绿茶抑制黄曲霉毒素B1致大鼠肝癌作用的剂量—效应关系研究

在1984年,我们首次发现绿茶对黄曲霉毒素B_1(AFB_1)致大鼠肝癌作用有显著的抑制效果。随后,对不同产地、不同品系绿茶,时间一效应关系,阻断AFB_1诱发肝癌的长期动物实验等进行一系列研究。实验结果表明,绿茶的防癌作用非常显著。但在这些研究中,绿茶用量均为5%。为了解     

大鼠肝癌发生过程中超微结构、c-myc和HER-2表达变化及意义

目的探讨大鼠肝癌(HCC)发生过程中的超微结构、c-myc和HER-2表达的变化情况。方法采用黄曲霉毒素B1(AFB1)制作诱导性大鼠HCC模型,并观察诱导性大鼠HCC模型在不同阶段的超微结构、c-myc和HER-2表达变化。结果该组大鼠HCC模型中,肝细胞呈变性损伤、异型性到癌变;线粒体由增生肿胀到枯竭、空泡变;糖原颗粒呈渐减少等特征性变化。观察到典型肝细胞吞噬细胞现象。c-myc、HER-2的逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)扩增产物电泳图谱显示在266、221bp处有DNA片段区带。与对照组大鼠肝组织比较,c-myc、HER-2mRNA在损伤病变、早期癌变和癌变肝组织的表达水平均显著升高。结论 AFB1诱导性大鼠肝细胞出现变性、异型性及癌细胞渐变的超微结构变化,其中c-myc、HER-2的异常表达可能参与了AFB1诱导大鼠癌变的过程。     

肝癌高发地区人群黄曲霉毒素暴露水平的评估

目的：通过对我国原发性肝癌高发区居民进行较为全面的黄曲霉毒素（AFT）暴露水平的评估，为进一步研究AFT与肝癌的关系提供依据。方法：选择甲地（广西扶绥县竹琴村）、乙地（江苏启东通兴乡）丙地（启东天汾镇）作为调查地区，应用AFT生物标记物的检测，对人群AFT暴露水平进行评估。结果：食物结构调查表明，甲地居民以玉米为主食，乙地和丙地居民则以大米为主食，粮食中黄曲霉毒素B1（AFB1）的污染水平以甲地最为严重，居民膳食中AFB1的摄取量即AFT外暴露水平，血清中AFB1-白蛋白（AFB1-ALB）加合物水平，肝癌发病率均以甲地最高，丙地最低，且有显著性差异。结论：AFT外接触水平高的居民，AFB1-ALB加合物水平，尿中AFM1水平亦高，说明两者是反映AFB1外接触剂量的良好指标，在现有膳食结构条件下，AFT暴露仍是肝癌危险因素之一。     

黄曲霉毒素B_1诱发大鼠肝癌的实验病理研究

本实验以黄曲霉毒素B_1(AFB_1)诱癌,苯巴比妥钠(PB)和四氯化碳(CCl_4)促癌,建立了一种新的诱发大鼠肝癌的实验模型,并用病理组织学、形态定量测算及电子显微镜等方法,研究了癌变过程中变异肝细胞灶/给节的发生和发展及其与肝癌的关系。结果表明,PB和CCl_4能使变异细胞灶的数目和体积增加,而且可促进肝癌的发生。作者还发现,嗜酸细胞结节与高分化型肝细胞癌密切相关。     

真菌提取液对黄曲霉毒素解毒作用的研究

本研究报道了从真菌Ｅ－２中提取的粗酶液，可使样品的黄曲霉素（ＡＦＴＢ１）含量明显减少。其最适作用温度为２５℃，最佳作用时间为４０ｍｉｎ，最适ｐＨ６．０。与对照组比较，可使ＡＦＴＢ１．的含量减少高达８０％。本研究为从真菌中提取横曲霉素有解毒作用的高效、专一的生物酶，提供了初步的依据。     

