CD31与CD34显示非小细胞肺癌微血管密度的对比分析

目的:探讨血管内皮标志物CD31和CD34在显示非小细胞肺癌(NSCLC)微血管密度(MVD)中的差异以及与临床病理特征的关系。方法:采用免疫组化染色方法和Weidner计数标准检测CD31和CD34在57例NSCLC组织中的表达。结果:CD31和CD34显示的MVD结果分别为(29.7±12.1)条和(38.2±12.7)条,范围分别是10~61条和19~76条,两者差异有统计学意义(P<0.001),但相关性良好(P<0.05);不同临床病理特征的MVD计数均无统计学意义(P>0.05)。结论:同用ElivisionTM plus法,CD34染色效果优于CD31,更适合于临床应用;CD34和CD31 MVD计数显示其结果与各临床病理特征无明显相关性。     

CD34与CD44s在非小细胞肺癌中的表达研究及其意义

目的探讨非小细胞肺癌(NSCLC))微血管密度(MVD)和CD44s表达与肿瘤浸润和淋巴结转移的关系.方法应用CD34和CD44s抗体,采用微波-LSAB免疫组化染色方法对78例手术切除的非小细胞肺癌进行血管标记免疫组化染色,并与10例正常组织对照.结果78例NSCLC标本平均微血管计数为65.8±14.3条,实际范围18～112条,有淋巴结转移的MVD(69.5±15.7)、CD44s(109.8±13.2)表达与无淋巴结转移的MVD(44.3±14.3)、CD44s(136.5±14.8)、正常对照的MVD(25.7±13.6)、CD44s(91.3±11.5)比较,均有非常显著的差异性(p＜0.01).MVD、CD44 s与年龄、性别、吸烟史、肿瘤大小以及病理学分级等临床病理学均无明显关系(P＞0.05).结论非小细胞肺癌间质内MVD和CD44s表达强度与淋巴结转移密切相关,二者均可作为预测非小细胞肺癌病人发生转移的指标.     

CEA mRNA及CK19mRNA在非小细胞肺癌外周血中的表达及其与临床病理参数的关系

目的检测非小细胞肺癌(NSCLC)患者外周血中癌胚抗原mRNA(CEA mRNA)及细胞角蛋白19 mRNA(CK19mRNA)的表达及与临床病理参数(病理类型、分期、细胞分化程度、淋巴结转移)之间的相关性。方法采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)技术检测48例NSCLC患者、15例肺良性疾病(BLD)患者和10例健康人外周血中CEA mRNA及CK19 mRNA的表达。结果 NSCLC患者外周血中CEAmRNA及CK19 mRNA的阳性表达率分别为58.33%(28/48)、68.75%(33/48),在BLD患者中的阳性表达率分别为6.67%(1/15)、13.33%(2/15),而健康对照组均无表达,差异有统计学意义(P<0.05)。其中Ⅰ、Ⅱ期NSCLC患者外周血中CEA mRNA及CK19 mRNA阳性表达率分别为27.78%(5/18)、83.33%(10/12)及44.44%(8/18)、75%(9/12)。外周血CEA mRNA及CK19 mRNA的阳性表达与临床分期及淋巴结转移密切相关,而与病理类型及分化程度无关。结论 NSCLC患者早期(Ⅰ、Ⅱ期)外周血中也有微转移的存在,说明微转移可能是NSCLC预后不良的原因之一。CEAmRNA与CK19 mRNA均可作为检测NSCLC患者外周血微转移较为合适的分子标志物,联合检测有助于提高检测的准确度。     

