环孢菌素A对白血病细胞株HL60和HL60／DNR P糖蛋白功能的影响

目的 克服白血病细胞的多药耐药性（ＭＤＲ）。方法 用流式细胞仪分析单抗ＵＩＣ２标记ＨＬ６０、ＨＬ６０／ＤＮＲ Ｐ糖蛋白（Ｐｇｐ）的表达，了解细胞株摄取和滞留荧光素Ｒ１２３的功能，并观察环孢菌素Ａ（ＣｓＡ）和丙磺舒（Ｐｂｃ）对细胞株上Ｐｇｐ的逆转作用。结果 ＨＬ６０／ＤＮＲ高度表达Ｐｇｐ，且可被ＣｓＡ逆转，使细胞内荮物浓度达到敏感细胞株水平。Ｐｂｃ不能逆转ＨＬ６０／ＤＮＲ。结论 ＣｓＡ对ＨＬ６０／Ｄ     

环孢菌素A逆转顺铂耐药性的初步研究研究

免疫抑制剂环孢菌Ａ对实验性肿瘤细胞耐药性的逆转已为研究者接受，本文采用自身对照法，初步观察了小剂量ＣｓＡ静脉／动脉灌注对顺铂治疗晚期复发性或耐药性卵巢癌的化疗增效作用４例患者共进行３９个疗程化疗，近期缓解率为４２．８６％，且副反应轻，提示；ＣｓＡ作为ＤＤＰ的增效剂用于临床，可提高复发性卵巢癌的治疗效果。     

Thapsigargin逆转K562/A02细胞多药耐药性的实验研究

目的 探讨内质网Ca^2 -ATP酶抑制剂thapsigargin对白血病多药耐药细胞株K562／A02化疗敏感性的影响。方法 用MTT比色法检测K562／A02细胞耐药性、thapsigargin的增殖抑制活性及其对K562／A02细胞化疗敏感性的影响；丫啶橙(AO)／溴化乙锭(EB)染色荧光显微镜观察thapsigargin处理后K562／A02细胞形态改变；流式细胞仪(FCM)检测P-糖蛋白(P-gp)表达；荧光显微镜检测Pgp功能。结果 ①thapsigargin对K562和K562／A02细胞的增殖抑制活性呈剂量和时间依赖性，K562／A02细胞较K562细胞对thapsigargin更敏感，thapsigargin诱导K562／A02细胞呈现典型的凋亡细胞形态学改变。②K562／A02细胞对阿霉素(ADM)、柔红霉素(DNR)、长春新碱(VCR)、依托泊苷(VP-16)、高三尖杉酯碱(HHT)和米托蒽醌(MXT)均出现不同程度的耐药性；thapsigargin抑制K562／A02细胞P-gP功能而对其表达无影响，thapsigargin能增加K562／A02细胞对ADM、DNR、VCR、VP-16、HHT和MXT的化疗敏感性。结论 Thapsigargin能诱导白血病多药耐药细胞株K562／A02细胞凋亡并能部分逆转K562／A02的多药耐药性；thapsigargin的多药耐药逆转功能可能与其凋亡诱导作用和抑制PgP功能有关。     

环孢素联合化疗逆转急性白血病多药耐药的临床研究

目的: 探讨环孢素(cyclosporinA,CsA)联合化疗逆转急性白血病(acute leukemia,AL)多药耐药(multi drug resistance,MDR)的临床疗效。方法: 28例急性白血病患者随机分成逆转组(CsA联合化疗)和对照组(单用化疗),且对16例逆转组患者进行P-糖蛋白(P-gp)测定。结果: 逆转组总有效率68.8%,复治患者的完全缓解(CR)7/10,均高于对照组的总有效率(25.0%)和复治患者CR(1/8),差异均有显著性(P<0.05)。结论: CsA联合化疗可以克服白血病细胞的MDR,而且随着白血病细胞P-gp阳性表达率增高,CsA的耐药逆转作用可能会越明显。     

环孢菌素A逆转顺铂耐药性的初步临床研究

免疫抑制剂环孢菌素A(CsA)对实验性肿瘤细胞耐药性的逆转已为研究者接受.本文采用自身对照法,初步观察了小剂量CsA静脉/动脉灌注对顺铂(DDP)治疗晚期复发性或耐药性卵巢癌的化疗增效作用.14例患者共进行39个疗程化疗,近期缓解率为42.86%,且副反应轻.提示:CsA作为DDP的增效剂用于临床,可提高复发性卵巢癌的治疗效果.     

