氯化两面针碱对人胃癌细胞增殖、迁移的抑制作用

目的探讨氯化两面针碱(NC)对人胃癌SGC-7901细胞增殖、迁移的作用及其机制。方法 MTT实验检测NC对SGC-7901细胞的增殖作用;Transwell小室实验检测NC对SGC-7901细胞迁移和侵袭的影响;Western印迹检测NC对人胃癌SGC-7901细胞中Bax,Bcl-2,PCNA,MMP2,MMP1和GAPDH表达的影响。结果 MTT实验表明NC抑制人胃癌SGC-7901细胞增殖,并且呈时间、剂量依赖性(P<0.05);此外,NC显著抑制SGC-7901细胞中PCNA表达,呈剂量依赖性(P<0.05);Transwell小室实验表明NC显著抑制SGC7901细胞迁移和侵袭,呈剂量、时间依赖性(P<0.05);Western印迹表明NC上调凋亡蛋白Bax的表达,下调抗凋亡蛋白Bcl-2表达,抑制MMP1以及MMP2的表达(均P<0.05)。结论 NC通过诱导细胞凋亡抑制SGC-7901细胞增殖,通过降解MMP1和MMP2从而抑制SGC-7901细胞侵袭和迁移。     

PHB1对人肝癌细胞增殖的影响及其作用机制

目的探讨抗增殖蛋白1(prohibitin1,PHB1)对人肝癌细胞增殖的影响及其作用机制。方法构建PHB1真核表达重组质粒(pEGFP-PHB1)和PHB1靶向siRNA质粒(shRNA-PHB1)转染人肝癌细胞HepG2和SMMC-7721,诱导PHB1在人肝癌细胞中表达上调和下调,采用MTT、流式细胞学、荧光定量PCR和免疫印迹等技术检测人肝癌细胞增殖、细胞周期,以及细胞周期关键调控分子的表达情况。结果高表达PHB1可阻滞HepG2和SMMC-7721细胞于G0/G1期[(67.28±2.94)%比(56.71±2.56)%,t=6.64,P=0.00;(69.48±3.82)%比(60.43±2.59)%,t=4.80,P=0.00],使S期比例下降[(14.74±1.45)%比(24.13±1.92)%,t=9.54,P=0.00;(13.73±1.26)%比(25.50±2.30)%,t=10.99,P=0.00],抑制细胞增殖;周期调控分子p53和p21CIP1mRNA和蛋白质水平显著升高,而Cyclin A2、Cyclin E1和CDK2 mRNA和蛋白质水平显著降低(P0.01)。低表达PHB1可促使HepG2和SMMC-7721细胞趋于S期[(31.65±2.71)%比(24.68±1.28)%,t=5.69,P=0.00;(31.02±2.49)%比(25.88±2.40)%,t=3.64,P=0.005],促进细胞增殖;p53、p21CIP1、Cyclin A2、Cyclin E1、CDK2 mRNA和蛋白质水平与PHB1高表达时相反(P0.01)。结论高表达PHB1可以阻滞人肝癌细胞周期于G0/G1期,进而抑制细胞增殖,其作用机制可能与p53介导的G0/G1期相关细胞周期蛋白有关。     

芒果甙对肝癌细胞增殖的抑制和凋亡的诱导

目的 观察芒果甙对人肝癌细胞株BEL-7404的毒性和诱导凋亡作用及对细胞周期的阴滞作用，探讨芒果甙作为肿瘤化学预防药物的可能性，方法 用MTT法观察芒果甙对人肝癌细胞株增殖的抑制作用。用光学显微镜观察芒果甙对细胞的毒性作用。以流式细胞仪检测芒果甙对细胞凋亡的诱导作用和对细胞周期的干预作用。结果 不同浓度的芒果甙在不同时间对肝癌细胞株均有毒性作用，并随浓度升高和作用时间的延长而毒性作用增强，凋亡也随之增加，芒果甙阻滞肝癌细胞周期于G2/M期，20μmol/L芒果甙作用24h后上述效果开始明显。结论 芒果甙对肝癌细胞株有明显的毒性作用。能诱导肝癌细胞凋亡和阻滞细胞周期于G2/M期具有潜在药用价值。值得进一步深入研究。     