RT-PCR检测外周血CK19 mRNA及CEA mRNA诊断非小细胞肺癌微转移的研究

目的应用RT-PCR法检测CK19 mRNA、CEA mRNA在非小细胞肺癌(NSCLC)患者外周血中的表达情况并进行比较分析,探讨它们在NSCLC发生、转移及预后中的意义。方法NSCLC患者76例,肺良性疾病患者15例,Ⅳ期非肺癌恶性肿瘤患者30例,健康志愿者20例,均在治疗前抽取外周血,通过RT-PCR法检测CK19 mRNA和CEA mRNA的表达。结果NSCLC患者的CK19 mRNA和CEA mRNA阳性率显著高于肺部良性疾病患者和健康对照组(P<0.05)。CK19 mRNA和CEA mRNA在NSCLC与Ⅳ期非肺癌患者中的阳性表达率无差异(P>0.05)。CK19 mRNA在外周血中的表达率与肺癌组织学类型无关(P>0.05),CEA mRNA在肺腺癌中高度表达(P<0.05)。CK19 mRNA及CEA mRNA与P-TNM分期无关(P>0.05)结论两种肿瘤标志物均可单独作为RT-PCR检测肺癌患者外周血微转移的分子标志物,且CEA mRNA可以帮助临床判断病理类型。该方法的建立可能有利于早期诊断肺癌转移,从而指导临床分期和治疗。     

大肠癌组织血管生成与患者外周血CK20mRNA表达的临床研究

目的观察大肠癌组织中微血管密度、血管内皮细胞生长因子(VEGF)表达与大肠癌患者外围血癌细胞微转移的关系.方法采用S-P免疫组织化学法检测了58例大肠癌组织中的微血管密度(MVD)和VEGF的表达,用巢式RT-PCR法检测了大肠癌患者外周血中癌细胞微转移情况并分析其与病理指标的关系.结果 58例大肠癌组织中35例高中分化MVD计数为30.2±12.7,低分化大肠癌23例MVD计数为86.6±19.1;26例大肠癌组织中VEGF呈阳性染色(44.8%).MVD计数及VEGF阳性表达与大肠癌分化程度、Dukes分期、有无区域淋巴结转移及远处转移密切相关(P<0.05或P<0.01).58例大肠癌患者外周血中32例CK20mRNA阳性表达(32/58),术后48 h有35例阳性表达(35/58),其中根治性切除组有21例阳性表达(21/44),非根治性手术组12例阳性表达(12/14),21例根治性切除患者术后7～14 d有11例转为阴性,12例非根治性切除患者术后7～14 d有11例阳性表达.CK20mRNA阳性表达与大肠癌病理分化程度无关,但与Dukes分期、区域淋巴结转移及远处转移情况相关(P<0.01).CK20mRNA阳性表达患者大肠癌组织中MVD计数(88.5±15.1)与VEGF阳性表达率(65.6%)明显高于CK20mRNA阴性表达患者的MVD计数(31.0±12.9)和VEGF阳性表达率(19.2%)(分别P<0.01,P<0.001).结论大肠癌组织中MVD和VEGF阳性表达与大肠癌的病理分化程度、Dukes分期、淋巴结及远处转移情况相关.大肠癌组织血管生成与周围静脉血中癌细胞微转移情况密切相关.CK20mRNA的检测对大肠癌预后判断、疗效评估及指导综合治疗有重要意义.     

血管内皮生长因子在前列腺癌中的表达及与肿瘤微血管密度和肿瘤细胞增殖的关系

目的探讨血管内皮生长因子(VEGF)在前列腺癌中的表达及与肿瘤微血管密度(MDV)和肿瘤细胞增殖的关系。方法采用免疫组织化学S-P法测定42例前列腺癌组织和10例正常前列腺组织中VEGF、KI-67的表达和MVD计数。结果前列腺癌中VEGF的阳性表达率为77.78%,KI-67LI和MVD计数分别为12.67±4.12和37.23±9.76,VEGF表达水平与肿瘤恶性程度、KI-67标记指数和MDV计数呈正相关。结论VEGF有促进肿瘤细胞增殖及血管生成的作用,联合检测VEGF、KI-67和CD34可作为病理诊断的补充,对患者预后判断和治疗方案的选择有重要参考价值。     

