多重聚合酶链反应检测人子宫颈常见病原体感染的应用研究

用多重 PCR 方法在同一 PCR 反应体系中同时检测人子宫颈常见病毒 HPV-16、HSV-2、CMV 以及CT 感染,采用快速制备 PCR 模板的方法,整个反应仅需4 h。研究结果总检出率为16/28,各病原体检出率分别是:HPV-16为3/28、HSV-2为6/28、CMV 为4/28和 CT 为6/28,因此,本方法既保持了 PCR 的敏感性和特异性,又是一种简便、快速的诊断技术,可用于人子宫颈感染的临床诊断。     

多重聚合酶链反应检测人子宫颈病毒感染

目的在同一反应体系中同时快速检测人子宫颈常见的人乳头状瘤病毒１６型（ＨＰＶ－１６）、人疱疹病毒２型（ＨＳＶ－２）和巨细胞病毒（ＣＭＶ）以及沙眼衣原体（ＣＴ）感染。方法采用快速制备样品的方法简化了聚合酶链反应（ＰＣＲ）实验过程，应用多重聚合酶链反应检测四种病原体。结果整个ＰＣＲ检测过程仅需４小时，总检出率为５７％，各病原体检出率分别是ＨＰＶ－１６１１％、ＨＳＶ－２２１％、ＣＭＶ１４％和ＣＴ２１％。结论该方法既保持了ＰＣＲ的敏感性和特异性，又是一种简便、快速的诊断技术，可用于人宫颈感染的临床诊断和预后判断。     

聚合酶链反应检测性传播疾病4种病原体

应用聚合酶链反应（PCR），对100例（男60，女40）性乱者进行人乳头状瘤病毒（HPV）、沙眼衣原体（CT）、淋球菌（NG）及解脲支原体（Uu)4种病原体基因检测。结果：58%至少有1种病原体感染。4种病原体总检出率为19.5%。各病原体检出率依次HPV-DNA30%；Uu-DNA22%;CT-DNA17%;NG-DNA9%。29.31%有混合感染，各病原体混合感染率NG77.77%;CT64.7%;Uu45.45%;HPV40%。结果提示：淋病在性病中的构成比明显下降，非淋菌性尿道炎的病原体似不一定均以CT感染最多见，对性高危人群做多项STD病原体检查，对STD防治是必要的。     

10287例女性性传播疾病FQ-PCR检测结果分析

目的分析10287例女性性传播疾病检测结果以了解性传播疾病感染情况。方法用荧光定量PCR方法对沙眼衣原体（CT）、解脲支原体（UU）、淋球菌（NG）、人乳头瘤病毒（HPV）、疱疹病毒（HSV）五种病原体进行定量测定。结果五种病原体患者阳性率为39．5％，阳性率依次为UU（32．24％），CT（3．57％），HPV（2．73％），NG（0．49％）和HSV（0．49％）。病例中以21～40岁年龄段感染率高。结论UU为女性性传播疾病的主要感染因素，感染率最高的是生育期妇女。     

406例泌尿生殖道感染病原体分析

1997年11月至2003年3月，对406例疑为泌尿生殖道感染者进行淋病奈瑟菌、沙眼衣原体、解脲支原体、乳头瘤病毒、疱疹病毒等5种病原体的检测。结果报告如下：     

应用聚合酶链反应检测宫颈分泌物人乳头瘤病毒

聚合酶链反应(PCR)检测人乳头瘤病毒(HPV),研究比较多。本实验主要检测宫颈分泌物人乳头瘤病毒6、11、16、18、33型,因其各型所致疾病互有交叉,故挑选一段针对HPV,各型共同的DNA序列,用PCR技术检出该核酸片段。在宫颈炎、阴道炎、尖锐湿疣病人中阳性率达31.25％(20/64)。说明人乳头瘤病毒对已婚育妇女普遍易感。检测HPV对宫颈炎、阴道炎、尖锐湿疣等妇科疾病的诊断治疗及宫颈癌的防治具有重要意义。     

