冰蜜生肌膏对兔成纤维细胞增殖影响的实验研究

目的:观察冰蜜生肌膏促进体外培养兔成纤维细胞增殖的影响。方法:采用消化分离法进行兔成纤维细胞的原代培养,通过形态学和免疫组织化学的方法鉴定成纤维细胞。第3代纯化的成纤维细胞分为5组,空白对照组每孔加入等量的PBS,实验组每孔分别加入125、62·5、31·25、15·625mg/ml的冰蜜生肌膏提取液进行培养,培养24、48、72h后分别行MTT法检测每孔的光吸收值（OD值）。结果:冰蜜生肌膏提取液加入到成纤维细胞中培养24、48、72h后,经MTT法检测,不同浓度（浓度分别为125、62·5、31·25、15·625mg/ml）冰蜜生肌膏与对照组OD值比较差异有显著性统计学意义（P<0·05）。结论:15·625mg/ml浓度冰蜜生肌膏对成纤维细胞的生长有明显促进作用（P<0·05）,药物浓度在15·625⁶2·5mg/ml时其作用随药物浓度升高而增加,并在浓度为62·5mg/ml时达到最大效应值（P<0·01）,当药物浓度大于62·5mg/ml时则作用趋向于饱和,提示一定浓度范围内的冰蜜生肌膏药液能明显增加成纤维细胞数量,且促进作用和浓度呈显著依赖性。     

芦荟生肌膏精提液对内毒素刺激的成纤维细胞增殖的影响

目的:观察芦荟生肌膏精提液对内毒素刺激的成纤维细胞增殖的影响。方法:在不同浓度的芦荟生肌膏精提液的作用下,通过MTT法检测芦荟生肌膏精提液对内毒素(LPS)刺激的成纤维细胞增殖的影响,并在光镜下观察各组细胞的形态学改变。结果:与对照组比,LPS刺激组形态学观察有明显改变,LPS显著抑制成纤维细胞的增殖(P0.001);与LPS刺激组相比,加入不同浓度中药精制提取液后,可以不同程度地减轻LPS的抑制作用,成纤维细胞的增殖恢复,各组形态学观察也有相应程度的改变,其中以大剂量组最为明显(P0.01)。结论:内毒素(LPS)可以显著抑制体外成纤维细胞的增殖,镜下表现为细胞稀疏,生长减慢,细胞形态拉长。芦荟生肌膏精提液对LPS刺激的成纤维细胞增殖有保护作用,可以拮抗LPS的抑制作用,恢复成纤维细胞的增殖,提示芦荟生肌膏可以通过促进成纤维细胞的增殖而促进直肠创面组织的愈合。     

IFN-γ对乳腺癌溃疡创面组织中成纤维细胞的影响

目的:通过体外培养人乳腺癌难愈合创面中成纤维细胞,并应用TGF-β/Smad信号通路阻断剂干扰素γ(IFN-γ)干扰后,探讨IFN-γ在乳腺癌难愈合创面中所发挥的作用和影响。方法:采用酶消化法对人乳腺癌溃疡创面组织行体外成纤维细胞原代培养。将实验细胞分成A、B、C、D共四组,A组为IFN-γ 5 000U/ml组;B组为IFN-γ 10 000U/ml组;C组为对照组,不加药物;D组为空白组。分别于第7天、第14天将培养细胞接种于96孔板内,用MTT法测定细胞增殖情况。结果:第7天及第14天A组吸光值与对照组C组比较差异无统计学意义(P0.05);B组吸光值均低于对照组C组,差异具有统计学意义(P0.05)。结论:IFN-γ对成纤维细胞的增殖抑制受到浓度的影响,浓度10 000U/ml时明显抑制了体外培养成纤维细胞的增殖,而在较低浓度(5 000U/ml)时对体外培养成纤维细胞增殖无明显抑制作用。     

