泛素、Skp2、p27在大肠癌组织中的表达及意义

采用组织芯片技术制作80例大肠癌癌组织芯片。S-P免疫组织化学方法检测芯片中泛素、S期激酶相关蛋白2（Skp2）和p27表达。结果泛素表达阳性率为45．0％,Skp2阳性率为47．5％,p27阳性率为38．8％,不同组织学类型大肠癌中泛素、skp2、p27的表达未见明显差异（P〉0．05）;有淋巴结转移者Skp2阳性率显著高于无淋巴结转移者（P〈0．01）,p27阳性率显著低于无淋巴结转移者（P〈0．01）。提示Skp2高表达和p27低表达与大肠癌的进展相关,Skp2和p27的表达可以作为评估大肠癌预后的参考指标;泛素和Skp2在p27的表达调控中起重要作用;应用组织芯片大规模高效检测临床组织样本是可行的,具有快速、方便、经济、准确的特点。     

骨肉瘤组织中Skp2、p27蛋白的表达变化及意义

目的观察p27和Skp2蛋白在骨肉瘤组织中的表达变化,并探讨其意义。方法选取40例骨肉瘤组织标本作为骨肉瘤组,另选40例正常骨组织作为对照组。用免疫组化SP法检测两组中的p27和Skp2蛋白。结果骨肉瘤组中Skp2的阳性表达率明显高于、p27的阳性表达率明显低于正常骨组织(P均<0.05)。Skp2表达与骨肉瘤组织类型、分化程度及淋巴结转移有关(P均<0.05);p27蛋白表达与骨肉瘤组织类型、分化程度有关(P均<0.05)。Skp2、p27蛋白在骨肉瘤组织中的表达呈负相关(r=-0.34,P<0.05)。结论 p27蛋白在骨肉瘤组织中呈低表达,Skp2蛋白在骨肉瘤组织中呈高表达,二者呈负相关关系,且与骨肉瘤的发生和转移有关,有可能成为了解骨肉瘤生物学行为的参考指标。     

p27kip1、Skp2及Survivin在乳腺癌组织中的表达及意义

近期,我们观察了p27^Kip1、S期激酶伴随蛋白2（Skp2）和Survivin蛋白在乳腺癌组织中的表达,并探讨其与临床病理特征的关系。     

前列腺癌组织中MT、PCNA的表达及意义

采用免疫组化方法检测66例前列腺癌组织中的金属硫蛋白（MT）和增殖细胞核抗原（PCNA）。结果显示,前列腺癌组织中MT与PCNA阳性表达率分别为59.1%（32/66）和75.8%（50/66）;二者在前列腺癌组织中的表达水平随Gleason评分和临床分期的增高而增加（P〈0.05）,MT和PCNA的表达呈正相关（r=0.369,P〈0.05）。认为MT和PCNA的表达与前列腺癌的发生、发展及预后密切相关。     

增殖细胞核抗原及p27蛋白在软骨肉瘤组织中的表达及意义

应用免疫组化SP法检测增殖细胞核抗原（PCNA）和p27蛋白在48例软骨肉瘤及20例软骨瘤组织中的表达,并对其与软骨肉瘤病理分级及预后的关系进行分析。结果软骨肉瘤组织中PCNA与p27蛋白表达星明显负相关,p27蛋白高表达率（＋＋）显著低于软骨瘤,PCNA高表达率显著高于软骨瘤组织;软骨肉瘤复发者PCNA高表达率显著高于未复发者,p27蛋白高表达率显著低于未复发者。PCNA高表达表达率与软骨肉瘤组织的分化程度无相关性,不同组织学分级者中无显著差异;p27蛋白表达与软骨肉瘤组织分化程度呈正相关,不同组织学分级间p27蛋白高表达率相比均有显著差异。认为PCNA高表达及p27蛋白减少或缺失是软骨肉瘤发生、发展的重要因素及预后不良的判断指标。     

