阿魏侧耳多糖抗癌作用机理研究

目的：阿魏侧耳（阿魏菇）多糖（Pleurotus ferulae polysaccharide,PFP）抗宫颈癌作用的机理研究。方法：MTT法、中性红比色法和Gfiess法。结果：灌胃给药500mg·kg^-1的阿魏菇多糖可抑制小鼠宫颈癌U14移植瘤的生长,抑瘤率达到39％,临床抗宫颈癌药顺铂的抑瘤率为46．5％,阿魏菇多糖与顺铂共同作用时,抑瘤率达到65．1％;但是在体外实验中,不同浓度阿魏菇多糖分别作用于人宫颈癌HeLa和人乳腺癌MCF．7细胞不同时间后,却不能抑制两种细胞的生长;在5μg·mL^-1的脂多糖刺激下,阿魏菇多糖不能促进脾淋巴细胞的增殖;不同浓度的阿魏菇多糖作用于腹腔巨噬细胞24h,能使腹腔巨噬细胞的吞噬能力显著增强,并且呈现明显的剂量依赖性,与此同时阿魏菇多糖也促进了腹腔巨噬细胞的增殖,但是却不能刺激腹腔巨噬细胞释放NO。结论：阿魏菇的抗宫颈癌机制可能是通过促进小鼠机体免疫功能而实现的。     

枸杞多糖对2型糖尿病大鼠免疫功能影响的研究

目的：探讨枸杞多糖对糖尿病大鼠免疫功能的影响。方法：将糖尿病大鼠随机分为对照组、高剂量枸杞多糖组、中剂量枸杞多糖组、低剂量枸杞多糖组。通过用酸性α-醋酸萘酯酶染色法和PHA诱导淋巴细胞转化试验来测试不同实验组糖尿病大鼠细胞免疫功能;采用盐析法纯化血清中免疫球蛋白lgG来衡量糖尿病大鼠体液免疫功能;采用小鼠腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞试验测试实验组和对照组大鼠特异性免疫功能。结果：枸杞多糖组与对照组比较,枸杞多糖能明显提高糖尿病大鼠血清中免疫球蛋白含量明显升高,能促进淋巴T细胞、巨噬细胞的增殖。结论：枸杞多糖对糖尿病大鼠的细胞免疫、体液免疫及巨噬细胞功能均有显著的增强作用。     

香菇多糖对巨噬细胞一氧化氮生成和细胞内还原型谷胱甘肽的影响

目的 为探讨香菇多糖（lentinan,LTN)激活小鼠腹腔巨噬细胞一氧化氮（NO）生成的作用机制。方法 观察LTN对小鼠腹腔巨噬细胞NO生成与细胞内还原型谷胱甘肽（GSH）的影响及其关系。结果 ⑴LTN对小鼠腹腔巨噬细胞NO生成具有明显的促进作用，同时细胞内GSH浓度随NO生成增加而减少；⑵NO生成抑制剂能抑制LTN刺激的小鼠腹腔巨噬细胞NO生成和细胞内GSH水平降低；⑶GSH去除剂能抑制巨噬细胞NO生成。结论 研究表明LTN促进小鼠腹腔巨噬细胞NO生成并同时消耗细胞内GSH，细胞内GSH水平可能与NO的生成有密切关系。提示细胞内GSH可能起到调节巨噬细胞NO生成和保护宿主细胞免受NO介导的细胞毒作用。     

芦荟多糖对老龄大鼠免疫功能影响的实验研究

目的：探讨芦荟多糖对老龄大鼠免疫功能的影响。方法：以老龄大鼠为模型,观察不同剂量（5g/kg、10g/kg、20g/kg,体重）芦荟多糖对老龄大鼠免疫器官指数、巨噬细胞吞噬率和吞噬指数、脾淋巴细胞增值能力的影响。结果：不同剂量芦荟多糖对胸腺及脾脏指数无明显影响,但能明显促进老龄大鼠脾淋巴细胞增值转化,大中剂量并能提高巨噬细胞的吞噬率和吞噬指数。结论：芦荟多糖具有增强和促进老龄大鼠免疫功能的作用。     

蝙蝠蛾被孢菌丝体多糖对小鼠免疫细胞的影响

目的 探讨蝙蝠蛾被孢菌丝体多糖免疫调节作用的机理.方法 将不同剂量的蝙蝠蛾被孢菌丝体多糖加入体外培养的小鼠淋巴细胞中,观察其对淋巴细胞增殖的影响.另外取CPSM培养的巨噬细胞RAW264.7,观察CPSM对巨噬细胞增殖、NO释放及吞噬中性红功能的影响.结果 CPSM具有促进体外培养的小鼠脾脏淋巴细胞增殖及促进巨噬细胞R...     

