HBV DNA定量检测及其与HBV标志物的相关性探讨

目的探讨乙型肝炎病毒(HBV)DNA与不同类型HBV免疫标志物之间的关系,为临床诊断和治疗提供有价值的判断标准。方法采用酶联免疫吸附试验(ELISA法)对220例血清标本进行HBV免疫标志物检测,同时用荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR)检测HBV DNA含量。结果 96例乙型肝炎表面抗原(HBsAg)、乙型肝炎核心抗体(抗-HBc)、乙型肝炎e抗原(HBeAg)阳性(+)标本中HBV DNA阳性检出率为91.7%(88/96);100例HBsAg(+)/抗-HBe(+)抗-HBc(+)标本中HBV DNA阳性检出率为20.0%(20/100)。HBsAg阳性组与HB-sAg阴性组、HBeAg阳性组与HBeAg阴性组的DNA载量比较差异有统计学意义。结论 FQ-PCR可以检测HBV感染的真实性和复制情况,其与ELISA法检测HBV血清标志物相结合,对乙型肝炎的临床诊断及治疗方案的选择、疗效观察及预后判断具有极其重要的作用。     

乙型肝炎病毒核酸荧光定量及血清标志物与肝功能检测的临床意义

目的探讨乙型肝炎病毒(HBV)感染者 HBV DNA 检出情况及其与血清病毒标志物及肝功能在临床应用的意义.方法采用实时荧光定量聚合酶链反应(FQ‐PCR)检测296例不同血清学类型的 HBV 感染者血清中的 HBV DNA ,同时检测 HBV 血清标志物与肝功能.结果99例 HBeAg (+)标本中 HBV DNA 阳性率为100%,平均 HBV DNA 含量为1.21×107 copy/mL ,其 HBV DNA 检出率和含量与 HBeAg(-)模式的检出情况比较差异有统计学意义(P<0.01);HBsAg (+)与 HBsAg (-)模式比较,HBV DNA 检测结果差异有统计学意义(P<0.01);肝功能正常组与肝功能异常组 HBV DNA 检出率比较差异有统计学意义(P<0.01).58例 HBsAg (-)且肝功能又正常的标本中检出了4例 HBV DNA 阳性.结论实时 FQ‐PCR 定量检测 HBV DNA 与 HBV 血清标记物及肝功能指标联合应用可使诊断更准确,治疗更合理.     

56℃ 30 min灭活对新型冠状病毒抗体和生化免疫检测结果的影响

目的探讨血清经56℃30 min灭活对新型冠状病毒(SARS-CoV-2)IgM抗体和生化免疫检测项目结果的影响。方法用密闭的真空采血管采集54例新型冠状病毒感染者或疑似感染者血液标本,离心后分别在56℃30 min灭活处理前后检测新型冠状病毒IgM抗体、术前八项(HCV-Ab、HIV-Ab、TP-Ab和乙肝五项)和常规生化检测,比较未灭活处理和灭活处理后各项指标的差异。结果含20例新型冠状病毒肺炎确诊病例的54例血清标本灭活前后的新型冠状病毒IgM抗体结果完全一致性达94.4%。术前八项灭活前后结果差异无统计学意义(P>0.05)。ALT、ALP、GGT、CK、CK-MB、LDH、Mb等不耐热酶类项目水平灭活前后差异有统计学意义(P<0.05),其余常规生化检测项目血清灭活前后差异无统计学意义(P>0.05)。结论除ALT、ALP、GGT、CK、CK-MB、LDH、Mb等不耐热酶类项目检测外,56℃30 min病毒血清灭活法可用于新型冠状病毒感染者或疑似感染者血液标本的新型冠状病毒IgM抗体、免疫感染类抗原抗体检测和多数生化常规项目检测的前处理。     

妊娠期乙型肝炎病毒感染者前S1抗原检测临床意义分析

目的 探讨乙型肝炎病毒(HBV)前S1抗原(Pre-S1)检测对于妊娠期HBV感染者的临床意义.方法 对120例妊娠期乙型肝炎(简称乙肝)患者血清标本用酶联免疫吸附法检测Pre-S1、时间分辨荧光免疫分析法检测乙肝五项指标、荧光定量聚合酶链反应检测HBV DNA,并对测定结果 进行统计学分析.结果 120例血清标本中共检测出乙肝五项大三阳35例,小三阳44例,其他HBsAg阳性模式41例.大三阳组Pre-S1、HBV DNA阳性率分别为91.4%、85.7%,高于其他各组(P<0.05);小三阳组Pre-S1、HBV DNA阳性率分别为68.2%、59.1%,高于其他HBsAg阳性组(P<0.05);其他HBsAg阳性组Pre-S1、HBV DNA阳性率为34.1%和19.5%.结论 妊娠期妇女血清Pre-S1水平与HBV DNA、HBeAg密切相关,可用于判断HBV复制和传染性,对于预防HBV宫内感染、联合阻断产前及产后HBV母婴传播有重要意义.     

