补肾健脾法对骨质疏松大鼠骨组织形态学影响的实验研究

目的研究补肾健脾法对骨质疏松症大鼠骨组织形态学改变的影响。方法取10月龄大鼠36只随机分成3组：补肾健脾组（BSJP）、正常组、模型组。BSJP组及模型组无茵条件下摘取双侧卵巢制造骨质疏松模型,正常组采取假手术。术后1周开始给药,12周后处死。取大鼠股骨远端1／3近关节部位,制作不脱钙骨切片,进行骨组织形态学研究。结果BSJP组大鼠静态组织学各项参数与模型组比较,有显著差异（P〈0．01）;动态组织学各项参数与模型组比较,有显著差异（P〈0．01）。结论中医药补肾健脾法可以明显降低破骨细胞活性,抑制绝经后骨质疏松症的高转换率,能够有效地防治骨质疏松症。     

补肾壮骨液对骨质疏松模型大鼠血清OPG、RANKL蛋白表达的影响

目的：观察补肾壮骨液（BGY）对骨质疏松（POP）模型大鼠骨形态计量学变化及血清OPG、RANKL表达的影响。方法：采用去势法建立大鼠POP动物模型,BGY三个剂量组和阳性对照组分别给予BGY和rhIGF-1。3个月后,采用图象分析系统进行骨形态计量学分析,ELISA法分别测定大鼠血清OPG、RANKL。结果：BGY高、中剂量组骨形态计量值与模型组比较有显著性差异（P〈0.05）;BGY三个剂量组、阳性对照组及模型组的血清OPG和RANKL均较正常组升高,而BGY三个剂量组、阳性对照组测得较高的OPG和RANKL值,较之模型组有显著性差异（P〈0.05,P〈0.01）。结论：BGY可通过上调OPG,下调RANKL的表达,影响OPG/RANKL/RANK系统,使其骨量增加,骨结构改善,从而起到防治POP的作用。     

姜黄素对佐剂性关节炎大鼠血清骨保护素和核因子κB受体活化因子配体蛋白表达及骨密度的影响

目的观察姜黄素对佐剂性关节炎(adjuvant arthritis,AA)大鼠血清骨保护素(osteoprotegerin,OPG)、核因子κB受体活化因子配体(receptor activator for nuclear factor-κB ligand,RANKL)表达以及骨密度的影响,探讨姜黄素防止类风湿关节炎(rhuematoid arthritis,RA)骨破坏的作用机制。方法取SD大鼠30只,随机分为模型组、姜黄素组及正常组,第28天腹主动脉取血,采用ELISA法来检测血清中RANKL、OPG蛋白的表达,取血后处死大鼠,剥离大鼠右侧胫骨,行骨密度检查。结果 (1)与正常组比较,造模组即模型组与姜黄素组大鼠血清RANKL均显著升高(P0.01),血清OPG显著降低(P0.01),RANKL/OPG比值显著升高(P0.01);(2)与模型组比较,治疗组即姜黄素组血清RANKL显著降低(P0.01),血清OPG均显著升高(P0.01),RANKL/OPG比值均显著降低(P0.01);(3)3组大鼠胫骨整体骨密度无显著性差异(P0.05),姜黄素组大鼠兴趣区骨密度值显著高于模型组(P0.01)。结论姜黄素对AA大鼠具有良好的治疗作用,能够通过调节血清RANKL及OPG的表达,来调节OPG/RANKL通路,从而提高AA大鼠骨密度,抑制其骨丢失。     

RANKL、OPG、LIGHT表达在CIA大鼠骨侵蚀中的意义

目的：研究RANKL、OPG、LIGHT表达在胶原诱导性关节炎（collagen—inducingarthritis,CIA）大鼠骨侵蚀中的意义。方法：选用健康雄性Wistar大鼠30只,随机分为造模组、正常对照组（10只,简称正常组）,造模组采用牛Ⅱ型胶原乳剂于大鼠尾根部注射,建立CIA模型。在造模成功大鼠中随机选取10只作为模型组（10只）。30天后,观察各组大鼠足趾肿胀度,取各组大鼠膝关节滑膜及血清。运用westernblot、免疫组化法分别检测大鼠外周血、滑膜RANKL、OPG、LIGHT表达。结果：与正常组比较,模型组大鼠足趾肿胀明显,差异有统计学意义（P〈0．01）;模型组大鼠外周血、滑膜RANKL、LIGHT表达显著增加,OPG表达显著减少,差异有统计学意义（P〈0．01）。结论：CIA大鼠外周血、滑膜RANKL、LIGHT表达水平升高,OPG表达减少。CIA大鼠骨侵蚀可能由于低表达的OPG不能竞争性抑制RANK和高表达的RANKL结合,加上高表达的LIGHT,促进破骨细胞生成和活化而致。     