丹参对瘢痕疙瘩成纤维细胞基质金属蛋白酶-1的作用

目的探讨丹参对培养瘢痕疙瘩成纤维细胞基质金属蛋白酶-1(matrix metalloprotein-ase-1,MMP-1)蛋白生成和mRNA表达的影响。方法采用酶联免疫吸附实验(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)和Northern杂交技术检测培养瘢痕疙瘩成纤维细胞MMP-1蛋白的合成分泌和mRNA的表达。结果培养瘢痕疙瘩成纤维细胞的MMP-1自发分泌量为(95±38)pg/ml;在培养基中丹参浓度分别为5mg/ml和10mg/ml条件下,MMP-1的浓度分别为(128±29)pg/ml(t=3.425,P<0.05)和(151±43)pg/ml(t=5.075,P<0.01)。在培养基中丹参浓度为10mg/ml时,培养瘢痕疙瘩成纤维细胞的MMP-1mRNA的表达被提高到(125±11)%(t=4.628,P<0.01)。结论丹参可提高培养瘢痕疙瘩成纤维细胞MMP-1蛋白的合成分泌和mR-NA的表达,这为丹参用于瘢痕疙瘩的临床治疗提供了理论依据。     

血竭提取物对成纤维细胞增殖及合成透明质酸的影响

目的 研究血竭提取物对成纤维细胞生物学作用的影响.方法 将血竭经过氯仿、乙酸乙酯、乙醇依次回流提取分别得到3种血竭提取液,培养液稀释后行成纤维细胞培养.噻唑蓝法MTT检测浓度分别为0.002、0.02、0.2、2、20 mg/ml的血竭提取物,在0、12、24、36、48、60、72h7个检测点对体外培养成纤维细胞增殖的影响,并绘制最适浓度下细胞生长曲线.流式细胞术FCM分析最适浓度培养下成纤维细胞的细胞周期变化.应用放射免疫分析法检测0、12、24、36、48、60、72 h细胞培养上清液中透明质酸(hyaluronic acid,HA)含量.结果 血竭乙酸乙酯提取物在0.2～2 mg/ml浓度范围内,促进成纤维细胞增殖,且呈浓度依赖性,在2 mg/ml浓度值时促进作用最显著,处于S期的细胞[(25.80±3.10)％]较对照组[(7.50±0.70)％]显著增加(P＜0.01),在此条件下培养成纤维细胞,12～72 h实验组分泌量逐渐增加,但较对照组偏低,组间比较差异有统计学意义(P＜0.01).结论 血竭乙酸乙酯提取物具有显著促进成纤维细胞增殖作用,可能是血竭促进创面愈合的机制之一.     

不同浓度碱性成纤维细胞生长因子对体外培养兔肌腱细胞增殖的影响

目的探讨不同浓度的碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)对体外培养兔肌腱细胞增殖的影响,并确定促进肌腱细胞增殖的最佳浓度。方法在体外培养第2代兔肌腱细胞的培养液中分别加入不同浓度(0.5、1、2、5、10、20、30、40、50μg/L)的bFGF,继续培养48 h,噻唑蓝(MTT)法染色,在酶联免疫检测仪上测出不同浓度bFGF组光密度(OD)值。结果与对照组OD均值相比:5、10、20、30、40、50μg/L bFGF组差异均有统计学意义(P<0.05);各组OD均值随bFGF浓度的增加,先逐渐增大(5～20μg/L),达到峰值后又逐渐降低(20～50μg/L)。结论 bFGF有明显促肌腱细胞增殖的作用,且与浓度有一定相关性,即促肌腱细胞增殖的起始bFGF浓度为5μg/L,而20μg/L时可达到促肌腱细胞增殖的最佳浓度。     