阿魏酸钠对人EBL—7404肝癌细胞的抑制作用

目的观察阿魏酸钠(sodium ferulate,SF)对离体肝癌细胞生长的抑制作用.方法将人EBL-7404肝癌细胞以1×108/l浓度接种于25cm2细胞培养瓶中,接近单层时,分为SF组和对照组.SF组用含SF(终浓度为1mg/l)和小牛血清(50ml/l)的1640培养液培养细胞,对照组用含小牛血清(50ml/l)的1640培养液培养细胞,48h后,收集细胞,碘化丙啶(propidium iodide,PI)染色后,用流式细胞仪检测每一细胞周期的DNA含量,并根据DNA的含量分类细胞.结果(1)SF组细胞凋亡为10.5%,对照组为5.9%,凋亡被上调.(2)SF组DNA百分比在S期明显降低(SF组为33.12%,对照组为47.83%),在G2/M期明显增加(SF组为27.87%,对照组为15.04%).结论SF诱导了人EBL-7404肝癌细胞凋亡,抑制了人EBL-7404肝癌细胞的增殖,SF能是一种有效抑制肝癌生长的中药.     

HBx 基因转染对人肝癌细胞系 HepG2细胞增殖的影响

目的探讨HBx基因转染对人肝癌细胞系Hep G2细胞增殖的影响。方法用脂质体转染法将HBx真核表达载体pc DNA3/HBx瞬时转入Hep G2细胞(转染HBx细胞组);以转染空载体细胞组和未转染Hep G2细胞组作为对照。以流式细胞仪及荧光显微镜观察各组肝癌细胞增殖情况。结果转染HBx细胞组的Hep G2肝癌细胞生长较其他两组密集。流式细胞仪检测显示转染HBx细胞组的Hep G2细胞较多处于增殖期(G2期细胞占5.68%)。荧光显微镜图像显示转染HBx细胞组处于增殖期的Hep G2细胞比率为47%,转染空载体细胞组为28%,未转染Hep G2细胞组为25%;转染HBx细胞组Hep G2细胞处于增殖期的比率与其他两组比较有统计学差异(P均<0.05)。结论 HBx基因转染能促进人肝癌细胞系Hep G2细胞增殖。     

NS-398对HepG2细胞增殖的抑制作用及机制探讨

目的探讨氮-2,环己氧-4,硝基苯—甲基磺胺（NS-398）对肝癌细胞株HepG2细胞的生长抑制作用及其机制。方法分别用100、200、300、400μmol/L的NS-398处理HepG2细胞,用MTT法测算肿瘤细胞抑制率,流式细胞仪检测细胞周期及细胞凋亡率,用免疫组化和Westernblot检测细胞的血管生长因子（VEGF）。结果NS-398呈剂量依赖性的方式抑制HepG2细胞增殖,并诱导其凋亡,随着NS-398浓度增大,S期细胞明显减少,有G1期细胞累积现象,其24h半数有效剂量（IC50）为300μmol/L。NS-398浓度为200μmol/L以上时HepG2细胞VEGF的表达与对照组相比,P〈0.01。结论NS-398对肝癌细胞增殖有抑制作用,并诱导其凋亡,可能与G1阻滞以及VEGF的表达受抑制有关。     

洋葱提取物对结肠癌细胞增殖的抑制作用

目的:研究洋葱水提取物和乙醇提取物中黄酮类化合物的含量及其各自对结肠癌细胞株增殖的抑制作用.方法:采用水提取和乙醇提取洋葱后,用紫外可见分光光度仪检测提取物中黄酮类化合物含量.体外培养结肠癌细胞株(LoVocells、SW480cells、HT-29cells、HCT-8cells),采用不同浓度的黄酮类化合物(0、2.5、5、10、20、40、60、80mg/L)对其进行干预,WST-8法检测洋葱水提取物和乙醇提取物对结肠癌细胞株增殖的抑制作用.结果:洋葱水提取物中黄酮类化合物含量较乙醇提取物高.WST-8法检测洋葱水提取物和乙醇提取物对结肠癌细胞株的抑制作用具有剂量和时间依赖性,且72h时水提取物较乙醇提取物对结肠癌细胞株(SW480)增殖抑制(%)更显著(10mg/L:37.77±5.84vs17.36±5.24;20mg/L:52.35±5.72vs24.15±5.54;40mg/L:68.17±7.76vs32.79±6.02;60mg/L:71.08±8.16vs47.55±2.45;80mg/L:76.00±5.87vs60.35±6.61,均P<0.05).结论:洋葱水提取物和乙醇提取物对体外...     

