脱氢表雄酮对成骨细胞ERβ的上调节作用

 目的研究脱氢表雄酮(DHEA)对成骨细胞雌激素受体(ER)亚型的调节及防治绝经后骨质疏松的作用机制。方法取新生2～4 d BALB/c小鼠颅骨,用酶消化法进行成骨细胞原代培养并鉴定。取原代培养的成骨细胞,模仿雌激素撤退现象后,给予不同时间1×10^-7mol·L^-1的DHEA培养,透射电镜观察细胞器的变化,RT-PCR分析成骨细胞护骨素(OPG)/破骨细胞分化因子(RANKL),ER亚型的表达;同时分析ER亚型与OPG生成的相关性。结果1×10^-7mol·L^-1的DHEA使成骨细胞的细胞器更为丰富,糖原减少,高尔基体发达且分层增多;对成骨细胞ERα的表达无明显影响,却增高OPG/RANKL,ERβ的表达(均为P<0.01),二者的表达水平呈明显正相关(P<0.01)。结论DHEA能够增高OPG/RANKL的表达,从而抑制骨的吸收;其作用机制与ERβ的上调有关。     

治尪汤联合甲氨蝶呤调节RANKL/OPG通路改善胶原诱导关节炎大鼠骨破坏的作用机制

目的 探究治尪汤联合甲氨蝶呤改善胶原诱导关节炎模型（CIA）大鼠的骨破坏作用及机制。方法 SD雄性大鼠随机分为正常组，模型组，甲氨蝶呤组（1.5 mg·kg^-1），甲氨蝶呤+治尪汤低（40.8 g·kg^-1），高（102.0 g·kg^-1）剂量组。除正常组外，其余大鼠分别于第1，7天尾部注射浓度为2 g·L^-1的Ⅱ型胶原乳剂50 μL建立CIA模型；第8天开始连续给药21 d，每7 d检测1次体质量、足趾厚度，进行关节炎指数（AI）评分，酶联免疫吸附测定法检测血清肿瘤坏死因子-α（TNF-α），白细胞介素-6（IL-6），白细胞介素-1β（IL-1β）含量，抗酒石酸酸性磷酸酶染色法检测踝关节破骨细胞的数量，免疫组化（IHC），实时荧光定量聚合酶链式反应（Real-time PCR），蛋白免疫印迹法（Western blot）检测踝关节核转录因子-κB受体活化因子配体（RANKL），骨保护素（OPG）的表达。结果 与正常组比较，模型组大鼠体质量显著降低（P<0.01），足趾厚度显著增加（P<0.01），踝关节AI评分显著增加（P<0.01），血清TNF-α，IL-6，IL-1β含量显著升高（P<0.01），踝关节破骨细胞数量显著增加（P<0.01），踝关节RANKL mRNA和蛋白表达显著升高（P<0.01），OPG mRNA和蛋白表达明显降低（P<0.05），RANKL/OPG显著升高（P<0.01）。与模型组比较，甲氨蝶呤+治尪汤低、高剂量可改善大鼠体质量，降低足趾厚度，AI评分，RANKL mRNA和蛋白表达并增加OPG mRNA和蛋白表达，使RANKL/OPG降低（P<0.05，P<0.01），且甲氨蝶呤+治尪汤高剂量效果最好，甲氨蝶呤+治尪汤低剂量次之，甲氨蝶呤再次之。结论 治尪汤联合甲氨蝶呤能更好地改善类风湿关节炎的骨破坏，可能是通过抑制RANKL/OPG通路实现的，本研究为中西医结合方案治疗类风湿关节炎骨破坏提供了实验基础。     