纳米金抑制血管内皮细胞增殖的分子机制

目的 观察纳米金能否抑制血管内皮细胞增殖,以及作用的分子机制.方法 在96孔板内,无血清培养人脐静脉血管内皮细胞(HUVEC)24 h,分别加入预先孵育过夜的纳米金(1000 nmol/L)+血管内皮生长因子(VEGF)165(10μg/L)、VEGF165各100μl,噻唑蓝(MTT)比色法观察纳米金对HUVEC增殖的影响.取3种浓度(250、500、1000 nmol/L)纳米金各0.5 ml,分别与碱性成纤维细胞生长因子(bFGF,10 mg/L)0.5 ml,4℃孵育24 h;再加入过饱和浓度的肝素-琼脂糖凝胶,离心后用bFGF抗体检测上清液和沉淀物中bFGF含量变化.无血清培养HUVEC 5孔,每孔加入VEGF165(10μg/L)100μl;再加入不同浓度纳米金(125、250、500 nmol/L),100μl,作用5 min,用Western blot方法测定磷酸化PLC-γ1蛋白.用AFM(原子力显微镜)表征纳米金与VEGF165作用后粒径大小.结果 纳米金+VEGF165组与VEGF165组的增殖倍数分别为1.75和4.25,表明纳米金抑制HUVEC的增殖(t=14.421,P<0.01).纳米金能够与具有肝素结合位点的bFGF结合.VEGF165浓度不变(10μg/L),随着纳米金溶液浓度的增加,从125、250到500 nmol/L,纳米金抑制PLC-γ1磷酸化越来越明显.AFM观察到纳米金与VEGF165作用后,粒径普遍大于30 nm.结论 纳米金与具有肝素结合位点的VEGF165结合,抑制了VEGF165的信号传导,从而抑制血管内皮细胞增殖.     

白蛋白对急性重症胰腺炎大鼠血管内皮细胞作用的实验研究

目的：通过大鼠体外实验探讨白蛋白与血浆胰蛋白酶损伤血管内皮的完整性的关系,初步证实白蛋白的保护作用。方法：分离并培养大鼠血管内皮细胞,将血管内皮细胞接种于96孔板中,待血管内皮细胞铺满96孔板底部,换用无血清DMEM 100μL并加入10组含不同白蛋白浓度的培养液50μL（浓度从10%～0.02%）,各孔均含浓度为0.125%的胰蛋白酶,反应1 h,通过MTT法测定各组细胞的OD值。结果：MTT实验结果显示白蛋白浓度与相应血管内皮细胞OD值呈正相关。Y代表OD值,X代表板孔中白蛋白浓度,回归方程为：Y=0.021X^3-0.084X^2＋0.140X＋0.397。结论：白蛋白对胰蛋白酶造成的血管内皮细胞损伤有保护作用,白蛋白浓度与对血管内皮细胞的保护作用成正相关。     

钒酸盐对内侧副韧带成纤维细胞增殖及胶原合成的影响

目的 探讨钒酸盐对大鼠内侧副韧带(medial collateral ligament,MCL)成纤维细胞增殖和I型胶原合成的影响. 方法 选取成年雄性SD大鼠12只,体重350～375 g,无菌切取MCL,以眼科剪剪成1 mill×l mm×1 mm大小后置于培养瓶中,0.25%胰蛋白酶消化传代制备MCL成纤维细胞.取第3代MCL成纤维细胞,分别加入不同浓度(O、1.0、2.5、5.0 ng/mL)的钒酸盐,采用MTT法测定细胞增殖,ELISA法及RT-PCR测定各浓度组细胞I型胶原的合成和I型胶原基因的表达,每浓度组样本量均为12. 结果 MTT法测得0～5 ng/mL4个浓度组细胞增殖的吸光度(A)值分别为0.213±0.016、0.327 4±0.023、0.449 4±0.137和0.561±4-0.028,1.0、2.5、5.0 ng/mL浓度组钒酸盐对MCL成纤维细胞有明显促增殖作用,与0 ng/mL浓度组比较差异均有统计学意义(P<0.05).ELISA法测得0～5 ng/mL各浓度组I型胶原的A值分别为0.47 4±0.02、0.51 4±0.03、0.60 4±0.01和0.72 4±0.02,1.0、2.5、5.0 ng/mL浓度组钒酸盐能明显促进I型胶原的合成,与0 ng/mL浓度组比较差异有统计学意义(P<0.05).RT-PCR测得0～5 rig/mL各浓度组I型胶原条带密度比值分别为1.37 4±0.76、1.97 4±0.53、2.41 4±0.94和2.73 4±0.82,1.0、2.5、5.0 ng/mL浓度组的I型胶原基因表达显著高于0 rig/mL浓度组,比较差异有统计学意义(P<0.05).以上每项指标1.0、2.5、5.0 rig/mE三浓度组间比较差异均有统计学意义(P<0.05). 结论 钒酸盐具有促进MCL成纤维细胞的增殖和I型胶原合成的能力,可能为治疗MCL损伤提供一种新的途径.     

