氟伐他汀对大鼠肾脏缺血再灌注损伤NF-κB表达的影响

目的 探讨氟伐他汀对大鼠肾缺血再灌注损伤后核因子-κB(NF-κB)表达的影响.方法 将36只大鼠随机分为假手术组、缺血再灌注组和氟伐他汀组,每组各12只.假手术组术前3d每日用等量0.9％氯化钠注射液灌胃后,予2％戊巴比妥钠腹腔麻醉(45 mg/kg),用500U肝素钠腹腔注射,游离双侧肾脏,切除右肾后缝合腹壁.缺血再灌注组实验过程与假手术组相同,但在右肾切除、左肾游离后行左肾缺血实验,将左肾动、静脉用血管钳夹闭45 min后恢复灌流.氟伐他汀组于术前3d每日予氟伐他汀(2 mg/kg)灌胃,余实验过程同缺血再灌注组.术后处死大鼠检测血肌酐(Cr)、尿素(BUN),光镜下观察肾组织病理学改变,蛋白免疫印迹检测NF-κB蛋白表达.结果 缺血再灌注组、氟伐他汀组与假手术组比较,Cr、BUN水平明显增高,NF-κB表达明显增高,肾组织病理学见肾小管损伤加重,差异有统计学意义(P＜0.05).氟伐他汀组与缺血再灌注组比较,上述肾脏损伤指标明显降低,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 氟伐他汀能减轻肾缺血再灌注损伤,其机制可能与抑制NF-κB的表达有关.     

阿托伐他汀对大鼠脑缺血再灌注脑组织bcl-2和bax表达的影响

目的:观察阿托伐他汀对大鼠脑缺血再灌注脑组织bcl-2和bax表达的影响。方法:Wistar大鼠随机分为正常组、假手术组、缺血再灌注组(IR组)和阿托伐他汀治疗组(MT组)。采用线栓法复制大鼠脑缺血再灌注模型,应用免疫组织化学法检测再灌注12h和24h大鼠脑组织bcl-2和bax的表达。结果:与正常组和假手术组比较,IR组和MT组bcl-2、bax表达均显著增高(P<0.01);与IR组比较,MT组bax表达显著降低(P<0.05),bcl-2表达增高(P<0.05)。结论:阿托伐他汀能抑制大鼠脑缺血再灌注后脑组织bax和促进bcl-2表达。     

己酮可可碱对大鼠肾缺血-再灌注损伤的保护作用及其机制

目的 探讨己酮可可碱(PTX)预处理对大鼠肾缺血-再灌注损伤(IRJ)的保护作用及其具体保护机制.方法 75只雄性SD大鼠随机分为3组:假手术组(SO组)、缺血.再灌注组(IRI组)、FTX治疗组(PTX组).每组25只.SO组:单纯剖腹术,游离双侧肾蒂血管后不作结扎,等待45 min后关闭腹腔.通过无损伤动脉夹阻断双肾血流45 min建立大鼠的肾IRI模型.FTX组术前0.5 h予FTX 20rng/kg静脉注射,术中PTX 6 mg/(kg·h)微泵维持.SO组、IRI组术前0.5 h予等量生理盐水静脉注射及微泵维持.3组分别于缺血前、缺血-再灌注即刻、再灌注后1 h、4 h、24 h 5个时间点监测肾功能、肾脏病理及肾组织匀浆的丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、细胞问黏附分子-1(ICAM-1)变化情况.采用单因素方差分析,组间两两比较采用q检验,并对部分数据行相关性分析.结果 肾IRI后,表现为肾小管上皮细胞不同程度的肿胀、变性、坏死,炎性细胞浸润,给予PTX预处理后肾脏病理改变明显减轻,炎性细胞浸润减少.与SO组相比,IRI组在再灌注后各时间点血清肌酐水平,肾小管损伤评分,.肾组织匀浆的TNF-α水平、ICAM-1水平显著升高(P<0.01),肾组织匀浆的SOD水平显著下降(P<0.01);与IRI组相比,FTX组在相应时间点的血清肌酐水平、肾小管损伤评分显著下降(P<0.05);在再灌注即刻、1 h、4 h、24 h肾组织匀浆的TNF-α水平明显下降(P<0.05),肾组织匀浆的MDA、ICAM-1水平在再灌注后4 h,24 h显著下降(P<0.01),肾组织匀浆的SOD水平在再灌注后4 h、24 h显著升高(P<0.05).相关性分析显示,TNF-α与MDA、SOD、ICAM-1之间的相关系数分别为0.801、-0.895、0.838,(P<0.01)结论 FTX对肾IRI有保护作用,该作用可能与FTX直接抑制肾组织中TNF-α的表达有关,从而减轻了氧化应激、抑制了ICAM-1的表达,减轻炎性细胞肾内浸润而发挥保护作用.     