女性生殖道感染常见病原体分布情况

为了解在引起女性生殖道感染的常见病原体中,淋球菌(N G)、沙眼衣原体(C T)、解脲脲原体(U-U)、人乳头状瘤病毒(H PV)和人巨细胞病毒(C M V)感染分布情况,笔者对在我院妇科、产科及皮肤性病科就诊的2645例女性生殖道感染患者进行调查。用荧光定量聚合酶链反应(FQ-PC R)检测以上5种病原体,并进行资料分析,现报道如下。1资料和方法1.1一般资料2004年1月～2005年1月在我院门诊就诊的女性患者2645例;其中妇科1057例,产科759例,皮肤性病科829例。按年龄将患者分为4组:17～29岁为A组(1256例);30～39岁为B组(764例);40～49岁为C组(497例);…     

早孕妇女外周血、宫颈分泌物及绒毛组织巨细胞病毒、单纯疱疹病毒Ⅱ型、弓形虫检测情况的分析

目的探讨早孕妇女中人巨细胞病毒(CMV)、单纯疱疹病毒Ⅱ型(HSV-Ⅱ)、弓形虫(TOXO)、沙眼衣原体(CT)感染的发生情况.方法采用PCR技术对486例早孕妇女的外周血、宫颈分泌物、绒毛组织检测CMV、HSV-Ⅱ、TOXO和CT.结果486例早孕妇女的外周血、宫颈分泌物、绒毛组织中CMV、HSV-Ⅱ、TOX-O、CT的总检出率分别为7.62%、2.67%、1.86%和17.08%.外周血中CMV、HSV-Ⅱ、TOXO检出率分别为1.64%、0.82%及1.65%;绒毛组织中CMV、HSV-Ⅱ、TOXO检出率均为0.21%;分泌物中CMV、HSV-Ⅱ、CT的检出率分别为5.76%、1.64%、17.08%.除CT的检出率随年龄增长而下降外,其余各项检测在不同年龄组中的检出率差异均无显著性(P均＞0.05),未产妇与经产妇的检出率差异无显著性(P＞0.05).结论孕早期血清CMV、HSV-Ⅱ、TOXO及CT的检测不必定为筛查的项目,对早孕妇女,可首先考虑作分泌物检测.     

用PCR对1646例性病病原体检测结果分析

近年来 ,非淋菌性尿道炎发病率呈现明显的上升趋势。我院自 1996年开始采用ＰＣＲ技术对疑为非淋菌性尿道炎患者进行衣原体 (ＣＴ)、解脲支原体(Ｕｕ)、人乳头状瘤病毒 (ＨＰＶ)及单纯疱疹病毒 (ＨＳＶ)检测。现将近期检测结果报道如下。1　材料与方法1.1　检测对象　均为我院皮肤性病科门诊患者 ,共 16 4 6例 ,其中男性130 2例、女性 344例 ,按常规采集尿道或生殖道的分泌物供检测。1 .2　试剂和仪器　由中山医科大学达安基因股份有限公司提供 ,实验仪器为美国ＰＥ公司产品ＰＴＣ - 10 0型扩增仪。2　结果　　 3　讨论3.1　从受检人数看 ,…     

巢式聚合酶链反应检测脑脊液中单纯疱疹病毒的DNA

应用巢式（ｎｅｓｔｅｄ）聚合酶链反应（ＰＣＲ）检测患者脑脊液中单纯疱疹病毒（ＨＳＶ）ＤＮＡ，２５份经鞘内ＩｇＧ抗体确诊的“单纯疱疹病毒性脑炎（ＨＳＥ）”患者的ＣＳＦ标本中２３份ＰＣＲ阳性；１０５份ＩｇＧ阴性的“散发性脑炎”患者ＣＳＦ中１５份ＰＣＲ阳性，其中７份阳性标本为发病１周内所取，２份取于发病当日。提示ＰＣＲ更适于ＨＳＥ的早期诊断。     

