藤梨根提取物对肺癌A549细胞凋亡及细胞周期的影响

目的 观察藤梨根乙酸乙酯提取物对肺癌A549细胞生长增殖、细胞周期及凋亡的影响.方法 体外培养肺癌A549细胞,分别给予不同浓度的藤梨根乙酸乙酯提取物进行干预,台盼蓝计数活细胞绘制不同浓度药物作用后细胞的生长曲线;四甲基耦氮唑蓝(MTT)比色法测定不同浓度药物作用不同时间对A549细胞生长的抑制率;采用流式细胞术(FCM)测定肺癌细胞周期、凋亡率变化;采用透射电镜观察药物作用后细胞的超微结构变化.结果 台盼蓝计数活细胞及MTT实验结果 均显示当药物浓度在20～160 μg/ml之间时,体外藤梨根提取物可明显抑制肺癌A549细胞的生长,呈现出明显的时间和剂量依赖性.FCM检测显示药物作用后,Go/G1期细胞数目增多,S期和G2/M期细胞数目相应减少,细胞发生G0/G1期阻滞,细胞凋亡率亦明显增加,随药物浓度增加、作用时间延长,其细胞周期阻滞作用及凋亡诱导作用逐渐增强.药物处理48 h后各组A549细胞透射电镜下均可见不同阶段典型的凋亡细胞形态学变化.结论 藤梨根提取物对人肺癌A549细胞生长有明显的抑制作用,呈现时效-量效关系,其作用与使细胞周期发生阻滞和诱导细胞凋亡有关.     

藤梨根提取物抑制肺癌A549细胞增殖作用机制研究

目的观察藤梨根乙酸乙酯提取物（RAE）对肺癌A549细胞凋亡的影响,并探讨其作用机制。方法体外培养肺癌A549细胞,分别给予不同浓度的RAE进行干预,流式细胞术检测用药后A549细胞凋亡率变化,免疫组化SP法检侧细胞Bcl-2、Bax蛋白表达变化,RT—PCR法检测细胞Bcl-2、Bax mRNA表达,激光共聚焦显微技术测定细胞胞内Ca^2＋浓度变化。结果各治疗组给予RAE作用后细胞凋亡率明显增加,并存在时相性和量效依赖性;用药后A549细胞Bcl-2蛋白和mRNA表达降低,而Bax蛋白和mRNA表达上调,细胞内Ca^2＋浓度明显升高,与对照组比较均有显著统计学差异（P均〈0．01）,亦存在时相性和量效依赖性。结论RAE可明显诱导肺癌A549细胞凋亡,其机制可能与降低其Bcl-2蛋白和mRNA表达、上调Bax蛋白和mRNA表达、升高细胞内Ca^2＋浓度有关。     

藤梨根提取物抗人肺腺癌A549细胞生长的实验研究

采用MTT检测法、集落形成试验、流式细胞术检测细胞凋亡及建立裸鼠移植瘤模型进行体内实验,观察藤梨根提取物对肺腺癌A549细胞的生长抑制作用。结果显示各浓度的藤梨根提取物对肺腺癌A549细胞均有较强的抑制效应,且呈现出明显的时相性和量-效依赖性;藤梨根提取物作用后G0～G1期细胞数增加,细胞出现凋亡,并随药物浓度增大作用增强;移植瘤体内试验显示藤梨根提取物高剂量组移植瘤生长缓慢,体积明显小于对照组及低剂量组。表明藤梨根提取物对人肺腺癌A549细胞在体内外均有生长抑制作用,并可诱导其细胞凋亡。     

藤梨根乙酸乙酯提取物对肺癌A549细胞增殖的影响

目的 探讨藤梨根乙酸乙酯提取物影响肺癌A549细胞生长增殖的作用机制.方法 体外培养肺癌A549细胞,分别给予不同浓度的藤梨根乙酸乙酯提取物进行干预,倒置显微镜观察藤梨根乙酸乙酯提取物作用后A549细胞形态学变化,四甲基偶氮唑蓝比色法(MTT)检测藤梨根乙酸乙酯提取物对A549细胞增殖活性的影响,集落形成实验观察藤梨根乙酸乙酯提取物对肺癌克隆原细胞增殖的影响,3H-掺入法检测藤梨根乙酸乙酯提取物对A549细胞DNA合成的影响,免疫组化SP法检测用药后A549细胞Ki-67抗原表达变化.结果 倒置显微镜下观察细胞形态学变化、MTT实验、集落形成实验结果均显示在体外藤梨根乙酸乙酯提取物在一定浓度下可以抑制肺癌A549细胞的生长,当药物浓度在20～160 μg/ml时,抑制呈现出明显的时间和剂量依赖性.并且A549细胞epm值及增殖指数随着药物剂量的增加和作用时间的延长而逐渐降低,仍以40、80、160 μg/ml组作用明显,与对照组比较差异显著,有统计学意义(P＜0.05).结论 藤梨根乙酸乙酯提取物可以明显抑制肺癌A549细胞的生长、增殖,其机制可能与抑制细胞DNA合成、降低Ki-67抗原表达有关.     

