c—erbB-2、p53和nm23H1蛋白在肝外胆管癌组织中的表达及临床意义

目的探讨c—erbB-2、p53和nm23H1基因在肝外胆管癌发生与发展中的作用。方法用免疫组化法检测72份肝外胆管癌组织、43份癌旁胆管组织和11份正常胆管组织中c—erbB-2、p53和nm23H1蛋白表达情况,并分析三项指标与肝外胆管癌临床病理特征的相关性。结果p53蛋白表达阳性率胆管癌组织〉癌旁组织〉正常胆管组织（P〈0．05、0．01）,且低分化者表达阳性率显著高于高分化和中分化者,Ⅲ～Ⅳ期者表达阳性率显著高于Ⅰ～Ⅱ期者,有转移者阳性表达率显著高于无转移者,生存时间≤18个月者显著高于〉18个月者（P〈0．05）;c—erbB-2蛋白表达阳性率胆管癌组织〉癌旁组织〉正常胆管组织（P〈0．05、0．01）,其中低分化者显著高于高分化及中分化者,有转移者明显高于无转移者（P〈0．05）;nm23H1蛋白表达阳性率胆管癌组织〈癌旁组织〈正常胆管组织（P〈0．05、0．01）,且低分化者显著低于高、中分化者,Ⅲ～Ⅳ期者表达阳性率显著低于Ⅰ～Ⅱ期者,生存时间≤18月者显著低于〉18月者。结论c—erbB-2、p53、nm23H1在胆管癌发生、发展中起重要作用,其中p53、nm23H1蛋白表达可反映胆管癌生物学行为和恶性程度,c-erbB-2蛋白过度表达与胆管癌分化程度有关。     

原发性肝细胞癌组织中PDCD5、Caspase-3蛋白的表达变化及意义

目的 观察原发性肝细胞癌组织中程序化细胞死亡分子5（PDCD5）、Caspase-3蛋白的表达变化,并探讨其临床意义。方法采用免疫组化二步法检测70例原发性肝细胞癌组织及30例癌旁组织中的PDCD5、Caspase-3蛋白。结果PDCD5蛋白在肝细胞癌组织、癌旁组织中的阳性表达率分别为35．7％（25／70）、63．3％（19／30）,两者相比,P〈0．05。Caspase-3蛋白在肝细胞癌组织、癌旁组织中的阳性表达率分别为31．4％（22／70）、70．0％（21／30）,两者相比,P〈0．05。PDCD5、Caspase-3在肝细胞癌组织中的表达与组织分级有关（P〈0．05）,而且两者的表达呈正相关（r=0．587,P〈0．05）。结论PDCD5、Caspase-3蛋自在肝细胞癌组织中的表达均明显下降,并与肝癌生物学行为密切相关。     

DcR3和Caspase-8在喉癌组织中的表达及其相关性

目的探讨诱捕受体3（DcR3）和Caspase-8在喉癌组织中的表达及其相关性。方法采用流式细胞术检测41例喉癌组织和41例相应癌旁组织中的DcR3和Caspase-8的表达，并以15例非喉癌患者喉部正常黏膜组织作对照。结果与癌旁组织及正常喉黏膜组织比较，喉癌组织中DcR3、Caspase-8蛋白的表达量及阳性表达率均存在统计学差异（P均〈0．05）。DcR3和Caspase-8蛋白的表达与喉癌淋巴结转移、临床分期、分化程度相关（P〈0．05）；喉癌组织中DcR3的表达与Caspase-8的表达呈负相关（P〈0．05）。结论DcR3可能通过抑制Caspase-8活性，在肿瘤生长和进展过程中发挥重要作用。     