妊娠期单纯疱疹病毒感染及母婴传播的研究

应用酶联免疫吸附试验（ＥＬＩＳＡ）和多聚酶链反应（ＰＣＲ）研究３８０例孕妇单纯疱疹病毒（ＨＳＶ）感染及母婴传播。结果表明：孕妇ＨＳＶ感染相当普遍,ＨＳＶ１和ＨＳＶ２感染率分别为８１．８５％、４８．０６％,其中ＨＳＶ２感染与有异常孕产史者关系更加密切。孕妇宫颈分泌物中ＨＳＶ２ＤＮＡ检出率为２．４１％。ＨＳＶ２宫内感染率为４．１７％。孕早期绒毛组织中ＨＳＶ２垂直传播率为１０％。１例无脑儿的胎脑、胎肺及其胎盘组织中均可检出ＨＳＶ２ＤＮＡ。     

孕妇单纯疱疹病毒感染与母婴传播

目的：前瞻性观察妊娠各期单纯疱疹病毒（ＨＳＶ）垂直传播。方法：用ＥＬＩＳＡ法检测孕妇外周血及相应脐血ＨＳＶＩｇＭ抗体；用ＰＣＲ技术检测宫颈分泌物，异常生育孕妇外周血及相应流产物ＨＳＶＤＮＡ。结果：妊娠早、中、晚各期及脐血ＨＳＶＩｇＭ阳性率分别为１１．９７％、６．３８％、０、８．２０％，ＩｇＭ阳性母亲无垂直传播。宫颈ＨＳＶＤＮＡ阳性率为２．０５％，经宫颈传播率为６６．６７％。异常生育孕妇外周血及相应流产物ＨＳＶＤＮＡ阳性率为２．０２％，２．６１％，经血传播率为５０．００％。感染组死胎畸形及先天感染发生的相对危险度分别为非感染组的６．６倍和２．２倍。二组婴儿体检与智测值无明显差异。结论：ＨＳＶ经宫颈传播大于经血传播，剖宫产不能阻断垂直传播。     

聚合酶链反应检测宫颈糜烂患者单纯疱疹病毒感染

目的 :探讨宫颈糜烂患者单纯疱疹病毒 (HSV)感染情况。方法 :用聚合酶链反应检测宫颈糜烂患者和正常对照组单纯疱疹病毒感染情况。结果 :10 2例宫颈糜烂患者中 ,HSV- 1和 HSV- 2阳性率分别是 4 .9%和 30 .4 % ,正常对照组中 ,HSV- 1和 HSV- 2阳性率分别为 2 .7%和 12 .0 %。结论 :HSV感染与宫颈糜烂关系密切 ,且以 HSV- 2感染为主。     

215例性病可疑标本应用PCR技术同步检测淋球菌、沙眼衣原体、解脲支原体结果分析

近年来,性传播疾病出现明显上升趋势,尤其是淋球菌(NGH)、沙眼衣原体(CT)、解脲支原体(MU)等病原体感染引起的性病,上升趋势最为显著,成为临床最常见的三种性病.通过对215例可疑标本应用PCR技术同步检测NGH、CT、MU三种病原体,目的是了解三种病原体在性病中的分布情况.     

生殖道衣原体感染与先兆流产的关系

目的：探讨女性生殖道沙眼衣原体感染与先兆流产的关系,并对其临床特点进行总结。方法：收集60例先兆流产和60例正常妊娠孕妇宫颈分泌物,应用PCR技术检测两组孕妇宫颈分泌物中衣原体非结构蛋白DNA（CT-DNA）。结果：60例先兆流产孕妇宫颈分泌物中,16例CT—DNA阳性,60例对照组孕妇宫颈分泌物中2例CT-DNA阳性,两者比较差异有统计学意义（P〈0．05）;先兆流产组中CT—DNA阳性的患者其孕期阴道不规则出血、宫颈脓性分泌物、宫颈糜烂水肿及宫颈息肉的临床表现均高于CT—DNA阴性的患者（P〈0．05）。结论：生殖道衣原体感染是导致先兆流产的原因之一;衣原体感染患者多伴有孕期阴道不规则出血、宫颈脓性分泌物、宫颈糜烂水肿及宫颈息肉。     