非小细胞肺癌P53、VEGF表达及其与肿瘤血管形成的关系

目的 :探讨P5 3和血管内皮生长因子 (VEGF)在非小细胞肺癌 (NSCLC)中的表达及其与肿瘤血管形成的关系。方法 :用免疫组织化学方法 (S -P法 ) ,检测 76例非小细胞肺癌患者手术切除标本P5 3、VEGF蛋白表达 ,并用Ⅷ因子抗体标记瘤组织中血管内皮细胞 ,计数MVD。结果 :非小细胞肺癌区P5 3、VEGF的阳性表达率及MVD值分别为 :5 5 .2 6 % ,36 .84 % ,32 .6 1± 8.14。非小细胞肺癌组织P5 3和VEGF的阳性表达率与淋巴结转移及临床分期密切相关。P5 3(+)或VEGF(+)组MVD (37.5 6± 6 .2 8,37.37± 7.98)均显著高于P5 3(- )或VEGF(- )组 (2 7.0 0± 5 .13,2 9.5 3± 5 .83;P <0 .0 1) ;VEGF和P5 3均为阳性时 ,MVD值最大 (4 3.5 3± 5 .0 1,P <0 .0 1)。MVD与P5 3蛋白及VEGF阳性表达、VEGF阳性表达与P5 3蛋白阳性表达均呈正相关。结论 :在非小细胞肺癌血管生成过程中 ,P5 3基因、VEGF在调控肿瘤血管形成方面起重要作用。     

缺氧诱导因子-1α在浸润性宫颈鳞癌组织中的表达及其与微血管密度的关系

目的:研究缺氧诱导因子1α(HIF-1α)在浸润性宫颈鳞癌组织中的表达及其与微血管密度的关系。方法:采用免疫组化EliVision法检测HIF-1α在20例正常宫颈和52例浸润性宫颈鳞癌组织中的表达特点,CD34抗体标记血管内皮细胞并计数MVD。结果:HIF-1α在浸润性癌组织中的阳性表达率为53.84%,明显高于正常组织表达率25.00%(P<0.05);FIGOⅡ期和淋巴结转移肿瘤组织HIF-1α表达明显高于Ⅰ期组和淋巴结未转移组(P<0.05)。肿瘤组织的MVD计数为38.85±4.04,明显高于正常对照11.95±2.31 (P< 0.05);Ⅱ期肿瘤MVD计数明显高于Ⅰ期,淋巴结转移组MVD计数明显高于未转移组(P< 0.05)。肿瘤组织中MVD计数与HIF-1α的表达水平正相关(r=0.31,P=0.02)。结论:浸润性宫颈鳞癌组织中HIF-1α表达与血管生成密切相关。HIF-1α过表达和高MVD计数与浸润性宫颈鳞癌的恶性生物学行为有关,可成为预测浸润性宫颈鳞癌侵袭转移的重要指标。     

结肠癌中VEGF、NOS的表达及其与微血管形成的关系

目的 :研究血管内皮生长因子 (VEGF) ,Ⅱ型一氧化氮合酶 (iNOS)在结肠癌组织中的表达及其与肿瘤血管形成的关系。方法 :采用免疫组化方法检测 4 0例结肠癌患者手术切除及石蜡包埋标本中VEGF、iNOS的表达 ,并以抗CD34单克隆抗体显示血管内皮细胞 ,根据CD34阳性的血管内皮计数来判定微血管密度 (MVD)。结果 :VEGF在 70 .2 % (2 9/ 4 0 )的结肠癌组织表达 ,iNOS在 82 .5 %(33/ 4 0 )肠癌组织中表达。VEGF阳性的结肠癌组织MVD为 38.2± 1.4 /高倍视野 ,VEGF阴性组织中为 2 2 .1± 2 .2 /高倍视野 ,两者有显著差异 ,(P <0 .0 1)。iNOS阳性肠癌组织MVD为 36 .8± 1.2 /高倍视野 ,iNOS阴性肠癌组织为 30 .2± 2 .4 /高倍视野 ,两者亦有显著差异。 (P <0 .0 1)。结论 :结肠癌组织VEGF、iNOS与MVD形成有密切相关。     