Caspase-7、Caspase-3、Survivin与乳腺癌新辅助化疗的关系

目的探讨新辅助化疗疗效与Caspas$-7、Caspase-3、Survivin的关系。方法用免疫组织化学法检测46例乳腺癌新辅助化疗前后石蜡包埋福尔马林固定标本Caspase-7、Caspase-3、Survivin的表达变化。结果新辅助化疗有效率为80．43％。Caspase-7新辅助化疗前后阳性率分别为67．39％、86．96％,P〈0．05;Caspase-3分别为63．04％、84．78％,P〈0．05;Survivin分别为71．74％、47．83％,P〈0．05。化疗前Caspase-7与Caspase-3阳性者化疗疗效好于阴性者（P均〈0．05）。结论Caspase-7、Caspase-3、Survivin的表达变化与新辅助化疗疗效密切相关。     

胆管腺癌组织中 Gab1、PI3 KCA 的表达变化及意义

目的：观察胆管腺癌组织中生长因子受体结合蛋白2相关的接头蛋白（ Gab1）、磷脂酰肌醇3激酶α亚单位（ PI3KCA）的表达变化,并探讨其意义。方法76例胆管腺癌患者,手术留取癌组织76例份（腺癌组）、癌旁正常组织45例份（癌旁组）,采用免疫组化法、Western blotting法、qRT-PCR法检测各组Gab1及PI3KCA,并分析两指标间及其与胆管腺癌临床病理参数的相关性。结果三种检测方法显示,腺癌组Gab1、PI3KCA表达均高于癌旁组（P均＜0．05）。 Gab1、PI3KCA表达均与胆管腺癌肿瘤直径、TNM分期、淋巴结转移有关（P均＜0．05）。 Spearman-rank相关分析显示,胆管腺癌组织中Gab1与PI3KCA表达呈正相关（ r＝0．214,P＜0．05）。结论胆管腺癌组织在细胞、蛋白、mRNA水平上均升高,Gab1及PI3KCA对胆管腺癌的发展及浸润转移恶性行为可能有促进作用,两者可作为胆管腺癌恶性行为及预后的预测因素及未来治疗的靶向基因。     

胃癌变过程中Hp感染与凋亡基因Survivin表达的关系

目的 研究胃癌变过程中幽门螺杆菌（Hp）感染与凋亡基因Survivin表达、细胞凋亡的关系。方法用快速尿素酶法、W—S银染法和美蓝法联合检测62例慢性浅表性胃炎（CSG）、55例慢性萎缩性胃炎（CAG）、52例肠化生（IM）、46例不典型增生（AH）、65例胃癌（Gc）组织中Hp的感染情况,采用免疫组化及TUNEL法分别检测Survivin蛋白的表达及细胞凋亡情况。结果Hp感染率、Survivin蛋白阳性表达率均随着GC形成中病变恶性程度的加重而明显上升（P〈0．05）。CAG、IM、AH和GC组Hp感染率较CSG组,Gc组较CAG组均明显升高（P均〈0．05）;AH、GC组Survivin蛋白阳性表达率明显高于IM和CAG组（P均〈0．01）;AH、GC组Hp阳性患者Survivin蛋白表达率均高于Hp阴性者（P均〈0．05）;CAG、IM、AH、GC组中Survivin阳性者凋亡指数均低于Survivin阴性者（P〈0．05）;低未分化GC患者Survivin蛋白表达明显高于高中分化者（P均〈0．05）。结论在胃黏膜癌变过程中,Hp感染可能通过逐渐上调Survivin基因的表达、抑制细胞凋亡和分化而发挥致癌作用。     