卵巢癌组织中PCNA、Ki-67的表达变化及意义

目的观察卵巢癌组织中增殖细胞核抗原（PCNA）、增殖细胞相关核抗原（Ki-67）的表达变化,并探讨其临床意义。方法采用免疫组化SP法检测40例卵巢癌、20例卵巢良性肿瘤组织中的PCNA、Ki-67。结果 PC-NA、Ki-67在卵巢癌组织中的阳性表达率明显高于卵巢良性肿瘤（P均〈0.05）;PCNA、Ki-67的表达与卵巢癌FIGO分期、组织分级、淋巴结转移有关（P均〈0.05）;卵巢癌组织中PCNA与Ki-67的表达呈正相关（r=0.929,P〈0.05）。结论卵巢癌组织中PCNA、Ki-67的表达增加,二者可作为评估卵巢癌临床分期、组织分级及淋巴结转移的参考指标。     

膀胱癌组织中Bcl-2、PCNA、p53的表达变化及意义

目的观察膀胱癌组织中Bcl-2、PCNA、p53的表达变化，并探讨其临床意义。方法用流式细胞术检测3l例膀胱癌组织中的Bcl-2、PCNA、p53，并与18例正常膀胱黏膜组织作对照。PI染色法和TUNEL法分别检测上述标本的细胞周期及凋亡细胞。结果31例膀胱癌组织中，Bcl-2阳性表达率为58．1％，p53为67．7％，PCNA中强度阳性。正常膀胱黏膜组织Bcl-2阳性表达率为16．7％、p53不表达、PCNA弱阳性，两者相比，P均〈0．01。Bcl-2、PCNA、p53的表达与膀胱癌的临床分级或分期相关。膀胱癌细胞周期分布异常，19例出现DNA异倍体，s期细胞增加，但未发现明显的周期阻滞现象。膀胱癌细胞凋亡增加。结论膀胱癌组织中Bcl-2、PCNA、p53过度表达，可出现DNA异倍体，均提示预后不良。     

乳腺肿瘤中Bcl-2、p53和PCNA蛋白的表达及临床意义

目的检测Bel-2、p．53和PCNA蛋白在乳腺良、恶性病变中的表达,旨在探讨其在乳腺癌发生和发展中的作用与意义。方法应用免疫组化SP法检测103例乳腺良、恶性肿瘤中Bcl-2、p53和PCNA蛋白的表达情况。结果①Bcl-2蛋白在乳腺癌、癌前病变及良性肿瘤中的阳性表达率分别为81．4％、93．3％和66．7％,各组间有明显差异（P〈0．05）,且Bcl-2蛋白在乳腺癌组织中的表达与淋巴结转移及组织学分级有相关性（P〈0．01）。②p53蛋白在乳腺癌、癌前病变及良性肿瘤中的阳性表达率分别为46．5％、23．2％和0％,各组问有明显差异（P〈0．05）。③PCNA在乳腺癌、癌前病变及良性肿瘤中的阳性表达率分别为74．4％、70．0％和70．0％,组间比较无明显差异（P〉0．05）。PCNA在乳腺癌组织中的表达与组织学分级有相关性（P〈0．01）。结论Bcl-2、p53和PCNA蛋白过表达在乳腺组织恶性转化中起重要作用。     

前列腺癌组织中p73的表达变化及意义

目的观察p73在前列腺癌组织中的表达变化,探讨其临床意义。方法采用免疫组织化学法检测32例前列腺癌组织（癌症组）和20例前列腺增生组织（对照组）中的p73。结果癌症组p73阳性率为31．3％,对照组为0,两组比较,P〈0．05;p73的表达与前列腺癌临床分期有关（P〈0．05）,073阳性前列腺癌患者术后5a生存率明显低于阴性者（P〈0．05）。结论前列腺癌组织中p73高表达,检测p73可判断前列腺癌的预后。     