肾缺血再灌注损伤时血清及肾组织中促炎症细胞因子的变化与意义

目的:探讨促炎症细胞因子白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-8(IL-8)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)在大鼠肾缺血-再灌注损伤(IRI)中的变化和意义。方法:采用夹闭大鼠肾动静脉的方法复制大鼠IRI模型,采用酶联免疫吸附试验(ELISA法)测定肾缺血及再灌注1 h、4 h和24 h时血清和肾组织中IL-6、IL-8和TNF-α含量,并对肾系数、血清尿素氮、肌酐等指标进行检测。结果:单纯缺血组和再灌注4 h、24 h组'肾组织中IL-6水平明显低于假手术组(P<0.05),血清中IL-6水平仅在缺血组低于假手术组;血清与肾组织中的IL-6含量在不同时间内其变化呈直线正相关(r=0.89,P<0.(J5)。肾组织中IL-8、TNF-α水平在单纯缺血和再灌注早期(1 h、4 h组)明显高于假手术组(P<0.01.0.05),随再灌注时间延长两者逐渐下降至对照组水平;血清IL-8在单纯缺血和再灌注1 h组明显低于假手术组(P<0.01),随再灌注时间延长,逐渐接近对照组水平。血清SUN、Scr水平和肾系数在IRI各组均高于对照组。结论:IL-8、TNF-α可能参与了早期肾IRI过程,IL-6在肾IRI中可能起一定保护作用。     

高压氧干预对大鼠肾缺血再灌注损伤保护作用的实验研究

目的探讨高压氧(HBO)对大鼠肾缺血再灌注损伤(IRI)的作用及其机制。 方法建立大鼠肾IRI模型,54只Wistar大鼠分为假手术组、肾IRI组和HBO治疗组,每组18只。各组分别于再灌注后1,3,5 h（每个时间点6只）采血测定血浆肿瘤坏死因子（TNF-α）、丙二醛（MDA）的水平及肾功能［肌酐(SCr）、尿素氮（BUN)］;同时肾组织HE染色后光镜观察病理变化。 结果(1)肾IRI组血浆TNF-α、MDA和SCr、BUN的水平明显高于假手术组(P<0.05);与肾IRI组相比,HBO治疗组血浆TNF-α、MDA和SCr、BUN的水平显著降低(P<0.05)。(2)假手术组各时间点肾小球、肾小管上皮细胞结构正常;肾IRI组随时间延长,肾小球毛细血管、肾小管上皮细胞损伤逐渐加重;HBO治疗后肾损伤的程度明显减轻,再灌注后1 h和3 h肾损伤减轻的程度明显优于再灌注后5 h。 结论TNF-α和MDA促进了肾IRI的发生发展。HBO通过减少TNF-α的生成和防止组织脂质过氧化,明显减轻了肾IRI,保护了肾功能。HBO早期干预更有利于防治肾IRI。     