非小细胞肺癌患者外周血中生存素和血管内皮细胞生长因子的表达及临床意义

目的:探讨非小细胞肺癌患者外周血中生存素和血管内皮细胞生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)的表达及临床意义。方法:应用荧光定量PCR法检测42例非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)患者及20例肺部良性疾病患者外周血中生存素mRNA和VEGF mRNA的表达。结果:NSCLC患者外周血中生存素mRNA和VEGF mRNA的表达水平明显高于肺部良性疾病患者(P=0.006;P=0.001)。NSCLC患者外周血中生存素mRNA的阳性表达率为59.5%,VEGF mRNA的阳性表达率为57.1%,两者联合检测阳性率可提高至76.2%。肺部良性疾病患者生存素mRNA阳性表达率为5%,VEGF mRNA均为阴性,明显低于NSCLC患者(P均<0.001)。NSCLC患者外周血中生存素mRNA和VEGF mRNA的表达与肿瘤的TNM分期显著相关(P<0.001;P=0.008),而与其他临床特征无明显相关性。结论:外周血生存素mRNA和VEGF mRNA表达可作为肺癌细胞的分子标志物用于临床诊断,两者联合检测可提高NSCLC患者外周血癌细胞的检出率。     

COX-2、PCNA、VEGF和MVD在非小细胞肺癌中的表达及其临床意义

目的研究环氧化酶2（cyclooxygenase-2，COX-2）、增殖细胞核抗原（proliferating cell nuclear antigen，PCNA）、血管内皮生长因子（vascular endothelial growth factor，VEGF）和微血管密度（microvessel density，MVD）在非小细胞肺癌（non-smallcell lung cancer，NSCLC）组织中的表达及其与临床病理的关系。方法应用免疫组化SP法检测78例NSCLC组织中COX-2、PCNA、VEGF及CD34表达的微血管密度（MVD）。结果78例NSCLC中，COX-2、PCNA及VEGF的阳性表达率分别为61．5％、89．74％及60．25％，CD34表达的MVD值为（38．5±7．59），COX-2表达与NSCLC组织学、临床分期和淋巴结转移之间存在显著性差异（P〈0．01），TNM（tumor-node-metastasis）分期中Ⅲ～Ⅳ期组，PCNA阳性表达率高于Ⅰ～Ⅱ期，存在显著差异（P〈0．01）；有淋巴结转移组VEGF阳性表达率高于无淋巴结转移组，存在显著差异（P〈0．01）；COX-2阳性表达与VEGF及MVD的表达之间存在显著差异（P〈0．01），COX-2阳性表达强度与PCNA阳性表达强度之间存在显著差异（P＜0．01）。结论COX-2、PCNA、VEGF和MVD在NSCLC发生发展中可能起协同作用，同时检测NSCLC组织中COX-2、PCNA、VEGF及MVD有助于判断患者预后。     

喉鳞癌caveolin-1和MVD表达及与颈淋巴结转移的关系

目的：探讨喉鳞状细胞癌组织中caveolin－1mRNA及蛋白的表达和微血管密度（MVD）与颈淋巴结转移的关系。方法：采用免疫组化法检测40例喉鳞状细胞癌组织中caveolin－1、CD34表达．并用半定量逆转录聚合酶链式反应（semi—RT—PCR）技术检测以上组织中caveolin－1mRNA表达水平。结果：不伴颈淋巴结转移的喉癌组（第1组）的caveolin－1mRNA相对A值为0．450±0．050,伴有颈淋巴结转移的喉癌组（第2组）的caveolin－1mRNA相对4值为0．701±0．073;caveolin－1蛋白第1组中阳性表达率为25．0％,第2组为65．0％,不论从基因还是蛋白水平,两组相比差异均有统计学意义（均P〈0．05）。CD34免疫组织化学染色结果显示第2组的MVD值为30．19＋_2．60显著高于第1组值21．34±4．62（P〈0．05）。喉鳞状细胞癌组织中caveolin－1高表达与MVD升高呈正相关（r=0．875,P〈0．05）,且二者与颈淋巴结转移相关。结论：caveolin－1在喉鳞状细胞癌中的表达可能在肿瘤转移过程中起了重要作用,与肿瘤血管形成关系密切。     

