清解益肺汤及胶囊剂抗小鼠Lewis肺癌转移及肿瘤血管生成机制的研究

目的研究清解益肺汤及胶囊剂抗小鼠Lewis肺癌生长转移并探讨其相关机制。方法建立C57BL/6J雄性小鼠Lewis肺癌模型,并随机分为模型对照组,清解益肺汤高、中、低剂量组,顺铂组、顺铂+清解益肺汤中剂量组、清解益肺胶囊组等7组。每组10只,连续给药14天。观察Lewis肺癌小鼠的肿瘤生长情况,肺转移瘤结节数,采用ELISA法检测小鼠血清中血管内皮细胞生长因子(VEGF)表达,Western Blotting印记法检测Lewis肺癌小鼠肿瘤组织CD34蛋白表达并计数微血管密度(MVD)。结果清解益肺汤及胶囊能减少小鼠Lewis肺癌瘤重和肺转移灶数,并能降低其血清VEGF水平以及肿瘤组织CD34蛋白(MVD)表达,中药组中以高剂量组和胶囊组效果最佳,联合组效果明显优于其他各组。结论清解益肺汤及胶囊能抗小鼠Lewis肺癌生长与转移,其机制可能与该药能降低VEGF表达和肿瘤组织微血管密度(MVD),抑制肿瘤血管生成有关。     

牛黄天龙方药抗肿瘤作用的实验研究

目的观察中药牛黄天龙方药对荷瘤小鼠的抗肿瘤作用及造血系统的影响。方法取BALB/C小鼠100只,随机分为牛黄天龙方药高、中、低剂量组,模型组及环磷酰胺组,采用皮下注射宫颈癌细胞株的方法建立U14荷瘤小鼠模型,分别给予牛黄天龙方药8、6、4g/(kg.d)及0.9%氯化钠注射液灌胃、环磷酰胺腹腔注射。用药10d后,取50只小鼠取血处死后计算抑瘤率和外周血白细胞及骨髓细胞计数;另50只继续饲养观察存活时间。结果各治疗组瘤质量、生存时间与模型组比较差异均有统计学意义(P0.05),瘤质量均低于模型组而生存时间均长于模型组,牛黄天龙方药大、中、小剂量组生存时间均长于环磷酰胺组(P0.05);牛黄天龙方药大、中、小剂量组外周血白细胞计数高于环磷酰胺组、低于模型组(P0.05),牛黄天龙方药大、中、小剂量组骨髓细胞计数高于环磷酰胺组(P0.05),与模型组比较差异无统计学意义(P0.05)。结论牛黄天龙方药具有显著的抗肿瘤作用且对造血系统的影响较小。     

魟鱼软骨多糖对Lewis肺癌VEGF MMP-2和MMP-9蛋白表达的影响

目的探讨魟鱼软骨多糖(RCG)对Lewis肺癌血管内皮生长因子(VEGF)、基质金属蛋白酶2(MMP-2)和基质金属蛋白酶9(MMP-9)蛋白表达的影响。方法:接种Lewis肺癌细胞,复制肺癌移植瘤模型;将实验分为生理盐水(Saline)组、不同剂量魟鱼软骨多糖(RCG)组、环磷酰胺(CTX)组,给药后观察肿瘤生长情况,计算肿瘤抑制率和肺转移瘤灶数目;采用Westernblot检测瘤组织中VEGF、MMP-2和MMP-9的蛋白表达。结果:与生理盐水组比较,魟鱼软骨多糖各剂量组对肿瘤的抑制率和肺转移数都具有显著性差异(P<0.05;P<0.01);与生理盐水比较,该多糖各剂量组对VEGF、MMP-2和MMP-9的蛋白表达水平显著降低(P<0.01)。结论:魟鱼软骨多糖明显抑制小鼠Lewis肺癌原发瘤的生长和转移,可能与其抑制肿瘤VEGF、MMP-2和MMP-9蛋白的表达有关。     