清营Ⅰ号药物血清促血管内皮细胞增殖作用的研究

目的:观察清营Ⅰ号含药血清对培养的HUVEC细胞增殖的影响.方法:应用血清药理学方法和MTT法,分FBS(胎牛血清)组、RS(正常家兔血清)组、RDS(丹参血清)组和RQS(清营I号血清)组,每组分5%、10%和15%3种浓度进行比较研究.结果:(1)RS组、RDS组和RQS组不同浓度细胞损伤无影响.(2)RQS能够影响HUVEC代谢MTT.(3)同种浓度RQS组OD值明显高于FBS、RS、RDS各组;10%、15%浓度组明显高于5%的OD值.而10%、15%RQS浓度组与FBS、RS 3种浓度组比较,均呈显著性差异(P<0.01).结论:清营Ⅰ号药物血清可明显增强VEC分裂、增殖,且增殖程度与浓度有关.     

胸腰椎骨折椎弓根内固定断裂与植骨融合方式的相关性分析

[目的]探讨胸腰椎骨折椎弓根螺钉内固定系统内固定术后,椎弓根螺钉断裂与植骨融合方式之间的关系,以探讨胸腰椎骨折植骨融合的最佳方式。[方法]回顾性研究1995年5月~2005年12月本院脊柱外科收治的胸腰椎骨折病人197例,其中A组单纯内固定(不植骨)患者14例,B组“H”形椎板植骨21例,C组横突间植骨67例,D组椎间、椎内联合横突间植骨95例。[结果]术后随访6~32个月,内固定断裂12例,其中A组4例,B组3例,C组5例,D组0例,4组中D组内固定断裂率显著低于其他3组(P<0.05)。[结论]椎间、椎体内联合横突间植骨重建脊柱三柱的稳定性,符合人体生物力学原理,能有效降低内固定断裂的发生。     

On the measurement of the functional properties of the CFTR

A number of methods are currently employed to assess the functional properties of CFTR channels and their response to pharmacological potentiators, correction of the defective CFTR trafficking, and vectorial introduction of new proteins. Here we review the most common methods used to assess CFTR channel function. The suitability of each technique to various experimental conditions is discussed.     

The Measurement of the Inclination Angle of the Hamate and Analysis of the Inclination Angle for the Rotation Deformity of the Little Finger in the Fixation of the Carpometacarpal Joint

ObjectiveComplex base fractures of the fifth metacarpal bone and dislocation of the fifth carpometacarpal joint are more prone to internal rotation deformity of the little finger sequence after fixation with a transarticular plate. In the past, we have neglected that there is actually a certain angle of external rotation in the hamate surface of transarticular fixation. This study measured the inclination angle of the hamate surface relative to the fifth metacarpal surface for clinical reference.MethodsIn a prospective single‐center study, we investigated the tilt angle of 60 normal hamates. The study included thin‐layer computed tomography (CT) data from 60 patients from the orthopaedic clinic and inpatient unit from January 2017 to March 2020, including 34 men and 26 women who were 15~59 years old, average 35 years old. The CT data of 60 cases in Dicom format of the hand was input into Mimics and 3‐Matics software for three‐dimensional (3D) reconstruction and measuring the angle α between hamate surface and the fifth metacarpal surface. According to the possible placement of the transarticular plate on the fifth metacarpal surface, we measured the angle β between the hamate surface 1 and the fifth metacarpal surface and the angle γ between the hamate surface 2 and the fifth metacarpal surface.ResultsThe average angle between the hamate surface and the fifth metacarpal surface was 11.66°. The hamate surfaces 1 and 2 have an external rotation angle of 7.30° and 7.51° on average with respect to the fifth metacarpal surface, respectively. There is no statistically significant difference in the angles between the two groups (P > 0.05).ConclusionsThe horizontal angle of the dorsal side of the hamate is different from the back of the fifth metacarpal surface, and the hamate has a certain external rotation angle with respect to the fifth metacarpal surface. No matter how the transarticular plate is placed, the plate always has a certain external rotation angle relative to the fifth metacarpal surface. When the fixation is across the fifth carpometacarpal joint, if the plate does not twist and shape, it will inevitably cause internal rotation of the fifth metacarpal, resulting in internal rotation deformity of the little finger sequence.     