非小细胞肺癌应用-16联合化疗方案的疗效观察

目的:观察重组人血管内皮抑素(YH-16)联合长春瑞滨和顺铂(NP)治疗Ⅲb-Ⅳ期非小细胞肺癌(non-small cell carcinoma,NSCLC)的近期临床疗效及安全性。评价治疗前、后外周血癌胚抗原(carcino-embryonic antigen,CEA)在NSCLC治疗中的价值。方法:应用YH-16联合NP方案治疗晚期NSCLC共34例,统计临床有效率、临床收益率、生存质量并比较治疗前后外周血CEA水平。结果:34例患者临床有效率为14.71%(5/34),临床收益率为70.59%(24/34),治疗后生存质量明显提高且差异具有统计学意义(P<0.05)。34例患者血清CEA水平从治疗前(57.30±4.93)ng/ml下降到第2周期治疗后(15.64±7.50)ng/ml,两组CEA水平相比差异有统计学意义(P<0.05)。结论:YH-16联合NP方案治疗晚期NSCLC是合理、安全、有效的。CEA可能是一个预测YH-16联合NP方案治疗NSCLC疗效的标志物。     

非小细胞肺癌外周血分子微转移研究

目的: 研究非小细胞肺癌(NSCLC)患者外周血癌胚抗原(CEA)、CK19、Lunx mRNA表达对于肿瘤微转移的价值。方法: 采用RT-PCR技术,对46例NSCLC患者(其中肺癌Ⅰ期组6例,Ⅱ期组9例,Ⅲ期组14例,Ⅳ期组17例))和同期18例良性肺部疾病(对照组)患者外周血CEA、CK19、Lunx mRNA进行检测。结果: NSCLC患者外周血Lunx、CEA、CK19 mRNA的阳性率为52.2%、43.5%、41.3%,其中Ⅰ期组Lunx、CEA和CK19 mRNA的阳性率为16.6%(1/6)、16.6%(1/6)和0%(0/6),与对照组差异均无统计学意义(P > 0.05);Ⅱ期、Ⅲ期和Ⅳ期组NSCLC患者Lunx mRNA的阳性率为44.4%(4/9)、50.0%(7/14)、70.6%(12/17),CEA mRNA的阳性率为33.3%(3/9)、50.0%(7/14)、52.9%(9/17),CK19 mRNA的阳性率为22.2%(2/9)、42.9%(6/14)、64.7%(11/17),肺癌Ⅱ期组Lunx、肺癌Ⅲ期组CEA和Lunx、肺癌Ⅳ期组CEA、CK19、LunxmRNA表达阳性与对照组差异均有统计学意义(P < 0.05~P < 0.01)。结论: 检测外周血CEA、CK19、Lunx mRNA表达可作为诊断早期NSCLC患者微转移重要的参考指标。     

非小细胞肺癌中Survivin和COX-2的表达及与肺癌发生、发展的关系

目的：检测Survivin和COX-2在人类非小细胞肺癌组织中的表达,探讨二者与非小细胞肺癌（NSCLC）的发生及生物学行为之间的关系。方法：实验组包括非小细胞肺癌60例,对照组包括正常肺组织15例。应用免疫组织化学洁检测Survivin和COX-2的表达水平,并用CD34指示肿瘤微血管计算微血管密度值。结果：非小细胞肺癌患者Survivin和COX一2的表达率分别为38．3％和48．3％,显著高于正常对照组。Survivin和COX-2的表达与临床分期和有无淋巴结转移有关,阳性表达率在临床Ⅲ＋Ⅳ期高于I＋Ⅱ期,有淋巴结转移组高于无淋巴结转移组。Survivin的表达还与组织学分级有关,随着分化程度的降低表达率增加。Survivin和COX-2的表达呈显著正相关关系。非小细胞肺癌组MVD值显著高于正常对照组,并且与临床分期有关,临床Ⅲ＋Ⅳ期高于I＋Ⅱ期。Survivin和COX-2的表达与tH,细胞肺癌的微血管密度值（MVD）密切相关,Survivin和COX-2阳性组MVD值显著高于阴性组。结论：Survivin和COX-2在非小细胞肺癌的发生发展过程中可能起重要作用,其中促进肿瘤血管生成和淋巴结转移可能是影响肿瘤进展的重要途径。     