Caveolin-1和Caspase-3蛋白在肝细胞癌中的表达及意义

目的研究Caveolin．1和Caspase-3蛋白在肝细胞癌中的表达及意义。方法采用免疫组织化学检测30例肝细胞癌,相应癌旁及10例正常肝组织中Caveolin-1和Caspase-3蛋白的表达。结果（1）Caveolin-1在正常肝组织、癌旁肝组织、肝细胞癌组织中的阳性表达率分别为90％、13．33％、10％。Caspase-3在正常肝组织、癌旁肝组织、肝细胞癌组织中阳性表达率分别为90％、70％、40％。Caveolin．1和Caspase-3在不同性质组织间的表达,差异均有统计学意义（P〈0．05）;（2）Caveolin-1与Caspase-3的表迭在肝细胞癌中无明显相关性（r=0．181,P=0．337）。结论Caveolin-1与Caspase-3在肝细胞癌组织中表达均呈下降,但两者间无明显相关性,提示在肝细胞癌中,Caveolin-1的异常与Caspase-3细胞凋亡紊乱无关。     

hENT1蛋白和RRM1蛋白在非小细胞肺癌组织中的表达及临床意义

目的探讨人类平衡型核苷转运载体1（hENT1）及核糖核苷酸还原酶M1（RRM1）在非小细胞肺癌（NSCLC）发病、预后中的作用及机制。方法应用免疫组化方法检测54份NSCLC组织及癌旁正常组织中bENT1、RRM1蛋白表达情况,并分析其与NSCLC临床病理特征及接受含吉西他滨方案化疗患者生存时间的相关性。结果bENT1蛋白及RRM1蛋白在NSCLC组织中的阳性表达率均显著高于癌旁正常肺组织（P〈0．05）,但均与年龄、性别、生存时间等临床特征无显著相关性;bENT1蛋白阳性表达、RRM1蛋白阴性表达者生存时间显著高于RRM1蛋白表达阴性、bENT1蛋白表达阳性者（P〈0．05）。结论bENT1蛋白和RRM1蛋白在NSCLC发病中具有一定作用,二者可通过调节化疗药物敏感性影响患者预后;联合检测上述两种蛋白表达有利于为患者制订个体化治疗方案。     

HMGB1、VEGF—C在肺癌组织中的表达及临床意义

采用免疫组织化学染色方法检测肺癌组织中高迁移率族蛋白1（HMGB1）及血管内皮生长因子C（VEGF-C）的表达。结果发现,非小细胞肺癌（NSCLC）组织HMGB1及VEGF-C阳性率明显高于癌旁组织（P〈0．05）。HMGB1在肺鳞癌组织中阳性表达率明显低于腺癌组织,而其癌旁组织阳性表达率明显高于腺癌癌旁组织（P均〈0．05）。肺鳞癌组织中VEGF-C阳性表达率明显低于腺癌组织（P〈0．05）;有淋巴结转移NSCLC组织HMGB1及VEGF-C阳性率明显高于无淋巴结转移NSCLC（P均〈0．05）;VEGF-C表达与HMGB1表达呈正相关（P〈0．05）。认为HMGB1和VEGF—C的表达与肺癌组织病理类型和淋巴结转移相关,可作为肺癌转移、治疗和预后判断指标。     

非小细胞肺癌Bcl-2基因蛋白表达及其与细胞凋亡和增殖的关系

目的探讨非小细胞肺癌Bcl-2蛋白表达与细胞凋亡和增殖的关系。方法采用SAB免疫组化法检测43例非小细胞肺癌及20例癌旁正常肺组织石蜡包埋标本Bcl-2蛋白及增殖细胞核抗原（PCNA）表达;用TUNEL法检测细胞凋亡。结果肺癌组织Bcl-2蛋白的表达显著高于癌旁肺组织,P〈0．05;肺癌组织中凋亡指数和增殖指数均明显高于癌旁正常肺组织,P〈0．01,Bcl-2表达阳性的肺癌组织细胞凋亡指数明显低于Bcl-2表达阴性组,P〈0．05;高细胞凋亡、增殖指数提示肺癌预后不良,P〈0．05。结论肺癌存在Bcl-2表达上调,Bcl-2异常表达在肺癌发生过程中可能起重要作用。     