抗疏健骨颗粒对骨质疏松模型大鼠OPG和RANKL的影响

目的：观察抗疏健骨颗粒对骨质疏松模型大鼠骨保护素（OPG）和核因子邸受体活化因子配基（RANKL）的影响,探讨抗疏健骨颗粒防治骨质疏松症的作用机理。方法：60只大鼠随机分为6组,每组10只,除假手术组外切除大鼠双侧卵巢诱发大鼠骨质疏松症模型,连续给不同剂量的药物灌胃12周,心脏取血,离心取上清,采用ELISA法检测血清中OPG和RANKL含量,并与假手术组、模型组和尼尔雌醇组进行比较。结果：假手术组、尼尔雌醇组、抗疏健骨颗粒大剂量组OPG及OPG／RANKL与模型组比较P〈0．01;抗疏健骨颗粒中剂量组OPG、OPG／RANKL及大剂量组RANKL与模型组比较P〈0．05;抗疏健骨颗粒小剂量组OPG、RANKL、OPG／RANKL与模型组比较P〉0．05;抗疏健骨颗粒中剂量组RANKL与模型组比较P〈0．01;OPG含量随着抗疏健骨颗粒剂量的增大逐渐增高。结论：抗疏健骨颗粒能够升高OPG,抑制成骨细胞表达RANKL,从而达到防治骨质疏松症的作用。     

补肾通督胶囊对胶原诱导关节炎大鼠RANK/RANKL/OPG系统的影响

目的研究补肾通督胶囊对胶原诱导关节炎大鼠RANK/RANKL/OPG系统的影响,为中医药治疗类风湿关节炎(RA)提供理论依据。方法 RA动物模型选用胶原诱导关节炎模型,将大鼠分为正常对照组、模型组、补肾通督胶囊低剂量组(BSL)、中剂量组(BSM)、高剂量组(BSH)和雷公藤组6组,每组7只大鼠。造模后13天开始给药,BSL、BSM及BSH组分别给予120、240及480 mg/(kg·d)的补肾通督胶囊灌胃,雷公藤组给予雷公藤多苷片24 mg/(kg·d)灌胃。各组每天灌胃1次,每次2 m L。正常对照组和模型组给予2 m L的生理盐水灌胃。共灌胃18天。于31天取材,制作踝关节TRAP切片,采用ELISA法检测血清核因子κB受体活化因子配体(RANKL)、骨保护素(OPG)、OPG巨噬细胞集落刺激因子(M-CSF)。结果与正常对照组比较,模型组大鼠踝关节病理切片的阳性反应、炎症和骨破坏程度显著提高(P<0.01),血清RANKL和M-CSF水平皆有显著上升(P<0.01),而OPG和OPG/RANKL水平皆有显著降低(P<0.01)。与模型组比较,BSH组和雷公藤组阳性反应、炎症和骨破坏评分也显著下降(P<0.01);而BS各组和雷公藤组RANKL和M-CSF均显著下调,而OPG和OPG/RANKL均显著上调,差异有统计学意义(P<0.01)。与雷公藤组比较,正常组M-CSF较低,而OPG和OPG/RANKL均较高,差异有统计学意义(P<0.01),而模型组和BS各组RANKL和M-CSF均显著上调,而OPG和OPG/RANKL均显著下调(P<0.01)。结论补肾通督胶囊对于关节炎大鼠缓解骨破坏的机制,可能是通过对破骨细胞的调控起作用。     