p16及PCNA蛋白在Barrett食管组织中的表达及意义

目的 探讨p16及增殖细胞核抗原（PCNA）蛋白在Barrett食管发生、发展中的意义,为临床防治食管癌提供依据。方法 选择经病理检查及手术确诊的Barrett食管患者食管标本19份（BE组）、反流性食管炎患者胃镜活检标本27份（食管炎组）、食管腺癌患者手术切除标本12份（食管癌组）、胃镜及病理检查正常的食管黏膜20份（对照组）,采用免疫组织化学方法检测p16及PCNA蛋白表达情况。结果 食管癌组p16蛋白阳性率显著高于对照组（P〈O．01）,且染色强度在食管癌组以强阳性多见,其余三组多为弱阳性;PCNA蛋白阳性率在食管癌组〉BE组〉食管炎组〉对照组,两两比较P均〈0．01。结论 p16及PCNA蛋白高表达与Barrett食管发生、发展相关;对病理已确诊的Barrett食管患者应加强防癌监护机制,必要时应行p16及PCNA蛋白检测判定细胞增殖和基因突变情况。     

Skp2、p27在急性白血病细胞中的表达及意义

采用免疫组化方法检测了Skp2及p27在32例急性白血病患者（AL组）及10例良性血液病患者（对照组）血细胞中的表达。结果AL组Skp2表达高于对照组,p27表达低于对照组,P均〈0．05。认为Skp2高表达与白血病的发生、发展密切相关,应用其抑制剂可为多靶位治疗白血病提供理论及技术基础。     

采用组织芯片技术检测胃癌组织中泛素、S相激酶相关蛋白2、p27的表达

组织芯片应用范围涵括了整个生命科学中各个基础研究、临床研究、应用研究以及药物开发的相关领域，具有广阔的发展前景。我们采用组织芯片技术制作了60例胃癌的组织芯片，并用免疫组织化学技术进行泛素(Ubiquitin)、S期激酶相关蛋白2(Skp2)、p27的检测，探讨胃癌组织中泛素、Skp2和p27表达的意义。     

膀胱移行细胞癌中细胞凋亡、P27及PCNA的表达

为探讨细胞凋亡、P^27及增殖细胞核抗原（PCNA）表达与膀胱移行细胞癌（简称膀胱癌）分级、分期及预后的关系，采用DNA末端标记法（TUNEL）和免疫组化法检测53例份膀胱癌组织中细胞凋亡指数（AI）、P^27标记指数（P^27LI)、PCNA标记指数（PCNALI）。结果显示，AI、P^27LI与PCNALI在膀胱癌不同分级之间差异有显著性，PCNALI在膀胱癌不同分期之间差异有显著性，而AI与P^27LI在T2、T3间差异有显著性，P均＜0.05。在复发的膀胱癌中AI、PCNALI显著高于未复发者，P^27LI显著低于未复发者。表明AI、P^27LI、PCNALI可作为评估膀胱癌恶性程度及预后的指标。     

NACT前后宫颈癌组织中PCNA、p53、P—gp的表达变化及意义

目的探讨宫颈癌新辅助化疗（NACT）前后增殖细胞核抗原（PCNA）、抑癌基因p53和P-糖蛋白（P-gp）在宫颈癌组织中的表达变化及其与化疗疗效的关系。方法对60例局部晚期宫颈癌患者行NACT,采用免疫组化法检测化疗前后宫颈癌组织中的PCNA、p53、P-gp。结果化疗前宫颈鳞癌组织中PCNA、p53和P—gp阳性表达率分别为86．7％、60．0％、56．7％;化疗后分别为93．3％、83．3％、83．3％,化疗前后p53、P—gp阳性率相比,P均〈0．05。NACT前宫颈癌组织p53、P-gp表达阴性者NACT有效率与p53、P—gp表达阳性者相比,P均〈0．05。结论NACT前后宫颈癌组织中p53、P-gp的表达水平有显著差异,p53、P-gp的表达水平可作为宫颈癌化疗疗效敏感性的预测指标．     