肉桂醛对小鼠U14宫颈癌组织中PI3K表达的影响

目的研究肉桂醛对小鼠U14宫颈癌组织中磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)表达的影响。方法建立U14宫颈癌移植瘤小鼠模型,随机分为4组,每组20只,即阴性对照组,环磷酰胺组,肉桂醛低(60 mg/kg)、高剂量组(240 mg/kg),不间断给药14 d。用HE染色法、免疫组化法、RT-PCR以及Western blot方法检测。结果灌胃14 d后肉桂醛组小鼠肿瘤较阴性对照组明显受到抑制,生命体征较阴性对照组和环环磷酰胺组得到明显的改善,肿瘤抑制率分别为肉桂醛低、高剂量组40.17%、49.32%,环磷酰胺组65.06%,同时肿瘤组织中PI3K表达下降。结论肉桂醛能抑制U14荷瘤鼠瘤体生长,提高小鼠的生存质量。     

益气除痰散结法对Lewis肺癌小鼠的抗肿瘤作用研究

目的观察益气除痰散结法对Lewis肺癌小鼠的抑瘤作用及其机制。方法复制转移性Lewis小鼠肺癌模型,将模型小鼠随机分为益气除痰散结法中药复方高、中、低(21.45,85.80,171.60 g·kg~(-1))剂量组,环磷酰胺组(CTX,0.02 g·kg~(-1))和模型组,每组各10只,观察肿瘤增长体积、瘤体质量、免疫器官指数、肺转移率,并采用免疫组化方法结合计算机图像析技术,观察小鼠肿瘤组织中的血管内皮生长因子(VEGF)表达的差异。结果模型组小鼠平均瘤体质量为(2.44±0.52)g,提示肿瘤接种成功且生长良好;接种Lewis肺癌瘤株细胞后各组小鼠皮下肿瘤体积随时间增长而变化,其中中药复方高剂量组、环磷酰胺组的肿瘤体积增长显著低于模型组和中药复方低剂量组(P0.01)。与模型组比较,中药复方高、中剂量组均有抑瘤作用(P0.01,P0.05),且明显增加胸腺及脾脏指数(P0.01),对肺转移灶也有抑制作用(P0.05,P0.01)。从HE染色的病理切片中发现,在应用益气除痰散结法中药复方治疗后,小鼠肿瘤组织的病理学表现与模型组比较有明显的差异。免疫组化法检测,肿瘤微血管内皮细胞被染成棕黄色,VEGF主要表达肿瘤细胞核和胞浆内,肿瘤细胞亦有少量染色,阳性染色的肿瘤细胞大多位于液化坏死区,浸润的淋巴细胞有表达,血管内皮细胞呈弱阳性染色。但益气除痰散结法中药复方高、中、低剂量组VEGF值与模型组比较,差异无统计学意义(P0.05)。结论益气除痰散结法能明显抑制荷瘤小鼠局部肿瘤的生长及肺转移,其抗肺癌作用的机理可能与促进肿瘤细胞凋亡、提高细胞分化程度,增强免疫力有关,但与VEGF靶点的关系不大。     

脂联素对乳腺癌小鼠血管内皮生长因子和基质金属蛋白酶-9表达的影响

目的探讨脂联素对乳腺癌小鼠血管内皮生长因子(VEGF)、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)表达的影响。方法选取80只健康雌性小鼠,采用含有二甲基苯蒽的芝麻油建立乳腺癌模型,成瘤率50%,建模成功后依据随机数字表将小鼠分为2组,模型组20只给予常规饲养,脂联素组20只给予重组鼠脂联素蛋白注射液腹腔注射,连续7 d。分别采用酶联免疫吸附法和Western blot(WB)法检测2组小鼠造模成功后和造模成功1,2,3周后血清VEGF、MMP-9水平和肿瘤组织中VEGF、MMP-9表达水平,造模成功3周后处死小鼠称肿瘤质量并计算瘤体积。结果脂联素组造模成功1,2,3周后血清VEGF、MMP-9水平及肿瘤组织中VEGF、MMP-9表达水平均明显低于同组造模成功后和同期模型组(P均0.05);脂联素组肿瘤质量明显低于模型组(P0.05),肿瘤体积明显小于模型组(P0.05)。结论脂联素可能通过抑制乳腺癌小鼠VEGF、MMP-9表达而抑制病情进展。     