蛴螬提取物对人肺癌A549细胞诱导凋亡作用的形态学观察

目的 探讨蛴螬提取物对人肺癌A549细胞诱导凋亡的形态学改变.方法 应用MTT法、HE染色、扫描电镜的方法 观察蛴螬提取物对体外培养的人肺癌A549细胞形态学影响.结果 蛴螬石油醚提取物对人肺癌A549细胞株的增殖抑制作用呈剂量依赖性和时间依赖性(P＜0.05或P＜0.01).倒置显微镜下蛴螬石油醚提取物80 μg/ml作用后,早期细胞出现凋亡形态学变化,晚期细胞发生膜破裂坏死.HE染色和扫描电镜观察细胞出现典型凋亡形态变化.结论 蛴螬提取物在体外对人A549肺癌细胞株有显著性抑制增殖和诱导凋亡作用.     

藤梨根提取物抗肺癌作用的体内实验研究

目的研究藤梨根乙酸乙酯提取物对肺癌A549细胞裸鼠移植瘤的生长抑制及凋亡诱导作用,探讨其可能机制。方法用肺癌A549细胞建立肺癌裸鼠移植瘤模型,随机分为对照组、治疗组（高剂量组、低剂量组）。根据瘤体积变化绘制移植瘤生长曲线,根据终末瘤质量比较计算抑制率,移植瘤细胞凋亡指数检测采用TUNEL法,移植瘤细胞Bcl-2、Bax蛋白、Ki-67抗原表达检测采用免疫组化SP法,RT-PCR检测移植瘤Bcl-2、Bax mRNA表达。结果各治疗组经藤梨根乙酸乙酯提取物治疗后移植瘤生长缓慢,治疗结束时治疗组移植瘤质量及瘤体积明显低于对照组（P均〈0.01）,高、低剂量组的瘤质量抑制率分别为69.00%和45.09%。治疗组移植瘤细胞透射电镜下均可见不同阶段典型的凋亡细胞形态学变化。各治疗组移植瘤组织凋亡指数明显高于对照组,而增殖指数明显减低,Bcl-2 mR-NA及蛋白表达较对照组亦明显减少,Bax蛋白及mRNA表达较对照组明显增加,高剂量组尤其明显（P均〈0.01）。结论藤梨根乙酸乙酯提取物对肺癌A549细胞裸鼠移植瘤生长有抑制作用,其机制与抑制移植瘤细胞的增殖活性和诱导癌细胞凋亡有关,而降低Bcl-2基因表达、上调Bax基因表达可能是其诱导细胞凋亡机制之一。     

三叶青提取物诱导肺癌A549株细胞凋亡的研究

目的探讨三叶青提取物对肺癌细胞A549的作用,初步探讨其机制。方法采用体外细胞培养技术,采用流式细胞仪检测A549细胞株的细胞周期分布相和细胞凋亡率。结果流式细胞仪检测结果显示:加三叶青提取物10-1g/L、10-2g/L处理后的细胞凋亡比例明显高于对照组。结论三叶青提取物对A549细胞具有诱导凋亡的作用。     

山茱萸多糖对肺癌A549细胞凋亡的影响及机制

目的探讨山茱萸多糖对人肺癌A549细胞凋亡作用的影响及机制。方法收集对数生长期A549细胞,加入终质量浓度分别为25、50、100 mg/mL的山茱萸多糖20μL,分别培养24、48、72 h,MTT法测定细胞增殖抑制率和山茱萸多糖的半抑制浓度(IC50)。倒置显微镜下观察50 mg/mL山茱萸多糖作用后细胞形态变化。免疫组化SP法检测Survivin蛋白表达,用免疫组化评分(IHS)表示。结果山茱萸多糖作用后A549细胞生长受到明显抑制,细胞增殖抑制率呈明显的量效、时效关系;倒置显微镜下观察到细胞凋亡的典型改变,免疫组化SP法染色显示Survivin表达降低,Survivin蛋白的IHS随浓度增加呈明显下降趋势。结论山茱萸多糖能诱导A549细胞凋亡,其机制可能与下调Survivin表达有关。     