筋骨胶囊对骨质疏松大鼠骨髓细胞OPG和RANKL mRNA表达量的影响

目的:观察筋骨胶囊对骨质疏松大鼠骨髓细胞护骨素(OPG)和核因子kB受体活化子配体(RANKL)mRNA表达量的影响,从分子水平上进一步探讨筋骨胶囊治疗骨质疏松症的有效机制。方法:取健康6月龄雌性SD大鼠48只,采用摘除双侧卵巢去势方法造成大鼠骨质疏松模型,随机分为假手术组、模型组、阿仑膦酸钠组(0.5mg/kg)、筋骨胶囊组(0.27g/kg)4组。用药12周后,处死所有大鼠,并取双侧股骨骨髓为标本,运用现代分子生物学RT-PCR技术,测量各大鼠骨髓基质细胞的OPG和RANKL mRNA表达量。结果:模型组OPG和RANKL mRNA表达量均明显高于假手术组(P0.01);阿仑膦酸钠组OPG mRNA表达量与模型组对比差异无统计学意义(P0.05),阿仑膦酸钠组RANKL mRNA表达量明显低于模型组(P0.01);筋骨胶囊组OPG mRNA表达量明显高于模型组(P0.01),筋骨胶囊组RANKL mRNA表达量明显低于模型组(P0.01);筋骨胶囊组OPG mRNA表达量明显高于阿仑膦酸钠组(P0.01),筋骨胶囊RANKL mRNA表达量与阿仑膦酸钠组相比差异无统计学意义(P0.05)。结论:筋骨胶囊能有效地上调OPG mRNA表达量,并抑制RANKL mRNA的表达,通过影响OPG/RANKL系统,抑制骨吸收,并促进骨形成,能有效地防治骨质疏松症。     

和痹方联合甲氨蝶呤对CIA大鼠Th炎症平衡及血清OPG、RANKL表达的影响

目的通过观察和痹方联合甲氨蝶呤(MTX)对胶原诱导的关节炎(CIA)大鼠Th细胞促炎与抗炎平衡及相关细胞因子及骨保护素(OPG)、B受体活化因子配体(RANKL)表达水平的影响,了解其联合治疗的抗炎作用及骨保护作用。方法利用完全弗氏佐剂和牛Ⅱ型胶原建立大鼠关节炎(CIA)模型,造模成功后随机分为模型组、甲氨蝶呤(MTX)治疗组、和痹方治疗组和联合用药组,采用容积法和计分法分别评价后肢肿胀度和四肢关节炎症程度;用ELLSA法检测大鼠血清中IL-6、IL-17、IL-4、IL-10、OPG、RANKL的水平。结果与模型组比较,各干预组均可降低关节肿胀度及AI评分差异有统计学意义(P0.05)。与模型组同期比较,MTX组、和痹方组、联合组IL-17、IL-6表达水平降低,IL-4、IL-10、OPG、OPG/RANKL表达水平升高,差异具有统计学意义(P0.01,P0.05)。与和痹方组及MTX组比较,联合组显著降低IL-17、IL-6、RANKL水平,升高IL-4、IL-10、OPG、OPG/RANKL水平差异具有统计学意义(P0.01,P0.05)。结论和痹方可能通过降低CIA模型大鼠血清中IL-17、IL-6及RANKL表达水平,升高OPG表达水平,而起到延缓关节炎性损伤所致的骨质破坏的作用。     

中药骨康对成骨细胞OPG和RANKL分泌的影响

目的：通过观察骨康含药血清对成骨细胞OPG、RANKL表达的影响,探讨其治疗骨质疏松的作用机制。方法：体外分离、培养成骨细胞,实验分为3组：正常血清组、中药骨康血清组和雌二醇含药血清组。采用酶联免疫吸附法,检测成骨细胞OPG和RANKL的表达。结果：中药骨康含药血清组RANKL含量显著低于空白对照组（P〈0.05）,而OPG分泌量显著高于空白对照组（P〈0.05）;中药骨康含药血清组与雌二醇含药血清组OPG和RANKL的含量无明显差异。结论：在去势状态下,中药骨康可能是抑制RANKL分泌,上调OPG分泌,而达到治疗骨质疏松症的作用。     