二至丸对诱发性乳腺癌组织中VEGF和MMP-9表达的影响

目的:研究滋阴方二至丸对二甲基苯蒽(DMBA)诱发性乳腺癌大鼠肿瘤组织中血管内皮生长因子(VEGF)、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)表达的影响.方法:60只雌性SD大鼠随机分为空白对照组、DMBA模型组、二至丸高、中、低(6.4,3.2,1.6 g·kg-1)剂量组和三苯氧胺(TAM)组.除空白对照组外,每只大鼠均以致癌剂DMBA诱导(剂量100 mg·kg-1,2次,间隔1周)乳腺癌.诱导第2天开始给予药物干预,每周触诊所有大鼠乳腺肿瘤发生情况并记录体重变化;15周后处死动物,统计各组大鼠乳腺肿瘤的发病率,并采用SP免疫组化法检测各组动物肿瘤组织中VEGF,MMP-9的表达情况.结果:与DMBA模型组比较,二至丸中剂量组和TAM组大鼠乳腺肿瘤平均潜伏期延长(P＜0.05),平均肿瘤直径、平均肿瘤体积、平均瘤重显著降低(P＜0.05);二至丸中、高剂量组VEGF和MMP-9强阳性率显著性降低(P＜0.05),且VEGF与MMP-9的表达呈正相关.结论:滋阴方药二至丸可能通过干预乳腺癌组织中VEGF和MMP-9的表达,抑制乳腺癌生长恶化.     

中肺合剂抗小鼠Lewis肺癌肺转移作用及相关机制的实验研究

 目的 观察中肺合剂对小鼠Lewis肺癌抗肿瘤肺转移的作用,并探索其相关机制。方法 采用Lewis肺癌移植瘤C57BL/6小鼠模型观察中肺合剂抗肿瘤肺转移作用,并采用荧光定量QRT-PCR法测定中肺合剂对Lewis肺癌小鼠肿瘤组织基质金属蛋白酶（MMP）-9表达的影响,采用EnVision法检测肿瘤组织血管内皮细胞生长因子（VEGF）和CD34蛋白的表达情况,并计数微血管密度(MVD)。结果 中肺合剂低、中、高剂量组（12.7,25.4,50.8 g·kg-1）和环磷酰胺（CTX）阳性对照组对移植性Lewis肺癌小鼠的肺转移抑制率为16.7%、45.8%、19.4%和80.6%,以中剂量组肺转移抑制作用最佳。中肺合剂能下调Lewis肺癌小鼠肿瘤组织MMP-9、VEGF蛋白的表达水平,并降低肿瘤组织MVD。MMP-9、VEGF表达和MVD之间呈正相关。结论 中肺合剂对小鼠Lewis肺癌具有显著的抗肿瘤肺转移作用,以中剂量组最佳。其作用机制可能与该药能降低肿瘤组织MMP-9、VEGF蛋白的表达水平,并降低肿瘤组织MVD有关。     