乙肝患者血清中丁肝病毒标志物检测的临床意义

目的 探讨乙型肝炎病毒(HBV)与丁型肝炎病毒(HDV)重叠感染后血清病毒性肝炎标志物的变化,为临床对乙肝患者病情的观察与治疗提供依据.方法 对156例HBsAg携带者,用ELISA法检测HBV和HDV免疫血清标志物(HBVM:HBsAg、抗-HBs、HBeAg、抗-HBe和抗-HBc;HDVM:HDAg和抗-HD),用PCR-荧光探针法检测HBV-DNA指标.结果 156例HBsAg携带者血清HDVM检出率为10.26%,HBV复制活跃组HDVM检出率为3.13%,较HBV复制缓慢组HDVM检出率21.67%明显低(P<0.001),HBV重叠感染HDV患者血清中HBV-DNA的检出率均明显低于单一HBV感染者,P<0.05.结论 HBV重叠感染HDV后,HDV复制可抑制HBV的复制和表达.     

乙型肝炎血清学标志物与HBV DNA的相关性分析

目的探讨乙型肝炎HBV DNA与乙型肝炎病毒血清标志物(HBV-M)之间的相关性。方法将400例血清标本采用荧光定量聚合酶链式反应(FQ-PCR)检测HBV DNA,并同时采用ELISA法检测HBV-M,按照不同的HBV-M模式分组进行分析。结果 131例HBeAg阳性标本中HBV DNA阳性率为100.0%,与HBeAg阴性标本的阳性率比较,差异有统计学意义(P<0.01);HBsAg阳性标本和HBsAg阴性标本比较,HBV DNA检测结果差异有统计学意义(P<0.01)。结论 HBV DNA检测在各种模式的HBV-M阳性血清中检出率相差较大,HBeAg和HBsAg阳性者HBV DNA阳性率较高。说明仅仅依靠HBV-M进行早期诊断以及判断患者是否具有传染性是不够的,同时检测HBV DNA和HBV-M有助于乙型肝炎的早期诊断、疗效观察和预后判断。     

原发性肝癌570例血清HBV标志物检测分析

目的 进一步探讨乙型肝炎与原发性肝癌的相关性.方法 采用微粒子免疫分析法(MEIA),用ABBOTT,AXSYM免疫全自动分析仪测定乙肝5项指标.结果 原发性肝癌患者中HBV感染率为91.19%.其中HBsAg阳性感染者占72.77%,HBsAg阴性感染者占18.42%.结论 HBV感染是导致原发性肝细胞癌的重要因素,HBsAg阴性的HBV感染者不能忽视.     

深圳市外来劳务工乙型肝炎血清学检测分析

目的了解2007~2009年深圳市外来劳务工乙型肝炎感染模式和状况,探讨乙肝5项和HBV DNA检出率之间的关系,为深圳市劳务工群体乙型肝炎的预防和控制提供科学依据。方法利用酶联免疫吸附法(ELISA)和实时荧光定量PCR法对2007~2009年1 226份深圳市外来劳务工的血清标本进行乙肝5项检测和HBV-DNA测定。结果深圳市外来劳务工乙肝5项异常者的HBV DNA总阳性率为48.94%。共发现7种HBV感染模式,小三阳患者占HBV感染总例数的49.67%,大小三阳HBV DNA的检出率分别为94.11%和21.67%。20~30岁的青年劳务工乙肝感染人数在A-G感染模式中均超过该模式感染者总数的50%以上。结论深圳市外来劳务工乙肝5项异常者近半数携带HBV DNA,必须加强对大三阳和模式D组(HBsAg阳性和抗-HBc阳性)感染者以及20~30岁的青年劳务工的HBV DNA的监测,从而对外来劳务工HBV感染者的传染性进行正确的评估,为乙肝的防护和治疗提供依据。     