粉防己碱对血管平滑肌细胞增殖及相关基因表达的影响

目的：研究粉防己碱（Tetrandrine,Tet)对内皮素 导的大鼠血管平滑肌细胞（VSMC）增殖及相关基因表达的影响。方法：采用细胞计数及^3H－TDR掺入实验检测VSMC增殖状态；应用Northern杂交检测Tet对VSMC诱导型一氧化氮合酶（iNOS)基因和ET诱导的c-jun基因表达的影响。结果：Tet可明显抑制VSMC的增殖（P＜0．05），抑制ET对VSMC的促丝裂作用（P＜0．05）；抑制原癌基因c-jun的表达，促进iNOS转录，结论：Tet可能通过调节iNOS和细胞增殖相关基因的表达而报抑制VSMC的增殖。     

FCRL5蛋白对肝癌细胞增殖与侵袭迁移能力的作用及机制

目的 探讨FCRL5蛋白对肝癌细胞增殖与侵袭迁移能力的作用及机制.方法 测定104例肝癌组织及癌旁组织FCRL5蛋白的表达水平,同时将SMMC-7721肝癌细胞株分为对照组(SMMC-7721细胞常规培养)和FCRL5转染组(FCRL5-mimics转染SMMC-7721细胞、FCRL5-inhibitor转染SMMC...     

Reversing effect of Tanshinone on malignant phenotypes of human hepatocarcinoma cell line

ＲｅｖｅｒｓｉｎｇｅｆｅｃｔｏｆＴａｎｓｈｉｎｏｎｅｏｎｍａｌｉｇｎａｎｔｐｈｅｎｏｔｙｐｅｓｏｆｈｕｍａｎｈｅｐａｔｏｃａｒｃｉｎｏｍａｃｅｌｌｉｎｅＹＵＡＮＳｈｕＬａｎＨＵＡＮＧＲｅｎＭｉｎ,ＷＡＮＧＸｉｕＪｉｅ,ＳＯＮＧＹｉａｎｄＨＵＡ...     

Reversing effect of Tanshinone on malignant phenotypes of human hepatocarcinoma cell line

AIM To study the reversing effect of Chinese drug tanshinone on malignant phenotype of cancer cells.METHODS Human hepatocarcinoma cell line (SMMC-7721) was treated in vitro with 0.5mg/L tanshinone for 4 days, and variation in cell differentiation was detected.RESULTS The morphology of cancer cells was tended toward well differentiation and cell growth was markedly inhibited. BrdU uptake assay and immunohistochemical stain of PCNA showed that the BrdU labeling rate and PCNA positive rate were lower than the controls, but no difference was found statistically as compared with all transretinoic acid. Flow cytometric assay demonstrated that S phase cells decreased and G0/G1 phase cells increased. Expression of c-myc oncogene protein decreased but the c-fos oncogene protein markedly increased.CONCLUSION Tanshinone could reverse the inducing differentiation in human hepatocarcinoma cells (SMMC-7721). It may become a new prospective inducer of cell differentiation to treat cancers.     

