几类常用外用中药成分对人皮肤成纤维细胞增殖及胶原合成的影响

目的体外观察珍珠粉、血竭、乳香、鹿茸、砒石的主要成分(水溶性珍珠粉、血竭素高氯酸盐、乳香水提物、鹿茸多肽、三氧化二砷)对人皮肤成纤维细胞(HSFb)的增殖及胶原蛋白合成的影响,初步探讨其治疗慢性皮肤溃疡的机制。方法组织块法体外培养HSFb;MTT法检测细胞增殖活性;羟脯胺酸比色法测定细胞胶原合成含量。结果药物分别作用于HSFb 48 h后,水溶性珍珠粉在1.25×102~1×103mg/L,血竭素在5.0×100~2.0×101mg/L,乳香水提物在6.4×10-1~2.0×103mg/L,鹿茸多肽在6.25×10-3~4.0×10-1mg/L浓度范围内对HSFb具有促增殖作用,与对照组比较差异显著(P<0.01或P<0.05),三氧化二砷在1.6×10-1~8.0×10-1mg/L浓度范围内对HSFb增殖具有抑制作用,与对照组比较差异显著(P<0.01)。药物分别作用于HSFb 48 h后,水溶性珍珠粉在2.5×102~1×103mg/L,血竭素高氯酸盐在2.5×100~2.0×101mg/L,乳香水提物在6.4×10-1~2.0×103mg/L,鹿茸多肽在1.6×10-3~4.0×10-1mg/L浓度范围内对HSFb胶原蛋白合成具有促进作用,与对照组比较差异显著(P<0.05或P<0.01),三氧化二砷在3.2×10-2~8.0×10-1mg/L浓度范围内对HSFb胶原蛋白合成具有抑制作用,与对照组比较差异显著(P<0.05或P<0.01)。结论敛口生肌药珍珠粉(水溶性珍珠粉)、活血生肌药血竭(血竭素高氯酸盐)、活血生肌药乳香(乳香水提物)、温阳生肌药鹿茸(鹿茸多肽)可促进人皮肤成纤维细胞增殖和胶原合成,蚀疮化腐药砒石(三氧化二砷)抑制人皮肤成纤维细胞增殖和胶原合成。     

红花对增生性瘢痕成纤维细胞增殖和胶原合成的影响

目的探讨红花对增生性瘢痕成纤维细胞（HSFB）增殖和胶原合成的影响及其意义。方法通过MTT比色试验和生长曲线测定法检测红花对体外培养的HSFB增殖活性的影响；^3H-脯氨酸掺入法测定红花对细胞胶原蛋白合成的影响；用光镜和电镜观察药物作用后HSFB形态学和超微结构的改变。结果红花可明显抑制HSFB的增殖和胶原蛋白的合成，且在一定范围内具有时间-剂量依赖性，以8μg／ml浓度组第3天作用最为显著；HSFB的形态和超微结构呈抑制改变。结论红花具有抑制HSFB增殖和胶原合成的作用，为应用该药治疗瘢痕提供了实验依据。     

地塞米松对肾间质成纤维细胞增殖及胶原合成的影响

目的"探讨糖皮质激素在肾脏病治疗中可能的作用机理. 方法"采用MTT比色法和L-3H-脯氨酸掺入法,观察地塞米松对体外培养的肾间质成纤维细胞增殖及胶原合成的影响. 结果"一定浓度范围内的地塞米松抑制成纤维细胞的胶原合成,但未见其对细胞增殖有影响. 结论"糖皮质激素可作用于肾间质成纤维细胞,抑制胶原的合成,从而可延缓肾间质纤维化的进程.     