左归丸联合温和灸对骨质疏松症模型大鼠骨密度、骨保护素mRNA及核因子κB受体活化因子配体mRNA的影响

目的探讨左归丸联合温和灸治疗骨质疏松症的可能作用机制。方法 40只雌性SD大鼠随机分为空白组、模型组、左归丸组、左归丸+温和灸组,每组10只。模型组、左归丸组、左归丸+温和灸组采用手术完整摘除双侧卵巢法制造骨质疏松症模型。造模3个月后左归丸组予左归丸10 ml/(kg·d)灌胃,左归丸+温和灸组予左归丸10 ml/(kg·d)灌胃+长强穴艾灸治疗,空白组和模型组予生理盐水10 ml/(kg·d)灌胃。各组均干预6周。干预前后测定大鼠股骨近端及第2腰椎骨密度,干预后通过PCR法检测大鼠骨组织骨保护素(OPG)mRNA和核因子κB受体活化因子配体(RANKL)mRNA表达水平。结果与空白组比较,模型组股骨、腰椎骨密度,骨组织OPG mRNA表达及OPG/RANKL降低,RANKL mRNA表达上升(P0.05或P0.01);与模型组比较,左归丸组、左归丸+温和灸组大鼠股骨、腰椎骨密度,骨组织OPG mRNA表达及OPG/RANKL均升高,RANKL mRNA表达降低(P0.05或P0.01),且左归丸+温和灸组大鼠股骨、腰椎骨密度,骨组织OPG mRNA表达及OPG/RANKL均较左归丸组升高,RANKL mRNA表达较左归丸组降低(P0.05)。结论左归丸联合温和灸能明显升高骨质疏松症大鼠的骨密度,上调OPG mRNA表达、下调RANKL mRNA表达可能是其作用机制之一。     

廖志峰应用健脾补肾活血汤治疗慢性再生障碍性贫血临床观察

目的：观察健脾补肾活血汤治疗慢性再生障碍性贫血（再障）的临床疗效。方法：将再障患者80例随机分为对照组、治疗组各40例。对照组采用司坦唑醇片联合环孢素A（Cs A）治疗,治疗组在对照组基础上加用健脾补肾活血汤治疗,疗程6个月。观察2组患者临床疗效及治疗前后外周血T细胞亚群、外周血象、血清肿瘤坏死因子α（TNF-α）和白介素3（IL-3）的变化情况。结果：治疗组治疗后CD4升高、CD8降低、CD4/CD8升高;TNF-α降低,IL-3升高,与治疗前及对照组比较差异均有统计学意义（P〈0.O5）。结论：健脾补肾活血汤可能通过改善T淋巴细胞亚群的比例,减少TNF-α造血负调控因子及增加IL-3造血正调控因子的释放,解除对骨髓造血的抑制,从而促进造血功能的恢复。     

补肾通督胶囊对肾虚寒凝型RA患者血脂代谢及相关细胞因子的调节作用

目的：观察补肾通督胶囊对肾虚寒凝型类风湿性关节炎（RA）患者血脂代谢及相关细胞因子的影响。方法：将符合纳入标准的类风湿性关节炎患者随机分为治疗组（36例）和对照组（35例）,治疗组口服补肾通督胶囊,对照组口服雷公藤多甙片,均服药12周;观察患者治疗前后血清瘦素（Leptin,LP）、白细胞介素-6（IL-6）、血脂及血液动力学的情况。结果：补肾通督胶囊可以使肾虚寒凝型RA患者LP、IL-6、血清总胆固醇（TC）、低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）、血浆黏度、红细胞聚集指数（RE）、红细胞变形指数（TK）显著降低（P〈0.01）,载脂蛋白A1（Apo-A1）及高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）均显著升高（P〈0.01或P〈0.05）;与对照组比较,治疗组LP、RE变化水平更为明显（P〈0.01）,Apo-A1、HDL-C变化水平更为明显（P〈0.05）。结论：补肾通督胶囊对肾虚寒凝型RA患者血脂代谢及其相关细胞因子具有良好的调节作用。     

针刺百会、神门穴对癫痫大鼠海马神经元凋亡基因BCL-2和BAX表达的影响

目的:探讨针刺百会和神门穴对戊四氮致痫大鼠海马神经元凋亡因子Bcl-2、Bax表达的影响。方法:60只健康成年雄性SD大鼠随机取10只作为空白对照组(A组),每日给予生理盐水腹腔注射,其余50只每日予戊四氮腹腔注射诱发癫痫模型。点燃成功的大鼠随机分为模型组(B组)、针刺10天组(C组)、针刺20天组(D组)、丙戊酸钠组(E组),每组9只。用免疫组化法检测各组大鼠海马区BCL-2、BAX表达情况。结果:A组与B组之间、B组与C、D、E组之间相比较大鼠大脑海马区Bcl-2、Bax表达均有显著差异(P<0.01或P<0.05),C、D、E组间相比无显著差异(P>0.05)。结论:针刺百会和神门穴可以减少戊四氮致痫大鼠海马区BAX的表达,增加BCL-2的表达,此机制可能为针刺治疗癫痫的作用之一。     