Survivin expression induced by doxorubicin in cholangiocarcinoma

AIM: To study the role of survivin expression induced by chemotherapy agent (doxorubicin) in the development and anti-chemotherapy of cholangiocarcinoma. METHODS: Expression of survivin was detected by SP immunohistochemical technique in 33 cases of cholangiocarcinoma, 28 cases of adjacent noncancerous bile duct, and 5 cases of benign bile duct lesions. Low concentration of doxorubicin (0.05 mg/l) was added in cultured cholangiocarcinoma cell line (QBC939). The expression of survivin was detected by RT-PCR and Western blot at 24 h and 48 h after adding doxorubicin. RESULTS: Survivin was expressed in 24 of 33 cholangiocarcinoma cases (72.7%). In contrast, no expression of survivin in adjacent noncancerous and benign bile duct lesions was observed (P<0.01). No correlation was found between survivin expression and clinical features. Doxorubicin could markedly (P<0.001) up-regulate survivin mRNA and protein expression of QBC939 cells. CONCLUSION: Overexpression of survivin in cholangiocarcinomas may play an important role in the development of cholangiocarcinoma, its relationship with prognosis of cholangiocarcinoma deserves further investigation. Higher expression of survivin is induced by doxorubicin in QBC939. Survivin expression may resist apoptosis induced by chemotherapy agents.     

Survivin expression induced by doxorubicin in cholangiocarcinoma

AIM:To study the role of survivin expression induced bychemotherapy agent (doxorubicin) in the development andanti-chemotherapy of cholangiocarcinoma.METHODS:Expression of survivin was detected by SPimmunohistochemical technique in 33 cases ofcholangiocarcinoma,28 cases of adjacent noncancerous bileduct,and 5 cases of benign bile duct lesions.Lowconcentration of doxorubicin (0.05 mg/l) was added incultured cholangiocarcinoma cell line (QBC939).Theexpression of survivin was detected by RT-PCR and Westernblot at 24 h and 48 h after adding doxorubicin.RESULTS:Survivin was expressed in 24 of 33 cholangiocar-cinoma cases (72.7%).In contrast,no expression of survivinin adjacent noncancerous and benign bile duct lesions wasobserved (P<0.01).No correlation was found betweensurvivin expression and clinical features.Doxorubicin couldmarkedly (P<0.001) up-regulate survivin mRNA and proteinexpression of QBC939 cells.CONCLUSION:Overexpression of survivin in cholangiocar-cinomas may play an important role in the development ofcholangiocarcinoma,its relationship with prognosis ofcholangiocarcinoma deserves further investigation.Higherexpression of survivin is induced by doxorubicin in QBC939.Survivin expression may resist apoptosis induced bychemotherapy agents.     

Survivin在柔红霉素诱导白血病细胞凋亡作用机制中的研究

目的：探讨Survivin在柔红霉素（DNR）作用机制中的作用,为进一步探讨白血病细胞对DNR耐药机制提供研究方向。方法：实验选用高表达Survivin的Molt-4细胞,逆转录-聚合酶链式反应（RT-PCR）检测DNR作用后Survivin mRNA的表达,免疫组织化学链霉亲和素-生物素-过氧化物酶复合物（SABC）方法检测DNR作用后Survivin蛋白的表达,免疫印迹方法检测DNR作用后Caspase-3、Caspase-8、Caspase-9蛋白的表达。结果：Survivin mRNA和蛋白表达水平随DNR浓度加大和作用时间延长而降低,差异有统计学意义（P〈0.05）;Caspase-3与Caspase-9蛋白活化片断随DNR浓度加大和作用时间延长而增多（P〈0.05）,Caspase-8未见明显活化片断。结论：①Survivin在DNR作用机制中发挥重要作用;②DNR可能通过线粒体途径诱导白血病细胞凋亡,Caspase-3和Caspase-9在凋亡通路中发挥重要作用。     