川芎嗪对心脏成纤维细胞增殖及胶原合成的影响

目的观察川芎嗪（TMP）对体外培养心脏成纤维细胞（CF）的增殖与胶原合成的影响。方法用消化法培养新生SD大鼠的CF，用四氮唑蓝（MTT）比色法测定细胞增殖，羟脯氨酸碱水解法测定胶原合成．观察不同浓度TMP对CF增殖和胶原合成的影响。结果随着TMP浓度的升高，MTT比色法A490值呈下降趋势；CF分泌的胶原随着TMP作用浓度和时间的增加呈递降趋势。结论TMP具有抑制SD新生大鼠CF增殖和胶原合成的作用。     

氢化可的松对体外培养的皮肤成纤维细胞增殖及胶原合成的影响

目的:研究激素对体外培养的成纤维细胞增殖及分泌功能的影响,初步探讨其治疗瘢痕的作用机制.方法:采用MTT比色法和3H-脯氨酸掺入法,观察氢化可的松对体外培养的皮肤成纤维细胞增殖及胶原合成的影响.结果:氢化可的松(0.1 g/L)能够抑制体外培养成纤维细胞增殖(MTT值0.523±0.051 vs 0.347±0.036,P<0.05)及分泌胶原的功能[3H-脯氨酸掺入量(248±6) Bq vs (181±6) Bq,P<0.05],并呈剂量依赖性(r=-0.8208).结论:氢化可的松可通过抑制瘢痕成纤维细胞增殖及胶原的合成,从而达到治疗瘢痕的作用.     

阿伐他汀对幼年大鼠心肌成纤维细胞增殖和胶原合成的影响及其意义

目的　探讨阿伐他汀对幼年大鼠心肌成纤维细胞 (CF)增殖和胶原合成的影响。方法　用消化法培养新生SD大鼠的CF ,采用3H 胸腺嘧啶核苷 ( 3H TdR)掺入法测定CF的DNA合成功能 ,四氮唑蓝 (MTT)比色法测定细胞增殖 ,流式细胞分析仪技术检测细胞周期 ,3H 脯氨酸掺入法测定胶原合成 ,分别观察不同浓度阿伐他汀对CF增殖和胶原合成的影响。结果　 ( 1)阿伐他汀以浓度依赖的方式抑制CF的3H TdR掺入率。其中 ,10 -7、10 -6、10 -5和 10 -4 mol/L组的3H TdR掺入率分别为(cpm/ 5 0 0 0细胞 ) 314± 6 8、2 5 3± 5 2、2 0 1± 5 3和 170± 48,显著低于对照组 ( 378± 6 5 ) (F =16 912 ,P <0 0 0 1)。 ( 2 )随着阿伐他汀浓度的增高 ,CF的MTT比色法A4 90 值呈明显的递减趋势 ,其中 10 -7、10 -6、10 -5和 10 -4 mol/L组的A4 90 值分别为 0 2 88± 0 0 0 8、0 2 5 2± 0 0 0 7、0 2 2 5± 0 0 0 8和 0 2 16± 0 0 13,与对照组 ( 0 311± 0 0 0 5 )相比 ,差异有非常显著意义 (P均 <0 0 1)。 ( 3)G0 /G1期细胞百分率随阿伐他汀浓度的增高而呈递增趋势 ,S期G2 /M期细胞百分率和增殖指数呈递减趋势 ,其中 10 -7、10 -6、10 -5和10 -4 mol/L组与对照组比较 ,差异有非常显著意义 (P均 <0 0 1)。 ( 4)CF的3H 脯     

川芎嗪对溶血磷脂酸诱导的心脏成纤维细胞增殖及胶原合成的影响

目的:观察溶血磷脂酸(LPA)对体外培养的心脏成纤维细胞(CF)增殖的影响,进一步研究中药川芎嗪单体对其的干预作用。方法:用消化法培养新生SD大鼠心脏成纤维细胞,用单四唑(MTT)比色法测定细胞增殖,羟脯氨酸碱水解法测定胶原合成,分别观察不同浓度LPA对CF增殖和胶原合成的影响及川芎嗪的干预作用。结果:随着LPA浓度的升高,MTT比色法A490值呈上升趋势。CF分泌的胶原随着LPA浓度和作用时间的增加呈递增趋势。20μg/m l的川芎嗪作用48 h即能明显抑制LPA(10-6μmol/L)诱导的细胞增殖作用(P<0.05)。结论:LPA具有促进SD新生大鼠CF增殖和胶原合成作用,而川芎嗪能对其产生明显的抑制作用,并呈浓度依赖性。     