阿托伐他汀对心肌梗死大鼠心肌纤维化和细胞外信号调节激酶表达的影响

目的观察阿托伐他汀对大鼠急性心肌梗死后心室重塑和心肌组织中细胞外信号调节激酶(ERK)1/2蛋白表达的影响。方法 20只雄性SD大鼠通过前降支动脉结扎法建立大鼠急性心肌梗死模型后随机分为心肌梗死组(AM I),心肌梗死阿托伐他汀组(ATV),另设假手术组(sham),每组n=10。阿托伐他汀组每天给予阿托伐他汀(10 mg/kg)灌胃,持续4周。假手术组和心肌梗死组每天给予同等量的0.9%氯化钠注射溶液灌胃。应用real-tim e PCR法检测梗死周边区心肌组织中Ⅰ型、Ⅲ型胶原mRNA表达,应用westernb lot方法检测p-ERK1/2、ERK1/2蛋白的表达。结果与假手术组比较,心肌梗死组和阿托伐他汀组中Ⅰ型、Ⅲ型胶原表达高于假手术组(P<0.01),阿托伐他汀组Ⅰ型、Ⅲ型胶原表达显著低于心肌梗死组(P<0.01)。心肌梗死组和阿托伐他汀组中p-ERK1/2表达高于假手术组(P<0.01),阿托伐他汀组p-ERK1/2表达低于心肌梗死组(P<0.01)。结论阿托伐他汀可以改善大鼠心肌梗死后心室重塑,其机制可能与下调心肌组织中p-ERK1/2表达有关。     

STF083010对大鼠肾脏缺血再灌注损伤的肾保护作用

目的探讨STF083010对大鼠肾脏缺血再灌注损伤(ischemia-reperfusion injury,IRI)的肾保护作用。方法健康雄性SD大鼠30只,随机分为假手术组、IRI组与STF083010组,每组10只。假手术组大鼠开腹后仅分离双侧肾动脉,不夹闭肾动脉;IRI组和STF083010组大鼠采用无创动脉夹同时夹闭左、右肾动脉45 min后放开,建立IRI模型;STF083010组大鼠建立IRI模型前2h腹腔注射STF083010 15mg/kg。缺血再灌注24h后,应用全自动生化仪检测3组大鼠血清尿素氮和肌酐水平,3组大鼠均行肾组织病理学PAS染色,采用免疫组织化学法检测肾组织XBP1、GRP78蛋白阳性表达率,采用实时荧光定量PCR检测肾组织XBP1、GRP78 mRNA表达水平。结果IRI组血清肌酐[(322.10±18.93)μmol/L]、尿素氮[(41.16±3.09)mmol/L]水平、肾小管损伤评分(202.50±9.15)高于STF083010组[(149.70±14.80)μmol/L、(25.22±3.81)mmol/L、129.50±5.49]和假手术组[(49.58±2.82)μmol/L、(7.56±0.70)mmol/L、25.88±1.46](P0.05),STF083010组高于假手术组(P0.05);IRI组和STF083010组大鼠肾组织GRP78蛋白阳性表达率[(27.16±3.98)%、(58.72±7.12)%]、GRP78 mRNA表达水平(0.086±0.007、0.335±0.023)、XBP1蛋白阳性表达率[(56.32±5.21)%、(29.83±3.78)%]、XBP1mRNA表达水平(0.172±0.053、0.088±0.054)高于假手术组[(4.86±2.30)%、0.015±0.001、(5.68±1.37)%、0.039±0.004](P0.05),STF083010组GRP78蛋白阳性表达率和GRP78mRNA表达水平高于IRI组,XBP1蛋白阳性表达率和XBP1mRNA表达水平低于IRI组(P0.05)。结论 STF083010可通过抑制XBP1表达,增加GRP78表达保护大鼠肾功能。     

阿托伐他汀对单侧输尿管梗阻大鼠肾小管间质过氧化物酶体增殖物激活受体γ表达的影响

目的 观察阿托伐他汀对单侧输尿管梗阻(UUO)大鼠肾小管间质过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPARγ)表达的影响.方法 将45只大鼠随机均分为假手术组、模型组及阿托伐他汀组(阿乐组),后两组行左侧输尿管结扎术.阿乐组术前3 d开始给予阿托伐他汀(10 mg·kg-1·d-1)灌胃,其余两组予等量生理盐水灌胃.术后5、10和15 d分别处死各组5只大鼠,取左肾行苏木素-伊红(HE)和Masson染色,动态观察肾脏病理改变,并用免疫组化方法检测肾小管间质中PPARγ的动态表达.结果 组织病理学显示,模型组呈现进行性肾小管间质面积增宽,纤微化程度加重.假手术组PPARγ主要表达于内髓集合管;模型组PPARγ表达则位于肾小管上皮细胞,半定量分析显示UUO后5 d PPARγ已经明显增高,梗阻后10 d达到峰值,15 d PPARγ已降低,但仍高于假手术组(P均＜0.01).阿乐组肾小管间质中PPARγ表达较同期模型组明显增加(P均＜0.01).结论 UUO模型大鼠肾小管间质PPARγ的表达量增加,并在肾小管部位出现PPARγ的表达;阿托伐他汀可增加PPARγ的表达,从而改善肾小管间质纤维化.     