PCR法检测泌尿道感染患者沙眼衣原体与解脲脲原体的研究

用聚合酶链反应（ＰＣＲ）法，对门诊的５２８例初诊为泌尿道感染患者进行了沙眼衣原体（Ｃｔ）与解脲脲原体（Ｕｕ）检测。结果显示：１７９例为淋球菌阳性，其中ＰＣＲ检测Ｃｔ阳性７１例，阳性率为３９．７％，Ｕｕ阳性７７例，阳性率为４３．０％；在３９４例非淋菌性尿道炎（ＮＧＵ）中，Ｕｕ阳性率为５３．３％（１８６／３４９），Ｃｔ阳性率为２７．２％（９５／３４９）。本研究表明应用ＰＣＲ检测Ｃｔ与Ｕｕ具有敏感性高、特异性强等优点，能为临床泌尿道感染病因学诊断与治疗提供定性依据     

核酸扩增-液相杂交法检测沙眼衣原体DNA

目的：探讨用核酸扩增（PCR）－液相杂交法检测沙眼衣原体DNA的效果。方法：用PCR－液相杂交法对616份临床标本进行了沙眼衣原体检测，并与培养法比较，对与培养法结果不相符合的标本及部分阴性标本进行连接酶链反应（LCR）复检。结果：PCR－液相杂交相法检测沙眼衣原体特异性良好。灵敏度达到0.1fg，临床标本沙眼衣原体DNA阳性检出率为27.6％，显著高于培养法的6.3%（P＜0.001）。以培养法为标准，此法的灵敏度为100％。以LCR法为标准，此法的灵敏度为97.2％,特异度为80.7%，2者具有较好的相符性。结论：PCR－液相杂交法检测沙眼衣原体DNA操作简便，特异性强，灵敏度高，适合临床应用。     

衡阳地区性乱人群中HSV2感染的研究

目的了解性乱人群典型皮损及无皮损的生殖道分泌物中2型单纯疱疹病毒(HSV2)的感染情况.方法用PCR法对衡阳地区310例性乱者作HSV2-DNA检测.结果187例典型皮损的性乱人群中,115例检出HSV2-DNA,阳性率为61.5%,其中男性阳性率为54.9%,女性阳性率为77.8%,男女之间差异显著(P<0.05).123例无皮损性乱人群中,28例检出HSV2-DNA,HSV2-DNA检出率为22.8%,其中男性阳性率为20.9%,女性阳性率为27.0%.结论衡阳地区性乱人群中HSV2有较高的感染率,典型皮损区HSV2-DNA检出率高于无皮损的生殖道分泌物.     

半巢式聚合酶链反应-微孔板杂交法检测沙眼衣原体

目的：应用半巢式聚合酶链反应－微孔板杂交法（半巢式PCR－MPH）检测泌尿生殖道沙眼衣原体（Ct)。方法：分别用质粒和主要外膜蛋白基因引物进行扩增，将下游引物用生物素标记，经半巢式PCR扩增Ct主要外膜蛋白基因后，扩增产物被包被有链霉亲和素的微孔板捕获，经碱变性后与标有荧光素的特异性探针进行杂交，然后通过辣根酶标记的抗荧光素抗体与杂交分子反应，经过酶底物显色，通过测定吸光度来判断结果。结果：主要外膜蛋白基因引物半巢式PCR较质粒引物PCR更敏感，比半巢式PCR产物酶切后电泳法高10倍，半巢式PCR－MPH法特异性强，该法重复法好，批内CV值＜10％，批间CV值＜15％，该法在包被浓度为4mg/L，产物1：20稀释，与微孔板结合20min后加入10pmol/mL探针杂交30min,用1：3000稀释的酶显色条件下有最佳结果，结论：该法操作简便，敏感性和特异性均高，无放射性和EB染料污染，适于临床样本的常规检测。