藤梨根提取物对大肠癌LoVo细胞增殖的抑制作用及诱导凋亡的影响

目的:研究藤梨根提取物(ethanol extract from radix of actinidia chinensis,EERAC)对人大肠癌LoVo细胞增殖和凋亡的影响.方法:提取藤梨根抗癌有效活性成分(EERAC),按浓度分为4处理组(10、40、160、320mg/L)和空白对照组(0mg/L).各实验组经作用24、48、72h后,进行一般形态学和AO/EB荧光染色观察;MMT法检测细胞增殖的抑制情况;免疫组织化学(immunohistochemistry,IHC)法测定LoVo细胞中凋亡相关基因Bcl-2、Bax、Caspase-3的蛋白表达变化.结果:与空白对照组比较,一般形态学显示EERAC处理组能使细胞密度减低,增殖变慢;细胞逐渐变大,细胞间接触变松,胞浆中颗粒增多,细胞脱壁现象和周围碎片增多;荧光染色观察可见处理组细胞呈橙红色荧光,细胞核出现碎片状或固缩状的凋亡特征学形态改变,凋亡现象与EERAC的浓度呈正相关性;MTT法检测显示,EERAC处理组对LoVo细胞的最佳作用时间为72h,最大抑制率为79.48%,具有浓度和时间的依赖性(P<0.01);IHC检测结果显示EERAC作用LoVo细胞24h后,Bcl-2表达明显减弱,Bax、Caspase-3表达水平明显增高,Bcl-2/Bax比值下降,差异具有统计学意义(P<0.05),其效应与浓度相关.结论:EERAC具有明显抑制LoVo细胞增殖的作用,其机制可能与降低Bcl-2表达,上调Bax、Caspase-3的表达水平,激活线粒体凋亡途径有关.     

藤梨根提取物对HT-29荷瘤裸鼠的抑制及诱导凋亡作用的影响

目的:研究藤梨根提取物(ethanol extract from radix of Actinidia chinensis,EERAC)对人大肠癌HT-29荷瘤裸鼠移植瘤的抑制和诱导凋亡作用.方法:提取EERAC,以大肠癌HT-29细胞对40只Balb/c-nu/nu裸鼠进行荷瘤造模,并随机将分为3个EERAC处理组(低剂量组5mg/kg、中剂量组10mg/kg、高剂量组20mg/kg),空白对照组(生理盐水)和阳性对照组(5-Fu,25mg/kg),每组8只,连续用药8d后,测定各实验组的肿瘤抑制率、脾脏指数.通过脾脏效应细胞培养,测定NK细胞的活性度.免疫组织化学法测定各组荷瘤裸鼠体内凋亡相关基因Bcl-2、Bax、Caspase-3的蛋白表达水平.结果:与空白对照组相比,EERAC对HT-29移植瘤均有明显的抑制作用,各剂量组的抑瘤率为9.12%、20.13%、37.81%,与药物剂量呈正比;EERAC各剂量组对荷瘤裸鼠脾脏指数较生理盐水组和5-Fu组有显著增加(P<0.05);不同剂量的EERAC均可使NK细胞活性度增加(P<0.05);EERAC作用后,HT-29荷瘤裸鼠体内的Bcl-2表达减弱,Bax、Caspase-3表达水平增高,Bcl-2/Bax比值下降,其作用也呈剂量相关性.结论:EERAC对大肠癌细胞HT-29荷瘤裸鼠具有抑制瘤体生长和诱导癌细胞凋亡的作用,其作用机制可能为抑制荷瘤裸鼠体内Bcl-2的表达,提高Bax、Caspase-3表达水平,下调Bcl-2/Bax.EERAC对荷瘤裸鼠免疫系统无不良影响,且能一定程度上提高机体的免疫功能.     

非诺贝特联用顺铂对人肺癌A549细胞抑制和凋亡的实验研究

目的探讨过氧化物酶体增殖因子激活受体仪激动剂非诺贝特联用顺铂对体外培养的人肺癌A549细胞增殖和凋广的影响及可能机制。方法采用MTF法分别检测单用非诺贝特、顺铂和非诺贝特联用顺铂对肺癌A549细胞的生长抑制情况。采用Hoechest染色观察非诺贝特联用顺铂对肺癌A549细胞的生长抑制作用。流式细胞术检测联合用药对A549细胞的凋亡诱导作用。RT—PCR法检测联合用药对A549细胞中caspase－3、survivinmRNA的表达变化情况。结果非诺贝特对肺癌A549细胞有抑制作用,呈现时间剂量关系。联合用药组作用肺癌A549细胞48h后比单用药组的细胞抑制作用强（P〈0．05）。形态学观察及流式细胞术结果显示联合用药组A549凋亡细胞数目多于单药组,RT—PCR结果提示联合用药组较单用药组上调caspase－3mRNA的表达,下调stirvivin mRNA的表达。结论非诺贝特与顺铂联用可以增强顺铂杀伤肺癌A549细胞作用,其机制可能与上调caspase－3的表达和下调survivin的表达有关。     