数据挖掘BLQ复方中药对肝癌荷瘤小鼠的抑瘤作用及初步机制研究

目的:观察数据挖掘BLQ复方中药对肝癌荷瘤小鼠的抑瘤作用,并探讨其初步机制。方法:ICR小鼠适应性饲养后,建立H22荷瘤小鼠模型,并随机分为模型组、5-FU组、BLQ复方中药高、中、低剂量组,造模后第2日开始给药,模型组给予生理盐水灌胃,BLQ复方中药高、中、低剂量组给予同体积中药水煎剂灌胃,灌胃体积为0.1 mL/10 g,连续灌胃14 d后处死小鼠,完整剥离肿瘤组织,称重,计算抑瘤率;取脾脏和胸腺,计算脾脏和胸腺指数;取血离心后用酶联免疫吸附法检测血清中白细胞介素-1(IL-1)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、γ-干扰素(IFN-γ)含量变化。免疫印迹法(Western blot)检测瘤组织Bax、Bcl-2、Caspase-3、Caspase-9蛋白表达。结果:与模型组比较,BLQ复方中药高、中、低剂量组抑瘤率分别为45.61%、47.72%及27.31%(P 0.01,P 0.05)。与模型组比较,BLQ复方中药高、中剂量组均能显著上调Bax、Caspase-3、Caspase-9蛋白表达(P 0.01),高剂量组则显著下调Bcl-2蛋白表达(P 0.01);低剂量组能显著上调Bax蛋白表达(P 0.01)。结论:BLQ复方中药能抑制肝癌小鼠肿瘤生长,可能是通过对细胞凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax及Capase-3、Capase-9的调节实现的,是BLQ复方中药抑制肿瘤细胞生长的机制之一。     

乳宁合剂对乳腺癌小鼠癌组织VEGF及MVD表达影响的研究

目的观察乳宁合剂对乳腺癌小鼠癌组织血管内皮生长因子(VEGF)表达和微血管密度(MVD)的影响。方法建立小鼠乳腺癌移植瘤模型,实验分为乳腺癌模型组、参一胶囊组、乳宁合剂高、中、低剂量组。分组给药21 d后,免疫组化法测定肿瘤组织中的VEGF和MVD。结果与模型组相比,乳宁合剂高、中剂量组及参一胶囊组均可明显降低VEGF和MVD表达(P0.05),其中以参一胶囊组作用最为明显,乳宁合剂高、中剂量组次之,并呈剂量效应关系。结论乳宁合剂可能通过抑制肿瘤血管生成而发挥抗肿瘤效应。     

健脾养正消癥方对裸鼠胃癌移植瘤及肝转移灶的生长转移及相关基因的影响

目的:观察健脾养正消癥方对裸鼠胃癌移植瘤及转移灶的生长转移及相关基因的影响。方法:建立人胃癌裸鼠移植瘤模型,并随机分为模型组,阳性组(5-氟尿嘧啶,5-Fu组),健脾养正消癥方低、高剂量组。观察健脾养正消癥方对裸鼠胃癌移植瘤的抑瘤率及肝转移灶的情况。反转录酶-聚合酶链锁反应(RT-PCR)法检测健脾养正消癥方对胃癌原位移植瘤及肝转移灶中基质金属蛋白酶2(MMP-2),MMP-9,MMP-14,血管内皮生长因子(VEGF),RECK基因表达的影响。Western blot法检测健脾养正消癥方对胃癌原位移植瘤及肝转移灶中P-STAT3,MMP-2,MMP-9,MMP-14,VEGF,RECK基因表达的影响。结果:健脾养正消癥方高、低剂量组小鼠瘤体平均瘤重明显小于模型组(P0.01)。健脾养正消癥方作用于裸鼠胃癌移植瘤及其肝转移灶后,侵袭转移相关基因中MMP-2,MMP-9,MMP-14,VEGF表达下降,RECK基因表达上升;健脾养正消癥方作用于裸鼠胃癌移植瘤及其肝转移灶后,其相关蛋白P-STAT3,MMP-2,MMP-9,MMP-14,VEGF表达下降,RECK蛋白表达上升。结论:健脾养正消癥方对裸鼠胃癌原位移植瘤及肝转移灶生长具有抑制作用;健脾养正消癥方能够下调P-STAT3,MMP-2,MMP-9,MMP-14,VEGF等相关基因或蛋白的表达同时上调RECK基因或蛋白的表达。     