银杏总黄酮对肾缺血再灌注大鼠p-JNK表达的影响

目的观察肾缺血再灌注损伤(IRI)后JNK活化的变化,并探讨银杏总黄酮(TFG)对其影响。方法 SD大鼠随机分为假手术组(Sham,n=12)、缺血再灌注组(IR,n=30)和银杏总黄酮处理组(TFG,n=12)。采用夹闭双侧肾动静脉45min然后松开动脉夹制备肾IRI模型。蛋白免疫印迹检测肾组织中p-JNK的表达,并用细胞凋亡原位末端标记(TUNEL法)检测肾小管上皮细胞凋亡。结果 IR组肾组织中p-JNK的表达在再灌注10 min开始升高,再灌注30 min达到高峰,再灌注1 h有所降低,再灌注24 h再次升高,同时该时段有大量肾小管上皮细胞凋亡;给予TFG处理,再灌注30 min p-JNK表达明显减弱,再灌注24 h细胞凋亡明显减少。结论 TFG防治肾IRI机制可能与抑制肾组织中JNK磷酸化的程度,减少肾小管上皮细胞凋亡有关。     

七氟醚对肾脏缺血再灌注损伤大鼠肾功能及内皮型一氧化氮合酶的影响

目的 探讨七氟醚(Sev)对肾脏缺血再灌注损伤(IRI)大鼠肾功能、肾小管坏死率及内皮型一氧化氮合酶(eNOS)的影响.方法 将45只健康大鼠随机分为MB组(假手术组)、YB组(IRI模型组)、ZL组(Sev+ IRI),每组15只.比较3组大鼠血尿素氮(BUN)、血清肌酐(Cr)水平,肾脏组织形态学表现,肾小管坏死率评分,eNOS、诱导型一氧化氮合酶(iNOS)阳性表达以及肾小管上皮细胞凋亡率.结果 与MB组大鼠相比,YB组、ZL组大鼠4、12、24 h的BUN、Cr水平均升高,且YB组大鼠12、24 h的BUN、Cr水平均高于ZL组,差异有统计学意义(P＜0.05).MB组大鼠肾脏组织细胞排列整齐、细胞间距均匀;YB组大鼠肾小管有扩张表现,组织排列混乱,细胞扁平且多坏死,病变处为片状,间质充血明显,出现中粒细胞侵润;ZL组上述病灶范围、充血等病理均有一定改善.YB组、ZL组大鼠4、12、24 h肾小管Paller评分均高于MB组,且YB组大鼠4、12、24 h肾小管Paller评分均高于ZL组,差异均有统计学意义(P＜0.05).与MB组相比,YB组大鼠肾组织eNOS强阳性表达降低,iNOS强阳性表达增强,差异有统计学意义(P＜0.05);与YB组相比,ZL组大鼠肾组织eNOS强阳性表达增强,iNOS强阳性表达降低,差异有统计学意义(P＜0.05).YB组、ZL组大鼠肾组织中肾小管上皮细胞凋亡率高于MB组,且YB组大鼠肾组织中肾小管上皮细胞凋亡率高于ZL组,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 Sev干预可改善肾脏IRI大鼠的肾功能,降低肾小管坏死率,对肾脏起保护作用,其机制可能与上调eNOS表达有关.     

氯沙坦对D-半乳糖致衰老大鼠肾脏肾小管上皮细胞转分化的影响

目的:探讨D-半乳糖致衰老大鼠肾脏中是否存在肾小管上皮细胞转分化及血管紧张素受体拮抗剂氯沙坦对其的影响。方法:大鼠随机分为3组:对照组、模型组、治疗组,每组12只。D-半乳糖连续腹腔注射制作亚急性衰老模型。观察肾组织病理改变,免疫组化方法检测α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、增殖性细胞核抗原(PCNA)的表达。结果:模型组肾小球体积增大,局灶节段性肾小球硬化,肾小管腔扩大,灶状小管萎缩,间质纤维化,而治疗组肾组织改变与模型组相比有所减轻。模型组α-SMA、PCNA的表达较对照组明显升高,而治疗组α-SMA、PCNA的水平较模型组减低(P<0.05)。结论:氯沙坦可以抑制α-SMA、PCNA的表达,抑制小管上皮细胞转分化,抑制细胞外基质的积聚,从而减轻衰老。     

