线粒体和微粒体谷胱甘肽S-转移酶在大鼠肝脏癌前病变组织中的变化

本文报道在大鼠肝脏化学致癌过程中癌前病变组织的细胞浆、微粒体、线粒体及核膜等亚细胞组分内谷胱甘肽S-转移酶(glutathione S-transferase,GST)活性的变化。在大鼠肝脏癌前病变组织中,胞浆、线粒体及微粒体内,以1,2-二氯-4-硝基苯(1,2-dichloro4-nitrobenzene,DCNB)为底物的A-C组GST活性以及以1-氯-2,4-二硝基苯(1-chlo-ro-24-dinitroben-zene,CDNB)为底物的B组GST活性均显著增高然而在核膜中上述的两种分子形式的GST活性,均无明显变化。实验结果表明,GST不仅存在于胞浆中,而且在线粒体、微粒体及核膜中也固有。把二乙基亚硝胺(diethylnitrosamine,DEN)腹腔注射后给予2-乙酰氨基芴(2-acetylaminofluoren,FAA)并进行肝脏部分切除,以此制造大鼠肝脏癌前病变,这时组织中不仅是胞浆中的GST活性明显升高,而且微粒体和线粒体GST也有显著升高。因此,作者认为微粒体及线粒体GST也可做为肝脏肿瘤标志酶。     

大鼠肝脏癌前病变组织线粒体谷胱甘肽S-转移酶的纯化及其部分性质

本文分离纯化了正常大白鼠肝脏和癌前病变大白鼠肝脏组织线粒体谷胱甘肽S-转移酶(GST),对其部分性质进行了探讨。经O-(二乙胺基乙基)-纤维素、羟基磷灰石,羧甲基-琼脂糖6B(CM-Sapharose 6B)柱层析以及等电聚焦电泳法,从正常肝组织和癌前病变肝组织中,分离纯化了两种不同性质的GST,暂命名为线粒体GST_1和线粒体GST_2。通过十二烷基磺酸钠(SDS)-聚丙烯酰胺凝胶电泳法和等电聚焦电泳法测定的线粒体GST_1的分子量约为23000,等电点为6.2,线粒体CST_2的分子量约为45000,等电点为9.1。在正常组织和癌前病变组织中CST同工酶无质上的差异。但是,线粒体GST_1在癌前病变组织中的活性明显著高于正常对照组(P<0.01)。     

大鼠肝脏微粒体中3种细胞色素P-450同工酶活性研究

目的　研究大鼠肝脏微粒体中CYP2D1/ 2、CYP2C11、CYP1A2 3种细胞色素P 4 5 0同工酶的活性。方法　用诱导剂和抑制剂分别在体内和体外调节大鼠肝脏P 4 5 0同工酶活性 ,并用高效液相法检测同工酶底物的特异性代谢产物来计算同工酶活性。结果　 3种同工酶底物的特异性代谢产物的分离度达到了 1.5 ;天内、天间精密度均小于 10 .2 2 % ,天内、天间准确度均小于 14 .95 % ;相关系数都达到 0 .999。在体内腹腔注射地塞米松能使CYP1A2、CYP2D1/ 2、CYP2C11活性分别增加 1.3倍 (P <0 .0 5 )、1倍 (P <0 .0 1)和 2 .3倍 (P <0 .0 1)。β 萘黄酮可使CYP1A2活性增加 13.7倍 (P <0 .0 1)。在体外 ,呋拉茶碱可以不同程度地抑制CYP1A2、CYP2C11活性 ;普罗地芬、α 萘黄酮可以抑制CYP1A2活性 ;奎宁可以抑制CYP2D1/ 2活性。结论　甲苯磺丁脲、右美沙芬和非那西汀可以作为人体的探药 ,因而实验建立的方法有望用于检测人血浆或尿液中 3种探药的特定代谢产物 ,分别用于估测人肝脏CYP2C9、CYP2D6和CYP1A2的活性。     

微粒体谷胱甘肽S-转移酶在移植性肿瘤生长过程中的变化

本文报道,在大鼠 AH-66移植性肝癌生长过程中,宿主肝脏微粒体、胞浆和血清中谷胱甘肽 S-转移酶(Glutathione S-transferase,GST)及 T-谷氨酰转肽酶(T-Glutamyltranspeptidase,γ-GT)活性的变化。在移植 AH-66的大鼠肝微粒体中,以1,2-二氯-4-硝基苯(1,2-Dichloro-4-nitrobenzene,DCNB)为底物的 B 组 GST 及 T-GT 活性显著增高;然而,以1-氯-2,4-二硝基苯(1-Chloro-2,4-dinitrobenzene,CDNB)为底物的 A-C 组GST 活性无显著变化。虽然胞浆中 GST 活性变化较小,但是血清中 GST 和γ-GT活性随肿瘤生长呈直线型上升。肝微粒体 GST 可做为移植性肿瘤较敏感的标志酶。     