血清乙型肝炎病毒大蛋白水平与病毒复制程度的关系

目的 探讨慢性乙型肝炎病毒(HBV)感染者血清大蛋白(HBV-LP)水平与HBV复制程度的关系.方法 采用酶联免疫吸附试验(ELISA)法对血清HBV-LP进行检测;乙型肝炎病毒表面抗原(HBsAg)、乙型肝炎病毒e抗原(HBeAg)采用微粒子酶免疫分析法(MEIA)检测;HBV DNA利用实时荧光定量聚合酶链反应(PCR)技术检测.结果 293份HBsAg阳性血清中HBV-LP阳性检出率(75.1%)与HBV DNA阳性检出率(74.4%)差异无统计学意义(P＞0.05).血清HBV-LP与HBV DNA水平具有良好的正相关性(r=0.724),在HBeAg阳性患者中,HBeAg定量结果与HBV DNA水平具有一定的相关性(r=0.368).结论 HBV-LP较HBeAg能够更好地反映血清HBV DNA水平,HBeAg阳性患者HBeAg定量检测值也在一定程度上反映出血清HBV DNA水平.     

HBV-LP在乙型肝炎诊断及判断预后中的作用

目的探讨乙肝病毒大蛋白(HBV-LP)与乙型肝炎病毒复制的关系和在诊断和预后中的作用。方法采用ELISA和荧光定量PCR(FQ-PCR)法,检测200例HBsAg阳性患者血清中HBV-LP、HBVM、HBV DNA和60例经拉米夫定治疗半年的乙型肝炎患者血清HBVM、HBV DNA,并与HBV DNA作对比分析。结果 200例HBsAg阳性患者中,HBeAg与HBV-LP和HBV DNA的阳性检出率差异有统计学意义(P0.05),HBV-LP与HBV DNA的阳性检出率差异无统计学意义(P0.05);60例抗病毒治疗患者血清HBV-LP和HBV DNA阳性检出率差异无统计学意义(P0.05)。结论 HBV-LP能准确反映乙肝病毒在人体内感染和复制情况,动态检测HBV-LP的变化有助于临床评估乙型肝炎的治疗效果。     

HBsAg和抗-HBs双阳性模式分析及临床意义

目的分析乙型肝炎病毒(HBV)血清标志物乙型肝炎表面抗原(HBsAg)和乙型肝炎表面抗体(抗-HBs)同时阳性的感染模式,探讨此类模式的产生原因及其临床意义。方法应用时间分辨免疫荧光分析法定量检测10 939例血清标本,从中筛选出HBsAg和抗-HBs同时阳性的标本,进而分析其检测结果 ,并与酶联免疫吸附试验(ELISA)检测的12000例血清标本得到的HBsAg和抗-HBs同时阳性的结果进行比较。结果定量检测10939例血清标本,其中HBsAg阳性3 338例,阳性率为30.5%,HBsAg和抗-HBs同时阳性者占0.8%(28/3 338);ELISA定性检测12 000例标本,HBsAg和抗-HBs同时阳性者占0.3%(12/12 000),统计学分析两种方法在检测HBsAg和抗-HBs同时阳性的结果 ,差异有统计学意义(P0.05)。该28例表现出4种类型HBV血清学指标的组合方式,以HBsAg、乙型肝炎e抗原(HBeAg)、乙型肝炎核心抗体(抗-HBc)阳性模式和HBsAg、乙型肝炎e抗体(抗-HBe)、抗-HBc阳性模式为主,分别有8例和17例;HBsAg、抗-HBs和抗-HBc阳性模式1例;其余2例仅HB-sAg和抗-HBs双阳性。结论 HBsAg和抗-HBs同时阳性虽然少见,但具有一定的临床意义,应当引起实验室和临床的注意。     

乙型肝炎病毒表面抗原和表面抗体同时阳性样本的体外中和反应特性分析

目的 研究同时阳性样本的乙型肝炎病毒(HBV)表面抗原(HBsAg)和乙型肝炎病毒表面抗体(抗-HBs)的体外中和反应特性.方法 运用化学发光定量检测技术在HBsAg阳性样本中收集抗-HBs同时阳性的样本血清作为研究对象;选择单纯HBsAg阳性的样本和单纯抗-HBs阳性的样本分别与同时阳性的研究组样本中的抗-HBs和HBsAg进行体外血清学中和反应,测定中和物中的HBsAg和抗-HBs含量;测定HBsAg单阳性样本的基因型和HBsAg亚型,记录各测定结果.结果 获取1例HBsAg(130.21 ng/mL)和抗-HBs(50.6 U/L)双阳性样本,HBV基因型为B型,HBsAg亚型为adw;20例HBsAg单阳性样本中有6例能中和研究组样本中的抗-HBs(中和物抗- HBs≤6.5 U/L);20例抗-HBs单阳性样本均能中和研究组样本中的HBsAg(中和物HBsAg≤0.06ng/mL).结论 同时阳性样本中的抗-HBs不是与其共存的HBsAg的特异性抗体.     