维拉帕米对人巩膜成纤维细胞增殖和胶原合成的影响

为探讨维拉帕米防治眼部增殖性疾病的可能性，在体外观察了维拉帕米对人巩膜成纤维细胞增殖指数和胶原合成的影响。结果：维拉帕米２０～４０ｍｇ·Ｌ￣（－１）作用４８ｈ可使细胞ＤＮＡ含量和增殖指数明显下降（Ｐ＜０．００１），ＩＤ＿（５０）＝３８ｍｇ·Ｌ￣（－１）；４０ｍｇ·Ｌ￣（－１）可使胶原合成明显下降，作用２４ｈ组ＩＤ＿（５０）＝４６ｍｇ·Ｌ￣（－１），作用４８ｈＩＤ＿（５０）＝３３ｍｇ·Ｌ￣（－１）。结果提示：维拉帕米可抑制人巩膜成纤维细胞增殖及胶原合成，可能具有防治眼部增殖性疾病的价值。     

染料木素和槲皮素对成纤维细胞增殖和胶原合成的抑制作用

目的：研究染料木素（genistein,GE)和槲皮素（quercetin,QU)对成纤维细胞增殖和胶原合成的影响。方法：用结晶紫染色法测定光密度值检测NIH3T3成纤维细胞增殖,用3H－脯氨酸掺入法测定3H－脯氨酸掺入NIH3T3细胞的Bq值表示胶原合成作用,结果：GE和QU都能浓度依赖性 抑制血清,血小板源生长因子（PDGF）或转化生长因子β1（TGF－β1）刺激的NIH3T3细胞增殖和胶原合成。结论：GE和QU具有体外抑制成纤维细胞增殖和胶原合成的作用。     

芦荟凝胶对人皮肤成纤维细胞增殖及胶原合成的影响

目的研究芦荟凝胶(aloe gel,AG)对人皮肤成纤维细胞(human skin fibroblast,HSFb)的增殖及胶原蛋白合成的影响。方法原代培养人皮肤成纤维细胞,传代培养后加入不同浓度的芦荟凝胶作用后,应用流式细胞仪检测细胞周期变化,应用碱水解法检测培养液中羟脯氨酸的含量变化,应用免疫组化法检测芦荟凝胶对成纤维细胞Ⅰ型前胶原合成的影响。结果细胞周期时项分析结果显示5%、10%浓度芦荟凝胶处理组细胞周期S G2/M期细胞百分率及增殖指数PI值较对照组增高(P<0.05),但在不同时间点检测的细胞周期差异无统计学意义(P>0.05)。各浓度芦荟组在不同时间段时其成纤维细胞培养液中羟脯氨酸含量均明显高于空白对照组(P<0.05)。经10%浓度芦荟凝胶处理后的成纤维细胞Ⅰ型前胶原表达增加(P<0.05)。结论芦荟凝胶能有效促进人皮成纤维细胞的增殖和胶原的合成。     

三七总甙对人增生性瘢痕成纤维细胞增殖及胶原合成的作用

目的　观察三七总甙对体外培养的人增生性瘢痕成纤维细胞增殖及胶原合成的作用 ,以寻找治疗人增生性瘢痕的有效药物。方法　体外培养人增生性瘢痕成纤维细胞 ,分别应用MTT比色法和3H 脯氨酸掺入法检测三七总甙作用后细胞增殖及胶原合成的变化。结果　和对照组相比 ,三七总甙能够显著抑制成纤维细胞增殖及胶原合成 (P <0 0 1)。结论　三七总甙具有体外抗纤维化作用 ,可能成为治疗增生性瘢痕的有效药物     

Effects of connective tissue growth factor antisense oligonucleotides on the proliferation and collagen synthesis of the cultured human keloid fibroblasts in vitro

Keloid ,akindofcommonlyseenpathologicalscarinclinicalpractice ,characterizedascontinuousinfiltratinggrowthwithhighpostoperativerecurrencerate ,isakeyre searchtopicinthefieldofplasticsurgery .However,thepathogenesisofkeloidisnotclear.Connectivetissuegrowthfactor (CTGF)isthecytokinethatplaysaveryim portantroleinthecourseoffibrosis ,anditsexcessiveex pressionmaybeinvolvedinsomefibroticdiseasessuchasscleroderma ,renalfibrosis ,pulmonaryfibrosis,arterio sclerosis[1] .Inourstudy ,weusedantisensest…     