肝细胞癌组织HSP70、p53和PCNA的表达及其意义

目的探讨热休克蛋白70（HSP70）、p53和增殖细胞核抗原（PCNA）在肝细胞癌（HCC）组织中的表达及其意义。方法采用免疫组化法检测正常人、慢性乙型肝炎、肝硬化和HCC肝或癌组织HSP70、p53和PCNA的表达情况。结果 HCC组织HSP70、p53和PCNA表达阳性率明显高于非癌组织（x1^2=27.16x2^2=67.6,x3^2=40.6,P〈0.01）;HSP70在正常人、慢性乙型肝炎、肝硬化和HCC中的表达逐步增强;HSP70和p53在分化较好的HCC中的阳性率明显低于分化不良者（x1^2=6.8,P1〈0.01x2^2=6.1,P2〈0.05）,而PCNA表达与HCC组织分化程度无关（x2=2.4,P〉0.05）;HSP70表达强度与p53和PCNA表达关系密切（x1^2=41.3,x2^2=41.4,P〈0.01）。结论 HCC是HSP70高表达肿瘤。HSP70表达与p53和PCNA表达密切相关,因而在HCC发生和发展中起重要作用。     

S期激酶相关蛋白2及细胞周期抑制蛋白p27在老年甲状腺癌患者癌组织中的表达及临床意义

目的研究S期激酶相关蛋白(Skp)2和细胞周期抑制蛋白p27在甲状腺癌癌组织中的表达及临床意义。方法首次就诊的老年甲状腺癌患者85例、甲状腺腺瘤老年患者40例和结节性甲状腺肿老年患者40例,采用免疫组织化学法检测甲状腺癌、甲状腺腺瘤和甲状腺肿组织中Skp2和p27蛋白的表达情况。结果 (1)甲状腺癌组织Skp2蛋白阳性表达率显著高于甲状腺腺瘤组织和甲状腺肿组织(P<0.001),甲状腺腺瘤组织和甲状腺肿组织Skp2蛋白阳性表达率差异无统计学意义(P>0.05);(2)甲状腺癌组织p27蛋白阳性表达率显著低于甲状腺腺瘤组织和甲状腺肿组织(P<0.001),甲状腺腺瘤组织和甲状腺肿组织p27蛋白阳性表达率差异无统计学意义(P>0.05);(3)Skp2蛋白的表达与肿瘤分期、周围组织侵犯情况及淋巴结转移有关(P<0.05或P<0.01),而与性别和肿瘤大小无关(P>0.05);(4)p27蛋白的表达与肿瘤分期、周围组织侵犯情况及淋巴结转移有关(P<0.05或P<0.01),而与性别和肿瘤大小无关(P>0.05);(5)甲状腺癌组织中Skp2与p27蛋白表达评分呈负相关(r=-0.657,P=0.016)。结论 Skp2和p27蛋白分别在甲状腺癌组织的表达呈负相关,两者参与了甲状腺癌的发生和发展。     

非小细胞肺癌组织中MinaS3、p53、PCNA的表达及意义

目的 探讨Mina53在非小细胞肺癌中的作用及Mina53、p53、增殖细胞核抗原（PCNA）在其中联合表达的意义。方法用免疫组化S-P法检测34例非小细胞肺癌组织,10例正常肺组织中Mina53、p53、PCNA的表达。结果在正常肺组织中Mina53、p53、PCNA表达量都很少,而在非小细胞肺癌组织中均高度表达。在非小细胞肺癌组织中,Mina53的阳性表达率是52．94％（18／34）,其表达与临床病理分型、淋巴结转移有明显的相关性（P〈0．05）。p53、PCNA的阳性表达率分别是64．71％（22／34）、76．47％（26／34）,其与各临床病理参数均无相关性（P〉0．05）。Mina53、p53、PCNA在非小细胞肺癌组织中的表达两两之间均有相关性（P均〈0．01）。结论Mina53有可能成为非小细胞肺癌的标记物,Mina53与p53、PCNA在非小细胞肺癌中联合检测,可起到互补作用,较全面地反映非小细胞肺癌肿瘤细胞的增殖情况。     