17β-雌二醇对骨髓基质细胞成骨、成脂分化和成骨细胞成脂横向分化的影响

 目的研究17β-雌二醇对小鼠原代骨髓基质细胞成骨、成脂分化以及小鼠原代成骨细胞成脂横向分化的影响。方法四甲基偶氮唑盐法(MTT)检测17β-雌二醇对骨髓基质细胞和成骨细胞增殖的影响,碱性磷酸酶(ALP)活性测定法检测17β-雌二醇对骨髓基质细胞成骨分化的影响,油红O染色形态学及定量测定法检测17β-雌二醇对骨髓基质细胞成脂分化和成骨细胞成脂横向分化的影响。结果1×10^-8,1×10^-7,5×10^-7,1×10^-6,5×10^-6和1×10^-5mol·L^-1的17β-雌二醇可以促进小鼠原代骨髓基质细胞和成骨细胞增殖(P<0.05);5×10^-7,1×10^-6,5×10^-6和1×10^-5mol·L^-1的17β-雌二醇促进骨髓基质细胞的成骨分化、抑制成脂分化,但是浓度为1×10^-7mol·L^-1的17β-雌二醇抑制骨髓基质细胞的成骨分化、促进成脂分化(P<0.05);浓度为1×10^-8,5×10^-7,1×10^-6,和1×10^-5mol·L^-1的17β-雌二醇抑制成骨细胞的成脂分化(P<0.05)。结论17β-雌二醇可以调节骨髓基质细胞向成骨细胞分化而减少其向脂肪细胞分化,并且可以抑制成骨细胞向脂肪细胞的横向分化。     

大血藤对破骨细胞活性及成骨细胞增殖分化作用的研究

该研究采用1α, 25-(OH)₂VitD₃诱导兔骨髓细胞法获得破骨细胞,以形态学观察、HE染色、抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)染色和骨吸收陷窝甲苯胺蓝染色来鉴定破骨细胞,用TRAP⁺细胞计数、TRAP活力测定和骨吸收陷窝的数量及面积来检测大血藤对破骨细胞分化及骨吸收功能的影响。培养MC3T3-E1Subclone 14(小鼠颅顶前骨细胞亚克隆14)细胞,用MTT法、碱性磷酸酶活力测定检测大血藤对其增殖和分化的影响。结果表明大血藤醇提物和水煎物低、中、高剂量组(2,20,200 mg·L^-1)对破骨细胞分化及骨吸收功能具有抑制作用,并具有剂量依赖性。大血藤醇提物和水煎物低、中剂量组具有促进MC3T3-E1Subclone 14细胞增殖分化的作用,说明大血藤对骨质疏松有一定的防治作用,这种作用可能是通过抑制破骨细胞活性和促进成骨细胞增殖分化来实现的。     

柚皮苷对破骨细胞分化的影响

目的: 探讨骨碎补单体成分柚皮苷对小鼠单核细胞RAW264.7诱导分化为破骨细胞的影响. 方法: 通过100 μg·L^-1核因子κB受体活化因子配基(RANKL)诱导RAW264.7细胞株分化为成熟破骨细胞,经TRAP特异性染色和骨吸收陷窝对破骨细胞进行鉴定.采用MTT法筛选抑制破骨细胞最强的浓度.在诱导过程中,采用筛选后含柚皮苷的培养基,诱导5 d后,通过TRAP阳性细胞计数和骨吸收面积分析来观察柚皮苷对破骨细胞的形成和骨吸收功能情况;流式细胞术检测柚皮苷对破骨细胞增殖的影响,RT-PCR检测柚皮苷对破骨细胞分化过程中核因子κB 受体活化因子(RANK)、抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)、基质金属蛋白酶 9(MMP-9)、活化T细胞核因子1(NFATc1)与C-fos mRNA表达的影响. 结果: 采用100 μg·L^-1的RANKL可成功诱导成熟的、有功能的破骨细胞.柚皮苷可以抑制破骨细胞的分化和骨吸收功能;抑制破骨细胞的增殖活性;柚皮苷可明显下调破骨细胞分化过程中的RANK,TRAP,MMP-9,NFATc1 mRNA的表达,上调C-fos mRNA表达. 结论: 柚皮苷可抑制破骨细胞分化、增殖和骨吸收功能,其机制可能是通过抑制破骨细胞分化过程中特异性基因表达实现的.     