VP-16诱导PC-3细胞凋亡和bcl-2及c-myc基因表达的研究

目的　研究 VP- 1 6诱导 PC- 3细胞凋亡和癌基因 bcl- 2及 C- myc表达的关系。方法　用末端标记法(TUNEL )和流式细胞术 (FCM)研究 PC- 3细胞凋亡 ,以免疫组化方法研究 bcl- 2及 C- myc蛋白的表达。结果　 TUNEL和FCM检测表明 ,PC- 3细胞的凋亡率随 VP- 1 6作用浓度增加和作用时间延长而升高 ;免疫组化结果显示 :bcl- 2和 c- myc基因表达的阳性百分率随 VP- 1 6作用浓度增加和作用时间延长而降低。结论　VP- 1 6能够诱导 PC- 3细胞凋亡和抑制其bcl- 2和 c- myc基因的表达 ,且具有作用浓度和作用时间依赖性。     

erbB1／HER1和erbB2／HER2在肺癌的表达

目的 检测第一和第二人体表皮生长因子受体（human epidermal-growth-factor erceptor 1 and 2,HER1,and HER2）在肺癌组织中的表达,探讨HER1、HER2过度表达与肺癌临床病理的关系。方法 用免疫组化法检测有随访资料的70例肺部（43例鳞癌和27例腺癌）组织中HER1、HER2的表达。结果 肺癌中HER1、HER2、HER1＋2的过度表达率分别为65．7％、41．4％和30．0％。肺癌中HER1、HER2、HERE1＋2的过度表达与肺癌淋巴结转移、TNM分期、患者术后生存率相关。结论 erbB1、erbB2阳是晚期肺部生长的调控基因,干预HER1、HER2、HER1＋2的过度表达可能是治疗晚期肺癌的有效方法。     

吸烟对大鼠肺组织B7-1/B7-2及其相关配体表达的影响

目的 通过研究吸烟对大鼠肺组织B7-1/B7-2及其相关配体表达的影响,探讨专职抗原提呈细胞(APC)在吸烟所致肺部慢性炎症发生发展中的作用.方法 将30只健康雄性Wistar大鼠随机分为不吸烟组、吸烟6周组和吸烟12周组,每组10只.采用免疫组化半定量法测定大鼠气道周围肺间质中慢性炎症细胞胞膜B7-1B7-2、CD28和CTLA-4的表达水平.结果 吸烟6周组与吸烟12周组大鼠肺组织B7-1、B7-2、CD28和CTLA-4表达量较不吸烟组均显著增高(P＜0.01),吸烟12周组较吸烟6周组表达量也均增高(P＜0.01),随吸烟时间的延长各指标表达量均呈上升趋势.结论 吸烟可引起大鼠肺组织B7/CD28/CTLA-4表达水平的增高,提示APC可能在吸烟所致肺部慢性炎症发生发展中起重要作用.     

原癌基因c-erbB-2蛋白在肝外胆管癌组织中的表达及临床意义

目的：研究原癌基因c-erbB-2产物在肝外胆管癌组织、癌旁胆管组织及正常胆管组织中的表达,探讨c-erbB-2原癌基因与肝外胆管癌发生与发展的关系.方法：应用免疫组织化学SABC的方法,检测了75例肝外胆管癌组织,48例癌旁胆管组织和9例正常胆管组织中原癌基因c-erbB2的表达水平.结果：c-erbB-2基因在肝外胆管癌组织高达80%（60/75）,而癌旁胆管组织中的阳性表达率为56%（27/48）,正常胆管组织中为阴性表达（0/9）,其差异有极显著性意义（P＜0.01）;在肝外胆管癌组织中,c-erbB-2的表达与肿瘤的恶性程度及淋巴结和远程转移正性相关,差异有显著性意义（P＜0.05）;c-erbB-2在有周围神经浸润的肿瘤中的表达率明显高于无周围神经浸润的肿瘤,差异有显著性意义（P＜0.05）;c-erbB-2在高组织学分级肿瘤（Ⅲ、Ⅳ）中的表达率显著性高于低分级肿瘤（Ⅰ）,差异有显著性意义（P＜0.05）;c-erbB-2表达与肿瘤大小、肿瘤部位、性别、年龄及有无血管浸润等临床病理指标间的差异无显著意义（P＞0.05）.结论：c-erbB-2基因的活化与肝外胆管癌的发生和发展密切相关;因c-erbB-2表达水平与肝外胆管癌恶性程度,神经浸润,淋巴结及远程转移密切相关,为一种肿瘤生物标志,c-erbB-2的表达分析在该类肿瘤的诊断,治疗和预后分析中具有潜在的重要临床应用价值.     