氟伐他汀单用及与安体舒通联用对兔ICAM-1、VCAM-1及MMP-9的影响

目的探讨他汀类药物单用及联用醛固酮拮抗剂安体舒通对兔颈动脉组织ICAM-1、VCAM-1及MMP-9表达的影响。方法高脂饲养兔建立动物模型。96只新西兰兔分为对照组、高脂饮食组、氟伐他汀处理组（氟伐他汀组）以及氟伐他汀与安体舒通联合处理组（联合处理组）,每组24只。用免疫组织化学法检测ICAM-1、VCAM-1、MMP-9表达量。结果氟伐他汀组和联合处理组ICAM-1、VCAM-1及MMP-9的表达随时间的增加而逐渐降低（P〈0.05）,且在治疗8周和12周时降低较为显著（P〈0.05）。结论随着高脂饲养时间的延长,动脉组织中ICAM-1、VCAM-1及MMP-9表达量增加;他汀类药物可降低ICAM-1、VCAM-1及MMP-9表达量,延缓动脉粥样硬化形成及易损组织产生,联合醛固酮拮抗剂时此作用增强。     

远期缺血预适应激活热休克蛋白27、促红细胞生成素、血红素加氧酶1对肾脏缺血再灌注损伤的影响

背景:缺血再灌注损伤是临床导致急性肾衰竭等其他疾病的重要原因,其机制为多因素、多途径的复杂的病理过程。目的:观察肾脏进行预处理后激活热休克蛋白、促红细胞生成素和血红素加氧酶1对肾脏缺血再灌注损伤的影响。方法:雄性C57BL/6小鼠90只随机分成3组。缺血再灌注组为右肾切除,左肾缺血25min再灌注24h;预适应组为双侧肾脏缺血20min再灌注8d后再进行缺血再灌注。假手术组开腹游离肾蒂。结果与结论:血清肌酐和尿素氮检测预适应组和假手术组明显低于缺血再灌注组(P<0.01);MPO染色发现缺血再灌注组大量中性粒细胞浸润(P<0.01);PAS染色发现预适应组肾组织病理情况轻于缺血再灌注组(P<0.05);TUNEL染色分析结果表明预适应组和假手术组细胞凋亡数明显少于缺血再灌注组(P<0.01);预适应组热休克蛋白27mRNA表达明显高于缺血再灌注和假手术组(P<0.05),热休克蛋白27mRNA于第8天时最强,促红细胞生成素、血红素加氧酶1mRNA在24～48h达到峰值A,然后逐渐下降,第8天后达到峰值B,B>A,并且高于假手术组(P<0.01)。提示远期缺血预适应激活热休克蛋白27、促红细胞生成素、血红素加氧酶1,能减少炎症因子浸润、促进肾小管细胞修复和抑制细胞凋亡从而参与肾脏内源性保护机制。     