补肾强督方含药血清对强直性脊柱炎OPG/RANKL通路的作用

目的探讨补肾强督方对强直性脊椎炎(ankylosing spondylitis,AS)骨保护素和核转录因子-κB受体活化因子配基(osteoprotegerin receptor activator for nuclear factorκB ligand,OPG/RANKL)通路的作用机制。方法选取2009年1-5月卫生部中日友好医院中医风湿病科门诊和住院活动期AS患者30例,予补肾强督方,每天1剂,早晚分两次口服,连续3个月;另选取健康志愿者30名。采集治疗前后患者血清及健康人血清。将成骨细胞hFOB1.19分为患者治疗前组、治疗后组及健康人组(对照组)。各组细胞分别于含相应血清的基础培养基中进行培养。取成骨细胞培养上清液,采用ELISA法检测成骨细胞OPG/RANKL含量及mRNA表达,采用RT-PCR检测OPG/RANKL蛋白表达。结果与对照组比较,治疗前组成骨细胞OPG含量、OPG mRNA及蛋白表达、OPG/RANKL mRNA及蛋白表达均降低,RANKL mRNA表达升高,差异均有统计学意义(P<0.05,P<0.01);与治疗前组比较,治疗后组OPG含量、OPGmRNA及蛋白表达、OPG/RANKL mRNA及蛋白表达升高,RANKL mRNA表达降低,差异均有统计学意义(P<0.05,P<0.01)。结论 AS患者血清能直接抑制成骨细胞OPG表达、促进RANKL表达、下调OPG与RANKL比率,补肾强督方治疗后的血清能直接促进成骨细胞表达OPG,抑制表达RANKL,上调OPG与RANKL比率,补肾强督方可能是通过直接上调成骨细胞OPG/RANKL而抑制破骨细胞分化和功能,达到促进骨生成,抑制骨吸收。     

小檗碱对肝细胞核因子4α表达及葡萄糖激酶活性的影响

目的：观察小檗碱对小鼠原代肝细胞核因子4α(HNF4α)表达及葡萄糖代谢关键酶葡萄糖激酶(GK)活性的影响，探讨小檗碱治疗2型糖尿病的分子机制。方法：采用改良两步灌流法培养小鼠原代肝细胞，用不同浓度的小檗碱(0, 1，3，10，30，100 μmol·L^-1)和1 mmol·L^-1二甲双胍干预24 h后，采用RT-PCR方法检测HNF4α mRNA表达；采用Western-blot方法检测HNF4α蛋白的表达，同时检测GK的活性。结果：与阴性对照组相比，小檗碱在10，30，100 μmol·L^-1时能够明显促进HNF4α mRNA及蛋白的表达，二者同时在30 μmol·L^-1时达到最大值(HNF4α mRNA相对吸光度为0.48±0.20,蛋白相对吸光度为3.47±0.86，P<0.01)；在10，30 μmol·L^-1时明显上调GK活性，同时在30 μmol·L^-1时达到最大值(0.080±0.073， P<0.05)；而二甲双胍对HNF4α mRNA、蛋白的表达及对GK活性的影响则与阴性对照组无明显差异。结论：小檗碱改善糖代谢的作用可能与其调节肝细胞核因子4α的表达进而调节GK活性有关。     