EGFR、Ki67、HER-2、E-cadherin在乳腺癌组织中的表达及临床意义

目的 研究乳腺癌组织中表皮生长因子受体（EGFR）、细胞增殖标志物（Ki67）、人表皮生长因子受体-2（HER-2）、上皮性钙黏蛋白（E-cadherin）的表达及意义.方法 回顾性分析经手术治疗证实的149例女性乳腺癌病理资料.结果 乳腺癌组织中EGFR的表达与组织学分级、淋巴结是否转移有显著相关（P＜0.05）,与ER、PR呈负相关（P＜0.05）;Ki67表达与淋巴结是否转移有显著相关（P＜0.05）,同时与EGFR呈正相关（r=0.171,P＜0.05）;HER-2表达与淋巴结是否转移有显著相关（P＜0.05）,并与EGFR呈正相关（r=0.186,P＜0.05）;E-cadherin表达与肿瘤大小、组织学类型、组织学分级有显著关系（P＜0.05）.结论 EGFR、Ki67、HER-2、E-cadherin的检测对乳腺癌的治疗及预后评估有重要意义.     

糖尿病大鼠视网膜血管超微结构改变与核因子-κB的关系

目的:观察不同病程糖尿病大鼠视网膜血管超微结构的改变与核因子-κB(NF-κB)在视网膜中的表达情况,并研究两者间的关系,以探讨NF-κB在糖尿病视网膜病变(DR)发病机制中的作用。方法:SD大鼠48只,随机分为糖尿病组24只,对照组24只。糖尿病模型的建立采用链脲佐菌素(STZ)一次性腹腔注射。应用免疫组化SP三步法分别于1,3,5个月对大鼠视网膜的NF-κB表达情况进行观察,并用透射电镜进行超微结构的观察。结果:大鼠视网膜血管超微结构:对照组,微血管管壁完整,基底膜连续完整,内皮细胞、周细胞结构正常,异染色质分布均匀。糖尿病组,1个月时,微血管形态基本正常;3个月时内皮细胞明显肿胀、变形,周细胞异染色质边集、浓染,细胞器结构不清,基底膜增厚;5个月时,内皮细胞肿胀、变形更加明显,并有不同程度增生,血管腔明显变窄,周细胞内异染色质分布不均、边集、浓染,基底膜显著增厚。免疫组化结果:对照组,NF-κB仅表达于视网膜神经节细胞和内皮细胞胞质中,细胞核内未见其表达。糖尿病组,从1个月开始,可见视网膜各层细胞均有表达,并主要表达于细胞核内,随病程延长,表达进行性增高。结论:在糖尿病视网膜病变早期,视网膜微血管还未出现明显改变时,NF-κB已被激活,并且随着病程的延长,视网膜微血管超微结构明显改变,NF-κB的表达活性也不断增强。因此,NF-κB在DR的早期发生和后期增殖性发展中可能发挥着重要作用,对今后治疗DR也提供了新的依据。     