EGFL7基因沉默对裸鼠胃癌血管生成的影响

目的：探讨类表皮生长因子域7（EGFL7）基因沉默对胃癌裸鼠模型瘤内血管生成的影响。方法：构建EGFL7短发夹状RNA表达质粒并转染SGC-7901细胞（pshEGFL7组）,以空质粒转染为对照组,观察两组皮下种植瘤生长曲线及体积;免疫组织化学法检测抗-CD34、血管内皮生长因子（VEGF）、血小板反应蛋白（TSP1）表达,RT-PCR检测MMP-2和TIMP2表达。结果：pshEGFL7组种植瘤体积为（1.86±0.65）cm3,微血管密度（MVD）为20.84±6.38,分级为1～2级;对照组种植瘤体积为（4.86±1.15）cm3,MVD为39.48±9.01,分级为3～4级;两组种植瘤体积、MVD和分级的差异有统计学意义,P值均〈0.05;EGFL7组TSP1蛋白阳性表达,而VEGF蛋白为弱阳性或阴性表达,MMP-2mRNA表达下调,而TIMP2mRNA表达上调,与对照组比较差异有统计学意义,P值均〈0.01。结论：EGFL7基因沉默可降低胃癌种植瘤血管生成,与调节MMP-2/TIMP2表达,影响VEGF/TSP1平衡有关。     

LYVE-1和CD31在非小细胞肺癌中的表达及与肿瘤转移的相关性研究

目的本研究探讨LYVE-1和CD31在非小细胞肺癌（non—small cell lung cancer,NSCLC）中的表达及其与肿瘤转移的关系．方法采用EnVision显色系统免疫组化方法检测40例NSCLC癌组织和40例癌周组织LYVE-1和CD31的表达,并计数LYVE-1和CD31标记的癌组织及癌旁组织中的微淋巴管（MLVD）和微血管密度（MVD）．结果NSCLC癌组织与正常肺组织和癌旁组织中MLVD差异有统计学意义（P〈0．001）;癌组织中MLVD在有淋巴结转移组与无淋巴结转移组比较差异有统计学意义（P〈0．001）;癌组织中MLVDⅠ期＋Ⅱ期与Ⅲ期＋Ⅳ期比较差异有统计学意义（P〈0．001）;但NSCLC癌组织中MLVD与性别、年龄、肿瘤大小、组织学类型和分化程度无关（P〉0．05）．NSCLC癌旁组织MVD显著高于癌组织MVD,差异有统计学意义（P〈0．001）;NSCLC有淋巴转移组MVD高于无淋巴转移组,比较无统计学意义（P〉0．05）;NSCLCⅢ期＋Ⅳ期MVD高于Ⅰ期＋Ⅱ期,比较无统计学意义（P〉0．05）．相关性分析统计表明,MLVD／MVD在NSCLC癌周组织中的表达无相关性（r=0．034,P〉0．05）．结论NSCLC中LYVE-1和CD31表达水平可作为判断病情进展和肿瘤转移的指标之一．     

HIF-1α/VEGF在肝细胞癌的表达及其与肿瘤血管生成的关系

目的:探讨缺氧诱导因子-1α(hypoxia-inducible factor,HIF-1α)和血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)在肝细胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)的表达及其与肿瘤血管生成的关系。方法:采用免疫组织化学SP法检测41例HCC组织及16例非肿瘤肝组织的HIF-1α及VEGF表达,采用鼠抗人CD31单克隆抗体标记肿瘤血管内皮细胞,计数HCC组织微血管密度(micro-vessel density,MVD)值。结果:在HCC组织与非肿瘤肝组织中,HIF-1α、VEGF阳性表达率和MVD值分别为82.9%、80.5%、41.0±20.2与37.5%、25.0%、20.1±9.1,两组差异均具有统计学意义(P<0.05)。在HCC组织中,HIF-1α、VEGF与MVD三者之间均具有相关性,并与病理分级相关(P<0.05)。结论:在HCC组织中,HIF-1α和VEGF呈高表达,与肿瘤血管生成密切相关。