乳宁Ⅱ号对TA2小鼠乳腺癌MA-891移植瘤中血管内皮生长因子表达的影响

目的研究乳宁Ⅱ号对TA2小鼠乳腺癌移植瘤中血管内皮生长因子(VEGF)表达及肺转移的影响。方法将体外培养的MA-891小鼠乳腺癌细胞接种于TA2小鼠右腋部皮下,造成小鼠移植瘤肺转移模型,同时予乳宁Ⅱ号治疗。结果乳宁Ⅱ号可抑制移植瘤生长,减少肺转移的发生(P<0．05),降低肿瘤组织中VEGF蛋白及VEGF mRNA表达(P<0．05)。结论乳宁Ⅱ号可通过降低肿瘤组织中VEGF蛋白及VEGF mRNA表达,发挥抑瘤和抗转移作用。     

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??OBJECITVE To study the inhibitive effect of plumbagin on Lewis lung cancer. METHODS Cell proliferation was determined by CCK8 assay. Apoptosis was determined by flow cytometry. The expression of Bcl-2 and VEGF protein was studied by Western blot assay. The model of C57BL/6 mice bearing Lewis lung cancer was established by subcutaneous seeding of Lewis lung cancer cells, and randomly divided into 5 groups (n=6). Tumor-bearing mice were injected with normal saline, plumbagin(low, medium, high dose) or cyclophosphamide (CTX) in each group. The tumor volume was measured. All mice were sacrificed on Day 22nd under aseptic condition for the tumor collection. The transplanted tumors were weighed for calculation of the tumor inhibition rate; Immunohistochemical method was applied to assessing the VEGF expression in tumor tissue. RESULTS CCK-8 assay showed that plumbagin had an obvious inhibition on Lewis lung carcinoma cells line in a dose-dependent manner(r=0.953, P<0.05). Plumbagin significantly increased cell apoptosis rate(P<0.05). The protein levels of Bcl-2 and VEGF were significantly reduced by plumbagin (0, 2.5, 5, 10 ??mol??L^-1) treatment(P<0.05). In plumbagin(low, medium, high dose) groups and CTX group, the tumour volume, tumour weight and the expression of VEGF were significantly less than those in the control group (P<0.05). CONCLUSION The plumbagin effectively inhibits Lewis lung carcinoma cells proliferation and tumor growth of Lewis lung carcinoma cells in mice. The mechanism involved is down-regulating the expression of Bcl-2 ,VEGF and inducing cell apoptosis.     

艾灸通过成纤维细胞生长因子受体1和血管内皮细胞生长因子受体2抑制肉瘤微环境血管生成

目的:观察艾灸对肉瘤微环境中成纤维细胞生长因子受体1(FGFR1)和血管内皮细胞生长因子受体2(VEGFR2)的影响,探讨艾灸防治肉瘤的作用机制.方法:将接种S180肉瘤细胞形成移植瘤的C57BL/6J小鼠分为模型组、顺铂组和艾灸组,每组10只.艾灸组直接灸移植瘤,距离3 cm,10 min/次,每日1次,治疗14 d...     

魟鱼软骨多糖对Lewis肺癌MMP-9表达的影响

目的:鱼软骨多糖(RCG)对Lewis肺癌基质金属蛋白酶9(MMP-9)表达的影响。方法:建立小鼠Lewis肺癌模型,将动物分为生理盐水组、不同剂量鱼软骨多糖组、环磷酰胺组,观察肿瘤生长情况,绘制肿瘤生长曲线,计算原发瘤抑制率;采用RT-PCR和Western blot检测瘤组织MMP-9基因和蛋白表达。结果:该多糖各剂量组小鼠的肿瘤生长曲线平缓,小鼠原发瘤抑制率、肺转移数与生理盐水组比较差异有显著性(P<0.05;P<0.01);与生理盐水比较,鱼软骨多糖各剂量组,MMP-9 mRNA和蛋白表达水平显著降低(P<0.01)。结论:鱼软骨多糖明显抑制小鼠Lewis肺癌原发瘤的生长和转移,可能与其抑制肿瘤MMP-9基因和蛋白表达有关。     