双氯芬酸选择性抑制表达环氧合酶-2的肝癌细胞的增殖

 目的检测体外培养的人肝细胞癌HepG2,Hep3B细胞和正常肝细胞系QSG7701细胞内环氧酶-2(cyclooxygenase-2,COX-2)的表达,观察环氧酶抑制剂双氯芬酸(diclofenac)对上述细胞增殖的作用,并检测前列腺素E₂(PGE₂)对双氯芬酸作用的影响,以探讨双氯芬酸抗增殖作用与细胞内COX-2的关系。方法采用半定量逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测COX-2 mRNA的表达水平,免疫印迹技术检测细胞内蛋白水平,cellcounting kit-8(CCK-8)细胞计数法测定细胞增殖活性。结果肝细胞癌HepG2和Hep3B细胞均高表达COX-2 mRNA和COX-2蛋白,正常肝细胞系QSG7701微弱表达COX-2。10～200μmol·L^-1的双氯芬酸浓度依赖性地抑制HepG2和Hep3B细胞的增殖(P<0.01),作用72h的半数抑制浓度(IC₅₀)分别为76.41和35.21μmol·L^-1。双氯芬酸对QSG7701的抑制作用较弱,IC₅₀值为170.23μmol·L^-1。20μmol·L^-1 PGE2与50μmol·L^-1双氯芬酸共同孵育能显著削弱后者抗HepG2和Hep3B细胞增殖的作用(P<0.01)。结论双氯芬酸通过抑制COX-2活性和PGE₂的生成,特异性地抑制表达COX-2的肝癌细胞的增殖。     

川芎嗪对血管紧张素Ⅱ诱导心肌细胞肥大的影响及其机制

目的: 探讨川芎嗪(TMP)对血管紧张素Ⅱ(Ang Ⅱ)所诱导心肌细胞肥大的抑制作用及其机制。方法: 利用Ang Ⅱ(0.1 μmol·L^-1)刺激新生大鼠心肌细胞建立肥大细胞模型。培养心肌细胞随机分为6组:对照组,Ang Ⅱ(0.1 μmol·L^-1)组,低剂量TMP(0.01 mmol·L^-1)组,中剂量TMP(0.1 mmol·L^-1)组,高剂量TMP(1 mmol·L^-1)组,吡咯烷二硫化氨基甲酸酯(PDTC,100 μmol·L^-1)组。在给药处理24 h后,收集各组心肌细胞,检测心肌细胞总蛋白含量、β-肌球蛋白重链(β-MHC)mRNA表达量和核因子-κB(NF-κB)蛋白表达量。结果: Ang Ⅱ刺激导致培养心肌细胞的总蛋白含量[Ang Ⅱ组(296.7±27.6)mg·L^-1,对照组(184.3±11.6)mg·L^-1,P<0.05]、β-MHC mRNA表达量(Ang Ⅱ组0.936±0.059,对照组0.496±0.030;P<0.05)明显增加,这证实心肌肥大的发生;TMP以剂量依赖的方式抑制Ang Ⅱ诱导的心肌细胞肥大。同时TMP 1 mmol·L^-1降低Ang Ⅱ诱导的肥大心肌细胞中磷酸化NF-κB(Ang Ⅱ组0.861±0.065,TMP组0.655±0.052,P<0.05)和I-κB蛋白的表达量(Ang Ⅱ 组0.785±0.042,TMP组0.525±0.045,P<0.05)。在应用Ang Ⅱ刺激心肌细胞同时,给予NF-κB抑制剂PDTC也能抑制Ang Ⅱ诱导的心肌细胞肥大。结论: 川芎嗪通过抑制心肌细胞内NF-κB途径,而抑制Ang Ⅱ诱导的心肌细胞肥大。川芎嗪的这些作用构成了它对心脏疾病具有保护作用的机制之一。     