桦菌芝多糖G-F组对HepA小鼠抑瘤率、HepA瘤细胞N-ras蛋白表达的影响

目的：研究桦菌芝多糖G-F组对移植型腹水型肝癌（HepA）小鼠抑瘤率、HepA瘤细胞N-ras蛋白表达的影响,为桦菌芝多糖抑瘤作用机制的揭示及临床应用提供实验依据。方法：采用移植型腹水型肝癌（HepA）小鼠,随机分为荷瘤对照组、桦菌芝多糖G-F低剂量组、桦菌芝多糖G-F中剂量组、桦菌芝多糖G-F高剂量组、猪苓多糖组。连续给药12d后,利用颈部脱臼方法处死小鼠,将剥离的各组肿瘤组织分别称重,计算其抑瘤率;用SP免疫组化染色技术及多媒体彩色病理图文分析系统测定HepA瘤细胞中Ras蛋白的表达。结果：桦菌芝多糖可明显抑制小鼠HepA瘤,抑瘤率可达40.60%;桦菌芝多糖G-F组、猪苓多糖组Ras蛋白的表达量均明显低于阴性对照组（P〈0.05）。结论：桦菌芝多糖有明显抗肿瘤作用,其机制是降低Ras蛋白的表达,抑制HepA瘤细胞的增殖。     

龙眼多糖抗肿瘤及免疫增强活性的实验研究

目的：探讨龙眼多糖对小鼠移植性肿瘤抑制作用及免疫增强作用。方法：观察龙眼多糖对小鼠肉瘤（S180）抑制作用;ConA刺激T淋巴细胞增殖转化法;小鼠腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞（CRBC）实验;迟发型变态反应（DTH）;观察分析LP免疫增强作用。结果：S180小鼠口服龙眼多糖200、400mg/kg剂量组可明显抑制肿瘤生长;可提高T淋巴细胞介导的细胞免疫;增强B淋巴细胞介导的体液免疫;提高了小鼠巨噬细胞吞噬能力。结论：龙眼多糖对小鼠肉瘤有明显抑制作用,其体内抑制肿瘤的生长可能与提升小鼠机体免疫力有关。     

桦菌芝多糖的抗突变作用研究

目的：研究桦菌芝多糖对环磷酰胺（CP）致小鼠微核率、染色体畸变率改变的影响,以探讨其对突变的拮抗作用。方法：60只小鼠随机分成6组,分别为对照组、桦菌芝多糖低剂量组、桦菌芝多糖中剂量组、桦菌芝多糖高剂量组、猪苓多糖组、环磷酰胺组。连续8d给药,于第9、10d给予环磷酰胺,于第10d注射环磷酰胺后,颈椎脱臼法处死试验动物。取骨髓常规制片,光学显微镜观察计数微核和染色体个数。结果：与阳性对照组比较,高中低3个剂量组微核形成率和染色体畸变率有显著的差异（P〈0．05）。结论：桦菌芝多糖具有抗突变作用。     

喜炎平注射液对巨噬细胞分泌炎性因子的影响

目的：研究喜炎平注射液对LPS诱导的小鼠单核巨噬细释放炎性因子的抑制作用。方法：用LPS刺激体外培养的小鼠单核巨噬细胞RAW264．7释放TNF—α、IL-6、NO等前炎性因子，检测不同浓度的药物对巨噬细胞释放以上炎性细胞因子的抑制作用。通过ELISA的方法检测TNF—α、IL-6的含量，采用Griess法检测培养液上清中NO的含量，以MTT法评价细胞毒性。结果：喜炎平注射液在3—200μg／ml的浓度范围内可明显抑制LPS诱导的巨噬细胞RAW264．7释放炎性因子TNF—α、IL-6及NO，并呈现良好的剂量依赖关系。结论：喜炎平能明显抑制巨噬细胞释放炎性细胞因子TNF—α、IL-6和NO。     

甘草多糖对小鼠巨噬细胞吞噬功能的影响

目的：观察甘草多糖（Glycyrrhizia polysaccharide,GPS)对小鼠非特异性免疫系统功能的影响。方法：采用印度墨汁廓清实验法测定小鼠网状内皮系统（RES）中的单核巨噬细胞系统功能。结果：与正常对照组比较，口服制剂高剂量组有显著性差异（P＜0．05），注射制剂高、中剂量组有显著性差异（P＜0．01）；与香菇多糖组比较，注射制剂高、中剂量组有显著性差异（P≤0．01）。结论：GPS能提高小鼠RES功能，不仅对特异性免疫功能有促进作用，而且对非特异性免疫功能亦有增强。     