病毒性肝炎血清标志物检测结果分析

目的了解血清抗-HAV IgM、HBsAg和抗-HCV的应用情况,并探讨抗-HEV IgM的临床应用。方法对2002年11月1日-2004年10月31日送检的血清标本抗-HAV IgM、HBsAg及抗-HCV检测结果进行回顾性分析,并对其中786份标本检测抗-HEV IgM。结果抗-HAV IgM阳性12例(0．43％),HBsAg阳性9673例(17．69％),抗-HCV阳性56例(0．71％),抗-HEV IgM阳性63例(8．02％)。结论应加强肝功能正常的普通人群的血清抗-HCV检测和肝功能显著异常患者的血清抗-HEV IgM检测。     

HBsAg/TP联合全血金标试纸条在无偿献血筛查中的应用

目的评价乙型肝炎病毒表面抗原／梅毒螺旋体（HBsAg／TP）联合全血金标试纸条在无偿献血筛选中的应用。方法采用卫生部临床检验中心的HBsAg、梅毒抗体临床科研血清盘对联合检测HBsAg／TP的金标试纸条进行灵敏度、特异性的测试。选择本站2001～2005年7月TRUST、TP—ELISA法检测为阳性或可疑反应的107份血样;单-HBsAg阳性和单一梅毒抗体阳性血样进行1：1混合的30份血样,以及100份随机初筛血样,采用试纸条进行测试;再用两种不同厂家生产的TP—EI。ISA和TPPA法试剂对以上血样进行检测,最后对检测结果进行综合评估。结果HBsAg／TP联合检测金标试纸条对梅毒的敏感性为92％,特异性为100％;对HBsAg的敏感性为80％,特异性为100％。结论HBsAg／TP联合全血金标试纸条可用于无偿献血者的筛查,有助于确保血液质量,降低血液报废率,值得推广应用。     

低水平血清乙肝病毒表面抗原测定及其临床意义

目的：了解低水平血清乙肝病毒表面抗原(HBsAg）的人群分布及其相关乙肝病毒血清标志物模式特征。方法：微粒子酶免疫分析技术测定8089例非肝炎病芡住院患者血清HBsAg及其表面抗体（抗－HBs）、乙肝病毒e抗原及其e抗体（HBeAg、抗－HBe）和乙肝病毒核心抗体（抗－HBc）;根据定值参比血清和样本的HBsAg荧光速率值／阴性对照荧光速率值之比值（S／N值）,并结合中和试验结果,确定浓度在5μg/L以下的HBsAg阳性例数,并分析相关乙肝病毒（HBV）血清标志物模式。结果:共检出HBsAg阳性816例,HBsAg浓度在5μg/L以下的有189例,占总数的2.34％,占HBsAg阳性人群的23.16％。其中,HBsAg浓度在1μg/L以下的有84例（44.40％）;1－2μg/L的有33例（17.5％）;2－5μg/L的有72例（38.10％）。对上述低水平HBsAg人群的5项HBV血清标志物检测获得8种模式,以“HBsAg、抗－HBc、抗－HBe阳性”,“HBeAg和抗－HBs阴性”模式为主（74.60％）;累计HBsAg和抗－HBc同时阳性者占94.17％;HBsAg与抗－HBs同时阳性只出现在HBsAg1μg/L以下人群中（6.45％）。结论：低水平血清HBsAg人群不容忽视,提高HBsAg检测灵敏度有重要意义;同时检测相关HBV血清标志物,对于确定上述人群有帮助。     

肝细胞性肝癌合并不同模式乙型肝炎血清标志物的临床分析

目的探讨肝细胞性肝癌(HCC)合并不同模式乙型肝炎血清标志物的意义,为HCC的普查、预防和临床诊断提供依据。方法筛选HCC患者标本840例,使用美国雅培公司提供的ARCHITECT i2000_(SR)化学发光免疫定量分析仪进行乙型肝炎血清标志物的检测,根据乙型肝炎血清标志物不同模式分成14组。结果 1)在不同模式乙型肝炎血清标志物中HCC检出率:A组HBsAg(+)、抗-HBe(+)、抗-HBc(+)"小三阳"模式为59.29%(498/840);B组HBsAg(+)、HBeAg(+)、抗-HBc(+)"大三阳"模式为20.48%(172/840),其他12组中均有HCC检出,与A组和B组比较差异有统计学意义(P0.01)。2)在HCC患者中乙型肝炎血清标志物的检出率为抗-HBcHBsAg抗-HBeHBeAg抗-HBs。结论 1)对于既往感染乙型病毒性肝炎或感染后恢复以及亚临床感染的患者均有HCC发生的可能,除了高危人群,以上人群均需重视定期体检。2)HBsAg(+)和抗-HBc(+)与HCC的发生均存在相关性,而抗-HBc比HBsAg等其他乙型肝炎血清标志物更具敏感性。     