NMDA受体对乙醇、乙醛调控大脑皮质神经元神经甾体水平的影响

 目的研究乙醇、乙醛对原代培养大鼠大脑皮质神经元神经甾体水平的影响以及与N-甲基-D-天门冬氨酸(NMDA)受体调控的相关性。方法应用不同浓度乙醇或乙醛处理神经元,同时应用地佐环平(dizocilpine,MK801)阻断NMDA受体,收集细胞培养上清,采用HPLC-MS/APCI法分离测定游离型神经甾体孕烯醇酮(PREG)、脱氢表雄酮(DHEA)、别孕烯醇酮(AP)及结合型神经甾体脱氢表雄酮硫酸酯(DHEAS)、孕烯醇酮硫酸酯(PREGS)的含量,观察乙醇、乙醛对原代培养神经元神经甾体水平的影响以及与NMDA受体调控的相关性。结果与PBS对照组相比,25,50,100mmol·L^-1的乙醇均可显著升高神经元培养液中PREGS的水平(P<0.05);25和50mmol·L^-1的乙醇均可显著升高神经元培养液中AP的水平(P<0.05);50mmol·L^-1的乙醇还可显著升高神经元培养液中PREG的水平(P<0.05)。与PBS对照组相比,12.5,25,50mmol·L^-1的乙醛可显著升高神经元培养液中DHEA的水平(P<0.05,P₅₀<0.01);25,50mmol·L^-1的乙醛可显著升高神经元培养液中PREG和DHEAS的水平(P<0.05),12.5mmol·L^-1的乙醛显著降低神经元培养液中DHEAS的水平(P<0.05)、显著升高其AP的水平(P<0.05),50mmol·L^-1的乙醛却显著降低其AP的水平(P<0.05);25mmol·L^-1乙醛还可使神经元培养液中PREGS的水平显著升高(P<0.05)。MK801反转了50mmol·L^-1乙醇升高PREGS水平的作用(P<0.01)以及25mmol·L^-1乙醛升高PREG和DHEAS水平的作用(P<0.01)。结论乙醇、乙醛对神经元神经甾体水平的影响存在着一定的量效关系且对游离型和结合型神经甾体的影响各不相同;NMDA受体阻断了乙醇上调PREGS以及乙醛上调PREG和DHEAS的作用。     

脱氢表雄酮对鼠成骨细胞芳香化酶和雌激素受体亚型转录的调控作用

 目的探讨脱氢表雄酮(DHEA)对鼠成骨细胞(OB)芳香化酶和雌激素受体(ER)亚型转录的调控作用。方法颅骨酶解法原代培养OB,体外模拟雌激素撤退现象,分为对照组、10^-7mol·L^-1 DHEA处理组和10^-10mol·L^-1雌二醇(E2)处理组,RealTime RT-PCR分析OB芳香化酶、ER_α和ER_βmRNA转录表达。结果各组OB中均稳定表达芳香化酶、ER_α和ER_βmRNA。与对照组比较,DHEA处理组和E2处理组OB芳香化酶、ER_α和ER_β的转录均显著增加。与对照组相比,DHEA显著提高了ER_β/ER_α比值;E2则显著降低了ER_β/ER_α比值(P<0.05)。结论DHEA和E2在体外都可促进OB中芳香化酶、ER_α和ER_βmRNA的表达;DHEA刺激OB优势表达ER_β;而E2则刺激OB优势表达ER_α。     

仙灵骨葆胶囊对去卵巢骨折大鼠骨折端骨微结构的影响及OPG/RANKL信号调控机制

目的 研究仙灵骨葆胶囊对去卵巢大鼠骨折端骨微结构的影响及骨保护素(OPG)/核因子κB受体活化因子配基(RANKL)信号调控机制.方法 从48只Sprague-Dawley雌鼠中随机挑出40只切除双侧卵巢,恢复性饲养6周后建立股骨骨折内固定模型,建模大鼠随机分为模型组,阳性对照组及仙灵骨葆胶囊高、中、低剂量组,余下8只...     

两种杜仲黄酮类化合物对成骨细胞OPG/RANKL及成骨相关转录因子的影响

目的:研究杜仲黄酮类化合物紫云英苷和黄芩素对成骨细胞特异性转录因子Osterix及破骨细胞抑制因子与核因子κB受体活化因子配体比值(OPG/RANKL)的影响。方法:采用MC3T3-E1 Subclone 14成骨细胞,不同浓度紫云英苷和黄芩素和维生素D3组加入质量浓度为30 mg·L-1作用细胞24 h后,用MTT法检测细胞增殖情况,成骨细胞接种于24孔板后,空白组加入培养基,给药组分别加入质量浓度为80 mg·L-1(高浓度),40 mg·L-1(中浓度),7.5 mg·L-1(低浓度)的含紫云英苷或黄芩素,作用24 h后,ELISA法检测钙离子活性,蛋白免疫印迹法检测Osterix,OPG以及RANKL的蛋白表达水平。结果:与空白组相比,紫云英苷和黄芩素可后明显促进MC3T3-E1 Subclone 14成骨细胞的增殖(P<0.05);明显上调OPG和Osterix的表达(P<0.05),同时能降低RANKL的表达(P<0.05)。结论:杜仲黄酮类化合物紫云英苷和黄芩素能促进MC3T3-E1Subclone 14成骨细胞增殖,并上调Osterix和OPG/RANKL。     