孕期尼古丁暴露所致成年雄性子代大鼠肝脏CYP同工酶及抗氧化酶变化

目的:探讨孕期尼古丁暴露(PNE)所致雄性子代大鼠肝脏细胞色素P450(CYP)同工酶及抗氧化酶表达和功能变化。方法:建立孕中、晚期尼古丁[2mg/(kg·d)]暴露大鼠模型,检测出生后3月和7月龄雄性大鼠肝脏CYP同工酶和抗氧化酶的表达和活性变化。结果:PNE的3月龄雄性大鼠肝脏CYP1A2、CYP2C11和CYP3A1的mRNA表达显著增加,其他亚型(CYP2A2、CYP2B1、CYP2D2和CYP2E1)为增加趋势,而CYP2E1活性显著降低,其他亚型(CYP2C6、CYP2D2/3和CYP3A1)有降低趋势;7月龄雄性大鼠肝脏CYP2A2和CYP2E1的mRNA表达增加,其他亚型(CYP1A2、CYP2C11、CYP2D2和CYP3A1)为增加趋势,而酶活性无明显变化。3月和7月龄雄性大鼠肝脏抗氧化酶谷胱甘肽过氧化物酶、超氧化物歧化酶和过氧化氢酶活性无明显改变。结论:PNE可导致雄性3月龄子代大鼠肝脏CYP同工酶的mRNA表达增加,但酶活性降低,7月龄雄性大鼠肝脏CYP同工酶功能趋于正常。提示PNE可改变雄性子代大鼠药物代谢功能但不影响抗氧化酶功能。     

大鼠血浆、肝脏和腓肠肌亚细胞组分中超氧化物歧化酶、谷胱甘肽过氧化物酶活性和丙二醛含量分布

对大鼠血浆、肝脏和腓肠肌亚细胞组分中超氧化物歧化酶、谷胱甘肽过氧化物酶活性和丙二醛含量进行了测定．结果，在大鼠血浆、腓肠肌和肝脏三者中，超氧化物歧化酶、谷胱甘肽过氧化物酶的活性和丙二醛含量由高至低的顺序依次为肝脏、肌肉、血浆，均有显著性差异；在肌肉和肝脏亚细胞组分中超氧化物歧化酶则以胞浆中活性为最，线粒体次之，微粒体中谷胱甘肽过氧化物酶活性最低．肝脏胞浆中谷胱甘肽过氧化物酶活性显著高于线粒体中的活性．谷胱甘肽过氧化物酶在微粒体中的活性极低或无法测出．丙二醛含量在肝脏中的含量最高，肌肉中含量次之，最后为血浆．丙二醛含量在肝脏中的顺序依次为线粒体、微粒体和胞浆．在肌肉中丙二醛含量顺序为胞浆、微粒体和线粒体．     

灯盏生脉胶囊有效组分对大鼠细胞色素P450酶同工酶作用的体外研究

目的 探讨灯盏生脉胶囊6种有效组分对细胞色素P450酶(CYP450酶)4种主要亚型(同工酶)的作用.方法 采用大鼠肝微粒体体外孵育的方法和液质联用(LC/MS/MS)技术,通过体外cocktail高通量筛选,选择不同的CYP450酶同工酶特异性探针底物与灯盏生脉有效组分共同孵育,比较灯盏生脉有效组分对大鼠肝微粒体中CYP450酶同工酶抑制作用.结果 五味子甲素对大鼠肝微粒体CYP3A1、2C6及2C11有弱抑制作用,五味子酯甲对CYP3A1及2C11有弱抑制作用,IC50值均在10～50 μmol/L之间.结论 本研究初步界定参与灯盏生脉胶囊有效组分代谢的大鼠CYP450酶同工酶,及其有效组分对大鼠CYP450酶同工酶的抑制作用,为灯盏生脉胶囊与其他药物的联合使用提供科学依据.     