洛铂对肝癌HepG2细胞增殖和调亡的作用及机制

目的在体外细胞中研究洛铂对肝癌HepG2细胞在增殖、凋亡方面的作用及其机制。方法将HepG2细胞分为洛铂组(增殖实验:5、10、15μmol/L组;凋亡实验:10μmol/L;侵袭实验:4μg/ml)和对照组(不加药物)。利用CCK8法和流式细胞术分别检测2组HepG2细胞的增殖和凋亡情况。通过Western Blot初步检测2组细胞中增殖、凋亡相关蛋白NF-κB、Bcl-2、Bax、Bid、Puma、Caspase-3的表达变化。增殖实验采用双因素方差分析,凋亡实验采用χ2检验,侵袭实验采用t检验。结果在作用于细胞24、48、72 h后,对照组与实验组细胞生长增殖抑制率差异有统计学意义(F=273.5,P<0.01),同一时间不同浓度间、同一浓度不同时间差异均有统计学意义(F分别为1857、1365,P值均<0.01)。2组间细胞凋亡率比较差异有统计学意义(χ2=1821,P<0.001)。实验组HepG2细胞中穿透Transwell小室的细胞数少于对照组(21.30±2.74 vs 45.00±4.26,t=11.89,P<0.001)。洛铂组HepG2细胞Bcl-2表达水平下降,NF-κB、Bax、Puma、Caspase-3表达水平升高。结论洛铂可通过影响一系列增殖、凋亡蛋白发挥抑制肝癌细胞增殖及促进凋亡的作用,但细胞内信号通路复杂,需要进一步研究。     

紫杉醇对耐阿霉素膀胱癌细胞株T24/ADM增殖的影响及机制

目的观察紫杉醇对耐阿霉素（ADM）人膀胱癌细胞株（T24/ADM）增殖的影响,并探讨其机制。方法用阿霉素浓度梯度递增法诱导培养人膀胱癌T24/ADM多药耐药细胞。用1、10、102、103nmol/L紫杉醇培养T24/ADM细胞12、24、48、72 h,用MTT法测算T24/ADM细胞增殖抑制率,用流式细胞仪PI单染法测定培养24、48 h时T24/ADM细胞凋亡率,并进行形态学观察。结果紫杉醇可抑制T24/ADM细胞生长,且在一定剂量范围内具有时间和浓度依赖性。实验组细胞凋亡率较对照组高,且随作用时间的延长,细胞凋亡率明显增高。紫杉醇组T24/ADM细胞镜下可见凋亡。结论紫杉醇可抑制膀胱癌T24/ADM细胞株生长,这种作用呈浓度时间依赖性,其机制可能与紫杉醇诱导T24/ADM细胞凋亡有关。     

青蒿琥酯对人前列腺癌PC3细胞的增殖抑制作用及机制探讨

目的探讨青蒿琥酯（Art）对人前列腺癌PC3细胞株增殖的抑制作用及机制。方法用不同浓度Art干预PC3细胞。采用MTT法检测用药后细胞增殖水平;用流式细胞术（FCM）检测细胞周期的改变和凋亡率;采用Western blot法检测不同浓度Art作用48h后PC3细胞Livin和Caspase-3蛋白的表达情况。结果与对照组比较,Art可显著抑制PC3细胞增殖（P〈0．01）。PC3细胞主要被阻滞在G0／G1期,PC3细胞凋亡率各实验组均明显高于对照组（P〈0．01）,且呈时间剂量依赖性。与对照组相比,各实验组PC3细胞survivin的表达显著下调（P〈0．01）,而Caspase-3的表达增加（P〈0．01）。结论Art可抑制PC3细胞增殖,其作用机制可能与调控细胞周期以及下调Livin的表达、上调Caspase-3而诱导PC3细胞凋亡有关。     

Effect of cell fusion on metastatic ability of mouse hepatocarcinoma cell lines

ＩＮＴＲＯＤＵＣＴＩＯＮＩｔｗａｓｋｎｏｗｎｄｕｒｉｎｇｔｈｅ１９７０ｓｔｈａｔｔｈｅｍａｌｉｇｎａｎｃｙｏｆｈｙｂｒｉｄｏｍａｃｅｌｓｄｅｃｒｅａｓｅｄｗｈｅｎｔｕｍｏｒｃｅｌｓｗｅｒｅｆｕｓｅｄｗｉｔｈｎｏｒｍａｌｃｅｌｓａｎｄｔｈｅｍａｌｉｇｎ...     