黄芪散对高糖作用下成骨细胞相关功能的影响

目的:观察黄芪散含药血清对高糖条件下成骨细胞功能的影响及与糖尿病性骨质疏松发病机制相关基因的影响,探讨黄芪散(HQS)对糖尿病性骨质疏松症的疗效机制。方法:选用健康清洁级5周龄Wistar大鼠10只,随机分为正常组和药物组。制备黄芪散含药血清和空白血清,选用健康清洁级新生大鼠乳鼠4只,体外以酶消化法分离培养新生乳鼠颅骨成骨细胞(Ob),行细胞计数(CCK-8)法测定高糖条件下(25.5 mmol·L~(-1))5%,10%,20%,30%含药血清对细胞增殖的影响,选取增殖活性最佳血清浓度,采用实时荧光定量PCR(Real-time PCR)和蛋白免疫印迹(Western blot)法检测黄芪散对成骨功能相关基因骨桥蛋白(OPN),骨钙素(OC),碱性磷酸酶(ALP)和胰腺-骨骼相关基因骨保护素(OPG),叉头转录因子1(Fox O1)表达的影响。结果:10%和30%血清浓度组细胞增殖较空白组有明显升高(P0.05);20%血清浓度组较空白组有显著升高(P0.01)。与空白组比较,5%浓度条件下,OPN,OPG mRNA表达明显下调(P0.05);10%浓度条件下,OC,ALP,OPN mRNA表达明显上调(P0.05,P0.01);OPG,Fox O1 mRNA较空白组表达显著下调(P0.01)。20%浓度和10%浓度条件差异性一致,OPN,OPG,Fox O1 mRNA影响趋势较10%浓度药物血清组更明显。20%浓度血清条件下,与空白组比较,OC和OPN蛋白表达显著上调(P0.01),OPG蛋白表达显著下调(P0.01)。结论:黄芪散对糖尿病性骨质疏松的疗效机制可能与其促进高糖作用下成骨细胞增殖作用有关,与下调胰腺-骨骼相关基因OPG,Fox O1表达有关。     

升麻三萜皂苷对破骨细胞形成分化的影响及机制研究

目的 探究升麻三萜皂苷（Cimicifuga triterpene saponins）对破骨细胞形成分化和骨吸收功能的影响,并基于网络药理学探讨其作用机制。方法 采用CCK-8法测定升麻三萜皂苷阿克特素、升麻环氧醇苷、升麻醇对骨髓巨噬细胞（bone marrow macrophages,BMMs）增殖活性的影响;抗酒石酸酸性磷酸酶（tartrateresistant acid phosphatase,TRAP）染色测定破骨细胞数目;磷酸苯二钠法测定破骨细胞的TRAP活性;鬼笔环肽染色观察破骨细胞F-actin环的形成;甲苯胺蓝染色检测破骨细胞在牛皮质骨骨片上形成的骨吸收陷窝;Western blotting分析破骨细胞标志基因和蛋白的表达。采用GeneCards和DisGeNET数据库获取破骨细胞功能的靶点,应用Cytoscape 3.7.1软件,采用蛋白互作的方式,筛选升麻三萜皂苷调控破骨细胞功能的核心靶点,并采用DAVID 6.8对核心靶点进行基因本体（gene ontology,GO）功能及京都基因与基因组百科全书（Kyoto encyclopedia of genes and genomes,KEGG）通路富集分析。结果 升麻三萜皂苷对BMMs增殖无显著影响,升麻三萜皂苷阿克特素、升麻环氧醇苷、升麻醇均可减少破骨细胞的数目,抑制破骨细胞TRAP活性和F-actin环的形成,显著抑制破骨细胞活化T细胞核因子1（nuclear factor of activated T cells 1,NFATc1）、原癌蛋白Fos（oncogene Fos,c-Fos）、基质金属蛋白酶9（matrix metalloproteinase 9,MMP9）和组织蛋白酶（cathepsin K,CTSK）的表达（P＜0.05、0.01）,减少破骨细胞在骨片上形成的骨吸收陷窝的面积（P＜0.01）。网络药理学分析表明升麻三萜皂苷主要通过丝裂原活化蛋白激酶（mitogen-activated protein kinase,MAPK）通路调控破骨细胞的骨吸收功能。结论 升麻三萜皂苷通过MAPK通路抑制BMMs诱导的破骨细胞的形成分化和骨吸收,可为抗骨质疏松新药的研发提供先导化合物。     