恐伤孕鼠对其仔鼠大脑海马区细胞凋亡的影响

目的：观察恐伤孕鼠对其仔鼠大脑海马区细胞凋亡的影响。方法：采用恐伤孕鼠的方法造模,受孕后的雌鼠用随机取数法分为正常组、模型组、补肾组,造模时间为整个妊娠期间。仔鼠出生后14天,取其大脑海马区组织用流式细胞术检测其细胞凋亡率;用免疫组化ABC法观察Bcl-2、Bax在大脑海马区的蛋白表达。结果：模型组仔鼠海马区脑组织细胞凋亡率较正常组和补肾组增加（P〈0．05）。同时,模型组仔鼠海马区脑组织Bcl．2阳性表达数下降、Bax阳性表达数升高,与正常组和补肾组比较均有极显著性差异（P〈0．01）。结论：恐伤孕鼠通过凋亡相关基因Bcl-2蛋白表达下降、Bax蛋白表达增加共同作用引起其仔鼠海马区脑细胞凋亡增加,从而影响到仔鼠脑的发育,而补肾治疗可逆转此效应。     

单双侧取穴电针对CCI模型大鼠镇痛效果及脊髓背角P2X3受体表达的影响

目的：观察单侧、双侧取穴电针对坐骨神经慢性挤压伤模型大鼠痛阈和脊髓背角中P2X3受体表达的影响。方法：通过测定造模后第15天及第5天大鼠足底热痛阈,比较各组间电针治疗后与电针治疗前痛阈的差值;采用免疫组织化学技术检测脊髓背角中P2X3受体的表达。结果：①与模型对照组比较,各电针治疗组大鼠痛阈差值均显著升高（P〈0．01）;双侧取穴电针组分别与健侧取穴电针组及患侧取穴电针组比较,痛阈差值均有显著升高（P〈0．01）;健侧取穴电针组与患侧取穴电针组之间痛阈差值没有显著差异（P〉0．05）。②与模型对照组比较,各电针治疗组大鼠脊髓背角中P2X3受体表达均有不同程度减少（P〈0．01）;各电针治疗组之间比较,大鼠脊髓背角中P2X3受体表达没有显著差异（P〉0．05）。结论：电针可能通过抑制大鼠脊髓背角中P2X3受体的表达,产生镇痛作用;电针治疗坐骨神经慢性挤压伤引起的疼痛时,双侧取穴较单侧取穴镇痛效果更明显。     

补肾活血方动员骨髓干细胞治疗急性心肌梗死的临床观察

目的:研究旨在初步观察补肾活血方对急性心肌梗死患者骨髓干细胞的动员作用。方法:急性心肌梗死患者40例随机分为补肾活血组和对照组,每组各20例。除常规治疗外,补肾活血组每日加服中药汤剂补肾活血方,每日1剂,连用2周。分别在治疗前和治疗后第3,5,7,14天,分别以流式细胞仪测定外周血中CD3+4细胞百分比及彩色多普勒超声诊断仪测定左室结构和功能,观察指标为左室舒张末内径(LVEDd)、左室收缩末内径(LVEDs)、左室射血分数(LVEF)。结果:(1)补肾活血组和对照组治疗后CD3+4细胞百分比均逐步升高,于第5天达到高峰,两组比较存在显著性差异(P0.01)。至治疗后第14天时,对照组测值已明显降低,而补肾活血组测值仍维持于较高水平(P0.05)。(2)经治疗28天后,补肾活血组LVEF增至(60.88±3.17)%,与治疗后7天时所测得的(51.75±5.63)%比较,呈明显改善(P0.01);与对照组相比较,LVEF改善明显(P0.05)。补肾活血组LVEDd及LVEDs则分别由治疗7天后时测值(62.31±5.60)mm与(41.87±4.92)mm降低至治疗28天后测值(52.51±2.32)mm与(33.56±3.66)mm,前后比较均有显著性差异(分别为P0.01与P0.05);而对照组LVEDd及LVEDs治疗后7天与治疗后28天比较未见显著性差异(P0.05)。结论:本研究初步证实了心梗后存在自发的骨髓干细胞动员现象。补肾活血方有可能通过动员骨髓造血干细胞,达到提高外周血骨髓干细胞水平的作用,从而能缩小梗死面积,对心肌梗死后心功能的恢复具保护作用。     