茶叶中多糖的分离及降血糖活性的研究

目的对茶叶中的水溶性中性多糖(NTPS)和酸性多糖(ATPS)进行分离,以探讨不同结构的茶多糖的降血糖活性。方法采用弱碱性的大孔阴离子交换树脂D 315分离出两种带不同电荷的茶多糖NTPS和ATPS,采用气相色谱和离子色谱分析其单糖组成,并采用DEAE-Sepharose FF对其作进一步分离,通过HPGPC法分析其分离产物主要级分的相对分子质量。通过四氧嘧啶ip造成高血糖模型,连续ig茶多糖12 d,对比研究两种茶多糖的降血糖活性。结果NTPS和ATPS都是杂聚糖。NTPS以中性糖为主,含质量分数为6.82%半乳糖醛酸,中性糖部分主要由半乳糖组成;ATPS以酸性糖为主,含质量分数为33.02%半乳糖醛酸,中性糖部分主要由鼠李糖、阿拉伯糖和半乳糖组成。两种茶多糖相对分子质量均小于3×104。NTPS、ATPS按照200和400 m g/kg.d的剂量连续给四氧嘧啶糖尿病小鼠ig 12 d,发现都能抑制四氧嘧啶糖尿病小鼠血糖的升高。结论首次采用D 315阴离子交换树脂从茶叶中分离出了不同结构的多糖NTPS和ATPS,两种多糖都有很好的降血糖效果。     

当归多糖促进慢性粒细胞白血病细胞性树突状细胞的诱导生成

目的 探讨当归多糖(APS)对慢性粒细胞白血病细胞诱导生成树突状细胞(DCs)的影响。方法 取慢性粒细胞白血病(CML)患者骨髓单个核细胞，分别予粒-巨噬集落刺激因子(GM—CSF)／白介素-4(IL-4)培养或GM-CSF／IL-4联合各浓度APS(50，100，200mg／L)培养，普通光镜和电镜观察细胞形态，台盼蓝拒染法检测细胞成活率，流式细胞仪检测DCs的免疫表型(CD80，CD86，CD83)，自体或异体混合淋巴细胞反应检测DCs刺激T淋巴细胞的增殖能力。结果GM-GSF/TL-4或GM-CSF，IL-4／APS诱导培养的慢性粒细胞白血病骨髓单个核细胞均表现出典型的树突状形态而且表达高水平的免疫表型。GM-CSF／IL-4／APS培养的DCs的细胞成活率和增殖能力显著提高，CD83，CD80，CD86表达显著升高，APS组慢性粒细胞白血病细胞诱导的树突状细胞(CML-DCs)刺激T淋巴细胞的增殖能力更强。结论 GM-CSF/IL-4/APS培养的DCs的CD83，CD80、CD86表达率明显高于GM-CSF／IL-4组。GM-CSF／IL-4／APS诱生的CML-DCs刺激T淋巴细胞增殖能力强于GM-CSF／IL-4组。APS能促进IL-4和GM-CSF对CML-DCs的诱生与成熟。     

膜法分级纯化姬松茸子实体多糖的研究

目的通过微滤和超滤对姬松茸子实体粗多糖分级纯化,获得最佳试验操作条件,考察各级相对分子质量范围内的多糖分布情况及所得制品的纯度。方法使用微滤和不同截留相对分子质量的超滤串联工艺。结果试验按相对分子质量将其分成>3×105、3×105~8×104,8×104~1×104以及<1×1044个级别,所得多糖质量分布比例约为5∶1∶3∶1。试验确定操作条件为室温,操作压力0.08~0.1MPa,微滤和各级超滤分别将各级多糖最高浓缩至45、35和25g/L。在低温下干燥制备的姬松茸多糖制品,质量分数高于70%,多糖总回收率高达83.7%。结论该工艺简单可行,姬松茸子实体多糖相对分子质量主要分布于>3×105和8×104~1×105。     

甘草多糖抗病毒作用研究

采用GPS对RNA及DNA类病毒共七种,在L929.FL细胞上进行抗病毒作用研究及机理探讨。结果表明,GPS具有明显的抗VSV、AdVⅢ、HSV-1、VV的活性。表现为能显著抑制CPE的发生,使组织培养的细胞得到保护。     

螺旋藻酸性杂多糖的分离纯化和分析

螺旋藻藻粉经热水提提,乙醇沉淀,Ｓｅｖａｇ法去蛋白质,十六烷基三甲基溴化铵（ＣＴＡＢ）沉淀得酸性杂多糖,再经ＤＥＡＥ－纤维素柱层析分经纯化两次得多糖ＰＳＰ１和ＰＳＰ２。ＰＳＰ１和ＰＳＰ２经ＨＰＬＣ的Ｃａｒｂｏｈｙｄｒａｔｅ Ａｎａｌｙｓｉｓ柱层析为单一对称峰,证明为均一多糖。纸层析和硫酸－咔唑反应分析表明：ＰＳＰ１主要由Ｄ－半乳糖、Ｄ－甘露糖、葡萄糖醛酸及Ｄ－葡萄糖四种残基组成,比例为２．１：３．     