Survivin、Caspase-3在非小细胞肺癌中的表达及其临床意义

目的探讨非小细胞肺癌（non-small-cell lung cancer,NSCLC）中存活素（survivin）与半胱氨酸蛋白酶（Caspase-3）之间的关系及其临床意义。方法采用免疫组织化学法检测117例NSCLC中Survivin的表达,同时采用流式细胞技术检测Caspase-3;分析评估此二者在肿瘤细胞抗凋亡与凋亡促成之间的意义。结果Survivin阳性率明显高于对照组（P〈0．01）,Survivin与肿瘤的分型无关（P〉0．05）,在淋巴转移中无表达。Caspase-3定量分析中,癌组与对照组、鳞癌与腺癌组、高中低分化组、淋巴转移与无淋巴转移组均有不同程度的统计学意义。结论Survivin、结合Caspase-3定量分析,凋亡指数均有不同程度的衰减。通过生物学行为研究,了解肿瘤细胞的凋亡抑制,有助于临床正确制订化疗方案和判断预后。     

TESTIN和Caspase-3蛋白表达与食管鳞癌临床病理特征及预后的关系

目的 检测食管鳞癌中TESTIN基因和Caspase-3蛋白表达水平,及与食管鳞癌临床病理特征及预后的关系.方法 应用免疫组化法检测50例食管鳞癌及癌旁＞5 cm组织中的TESTIN蛋白和Caspase-3蛋白的表达水平.Western印迹及半定量RT-PCR法检测65例配对人食管鳞癌和癌旁组织中TESTIN表达的差异.分析两因素表达的相关性及其与食管鳞癌临床病理特征及预后的关系.结果 50例食管鳞癌标本中,免疫组化结果显示TESTIN蛋白和Caspase-3蛋白阳性率分别为30.0%(15/50)和24.0%(12/50),显著低于癌旁组织的84.0%(42/50)和94.0%(47/50),组间差异有统计学意义(P值均＜0.01).65例配对人食管鳞癌组织中,TESTIN mRNA的表达量显著低于癌旁组织(P＜0.05);Western印迹检测结果显示,69.2%(45/65)的食管鳞癌组织TESTIN蛋白表达量比对应癌旁组织下降(P＜0.01).TESTIN的表达与食管鳞癌分化程度有关,而与性别、年龄、肿瘤大小、TNM分期、淋巴结转移无关.食管鳞癌中TESTIN在蛋白水平与Caspase-3表达呈正相关.TESTIN蛋白阴性表达者的累计生存时间显著低于阳性者(P＜0.05).结论 TESTIN和Caspase-3在食管鳞癌组织中的表达下调且呈正相关性,两者在食管鳞癌的发生发展过程中可能起协同作用,TESTIN对评价食管鳞癌的预后可能有较好价值.     

缬草波春诱导MKN-45胃癌细胞凋亡

目的:研究缬草波春诱导胃癌细胞凋亡,探讨其诱导凋亡与半胱氨酸酶(Caspase)及生存素(Survivin)mRNA、P53蛋白、Survivin蛋白表达的关系.方法:以100 mg/L的缬草波春作用于加Caspase-3抑制剂、Caspase-8抑制剂、Caspase-9抑制剂和未加Caspases抑制剂培养的MKN-45细胞24,48和72 h,用流式细胞仪分别检测细胞凋亡率;不同浓度的缬草波春(5,10,25,50,100 mg/L)作用MKN-45细胞不同时间(24,48,72 h)后,用tripure提取液提取细胞RNA,用RT-PCR法,检测Survivin mRNA的表达.不同浓度缬草波春(50和100 mg/L)作用MKN-45胃癌细胞株24 h后,用免疫组化的方法,检测P53蛋白和Survivin蛋白的表达.结果:单用Caspase抑制剂组,作用24,48和72 h对MKN-45细胞凋亡率无明显影响,与对照组比较差异无显著意义.Caspase-3抑制剂、Caspase-9抑制剂与缬草波春联合应用后24,48和72 h使MKN-45细胞凋亡率高于对照组(24 h:5.73%,5.41% vs 4.38%,P＜0.01;48 h:6.88%,6.32% vs 4.35%,P＜0.01;72 h:7.72%,8.62% vs 4.54%,P＜0.01),低于缬草波春组(24 h:5.73%,5.41% vs 8.14%,P＜0.01;48 h:6.88%,6.32% vs 12.31%,P＜0.01;72 h:7.72%,8.62% vs 26.41%,P＜0.01),与对照组及缬草波春组比较差异均有显著意义(P＜0.01).Caspase-8抑制剂与缬草波春联合应用后24,48和72 h MKN-45细胞凋亡率明显增加,与对照组比较差异有显著意义(8.02% vs 4.38%,P＜0.01;11.05% vs 4.35%,P＜0.01;24.86% vs 4.54%,P＜0.01),与单用缬草波春组比较差异无显著意义.缬草波春降低MKN-45胃癌细胞株Survivin mRNA的表达,并有浓度依赖性和时间依赖性,而且使MKN-45胃癌细胞株P53蛋白表达增加,Survivin蛋白表达降低,均有浓度依赖性.结论:缬草波春可诱导MKN-45细胞凋亡,其作用可部分被Caspase-3,Caspase-9抑制剂所抑制,但不能被Caspase-8抑制剂所抑制.缬草波春诱导MKN-45胃癌细胞株凋亡与P53蛋白表达提高及Survivin mRNA和Survivin蛋白低表达降低有关.     