补肾健脾胶囊延缓老年性耳蜗毛细胞凋亡的实验研究

目的:观察补肾健脾胶囊对C57小鼠老年性耳蜗毛细胞损害的保护作用并探讨其作用机制。方法:选择刚出生的C57 BL/6J小鼠30只,随机分为对照组10只,补肾健脾胶囊组20只,其中对照组小鼠为常规饲料喂养;中药组小鼠常规饲料至出生后1个月时开始饮用补肾健脾胶囊溶液以代替日常饮水。两组至7月龄时终止实验。取出小鼠耳蜗,制作成耳蜗铺片,在光学显微镜下观察并比较两组小鼠耳蜗毛细胞退行性改变状况。结果:对照组C57 BL/6J小鼠出现耳蜗毛细胞损伤加重的趋势,且这种随着年龄增长而发生的耳蜗损害遵循着从底回逐渐向顶回发展的规律,同时外毛细胞的损害比同区域的内毛细胞严重。服用复方补肾健脾胶囊的小鼠与同龄对照组小鼠相比,耳蜗毛细胞损害则相对较轻。结论:补肾健脾胶囊可以延缓C57 BL/6J小鼠随着年龄增长而发生的耳蜗毛细胞凋亡,提示该中药胶囊可能具有对抗老年性耳聋的药理效应,其作用机制可能与提高细胞环核苷酸含量,调节核酸代谢,保护和稳定DNA结构等有关。     

补肾中药对去势大鼠骨生物力学影响的研究

使用补肾方剂（补肾健骨胶囊）对切除卵巢的雌性成年大鼠进行了治疗，并与正常对照组、模型组和尼尔雌醇治疗组的大鼠进行了比较。统计学结果显示，使用补肾健骨胶囊治疗的各组大鼠股骨骨载荷、骨桡度、骨强度、弹性模量等生物力学指标明显好于模型组，差异有显著性和非常显著性。说明补肾健骨胶囊治疗可明显改善去势大鼠的骨生物力学状态，提高骨骼抵抗外力冲击的能力，有效的防治大鼠去势后引起的骨质疏松症，避免骨折的发生。     

疏肝健脾法治疗腹泻型肠易激综合征的临床研究

目的：观察疏肝健脾法治疗腹泻型肠易激综合征的临床疗效。方法：应用疏肝健脾法并根据症状随证加减治疗腹泻型肠易激综合征的患者35例,疗程均为1个月,比较治疗前后的临床症状和生活质量,观察该方法治疗肠易激综合征的临床治疗效果。结果：总有效率为91.4%,患者的临床症状及生活质量较治疗前有显著差异（P〈0.01）。结论：疏肝健脾法能有效改善腹泻型肠易激综合征患者的生活质量和临床症状。     

艾灸对实验性类风湿性关节炎大鼠海马GR、MEL1B表达影响的研究

目的:探索艾灸治疗实验性类风湿性关节炎(RA)大鼠海马中枢的功能机制。方法:将SD大鼠随机分为空白对照组、RA模型组、艾灸组,用弗氏完全佐剂制造实验性RA病理模型,艾灸"肾俞"、"足三里"穴治疗,用免疫组化法测定大鼠海马糖皮质激素受体(GR)表达,用原位杂交法检测海马褪黑激素受体1B(MEL1B)表达。结果:模型组与空白组比较,GR表达有增高趋势(P>0.05),艾灸组显著低于模型组(P<0.01)。模型组与空白组比较,MEL1B光密度值显著增高(P<0.01),艾灸组明显低于模型组(P<0.05)。结论:艾灸对实验性RA海马中枢有良性调整作用,海马GR、MEL1B在艾灸治疗实验性RA大鼠抗炎效应中具有重要作用。