Immunomodulators from plants and fungi

This discovery of the regulation of the immune response by hormone-like proteins (lymphokines) offers opportunities for the search for novel and specific immunomodulators through new screening procedures; it has also assisted the analysis of the mechanism of action of established immunomodulators. This is illustrated by reference to a range of immunomodulators of plant or fungal origin, chosen for the recent progress in the understanding of their mechanism of action, or their potential clinical importance. These are the vaccine adjuvant saponin, the non-specific immunostimulators lentinan and krestin (fungal polysaccharides) and bestatin (a fungal peptide) and the immunosuppressive fungal peptide cyclosporin A.     

人参多糖对K562细胞人粒-巨噬细胞集落刺激因子和促红细胞生成素及其受体表达的影响

目的研究人参多糖(GPS)对人红白血病细胞株(K562)表达人粒-巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)、促红细胞生成素(EPO)及其受体的影响。方法采用细胞体外培养技术,RT-PCR检测GPS诱导后K562细胞中GM-CSF、EPOmRNA的表达、免疫细胞化学方法检测K562细胞经GPS作用后GM-CSF、EPO及其受体蛋白表达的变化、Westernblotting检测GPS诱导后K562细胞GM-CSF、EPO受体蛋白的表达。结果经GPS诱导后,RT-PCR检测显示K562细胞GM-CSFmRNA的表达有所增强,但与对照组相比无统计学意义,EPOmRNA的表达有明显的降低;免疫细胞化学方法检测EPO与GM-CSF蛋白的表达明显减弱,EPO与GM-CSF受体蛋白的表达明显增强;Westernblotting检测GM-CSF、EPO受体蛋白的表达增强。结论GPS既能抑制K562细胞分泌GM-CSF、EPO,又能明显促进GM-CSF、EPO受体的合成和分泌。     

Hepatoprotective effects of Yulangsan polysaccharide against isoniazid and rifampicin-induced liver injury in mice

Ethnopharmacological relevance

Yulangsan polysaccharide (YLSPS) is often used in popular folk medicine in the Guangxi Zhuang Autonomous Region of China as a chief ingredient of Millettia pulchra, which is used as an hepatic protection, anti-aging and memory improving agent. In this study, the hepatoprotective effects of YLSPS against isoniazid (INH) or rifampicin and isoniazid (RFP+INH)-induced liver injury were investigated in mice.

Materials and methods

The liver injury was induced by intragastric administration of INH or RFP+INH daily for 10 days. During the experiment, the model group received INH or RFP+INH only, and the normal control group received an equal volume of saline. Treatment groups received not only INH or RFP+INH but also the corresponding drugs, DDB (200 mg/kg/day) or YLSPS (100, 200, and 400 mg/kg/day) 2 h after the administration of INH or RFP+INH.

Results

Analysis experiments showed that YLSPS significantly alleviated liver injury as indicated by the decreased levels of ALT and AST and the increased levels of SOD, GSH and GSH-Px. Moreover, YLSPS could effectively reduce the pathological tissue damage. The research on the mechanisms underlying the hepatoprotective effect showed that YLSPS was able to reduce lipid peroxidation and activate the anti-oxidative defense system.

Conclusion

Our results show that YLSPS is effective in attenuating hepatic injury in the INH or RFP+INH-induced mouse model, and could be developed as a new drug for treatment of liver injury.     

蜗牛多糖体外抗乙型肝炎病毒作用研究

目的:探讨蜗牛多糖抗乙肝病毒活性。方法:将不同浓度蜗牛多糖与HepG2.2.15细胞株共培养,以拉米夫定为阳性对照药,用ELISA法检测HBsAg和HBeAg分泌水平,实时荧光定量PCR检测HBV DNA含量,计算抑制率。结果:蜗牛多糖在体外能有效抑制HepG2.2.15细胞HBsAg和HBeAg分泌,最大抑制率分别为42.8%和52.1%;对HBV DNA的复制有一定抑制作用(P<0.05)。结论:蜗牛多糖在体外具有显著的抗乙型肝炎病毒作用,且毒性较小,具有良好应用前景。     

无花果多糖对免疫抑制小鼠的免疫调节作用

目的：研究无花果多糖（FCPS）对免疫功能低下小鼠的调节作用。方法：采用荷瘤、药物的方法建立免疫抑制小鼠动物模型、利用巨噬细胞吞噬中性红、MTT方法及淋巴细胞转化实验，检测无花果多糖对免疫抑制小鼠免疫反应的影响。结果：无花果多糖可增强吞噬细胞的功能，增中抗体形成细胞数，促进淋巴细胞的转化。结果：无花果多糖具有免疫增强作用。