胃癌患者血清及组织中组织蛋白酶-D、谷胱甘肽-S-转移酶活性测定的临床意义

目的　探讨组织蛋白酶 - D(Cath- D)、谷胱甘肽 - S-转移酶 (GST)活性变化与胃癌发生、发展及预后的关系。　方法　检测胃癌、单纯性胃炎、胃炎伴癌前病变患者血清、癌组织、癌旁组织、胃窦粘膜中 Cath- D、GST的活性和手术前后血清 GST活性。　结果　 (1)胃癌组的 Cath- D、GST的活性显著高于单纯性胃炎组及胃炎伴癌前病变组 (P<0 .0 1) ,胃炎伴癌前病变组 GST的活性显著高于单纯性胃炎组 (P<0 .0 5 ) ,Cath- D活性与单纯性胃炎组比较差异无显著性 (P>0 .0 5 )。 (2 )胃癌组织 Cath- D、GST的活性显著高于癌旁组织 (P<0 .0 5 )、癌旁组织中Cath- D、GST的活性显著高于对照组织 (P<0 .0 5 )。 (3)伴有淋巴结转移的胃癌组织中 Cath- D活性显著高于不伴有淋巴结转移的 (P<0 .0 5 ) ,GST的活性在伴有与不伴有淋巴结转移者中差异无显著性 (P>0 .0 5 )。 (4) Cath- D的活性与按预后好坏的组织学分型 (P<0 .0 1)、按 TNM的分期 (P<0 .0 1)等病理指标有密切相关 ,而 GST的活性与病理指标无显著相关 (P>0 .0 5 )。 (5 )胃癌手术后 10天血清中 GST的活性明显低于手术前 (P<0 .0 1)。　结论　Cath- D、GST活性联合检测可用于胃癌高危人群筛选、监测癌前病变进展及预测肿瘤复发     

大鼠血浆,肝脏和腓肠肌亚细胞组分中超氧化物岐化酶,谷胱甘肽过氧…

对大鼠血浆，肝脏和腓肠肌亚细胞组分中超氧化物岐化酶，谷胱革肽过氧化物酶活性和丙二醛含量进行了测定，结果，在大鼠血浆，腓肠肌和肝脏三者中，超氧化岐化酶，谷胱甘肽过氧化物酶的活性和丙二醛含量由高至低的顺序依次为肝脏，肌肉，血浆，均有显著性差异；在肌肉和肝脏亚细胞组分中超氧化物岐化酶则胞浆中活性为最，线粒体次之，微粒体中谷胱甘肽过氧化物酶活性最低，肝脏胞浆中谷胱甘肽过氧化物酶活性显著高于线粒体中的活性，     

苦杏仁提取物的抗癌作用及其对移植性肝癌小鼠肝脏细胞色素P-450含量和谷胱甘肽S-转移酶活性的影响

将长白山区苦杏仁中提取的抗癌有效成分(以下简称“ATE”)按300、400、600mg/kg剂量给移值性肝癌小鼠腹腔注射10天(或14天),其肿瘤抑制率分别为72％、60.8％、51.0％。移植性肝癌小鼠肝脏微粒体细胞色素P-450含量比正常小鼠显著下降。当用ATE给药10天,肿瘤生长被抑制的小鼠P-450含量达到正常水平,移植性肝癌小鼠肝胞浆中以1,2-二氯-4-硝基苯(DCNB)为底物的A-C组谷胱甘肽S-转移酶(GST)活性高于正常小鼠,而ATE给药组小鼠的A-C组GST活性有进一步升高的倾向,但是以1-氯-2,4-二硝基苯(CDNB)为底物的B组GST活性无显著变化。肝微粒体B组GST活性在移植性肝癌小鼠有增高倾向,ATE给药组小鼠中,则无显著变化。     

胎儿脏器亚细胞组分中谷胱甘肽S-转移酶活性分布

用差速离心法对胎龄4～7个月水囊引产胎儿的肝、肺、肾、心脏、脾、脑和胃组织的胞浆、线粒体和微粒体进行了分离,并以1.2-二氯-4-硝基苯(CDNB)为底物,测定了上述脏器亚细胞组分中谷胱甘肤S-转移酶(glutathione S-transferase,GST)的活性。结果显示,在上述脏器亚细胞组分中,GST活性主要分布在胞浆,在微粒体和线粒体中亦有分布。以每克湿组织所含GST活性大小顺序排列上述各脏器,依次为脾、心、脑、胃和肝、肾、肺。     

聚焦层析分离人肝精氨酸酶同工酶组分

用聚焦层析结合DEAE-Sephadex A-50离子交换层析,从正常人肝浸液中分离得两个精氨酸酶同工酶组分.经聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)鉴定从聚焦层析得到的第一峰同工酶组分为一条蛋白带,第二峰具有精氨酸酶活性的蛋白组分的主要蛋白带也极明显。各蛋白质成分向阴极电泳的前后顺序与从聚焦层析洗脱的先后次序一致。两型同工酶的比活力分别约为2050U/mg及790U/mg。用SDS-PAGE检测两型同工酶均由两种亚基组成,且分子量近似。     