白鹤方对人胃癌裸小鼠原位移植瘤微血管密度、MMP-9表达的影响

目的观察白鹤方对人胃癌BGC-823裸鼠原位移植瘤生长和转移的抑制作用,以及对移植瘤组织微血管密度(MVD)、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)表达的影响。方法 60只裸鼠建立人胃癌BGC-823原位移植瘤模型,随机分为白鹤方组、5-氟尿嘧啶(5-FU)组、白鹤方与5-FU联合治疗组和模型组,每组15只。白鹤方组给予白鹤方(0.2 g/ml) 0.5 ml灌胃,1次/d; 5-FU组予5-FU稀释液(6 mg/ml) 0.2 ml腹腔注射,1次/周;白鹤方与5-FU联合治疗组,予白鹤方(0.2 g/ml) 0.5 ml灌胃,1次/d,同时予5-FU稀释液(6 mg/ml) 0.2 ml腹腔注射,1次/周。模型组予0.9%NaCl溶液0.5 ml/d灌胃,1次/d。用药6周后结束实验,观察各组裸鼠原位移植瘤生长和转移情况,测瘤体质量,计算抑瘤率;电镜下观察移植瘤超微结构;免疫组化检测各组裸鼠移植瘤组织MVD和MMP-9表达情况。结果白鹤方组、5-FU组、白鹤方与5-FU联合治疗组移植瘤体质量明显低于模型组,抑瘤率分别为48.65%、47.64%和54.39%;电镜下观察发现,白鹤方组、5-FU组、白鹤方与5-FU联合治疗组胃癌细胞均出现凋亡表现;白鹤方组、白鹤方与5-FU联合治疗组移植瘤组织MVD和MMP-9表达低于5-FU组和模型组(P0.05)。结论白鹤方对人胃癌BGC-823裸鼠原位移植瘤生长和转移具有抑制作用,能降低移植瘤组织MVD,抑制微血管生成;可能是通过下调MMP-9表达而发挥作用。     

消瘕方抑制人乳腺癌裸鼠移植瘤血管内皮生长因子表达的实验研究

目的:研究消瘕方对人乳腺癌MDA-MB-435细胞株裸小鼠移植瘤中血管内皮生长因子(VEGF)表达的影响。方法:以体外培养的人乳腺癌MDA-MB-435细胞接种于裸小鼠右腋部位制造裸鼠皮下移植瘤模型,随机分为生理盐水组、5-氟尿嘧啶组及消瘕方小,中,大剂量组,每组小鼠予以相应药物治疗6周后脱颈处死,称瘤重,计算肿瘤生长抑制率,并采用RT-PCR法、免疫组化法检测肿瘤组织中VEGFmRNA及蛋白的表达。结果:消瘕方可抑制乳腺移植瘤生长,降低瘤体内VEGFmRNA表达(P<0.05),下调相应VEGF蛋白表达(P<0.05),其中以中剂量组效果更明显。结论:消瘕方的抑瘤作用与其下调瘤体内VEGF表达密切相关。     

三氧化二砷对人肝癌细胞黏附和侵袭影响的实验研究

目的探讨三氧化二砷(亚砷酸,As2O3)注射液是否具有抗肝癌细胞黏附和侵袭的作用及其相关机制。方法选用人类肝癌细胞株SMMC-7721细胞及裸鼠人类肝癌转移模型为研究对象,通过细胞运动迁移实验、细胞黏附实验和免疫组化方法观察As2O3对SMMC-7721细胞的运动迁移、与纤维粘连蛋白(FN)、内皮细胞黏附以及裸鼠人肝癌转移模型肝移植瘤表达CD44和MMP-2基因蛋白的影响。结果As2O3注射液可显著抑制SMMC-772l细胞在FN上的迁移运动和SMMC-7721细胞与FN、内皮细胞的黏附,并能降低裸鼠肝移植瘤CD44、MMP-2的表达。结论As2O3具有抗肝癌细胞黏附和侵袭的作用,其机制可能与As2O3能降低肝癌细胞表达CD44和MMP-2有关。