多药耐药P糖蛋白检测与急性白血病预后相关性研究

目的：探讨多药耐药（ＭＤＲ）Ｐ糖蛋白（Ｐ１７０）表达与急性白血病预后有关。方法：采用抗Ｐ１７０单克隆抗体ＪＳＢ－１及碱性磷酸酶抗碱性磷酸酶免疫细胞化学技术检测８６例（１０４例次）急性白血病骨髓细胞Ｐ１７０表达。结果：Ｐ１７０阳性率难治组为７６．９％（１０／１３），复发组４０．９％（９／２２），初治组２７％（１０／３７），完全缓解组１８．８％（６／３２）。初治组Ｐ１７０阴性病例首次诱导完全缓解（ＣＲ     

环孢菌素A异搏定辅助化疗治疗成人难治性白血病22例临床观察

化疗增敏剂环孢菌素Ａ、异搏定辅助联合化疗，治疗２２例成人难治性白血病，１７例完全缓解，３例部分缓解，２例无效，总有效率９０％（２０／２２），其主要副作用为骨髓抑制、消化道反应和心脏毒性。提示环孢菌素Ａ、异搏定辅助联合化疗是治疗难治性白血病的有效办法。     

环孢菌素A在难治性肾病综合征的应用

环孢菌素Ａ在难治性肾病综合征的应用孙安远（广西医科大学第一附属医院肾内科南宁５３００２１）环孢菌素Ａ（ＣｙｃｌｏｓｐｏｒｉｎＡ．ＣｓＡ）是近年问世的新型强效免疫抑制剂，临床上主要用于器官移植。近年来ＣｓＡ也应用于免疫介导所致疾病的治疗并在治疗难治性肾...     

环孢菌素A治疗免疫性皮肤病新进展

<正>自1978年环孢菌素A（cyclosprinc A,CSA）,应用于临床,首先用于预防和治疗器官移植排斥反应和移植抗宿主病。近来,此药在皮肤科临床领域进行了大量的研究,国内外文献报道较多,西方着重介绍有关CSA治疗免疫性皮肤病的一些新进展。     

多药耐药逆转剂抗白血病细胞多药耐药性的作用

白血病细胞对化疗药物产生多药耐药性是联合化疗失败的最重要原因之一.虽然大量研究表明白血病耐药的机制很多,包括细胞膜药物泵分子的诱导、细胞浆内药物代谢酶活性或代谢途径的改变、白血病细胞凋亡机制的改变等,但P-糖蛋白(P-glycoprotein,P-gp)在白血病细胞膜上的表达仍是目前研究发现最主要的耐药机制.     

冬凌草甲素逆转多药耐药细胞系K562/A02耐药性的研究

目的：探讨冬凌草甲素对多药耐药细胞系K562／A02耐药性的逆转作用。方法：以柔红霉素（DNR）和高三尖杉酯碱（HHT）联合不同浓度的冬凌草甲素处理K562／A02及敏感细胞系K562／S，以四唑盐比色法（MTT）检测两种化疗药物的半数抑制浓度（IC50），以流式细胞仪检测P170蛋白的表达与细胞内DNR的浓度。结果：冬凌草甲素可明显减小K562／A02细胞对DNR，HHT的IC50，降低耐药倍数，下调P170蛋白的表达，增高细胞内DNR的浓度，而对K562／S细胞无显著影响。结论：冬凌草甲素可逆转药细胞系K562／A02的耐药性，是一种很有希望的抗白血病中药。     

汉防己甲素联合屈洛昔芬逆转K562/A02细胞耐药的研究

目的 :探讨汉防己甲素 (Tet)联合屈洛昔芬 (Drol)对耐药细胞系K5 62 /A0 2的逆转作用。方法 :采用四甲基偶氮唑盐比色法 (MTT法 )测定柔红霉素 (DNR)的细胞毒性。结果 :1μmol·L-1Tet、5 μmol·L-1Drol均能增加DNR对耐药细胞系K5 62 /A0 2的细胞毒作用 ,半数抑制量 (IC50 )分别为 (7.2 8± 2 .0 6)mg·L-1和 (7.5 8± 3 .44 )mg·L-1,逆转倍数分别为 2 .94和2 .82倍。两药联合应用后作用明显增强 ,IC50 为 (1.66± 0 .41)mg·L-1,逆转倍数达 12 .9倍。结论 :单独应用Tet、Drol可部分逆转K5 62 /A0 2细胞的耐药性 ,两药联用具有明显协同效应。     

Reversal effect of bufalin on multidrug resistance in K562/VCR vincristine-resistant leukemia cell line