N-乙酰半胱氨酸上调细胞FLICE抑制蛋白表达对脓毒症小鼠急性肾损伤的保护作用及其机制研究

目的研究N-乙酰半胱氨酸（NAC）上调细胞FLICE抑制蛋白（c-FLIP）表达对脓毒症小鼠急性肾损伤的作用。 方法将30只雄性BALB/c小鼠分为假手术组、脓毒症组和NAC组,每组各10只。采用盲肠结扎穿孔术法制备脓毒症小鼠模型,假手术组除不结扎穿刺盲肠外,其余手术步骤相同,NAC组小鼠术后15 min尾静脉注射NAC 100 mg/kg。造模成功后24 h取小鼠肾脏,光镜下观察肾脏组织病理变化;采用实时定量PCR（RT-PCR）法检测c-FLIP mRNA表达;采用Western-blotting法检测c-FLIP蛋白表达;复制上述实验观察96 h内小鼠的生存情况。 结果与假手术组相比,脓毒症组小鼠肾小球萎缩、肾小管上皮细胞变形、肾小管腔内可见大量肾细胞间质和碎片,而NAC组小鼠肾脏组织病变明显减轻。三组间肾脏组织病理学损伤评分、c-FLIP mRNA及蛋白表达比较,差异均有统计学意义（F = 101.400、31.720、20.330,P均< 0.05）。进一步两两比较发现,CLP组小鼠肾脏组织病理学损伤评分较假手术组显著升高（P < 0.001）,NAC组小鼠肾脏组织病理学损伤评分较CLP组显著降低（P < 0.001）。与假手术组相比,脓毒症组小鼠c-FLIP mRNA及蛋白表达均明显下降（P均< 0.05）,NAC组c-FLIP的蛋白表达有所降低（P < 0.05）;与脓毒症组相比,NAC组小鼠c-FLIP mRNA及蛋白表达均显著上升（P均< 0.05）。Kaplan-Meier生存曲线结果显示,三组小鼠生存情况比较,差异有统计学意义（χ²= 8.806,P= 0.012）。进一步两两比较发现,脓毒症组及NAC组小鼠的存活数量均较假手术组显著降低（P均< 0.017）,而NAC组小鼠存活数量较脓毒症组明显升高（P < 0.017）。 结论NAC通过上调c-FLIP表达对脓毒症小鼠的急性肾损伤具有显著的保护作用。     

hBDNF-GFP基因转染神经干细胞对视神经损伤大鼠视网膜BDNF表达的影响

目的 探讨移植hBDNF-GFP基因转染神经干细胞后对视神经损伤大鼠视网膜BDNF表达的影响.方法 ①78只SD大鼠随机分为正常对照组(n=6)、视神经夹伤组(n=72).视神经夹伤组动物行右侧视神经夹伤后随机平均分为三个亚组:分别于玻璃体腔内注射0.01 mol/L PBS(PBS组),GFP基因转染神经干细胞(GFP-NSCs组)和hBDNF-GFP基因转染神经干细胞(hBDNF-GFP-NSCs组).各组动物单纯暴露左侧视神经作为假损伤组.分别于移植后3 d,7 d,14 d和28 d处死动物取视网膜,ELISA法检测各组视网膜中BDNF含量.②另取6只视神经损伤大鼠移植hBDNF-GFP-NSCs,分别于2周、4周和8周各处死2只大鼠,取眼球做冰冻切片观察移植细胞存活、迁移情况.③35只sD大鼠随机分为4组:正常对照组(n=5)、右眼视神经损伤NSCs治疗组(n=10)、GFP-NSCs治疗组(n=10)及hBDNF-GFP-NSCs治疗组(n=10).④各组于术后4周和8周分别处死5只大鼠,West-era-blot法检测视网膜组织中BDNF表达.结果 ①ELISA结果显示,正常对照组BDNF含量与假损伤组间比较差异无统计学意义(P>0.05),移植手术后第3天时,三个损伤亚组视网膜匀浆上清中hBDNF含量明显增加(与假损伤组比较P<0.05),而三组间差异无统计学意义(P>0.05);7 d时,GFP-NSCs组与假损伤组比较差异具有统计学意义(P<0.05),而PBS组、hBDNF-GFP-NSCs组与假损伤组比较差异无统计学意义(P>0.05),PBS组与GFP-NSCs组间及hBDNF-GFP-NSCs组与GFP-NSCs组间差异具有统计学意义(P<0.05);移植第14天和28天时,PBS组和GFP-NSCs组中视网膜BDNF含量降低,而hBDNF-GFP-NSCs组中BDNF含量与其他三组比较明显升高,差异有统计学意义(P<0.05).②冰冻切片示移植后,hBDNF-GFP-NSCs可在宿主视网膜内存活,并逐渐迁移至视网膜各层.③Western-blot检测显示,各组内第4周和第8周BDNF表达差异无统计学意义,移植hBDNF-GFP-NSCs组视网膜组织中BDNF表达明显高于于其他各组.结论 hBDNF-GFP基因转染神经干细胞移植后可在宿主视网膜长期存活,且可以稳定高表达BDNF.     