基于AMPK/mTOR信号通路探讨左、右归丸对绝经后骨质疏松症大鼠骨吸收的影响

目的:观察左、右归丸对绝经后骨质疏松症(PMOP)大鼠骨组织AMPK/mTOR基因与蛋白表达影响,并基于此信号通路对PMOP大鼠骨吸收进行实验研究,探索其防治PMOP的作用机制.方法:将60只SD大鼠随机分为空白(KB)组、假手术(SHAM)组、模型(OVX)组、左归丸(ZGW)组、右归丸(YGW)组、补佳乐(BJL)...     

Wogonin inhibits osteoclast formation induced by lipopolysaccharide

To evaluate the inhibitory activity of wogonin against lipopolysaccharide (LPS)-induced bone resorption, we investigated the effect of wogonin on osteoclastogenesis induced by LPS. Wogonin inhibited LPS-induced osteoclastogenesis in co-cultures of mouse calvaria-derived osteoblasts and bone marrow-derived pre-osteoclasts. Wogonin also suppressed osteoclastogenesis in LPS-injected mouse calvaria. In osteoblasts, the upregulation of receptor activator of nuclear factor-κB (RANKL) expression and the downregulation of osteoprotegerin (OPG) expression by LPS were inhibited by wogonin. Wogonin and NS-398, a COX-2 inhibitor, suppressed LPS-stimulated PGE₂ production in osteoblasts. NS-398 inhibited the effect of LPS on RANKL and OPG expression in osteoblasts. These results suggest that wogonin acts as an inhibitor of LPS-induced osteoclastogenesis through downregulation of RANKL and upregulation of OPG expression via blockage of PGE₂ production. Based on these results, wogonin has potential for use as a therapeutic agent in bacteria-induced bone resorption. Copyright © 2009 John Wiley & Sons, Ltd.     

大鼠成骨细胞RANKL-OPG mRNA表达的增龄性变化及淫羊藿甙的干预作用

目的:观察体外培养大鼠成骨细胞RANKL-OPG mRNA的表达随年龄增长的变化,及淫羊藿甙的干预作用,探讨RANKL-RANK-OPG系统在骨质疏松发病中的作用及淫羊藿甙有效防治骨质疏松的机理。方法:取出生24 h、3月龄、6月龄和12月龄SD雌雄大鼠的成骨细胞进行体外培养,MTT测定淫羊藿甙促成骨细胞增殖的最佳浓度,干预后RT-PCR检测RANKL-OPGmRNA的表达。结果:RANKL-OPG的比例随年龄增长逐渐变大,而淫羊藿甙可以一定程度上改变上述变化趋势。结论:RANKL-OPG比例的变化在骨质疏松发病中起到重要作用,淫羊藿甙通过调节RANKL-OPG比例的增龄性变化延缓了骨丢失随年龄增长而加剧的趋势,从而有效地防治骨质疏松症。