Survivin Expression in Colorectal Carcinomas: Correlations with Clinicopathological Parameters and Survival

Background  

Survivin is a new member of the Inhibitor of apoptosis protein family that has a dual function as a mitotic regulator and apoptosis inhibitor. Survivin is prominently expressed in transformed cell lines and in many human cancers, including colorectal carcinoma. The aim of this study is to investigate the expression of survivin in colorectal carcinomas and its possible associations with clinicopathological parameters and patient survival.     

AnnexinⅡ、Caspase-3蛋白在卵巢癌组织中的表达及意义

目的进一步探讨卵巢癌的发生机制。方法选择同期手术切除的组织标本,卵巢癌52份（观察组）、卵巢良性上皮性肿瘤18份（对照组）,采用免疫组化SP法检测其AnnexinⅡ、凋亡蛋白酶（Caspase）-3蛋白表达情况,采用Spearman相关分析法分析两指标间及其与卵巢癌临床病理特征的关系。结果观察组与对照组AnnexinⅡ蛋白阳性表达率分别为80．77％（42／52）、44．45％（8／18）,Caspase-3蛋白阳性表达率分别为48．08％（25／52）、94．44％（17／18）,两两比较P均〈0．05;AnnexinⅡ蛋白表达与卵巢癌组织学类型、组织学分级无关,与临床分期和淋巴结转移有关（P〈0．05）,Caspase-3蛋白表达与卵巢癌组织类型、病理学分级、淋巴结转移无关,与卵巢癌临床分期有显著相关性（P〈0．05）;Annexin11和Caspase-3蛋白在卵巢癌组织中的表达呈负相关（r=-0．409,P〈0．05）。结论AnnexinⅡ、Caspase,3蛋白异常表达在卵巢癌发生、发展中起重要作用,且两者存在协同性。     

唾液酸化Lewis-X抗原和P16在胆管癌中表达的临床意义

探讨唾液酸化Lewis—X(sialyl Lewis-X,SLeX)抗原和P16基因蛋白表达与胆管癌病理指标的关系。应用免疫组化方法，检测43例胆管癌组织中SLeX抗原和P16基因蛋白表达，综合分析了SLeX和P16蛋白表达与胆管癌临床病理因素间的关系。在胆管癌组织中，SLeX和P16表达阳性率分别为67．4％和44．2％。SLeX高表达和P16低表达与胆管癌的TNM分期、分化程度和转移密切相关(P＜0．05)。SLeX表达与P16表达呈负相关(r＝-0．54，P＜0．O01)。SLeX和P16表达提示胆管癌生物学行为不良。