青蒿琥酯联合热疗对肺腺癌细胞A549增殖和凋亡的影响

目的观察青蒿琥酯联合热疗对肺腺癌细胞A549的增殖抑制作用。方法将A549分为四组:A组给予不同浓度的青蒿琥酯;B组给予热疗(43℃加热1 h);C组给予青蒿琥酯联合热疗;D组为正常培养A549(对照组)。分别在处理24、48 h时用MTT法检测四组A549的生长抑制情况;流式细胞术检测细胞周期和凋亡率。结果青蒿琥酯对A549生长抑制作用与剂量—效应—时间呈正相关系,在100～800μmol/L的范围内呈线性关系。青蒿琥酯及青蒿琥酯联合热疗作用24 h半数抑制浓度(IC_(50))分别为396μmol/L和172μmol/L。与D组相比,A、C组G_0/G_1期细胞数增多,S期和G_2/M期细胞数减少(P<0.01)。A、C组细胞凋亡率分别为16.77%和28.90%,均高于D组的2.08%(P<0.01)。结论青蒿琥酯、青蒿琥酯联合热疗可抑制A549生长,诱导细胞凋亡可能是其作用机制之一。     

川芎嗪、顺铂对人小细胞肺癌NCI-H446细胞凋亡的影响及机制探讨

目的观察川芎嗪、顺铂对小细胞肺癌NCI-H446细胞凋亡的影响,并探讨其机制。方法将对数生长期的NCI-H446细胞分为A、B、C、D组。A组常规培养,B组加入川芎嗪培养液100μg/ml,C组加入顺铂培养液2μg/ml,D组加入上述浓度的川芎嗪及顺铂培养液,均继续培养72 h。流式细胞仪检测各组细胞凋亡率,Westernblot法检测各组细胞中的Bcl-2、p53。结果 A组NCI-H446细胞凋亡率为5.23%±1.01%、Bcl-2蛋白为0.87±0.003 5、p53蛋白为0.19±0.002 3,B组分别为16.37%±1.23%、0.58±0.004 8、0.31±0.001 4,C组分别为19.2%±1.51%、0.32±0.003 9、0.46±0.002 5,D组分别为21.2%±1.79%、0.23±0.001 9、0.62±0.002 7。B、C、D组与A组相比,P均〈0.05;D组与B、C组相比,P均〈0.05。结论川芎嗪、顺铂联合应用可诱导小细胞肺癌NCI-H446细胞凋亡,可能与其降低Bcl-2表达水平、升高p53表达水平有关。     

茶多酚对肺癌SPC-A1细胞增殖的影响

目的探讨茶多酚对人肺癌SPC—Al细胞增殖的影响。方法体外培养人肺腺癌SPC—A1细胞，以50—300mg／L茶多酚作用12、24、36h后，MTT法测定细胞的增殖活性，琼脂糖凝胶电泳、透射电镜观察细胞凋亡情况，流式细胞仪检测对细胞周期的阻滞作用。结果茶多酚可抑制肺癌细胞的增殖活性，其抑制作用随时间的延长而增强，以36h抑制作用最强。浓度50～150mg／L，抑制作用随浓度增高而增强；浓度〉150mg／L，抑制作用随浓度增高反而减弱。茶多酚可使肺癌细胞阻滞于G1期，以150mg／L阻滞作用24h最强。结论茶多酚可诱导人肺癌SPC-Al细胞的凋亡，并使细胞周期阻滞于G1期，抑制肺癌细胞的增殖。     

藤梨根提取物通过调控miR-192-5p/ARPP19轴影响结直肠癌细胞的增殖和凋亡

背景 藤梨根提取物(rattan root extract,RRE)可抑制胃癌、肺癌等肿瘤细胞增殖,具有一定抗肿瘤作用,但其是否影响结直肠癌细胞的恶性表型还未知.miR-192-5p在结直肠癌组织中表达降低,且其低表达与肿瘤大小等临床病理特征相关,可作为结直肠癌诊治的潜在生物学标志物.StarBase生物信息学软件预测...     