氟伐他汀单用及与安体舒通联用对兔ICAM-1、VCAM-1及MMP-9的影响

目的探讨他汀类药物单用及联用醛固酮拮抗剂安体舒通对兔颈动脉组织ICAM-1、VCAM-1及MMP-9表达的影响。方法高脂饲养兔建立动物模型。96只新西兰兔分为对照组、高脂饮食组、氟伐他汀处理组(氟伐他汀组)以及氟伐他汀与安体舒通联合处理组(联合处理组),每组24只。用免疫组织化学法检测ICAM-1、VCAM-1、MMP-9表达量。结果氟伐他汀组和联合处理组ICAM-1、VCAM-1及MMP-9的表达随时间的增加而逐渐降低(P0.05),且在治疗8周和12周时降低较为显著(P0.05)。结论随着高脂饲养时间的延长,动脉组织中ICAM-1、VCAM-1及MMP-9表达量增加;他汀类药物可降低ICAM-1、VCAM-1及MMP-9表达量,延缓动脉粥样硬化形成及易损组织产生,联合醛固酮拮抗剂时此作用增强。     

糖尿病大鼠肾小球细胞中p27蛋白的表达与细胞增殖和凋亡的相关性

背景:P27是近年来在肾脏疾病研究中受到广泛关注的一种细胞周期激酶抑制剂,它通过影响细胞周期这一细胞生命活动的基本过程来调节细胞的生长。已证实p27蛋白对肾脏细胞增殖、肥大、分化、凋亡等多种生长反应均具有重要的调控作用。目的:探讨肾组织p27蛋白的表达与糖尿病肾病细胞增殖、凋亡之间的相互关系。设计:完全随机分组设计,对照动物实验。单位:华中科技大学同济医学院附属同济医院肾病实验室。材料:实验于2004-09/2005-01在华中科技大学同济医学院附属同济医院内科肾病实验室及同济医学院超微病理中心完成。选用清洁级成年雄性SD大鼠48只,随机将大鼠分为2组:实验组和对照组,每组24只。方法:①建立糖尿病模型:实验组按60mg/kg剂量腹腔注射链脲佐菌素诱导糖尿病模型。48h后,测定血糖和尿糖。将实验组随机血糖≥16.7mmol/L且尿糖为誔～誒誒者视为模型成功。②模型成功后第3熏7熏14熏28天分别处死实验组和对照组动物各6只。处死前测定血肌酐、尿肌酐,计算内生肌酐清除率;用ELISA法测定尿视黄醇结合蛋白;作十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶圆盘电泳分析尿蛋白。③肾组织切片,光镜下观察病理学改变。部分皮质作超微结构检查。④用免疫组化染色法检测肾组织切片p27及增殖细胞核抗原蛋白的表达;原位末端标记法检测细胞凋亡。分别用肾小球p27、增殖细胞核抗原、原位末端标记法阳性细胞数/肾小球细胞总数表示肾小球p27、增殖细胞核抗原表达的阳性率及凋亡率。⑤组间差异用未配对资料t检验,数据间相关性处理采用Spearman相关分析。主要观察指标:实验组大鼠造模后第3,7,14,28天肾功能,尿蛋白,肾小球细胞p27,增殖细胞核抗原表达阳性率和凋亡率与对照组比较结果。结果:大鼠48只均进入结果分析。①病理学改变:造模后第7天,光镜下开始出现肾小球直径增大,电镜下开始出现脏层上皮细胞足突融合;第14天时电镜下出现肾小球系膜区轻度节段性增宽;第28天时光镜下始见肾小球系膜区轻度节段性增宽。②实验组造模后第7,14,28天内生肌酐清除率及尿视黄醇结合蛋白水平明显高于对照组(t=2.143～3.004熏P<0.05)。尿圆盘电泳提示,从第3天起,每组均有部分标本出现中、低分子蛋白。③实验组造模后第3天大鼠肾小球细胞p27蛋白的表达阳性率明显低于对照组(t=2.536熏P<0.05),第7,14,28天表达阳性率依次增加,明显高于对照组(t=2.704～2.823熏P<0.05)。实验组造模后第3天大鼠肾小球增殖细胞核抗原的表达阳性率最高,第7,14天表达依次减少,但仍明显高于对照组(t=2.681熏2.525熏P<0.05),造模后第28天与对照组比较,差异不明显。造模后第3天大鼠肾小球细胞凋亡率明显高于对照组(t=2.764熏P<0.05),第7,14,28天大鼠肾小球细胞凋亡率均明显低于对照组(t=2.096～2.627熏P<0.05)。④肾小球p27蛋白表达阳性率与肾小球增殖细胞核抗原表达阳性率呈显著负相关(r=-0.446熏P<0.05),与凋亡率呈显著负相关(r=-0.517熏P<0.05)。结论:糖尿病早期肾近曲小管损害引起的重吸收功能障碍和肾小球的高滤过基本同步发生。p27蛋白在糖尿病早期可能通过抑制肾脏细胞增殖和凋亡而参与糖尿病肾病的发生、发展。     