CYP450含量及CYP2C、GST活性在DAB诱导大鼠肝癌形成过程中的变化

目的：研究肝脏的细胞色素P450（CYP45）的含量,反映CYP2C活性的氨基比林－N－去甲基化酶（ANDM）及谷胱苷肽－S－转移酶（GST）的活性水平在诱导原发性肝癌过程中的变化。方法：用观察肝脏的CYP450的含量,二甲基氨基偶氮苯（DAB）作为诱导剂,喂养Wistar雄性大鼠,ANDM和GST的活性水平。结果：与对照组相比,诱癌组CYP450含量及GST,ANDM的活性在2周时无显性差异,CYP450含量及ANDM的活性在第12,30周时明显降低,GST在12周时明显增高,而在30周时与对照组无差别,在形成肝癌的大鼠肝脏中,肝组织中的CYP450含量水平依次是：癌组织＜癌旁组织＜正常组织。结论：DAB诱导的原发性大鼠肝癌形成过程中肝脏的CYP450的含量有下降的趋势,DAB不能诱导ANDN活性,但能诱导增强GST的活性水平。     

尖吻蝮蛇毒素组双向电泳和二维液相色谱研究

目的：初步研究尖吻蝮蛇蛇毒的蛋白质组分及其活性。方法：利用双向电泳和二维色谱（IEX＋HPLC）分析尖吻蝮蛇蛇毒蛋白质组，并制备分离样品研究蛇毒中酶和毒素活性。结果：双向电泳分离检测得到128种蛋白质，其中24种蛋白质丰度较高，73种为酸性蛋白质，加种为碱性蛋白质。二维色谱展现58种蛋白质，其中26种蛋白质丰度较高。初步活性研究表明，尖吻蝮蛇蛇毒蛋白质多数属于丝氨酸蛋白酶、金属蛋白酶和磷脂酶A2家族，部分蛋白质可能属于去整合素家族。结论：双向电泳和二维色谱相互结合．有效分析了尖吻蝮蛇毒的蛋白盾组成和生物活性．     

已婚妇女宫颈组织乳酸脱氢酶(LDH)及其同工酶谱的观察

应用聚丙稀酰胺圆盘凝胶电泳法观察到已婚妇女正常宫颈组织和宫颈癌组织LDH同工酶谱基本相同,唯正常组织和癌组织的同工酶含量有所不同,癌组织中LDH_4增加;两类宫颈组织的LDH_3均为双带,酷似两种同工酶(即于LDH_2和LDH_3之间有一额外区带,其电泳行为更接近于LDH_3)。应用二硝基苯肼法测得宫颈癌组织LDH总酶活性大于正常相应组织,其差别有高度显著性(P<0.001)。维族和汉族正常宫颈组织LDH总酶活性差别无显著性。     

A comparative study of the effects of cadmium on microsomal mixed-function oxidase activities between kidney cortex and liver

Summary The effects of cadmium and phenobarbital (PB) administration on the activities of microsomal mixed-function oxidase (MFO) in rat kidney cortex and liver were studied. Five indices, including cytochrome P-450 contents, aniline hydroxylase, NADPH-cytochrome c reductase, amino-pyrine N-demethylase and 7-ethoxycoumarin O-deethylase activities, were assayed. By comparison, it was found that PB could induce MFO activities in kidney cortex microsomes and liver microsomes, both hepatic and renal microsomal MFO were decreased by the ip injection of CdCl₂, and Cd²⁺ could markedly decrease the phenobarbital induction to hepatic and renal microsomal MFO activities with the exception of NADPH-cytochrome c reductase in kidney cortex microsomes.     

Ehrlich腹水癌和肺癌带瘤小鼠肝脏某些肿瘤标志酶活性的变化

本文报道Ehrlich腹水癌和肺癌带瘤小鼠肝脏中细胞色素P-450(简称P-450)、UDP-葡萄糖醛酸基转移酶(简称UDP-GT)及乳酸脱氢酶(简称LDH)等肿瘤标志酶活性的变化,并在给有机锗化合物(简称Ge)以抑制肿瘤生长时,观察了上述标志酶的变化。Ehrlich腹水癌带瘤小鼠肝微粒体细胞色素P-450含量低于正常对照组,而UDP-GT的“胚胎型”(O-GT)和“新生儿型”(P-GT)活性及肝细胞浆中LDH活性显著增高。在移植肿瘤后,给Ge以抑制肿瘤生长时,小鼠肝脏P-450含量和UDP-GT及LDH活性趋于正常水平。肺癌带瘤小鼠肝脏O-GT和LDH活性均有显著增高,但P-450含量无显著变化。当移植肿瘤后给Ge以抑制肿瘤生长时,肝微粒体O-GT活性趋于正常水平。实验结果表明,Ge对正常小鼠肝脏P-450有抑制作用,而对UDP-GT的胚胎型(O-GT)则有诱导效应。