ObjectiveTo probe insights into the reversal effect of bufalin on vincristine-acquired multidrug resistance (MDR) in human leukemia cell line K562/VCR.MethodsProliferative inhibition rate and the reversal index (RI) of bufalin were determined by Methyl thiazolyl tetrazolium assay. The uptake of Adriamycin (ADM) in K562/VCR cells, cell cycle and apoptosis rate were determined by flow cytometry (FCM). Cell morphologic changes were observed with Wright-Giemsa staining. The expression of P-glycoprotein (P-gp), multidrug-associated protein-1 (MRP1), Bcl-xL and Bax protein were measured by immunocytochemistry.ResultsThe human leukemia multidrug resistant K562/VCR cells showed no cross-resistance to bufalin. The RIs of bufalin at concentrations of 0.0002, 0.001 and 0.005 μmol/L were 4.85, 6.94 and 14.77, respectively. Preincubation of 0.001 μmol/L bufalin for 2 h could increase intracellular ADM fluorescence intensity to 28.07% (P<0.05) and down-regulate MRP1 expression simultaneously, but no remarkable effect was found on P-gp protein. Cell cycle analysis indicated increased apoptosis rate and apparent decreased G2/M phase proportion after treatment with bufalin. When exposed to 0.01 μmol/L bufalin, typical morphological changes of apoptosis could be observed. Down-regulation of Bcl-xL and up-regulation of Bax expression in K562/VCR cells could be detected by immunocytochemistry.ConclusionBufalin could partly reverse the MDR of K562/VCR cells, with a possible mechanism of down-regulating MRP1 expression and activating apoptosis pathway by altering Bcl-xL/Bax ratio.     

汉防己甲素逆转白血病细胞株K562/A02耐药的机制

目的:研究汉防己甲素（TTD）对白血病细胞株K562/A02多药耐药(MDR)逆转的机理。方法：以白血病细胞系K562及其耐药细胞系K562/A02为TTD作用的靶细胞。细胞水平检测实验分5组（K562组、K562/A02组、K562+ADM组、K562/A02+ADM组和K562/A02+TTD+ADM组）,采用MTT法检测TTD对K562和K562/A02细胞的非细胞毒性剂量,流式细胞术检测细胞内阿霉素(ADM)的浓度,基因、酶学、蛋白水平检测实验分3组（K562组、K562/A02组和K562/A02+TTD组）,采用RT-PCR法检测mdr1 mRNA的表达,免疫细胞化学方法检测谷胱甘肽S转移酶π（GST-π）和拓扑异构酶Ⅱ（Topo Ⅱ）的表达水平,Western-blotting法检测P-糖蛋白（P-gp）和bcl-2表达。结果：1.562 5 mg•L^-1的TTD处理K562/A02细胞后,细胞内ADM的浓度较单用ADM组明显提高（P<0.01）;与空白对照组比较,K562/A02细胞内mdr1 mRNA/P-gp的表达量减少（P<0.01）;GST-π和TopoⅡ表达无明显变化;凋亡抑制基因bcl-2的表达量减少（P<0.01）。结论:TTD主要通过增加细胞内ADM浓度,下调mdr1/P-gp和bcl-2表达逆转耐药。     

甲基莲心碱、红霉素对K562/A02细胞内谷胱甘肽含量的影响

目的：探讨甲基莲心碱（Nef）、红霉素（EM）对K562/A02细胞内谷胱甘肽（GSH）含量的影响,及其对白血病细胞代谢解毒系统介导的多药耐药（MDR）的逆转作用。方法：采用生物化学DTNB法测定细胞内GSH含量。结果：K562/A02细胞内GSH含量为（137.34±33.10）mg/mgprot,高于K562细胞内GSH含量（73.38±10.02）mg/mgprot（P<0.05）,且为K562细胞的1.87倍;Nef 10 mg/L,EM 100 mg/L,Nef 10 mg/L+EM 100 mg/L,维拉帕米（VRP）5 mg/L处理2 d后K562/A02细胞内GSH含量分别为（69.01±15.99）mg/mgprot,（70.57±11.93）mg/mgprot,（65.74±13.37）mg/mgprot, （70.86±16.16） mg/mgprot,均较无药组含量(137.34±33.10)减低（P<0.05）。结论：细胞内GSH含量增高是K562/A02细胞产生MDR的机制之一;Nef,EM能使K562/A02细胞内GSH含量下降可能是其逆转耐药白血病细胞MDR的机制之一。     

槲皮素对K562/A02细胞多药耐药基因及糖蛋白表达的影响

目的：观察槲皮素对K562耐药细胞多药耐药基因及蛋白表达的影响，探讨其临床应用的可能性。方法：以浓度为0．5～100μmol／L的槲皮素处理K562／A02细胞，24h后，采用逆转录-多聚酶链反应(RTPCR)方法检测细胞内mdrl基因表达，应用流式细胞仪检测P糖蛋白(Pgp)含量变化。结果50μmol／L以上浓度处理组的mdrl基因表达较空白对照组明显下调。经0．5～100μmol／L槲皮素处理的K562／A02细胞荧光标记Pgp有随槲皮素浓度增加而减弱的趋势。结论：较高浓度的槲皮素可下调K562／A02细胞mdrl基因的表达。槲皮素可下调K562/A02细胞Pgp的表达。     