蟾毒灵对人肝癌BEL-7402细胞增殖的影响

目的：研究蟾毒灵对人肝癌BEL-7402细胞增殖及细胞周期的影响。方法：采用MTT法观察蟾毒灵对人肝癌细胞增殖的抑制作用；光镜及透射电镜观察细胞形态及超微结构；流式细胞术分析细胞周期分布情况。结果：蟾毒灵对肝癌细胞生长抑制作用呈浓度-时间依赖性，24、48和72小时的半数抑制浓度分别为6．67、0．348和0．228μmol／L，蟾毒灵可将细胞周期阻滞于G2／M期，透射电镜观察到典型的细胞凋亡特征。结论：诱导肝癌细胞周期G2／M期阻滞可能是蟾毒灵抑制肝癌细胞增殖的机制之一。     

原花青素对人肝癌细胞SMMC-7721增殖及凋亡的作用

目的探讨葡萄籽提取物原花青素（PA）对人肝癌细胞SMMC-7721增殖和凋亡的影响。方法取对数生长期人肝癌细胞SMMC-7721,分别加人20、40、60mg／L的PA培养24h后,采用MTI＂法检测细胞增殖抑制率、流式细胞仪分析细胞凋亡率,并测定细胞内超氧化物歧化酶（SOD）活力、丙二醛（MDA）和活性氧簇（ROS）等指标。结果20、40、60mg／L的PA对人肝癌细胞SMMC-7721的增殖抑制率分别为（22．7±1．8）％、（38．6±1。9）％、（47．6±2．5）％,细胞凋亡率分别为（19．7±5．1）％、（29．7±2．9）％、（48．5±4．5）％,两者均随PA浓度的升高而增高（P均〈0．01）;与对照组比较,各剂量组人肝癌细胞SMMC-7721中MDA、ROS水平逐渐下降（P〈0．05）;SOD活力逐渐上升（P〈0．05）。结论PA在体外可呈浓度依赖性抑制人肝癌细胞SMMC-7721的增殖及凋亡,其作用机制可能与清除ROS、提高SOD的活性、降低脂质过氧化反应等有关。     

蛋白酶体β亚基4型对人肝癌SMMC7721细胞增殖存活的影响

目的旨在探讨蛋白酶体β亚基4型(PSMB4)对人肝癌SMMC7721细胞增殖存活的影响及其可能的机制。方法利用特异性短发夹RNA(shRNA)技术构建干扰PSMB4表达的SMMC7721实验组细胞;运用MTT、克隆形成实验检测细胞增殖的影响,流式细胞术检测细胞凋亡率的变化,Western Blot检测相关蛋白的表达变化。计量资料两组间比较采用独立样本t检验。结果成功构建了干扰PSMB4表达的SMMC7721实验组细胞(shRNA1:t=22.67,P<0.0001;shRNA2;t=30.88,P<0.0001;shRNA3:t=67.82,P<0.0001)。MTT实验显示第4天(0.4770±0.0135 vs 0.3237±0.0127,t=8.286,P=0.0012)、第5天(0.5893±0.0088 vs 0.3847±0.0090,t=16.220,P<0.0001)实验组细胞OD490值显著低于对照组。克隆形成实验显示细胞集落数显著减少。流式细胞术显示实验组细胞的早期凋亡率[(5.5570±0.2589)%vs(3.8870±0.3324)%,t=3.964,P=0.0166]、晚期凋亡率[(12.6300±0.4198)%vs(5.3100±0.3062)%,t=14.080,P=0.0001]及总凋亡率[(18.1800±0.6785)%vs(9.1970±0.6313)%,t=9.967,P=0.0006]均明显高于对照组,且干扰PSMB4表达的实验组细胞中核因子-κB亚基p65蛋白表达降低(0.8015±0.0120 vs 0.2841±0.0110,t=31.830,P<0.0001),核因子-κB抑制蛋白α表达增加(0.4816±0.0112 vs 0.6583±0.0142,t=9.774,P=0.0006)。结论干扰PSMB4表达可能通过抑制NF-κB信号通路,从而导致肝癌SMMC7721细胞的增殖存活能力下降。