热疗联合顺铂对小细胞肺癌NCI-H446细胞凋亡的影响及机制探讨

目的观察热疗联合顺铂对小细胞肺癌NCI-H446细胞凋亡的影响,并探讨其可能的机制。方法将对数生长期的NCI-H446细胞随机分为A、B、C、D组,A组常规培养不进行特殊处理,B组将细胞消化后放置离心管中在42℃水浴中加热2 h,C组加入含2μg/mL顺铂的培养液4μg/孔,D组先经过水浴处理后加入顺铂。继续培养72 h后,采用流式细胞仪测算各组细胞凋亡率,采用Western blot法检测各组细胞中的Bcl-2、Bax。结果 NCI-H446细胞凋亡率A组为4.25%±0.56%、B组为8.12%±0.64%、C组为10.02%±0.82%、D组为12.12%±0.49%,B、C、D组细胞凋亡率与A组比较,P均<0.05;D组与B、C组比较,P均<0.05。NCI-H446细胞中Bcl-2、Bax相对表达量A组分别为0.89±0.002 8、0.18±0.001 8,B组分别为0.61±0.004 2、0.32±0.002 0,C组分别为0.30±0.003 6、0.48±0.001 4,D组分别为0.21±0.001 7、0.64±0.002 5。B、C、D组与A组比较,P均<0.05;D组与B、C组比较,P均<0.05。结论热疗联合顺铂可诱导小细胞肺癌NCI-H446细胞凋亡,其机制与降低细胞中Bcl-2表达、升高Bax表达有关。     

蝙蝠葛活性成分对人肺癌A549细胞株抗增殖作用的实验研究

目的探讨蝙蝠葛活性成分对人肺癌A549细胞株抗增殖作用及其机制。方法应用MTT法测定蝙蝠葛活性成分对人肺癌A549细胞株的生长抑制作用;通过吖碇橙（AO）/溴化乙啶（EB）染色荧光显微镜观察肿瘤细胞的形态学变化;采用流式细胞仪检测A549细胞的周期分布相;应用免疫细胞化学技术SP法检测药物处理前后增殖细胞核抗原Ki-67、Bcl-2的表达。结果蝙蝠葛活性成分对人肺癌A549细胞株有明显的抑制生长的作用,且呈现出浓度依赖性;蝙蝠葛活性成分可诱导A549细胞发生细胞周期阻滞;蝙蝠葛活性成分作用后Ki-67和Bcl-2阳性表达率较对照组降低（P〈0.01）。结论蝙蝠葛活性成分在体外对人肺癌A549细胞株有显著的抑制增殖作用,可能与下调Ki-67、Bcl-2蛋白表达,细胞周期发生G0/G1期阻滞有关。     

廿烷五烯酸协同顺铂对肺腺癌细胞株的影响

目的观察廿烷五烯酸（EPA）联合顺铂对肺腺癌细胞株A-549的抗增殖和诱导凋亡作用。方法A-549进行体外培养后分为A组和B组。B组分别加EPA15（B1组）、30（B2组）、60（B3组）μg/ml及顺铂30μg/ml（B4组）、顺铂30μg/ml＋EPA15μg/ml（B5组）、顺铂30μg/ml＋EPA 30μg/ml（B6组）、顺铂30μg/ml＋EPA60μg/m（B7组）,分别培养24、48、72、96 h。A组加培养液50μl。实验步骤两组相同。MTT法测A-549的生长抑制率,倒置显微镜、光学显微镜观察细胞形态,TUNEL法检测细胞凋亡率。结果①B1～B7（EPA在15～60μg/ml范围内）组,A-549均呈抑制生长,EPA与顺铂具有协同抗癌作用,并表现出浓度、时间依赖性关系。②光镜下B组A-549体积变小、变圆,核染色质浓缩或染色质块形成,部分细胞核脱落,细胞膜起泡形成凋亡小体;A组细胞生长旺盛,呈不规则形,核分裂象多见,细胞核规整,染成均一蓝色。倒置显微镜下,B组A-549体积变小、变圆,核染色质凝集,细胞间连接疏松,贴壁能力减弱;A组细胞贴壁生长良好,充分生长,透亮度好。③B1～B3组细胞凋亡指数（AI）依次升高,分别为5．57％±0．82％、11．68％±1．26％、24．53％±1．68％（P〈0．01）。结论体外实验中,EPA对A-549生长有抑制作用,呈明显的量效和时效关系;EPA与顺铂有协同作用。