TACE治疗对兔VX2肾移植瘤细胞增殖影响的实验研究

目的：探讨经肾动脉化疗栓塞术（TACE）对兔VX2肾移植瘤模型增殖细胞核抗原（PCNA）表达的影响,评价兔VX2肾移植瘤介入治疗的疗效。材料与方法：将瘤块种植到22只新西兰纯种大白兔的左肾上极。超声监测肿瘤生长,待肿瘤长至1~2 cm大小时,将实验兔随机分为对照组、TACE组,对照组10只,实验组12只。行TACE术：对照组（A组）给予生理盐水10 mL;TACE组（B组）给予超液化碘油0.2 mL/kg和阿霉素2 mg/kg。栓塞后7 d处死动物取出瘤块,用10%中性福尔马林液固定,石蜡包埋,5 μm连续切片,免疫组化染色检测肿瘤PCNA的表达。结果：本实验免疫组化结果显示2组共22只实验动物中PCNA均有表达,阳性率为100%,TACE组（71.6±11.01）%的细胞增殖指数（PI）明显高于对照组（61.2±11.21）%（P=0.041）。结论：经导管动脉化疗栓塞术是一种创伤小、疗效确切的兔VX2肾移植瘤治疗方法;TACE术后1周残存肿瘤组织细胞PI升高。     

平滑肌细胞凋亡在自然消退动脉粥样硬化中作用的实验研究

目的 :探讨平滑肌细胞 (SMC)凋亡在动脉粥样硬化自然消退过程中的作用和意义 ,方法 :将 2 1只日本大耳白兔随机分为正常对照组、高胆固醇喂养组和停高胆固醇喂养组 ,采用病理观察 ,分别以缺口末端标记法 (TUNEL )和标记生物素抗生素系技术 (L AB)免疫组织化学法检测 SMC凋亡和增殖的表达变化。结果 :停高胆固醇喂养组抑制主动脉平滑肌细胞增殖核抗原 (PCNA)的表达作用明显 (P<0 .0 5 ) ,SMC凋亡表达下降不明显 (P>0 .0 5 )。结论 :停高胆固醇喂养可抑制 SMC增殖 ,除具有消退动脉粥样硬化斑块作用外 ,还可能通过诱导 SMC凋亡来逆转动脉粥样硬化的形成。     

缓释型氟伐他汀和速释胶囊型氟伐他汀对高脂血症患者动脉僵硬度影响的比较

目的探讨缓释型氟伐他汀和速释胶囊型氟伐他汀对高脂血症患者动脉僵硬度的影响。方法将139例混合型高脂血症患者按随机数字表法分为速释胶囊型氟伐他汀组（68例）和缓释型氟伐他汀组（71例）。速释胶囊型氟伐他汀组给予氟伐他汀40mg,口服,2次·d^-1,治疗12周;缓释型氟伐他汀组给予缓释型氟伐他汀80mg,口服,1次·d^-1,治疗12周。用SphygmoCor动脉脉搏波分析仪测定2组患者脉搏波传导速度（PWV）及增强指数（AIx）值,观察其数值的变化。结果缓释型氟伐他汀组治疗后,AIx及PWV数值均较速释胶囊型氟伐他汀组明显降低（均P〈0.05）。结论与速释胶囊型氟伐他汀相比,缓释型氟伐他汀更有效地降低动脉僵硬度。选择使用缓释型氟伐他汀治疗混合型高脂血症患者是较为合适的治疗方案。