A new HBsAg screening assay designed for sensitive detection of HBsAg subtypes and variants

The design of a new HBsAg screening assay, the Hepanostika HBsAg Ultra is based on the use of monoclonal antibodies raised against native wild-type HBsAg and reactive with HBsAg in which the common 'a'-determinant is modified by site-directed mutagenesis of four of the cysteine moieties. The design was checked using the same cysteine variants and samples from patients known to be infected with HBsAg variants. The results found were compared with other state-of-the-art commercial screening assays. The design of the Hepanostika HBsAg Ultra enabled detection of all variant HBsAg-positive samples in contrast to the other commercial assays. An additional 980 samples were tested to assess the specificity and sensitivity of the Hepanostika HBsAg Ultra. Screening of presumed negative serum and plasma samples resulted in a specificity of 100%. This makes the Hepanostika HBsAg Ultra the first screening assay with a design able to detect HBsAg variants with high sensitivity and specificity.     

荧光定量PCR检测HBVDNA与血清HBV标志物的关系

目的　探讨荧光定量 PCR检测血清 HBVDNA与血清 HBV标志物的关系。方法　采用酶联免疫吸附法(ELISA)和荧光定量 PCR(FQ- PCR)两种方法同时检测 357份肝炎患者血清 ,并对结果进行对比分析。结果　肝硬化组HBVDNA含量明显低于 HBs Ag携带者组 (P<0 .0 5)。血清 HBs Ag、抗 - HBc、HBe Ag阳性组 HBVDNA含量明显高于HBs Ag、抗 - HBc、抗 - HBe和 HBs Ag、抗 - HBc阳性组 (P<0 .0 1 ) ,而后两组 HBVDNA检出率仍较高。结论　 FQ- PCR可真实反映 HBV感染、复制及病程变化 ,对乙型肝炎临床诊断及治疗均有较大的指导意义     

金免疫层析试验检测HBsAg等项目结果分析

目的 比较金免疫层析试验(GICA)与酶联免疫吸附试验(ELISA)检测乙型肝炎病毒表面抗原(HBsAg)的结果符合率,以了解GICA的特异性与敏感度.方法 用GICA和ELISA平行检测受检者血清标本HBsAg.结果 通过1 205份血清样本的分析,发现GICA和ELISA检测HBsAg的结果符合率为99.09%,GICA检测HBsAg存在漏检(即假阴性).结论 GICA较ELISA敏感度低,用GICA检测HBsAg等项目存在一定程度的漏检率,GICA只能筛查HBsAg,检测HBsAg低含量的血清标本不宜使用.GICA快速诊断法可用来大规模普查人群HBsAg的感染情况,也适用于临床急症标本等快速检测的需要.     

HBsAg阴性及弱反应性标本的检测及临床意义

目的探讨ELISA两步法、化学发光法、荧光定量PCR定量技术对HBsAg阴性及弱反应性标本的检测及其临床意义,为提高临床检测准确率提供借鉴。方法收集医院门诊和住院受检者经ELISA一步法检测的乙肝两对半4种模式标本(模式1:仅HBeAb阳性;模式2:仅HBcAb阳性;模式3:HBcAb阳性和HBeAb阳性;模式4:HBsAg均为弱反应性的标本),用ELISA两步法及化学发光法检测,再对经化学发光法检测HBsAg结果为阳性的标本用FQ-PCR检测乙肝病毒DNA载量。结果仅HBeAb阳性的标本,共2例,ELISA两步法结果显示HBsAg均为弱反应性,化学发光法结果为阴性;仅HBcAb阳性的标本121例,ELISA两步法结果示HBsAg呈弱反应性者为26例(占21.5%),化学发光法结果阳性8例(占16.7%);HBcAb阳性和HBeAb阳性的标本55例,ELISA两步法HBsAg结果呈弱反应性的为25例(占45.4%),化学发光法结果阳性14例(占25.5%),其中7例用常规PCR方法检测结果拷贝数均小于5.0*102;HBsAg为弱反应性的标本59例,ELISA两步法弱反应性的结果均在临界值附近,化学发光法结果均为阳性。结论对于HBsAg阴性及弱反应性的临床标本,最好采用化学发光法检测或者进行确证试验。