磷酸化AKT和HER-2蛋白在早发性乳腺癌中的表达及意义

目的 探讨pAKT和HER-2蛋白在女性早发性乳腺癌组织中的表达及其临床意义.方法 采用免疫组化SP法检测66例病理资料完整的女性早发性乳腺癌标本中pAKT和HER-2的表达状态,并分析其与肿瘤大小、淋巴结转移及ER、PR等的关系.结果 66例乳腺癌组织中的pAKT表达阳性率为46.97％ （31/66）,HER-2表达阳性率为31.82％（21/66）,pAKT的表达水平在ER阳性和ER阴性组间差异具有统计学意义（P =0.030）,与肿瘤大小（P =0.769）、淋巴结转移（P =0.322）、临床分期（P =0.359）、病理类型（P =0.569）、组织学分级（P =0.778）、PR表达（P =0.309）均无关;HER-2表达水平在淋巴结转移和未转移组间的差异有统计学意义（P=0.012）,而与肿瘤大小（P=0.995）、临床分期（P =0.661）、病理类型（P=0.846）、组织学分级（P =0.763）、ER表达（P=0.610）、PR表达（P=0.860）均无关;pAKT与HER-2表达呈正相关（r=0.270,P=0.029）.结论 在早发性乳腺癌中,pAKT及HER-2过表达与患者后续激素治疗的反应性及早期复发、淋巴结转移等恶性生物学行为密切相关.同时,联合应用芳香化酶抑制剂和AKT信号通路抑制剂可能会更好的控制早发性乳腺癌的发生和发展.     

HSD17 B1和HSD17 B2基因多态性与四川汉族人群肝癌的关联性研究

目的：探讨性激素17β-羟甾类固醇脱氢酶（HSD17B1和HSD17B2）基因单核苷酸多态性与四川地区汉族人群肝癌之间的关系,为肝癌的预防、筛查、治疗及预后提供理论依据。方法以136例汉族肝癌患者,200例汉族健康人群为对象,选取HSD17B1 rs676387、HSD17B2 rs8191246两个位点作为遗传标志,采用聚合酶链反应-限制性片段长度多态技术检测 HSD17B1和 HSD17B2基因多态性及其分布频率。结果与健康人群相比HSD17B1 rs676387的T等位基因显著增加肝癌患病风险（P＜0．05）。结论 HSD17B1 rs676387与四川汉族 HCC的发生发展具有相关性,该研究结果有待在多民族、多中心、大样本研究中进一步证实。     

miR-192负性调控人肝癌细胞株HepG2中RB1基因的表达

目的 探讨miR-192对人肝癌细胞株HepG2中RB1基因表达的调节作用.方法 运用生物信息学方法对miR-192进行靶基因预测并分析其潜在靶基因RB1;将含有miR-192结合位点的RB1 mRNA 3′端非编码区(3′UTR)片段和在miR-192结合位点进行突变的RB1 3′UTR突变片段克隆至报告基因载体pMIR-Report luciferase vector,重组质粒分别命名为pMIR-RB1和pMIR-RB1-mut;将重组质粒、Beta-gal内参质粒和microRNA共转染HepG2细胞,双荧光素酶报告基因系统检测各实验组中细胞荧光素酶的表达;SYBR Green荧光定量PCR和Western blot分别在mRNA和蛋白水平检测miR-192对内源性RB1表达的调节作用.结果 生物信息学分析筛选出89个miR-192的潜在靶基因,RB1基因是其中之一;测序验证重组质粒pMIR-RB1和pMIR-RB1-mut构建成功;过表达miR-192时,共转染pMIR-RB1质粒的细胞相对荧光素酶活性(4.80±0.36)较相应过表达miR-NC组(7.90±0.91)明显降低(P＜0.05),而共转染pMIR-Luc或pMIR-RB1-mut质粒的细胞相对荧光素酶活性[pMIR-Luc:(7.68±1.04);pMIR-RB1-mut:(7.56±0.99)]较相应过表达miR-NC组[pMIR-Luc:(7.86±0.73);pMIR-RB1-mut:(7.82±1.05)]无显著差异;上调miR-192水平显著降低HepG2细胞中内源性RB1 mRNA[(0.56±0.10)vs (1.05±0.13)]和蛋白(47% vs 100%)的表达.结论 RB1基因是miR-192的一个靶基因,在HepG2细胞中,miR-192通过直接结合RB1 mRNA 3′UTR而负性调控RB1基因表达.