肝细胞癌患者肝癌组织S期激酶相关蛋白2、p27表达与临床病理特征的关系

目的探讨S期激酶相关蛋白(Skp)2、p27两种蛋白在肝细胞癌发生、发展及转移过程中的作用及相关性,为深入研究肝细胞癌发生发展机制及靶向治疗提供理论基础。方法应用EnVision法检测80例肝细胞癌Skp2、p27表达情况,并比较与不同临床病理特征间关系。结果肝细胞癌Skp2和p27阳性表达率明显高于正常对照组(P<0.05)。肝细胞癌Skp2和p27阳性表达与组织学分级、临床分期、肿瘤大小、肝内转移密切相关。肝细胞癌Skp2阳性表达与淋巴结转移和甲胎蛋白密切相关。肝细胞癌Skp2表达与p27表达呈明显负相关。结论 Skp2蛋白与肝细胞癌发生发展有关,并可能是反映肿瘤细胞增殖标志物和新的肿瘤基因治疗靶点。肝细胞癌中p27阳性表达与肿瘤发生、发展相关。     

Skp2-siRNA对Eca-109食管癌细胞系p27kip1蛋白表达的影响

目的 观察通过RNA干扰(RNA interference,RNAi)使Skp2基因沉默转染后对食管癌Eca-109细胞株中p27kip1表达的影响.方法 以Eca-109食管癌细胞系作为实验对象,设计合成针对Skp2的siRNA并进行转染.实验分为转染组、空白对照组、转染对照组、阴性对照组.采用免疫组化方法(SP法)检测各组Eca-109食管癌细胞系p27kip1蛋白表达的情况,采用Imageproplus(IPP)测定累积光密度值(IOD).每张切片选5个视野,求IOD 均值.采用方差分析进行组间均数比较,以p<0.05表示差异有统计学意义.结果 ①RNAi-Mate转染Eca-109细胞6 h后用荧光显微镜检测,计数转染Eca-109细胞的效率＞80%,本实验选此比例作为实验浓度.②经过转染后24 h的细胞开始变圆,生长比同时间正常培养的对照组细胞缓慢,48 h后细胞出现凋亡,有部分细胞脱落,72 h后细胞脱落变多.③免疫组化检测结果显示:转染 24 h后p27kip1蛋白表达开始上升IOD值为7.295±0.277、48 h后上升最明显IOD值为9.075±0.880、72 h 后p27kip1蛋白表达开始下降IOD值为3.506±0.160,与空白对照组相比较,差异有显著统计学意义(P<0.01,psiRNA=0.000),转染组24 h、48 h、72 h之间差异有统计学意义(P<0.05).结论 将人Skp2-siRNA转染入Eca-109食管癌细胞系后,能有效通过下调Skp2的表达,而上调p27kip1蛋白的表达.说明Skp2在Eca-109食管癌细胞增殖调控中起到重要作用,RNAi技术有可能作为抑制肿瘤细胞生长的一种手段.     

口腔黏膜癌前病变细胞和患者血清中p53、p16及PCNA的表达及意义

目的 探讨口腔黏膜癌前病变细胞和患者血清中p53、p16及增殖细胞核抗原(PCNA)的表达及其意义.方法 选择我院口腔科手术切除及活检标本65例,其中口腔扁平苔藓21例,口腔白斑22例,慢性盘状红斑狼疮22例.结果 p53蛋白在慢性盘状红斑狼疮/口腔白斑中表达的阳性率明显高于口腔扁平苔藓,差异有统计学意义(P ＜0.05);p16蛋白在口腔扁平苔藓中表达的阳性率明显高于口腔白斑/慢性盘状红斑狼疮,差异有统计学意义(P ＜0.05);PCNA在慢性盘状红斑狼疮/口腔白斑中表达的阳性率明显高于口腔扁平苔藓,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 p53基因突变使p53蛋白过度表达、p16蛋白表达缺失和PCNA的过度表达与口腔黏膜癌前病变的发生和发展具有相关性,为口腔黏膜癌前病变的诊断提供了理论依据.