静脉输注甘露醇开放血脑屏障对抗生素透过血脑屏障的影响

目的　通过快速静脉输注甘露醇可逆性开放血脑屏障 (BBB) ,探知此方法能否增加抗生素透过BBB的量 ,在何时达到最高峰 ,其通透量增加后临床上有无不良反应。方法　采用自身配伍设计 ,共 6个样本组。对照组仅使用抗生素 ;其余 5组分别在使用甘露醇前 60、3 0min ,同时使用甘露醇后 3 0、60min使用抗生素 ,各组皆取使用抗生素后 1h的脑脊液测其抗生素浓度。抗生素选用头孢三嗪。结果　测量值经过q检验 ,经 2 0 %甘露醇处理前后的CSF中的头孢三嗪浓度差异有非常显著性。全组患者经临床观察未出现神经系统的不良反应。结论　经静脉快速输注2 0 %甘露醇后可以使透过BBB的水溶性抗生素的量增加 ,两者使用的顺序是在抗生素使用 3 0min内即给予甘露醇快速滴注。该方法不会增加低神经毒性抗生素在中枢神经系统的不良反应。     

三角韧带损伤的手术治疗

[目的]探讨踝关节三角韧带损伤的手术治疗及效果。[方法]2002年4月-2005年4月治疗伴有三角韧带损伤的踝关节骨折40例，均采用切开复位和坚强内固定，并修复重建三角韧带，恢复踝关节内外侧结构的稳定性。下胫腓联合分离仍不稳定者，给予皮质骨螺钉横向内固定。[结果]全部病例得到16个月-3a随访，平均1．5a。按齐氏疗效评定标准：优良30例，可8例，差2例，优良率75％。[结论]强调踝关节骨折切开解剖复位，坚强内固定的同时，应充分重视修复重建三角韧带。     

Influence of the design of the prosthesis on the outcome after hemiarthroplasty of the shoulder in displaced fractures of the head of the humerus

We reviewed 39 patients with displaced three- and four-part fractures of the humerus. In 21 patients (group A) we had used an anatomical prosthesis for the humeral head and in 18 (group B) an implant designed for fractures. When followed up at a mean of 29.3 months after surgery the overall Constant score was 51.9 points; in group A it was 51.5 and in group B 52.4 points. The subjective satisfaction of the patients was assessed using a numerical rating scale and was similar in both groups. In group A complete healing of the tuberosities was found in 29% and 50% in group B. Partial integration was seen in 29% of group A and in only one patient in group B, while resorption was noted in 43% of group A and 44% of group B. The functional outcome was significantly better in patients with complete or partial healing of the tuberosities (p=0.022). The specific trauma prosthesis did not lead to better healing of the tuberosities. The difference in clinical outcome obtained by the two designs did not reach statistical significance.     

Preservation of the pylorus and resection of the head of the pancreas

The historical evolution of the pylorus-preservation resection of the head of the pancreas is traced from the first resections early in this century to relative standardization of the operation, to a lowering of the operative mortality, and to an interest in improving nutritional status after resection. There are many theoretical advantages for the function of the upper gastrointestinal tract after pylorus and gastric preservation, such as maintenance of gastric capacitance and equilibration of osmotic pressure in gastric digestants, foodstuff digestion and absorption, and bowel motility. After the pylorus-preserving resection, gastric emptying is normal, pyloric function to prevent duodenal reflux is often normal, and gastric acids and serum levels of duodenal hormones are at normal levels, whereas after standard pancreatoduodenectomy, all of these are often abnormal. No prospective blinded studies have been published comparing nutritional values after the two operative procedures, but evidence is presented of a satisfactory result with regard to gastric capacitance, body weight gain, and lack of postgastrectomy symptoms. An undoubted advantage of the pylorus-preserving feature is a simplification of the operation. These gains are achieved without increase in operative mortality, without increase in the incidence of jejunal ulcer, and without theoretical or actual decrease in value of the procedure as a cancer operation, except in patients with duodenal carcinoma proximal to the ampulla of Vater.