反义核酸逆转Hep-2v细胞多药耐药的研究

目的：探讨克服肿瘤细胞的多药耐药(multidrug resistance,MDR)的有效方法。方法：用反义硫代磷酸寡聚脱氧核苷酸(asODN)对Hep-2v细胞进行多药耐药(MDR)逆转实验，(1)将Hep-2细胞经长春新碱(vcR)筛选建立Hep-2v耐药细胞株为靶细胞；(2)针对mdrl mRNA序列计算机辅助设计人工合成两个15mer反义寡聚脱氧核苷酸序列：asODN Ⅰ、Ⅱ，以硫代法修饰，其中序列Ⅰ和Ⅱ的作用位点相邻接，互补位点为MDR-mRNA的330～359碱基；(3)MDR逆转实验：两个反义序列分别或联合作用于Hep-2v细胞，MTT法测定反义核酸作用前后vcR对Hep-2v细胞IC50，比较其细胞毒作用；用流式细胞仪(FcM)检测反义核酸作用后各实验组细胞表面糖蛋白P-170的阳性率；RT-PCR法检测mdrl mRNA表达水平。结果：两个反义核酸均使Hep-2v细胞的P-170阳性率下降，mdrl mRNA水平低调，VCR对Hep-2v的细胞毒作用IC50从900nmol/L降至＜200nmol／L。结论：两个反义核酸用于Hep-2v的MDR均获得明显的逆转效果，序列Ⅰ Ⅱ联合作用的效果更强，表明两个序列可能有协同作用。     

甲孕酮联合苦参碱对耐药细胞株K562/AO2多药耐药逆转作用的研究

目的应用甲孕酮(MPA)联合苦参碱(MAT)逆转人白血病细胞株K562/AO2对阿霉素的耐药性,观察联合用药逆转耐药的疗效。方法用MTT法检测MPA与MAT的细胞毒性,荧光分光光度法检测各组细胞内药物(ADM)浓度的改变,流式细胞仪测定细胞凋亡的情况,流式细胞术检测细胞的p-gp表达情况。结果(1)确定了甲孕酮及苦参碱对K562/AO2细胞的非细胞毒性剂量和低细胞毒性剂量,确定了非细胞毒性剂量的两药联合应用后未出现毒性叠加。(2)在与ADM合用时,K562/AO2+甲孕酮及K562/AO2+苦参碱组,细胞凋亡百分率均高于K562/AO2耐药组(P<0.05,P<0.01),但均低于K562/AO2+甲孕酮+苦参碱组(P<0.01,P<0.05)。(3)与K562比较,K562/AO2细胞中P-gP呈高表达;与K562/AO2耐药组比较,K562/AO2十苦参碱组及K562/AO2+甲孕酮组P-gp表达量降低(P<0.01),但当两者联合应用时作用大于两者单独作用。(4)与ADM组比较苦参碱、甲孕酮均能提高K562/AO2细胞内ADM浓度,P均<0.01,两者联合应用时作用大于两者单独作用。结论非细胞毒性剂量的...     

Comparison of antileukemic immunity mediated by dendritic cells derived from multidrug resistant leukemia K562/A02 cells and sensitive K562 cells

Dendritic cells (DCs), as the most potent antigen presenting cells in vivo, are central to generating specific immune responses and can be used as important vectors in antitumour immunity. DCs loaded with tumour antigens can induce specific antitumour response in cytotoxic T lymphocytes (CTL) . P-glycoprotein ( P-gp), a product of mdrl gene, widely overexpressed in many multidrug resistant (MDR) tumour cells, is a main mechanism that makes tumour cells escape from death induced by chemotherapeutic agents.     

小剂量环孢素A逆转肾癌细胞多药耐药及其机制探讨

目的 探讨小剂量环孢素Ａ对肾癌细胞多药耐药的逆转及其机制。方法 通过体外实验用ＭＴＴ法测定逆转前后肾癌细胞存活率,检测逆转前后Ｐ糖蛋白表达情况。结果 小剂量环孢素Ａ（≤１ｍｇ／Ｌ）可以逆转ＲＣＣ ９２５肾癌细胞对阿霉素和长春新碱的耐药,还可诱导ＲＣＣ ９２５肾癌细胞表达Ｐ糖蛋白水平增高。结论 人体最大耐受剂量之内的环孢素Ａ可以逆转ＲＣＣ ９２５肾癌细胞的多药耐药,其机制与Ｐ糖蛋白表达有关。