水飞蓟宾对大鼠肝贮脂细胞HSC-T6增殖和胶原合成的影响

目的：观察水飞蓟宾对大鼠肝贮脂细胞ＨＳＣ－Ｔ６增殖和胶原合成的影响,探讨其保护肝脏及抗硬化机制。方法：采用结晶紫染色法测定细胞增殖,＾３Ｈ－脯氨酸掺入法测定胶原合成。结果：水飞蓟宾（６．２５～５０μｇ／ｍｌ）以浓度依赖方式抑制血清、巨噬细胞条件培养液以及血小板源生长因子或转化生长因子β１诱导的细胞增殖和胶原合成。结论：抑制贮脂细胞增殖和胶原合成可能是水飞蓟宾保护肝脏抗硬化机制之一。     

The role of calcineurin in the lung fibroblasts proliferation and collagen synthesis induced by basic fibroblast growth factor

Objective To investigate the role of calcineurin (CaN) in the lung fibroblast proliferation and collagen synthesis induced by basic fibroblast growth factor (bFGF).Methods We used Western blot and immunohistochemical methods for investigating the content and distribution of calcineurin in the lung tissue. Calcineurin activity in different tissues was measured using 32P-labelled substrate. In the primary culture of lung fibroblasts, 3H-thymidine (3H-TdR) and 3H-proline incorporation methods were used to study the effect of cyclosporin A (CsA), an inhibitor of calcineurin, on the lung fibroblast DMA and collagen synthesis stimulated by bFGF.Results We found that calcineurin was expressed in lung tissue and has phosphatase activity (7.1±2.0 pmol Pi/mg pr/min). CsA (10~(-8)-10~(-6) mol/L) inhibited lung fibroblast 3H-TdR incorporation induced by bFGF in a dose-dependent manner, with the inhibitory rates by 20% , 46% and 66% (P< 0.01). CsA (10~(-7) -10~(-6) mol/L) inhibited 3H-proline incorporation in lung     

IL-17对肺成纤维细胞的增殖、转化和胶原合成作用

目的探讨IL-17对博来霉素诱导肺纤维化形成中的肺成纤维细胞增殖、转化、胶原合成作用。方法用5 mg/kg博来霉素气管内注入的方法诱导肺纤维化形成,逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测IL-17/IL-17RmRNA在肺纤维化形成中表达的变化,选择表达IL-17RmRNA最佳时间的肺成纤维细胞进行原代培养、鉴定。使用四氮唑蓝比色法检测不同浓度的IL-17对肺成纤维细胞的增殖。使用RT-PCR和Western Blotting检测肌成纤维细胞标志物α-SMA以及I和III型胶原的表达。结果(1)IL-17/IL-17RmRNA在肺纤维化形成中明显升高,在第14天表达最高。(2)不同浓度IL-17能够促进肺成纤维细胞的增殖,最佳浓度为50 ng/ml。(3)IL-17促进肺成纤维细胞表达α-SMA增加。(4)IL-17促进肺成纤维细胞I和III型胶原合成。结论 IL-17具有促进小鼠肺纤维化形成中肺成纤维细胞增殖、转化和胶原的合成作用,可能在肺纤维化形成中起重要作用。     

脂多糖对正常人皮肤成纤维细胞胶原合成的影响

目的:研究脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)对正常人皮肤成纤维细胞胶原合成的影响,以阐明LPS在皮肤创伤愈合中的可能作用.方法:体外培养正常人皮肤成纤维细胞,采用3H-脯氨酸掺入法观察不同浓度(0、0.005、0.01、0.05、0.1、0.5和1.0 μg·ml-1)的LPS对成纤维细胞胶原合成的影响.结果:LPS刺激浓度在0.005 μg·ml-1时,皮肤成纤维细胞胶原蛋白合成增加;随着刺激浓度增加,刺激作用增强;但当LPS浓度为0.5 μg·ml-1时,促胶原合成作用开始降低;当浓度达到1.0 μg·ml-1时则呈现抑制效应.结论:在一定浓度范围内LPS促进成纤维细胞胶原合成,表明LPS在皮肤创伤愈合中可能具有重要作用.