黄芩苷诱导前列腺癌细胞株DU145凋亡的体外研究

目的 :探讨黄芩苷诱导前列腺癌细胞株DU14 5凋亡的作用机制。方法 :采用不同浓度的黄芩苷处理细胞后 ,用流式细胞仪检测前列腺癌细胞DU14 5的凋亡率及细胞周期分布 ;电镜下观察细胞超微结构 ;免疫组织化学染色检测凋亡相关蛋白的表达。结果 :5 0 ,12 5 μmol·L^-1黄芩苷能诱导前列腺癌细胞DU14 5凋亡 ,凋亡率与剂量正相关 ;DU14 5随药物浓度及作用时间变化 ,细胞周期分布呈现G₁期细胞比例逐渐增高 ,并出现典型的凋亡峰 ;电镜下可见特征性的凋亡小体 ;免疫组织化学染色提示bcl 2在药物处理的DU14 5中表达下调 ,Bax表达缺失 ,Fas表达上调。结论 :黄芩苷能诱导前列腺癌细胞凋亡 ,并明显抑制癌细胞增殖 ,具有直接抗肿瘤作用。     

黄芩苷诱导结肠癌细胞株SW-1116凋亡的研究

目的：探讨黄芩苷诱导结肠癌细胞株SW-1116凋亡的作用机制，为黄芩苷在抗肿瘤方面的应用提供理论依据。方法：采用不同浓度的黄芩苷处理细胞后，用流式细胞仪检测结肠癌细胞株SW-116凋亡,结果：50，100，200μmol／L黄芩苷能够诱导结肠癌细胞SW-1116凋亡，凋亡率与剂量呈正相关，SW-1116的凋亡随药物浓度及作用时间变化，细胞周期分布呈现G1期细胞比例逐渐增高，并出现典型的凋亡峰。结论：黄芩苷能诱导结肠癌细胞凋亡，并明显抑制癌细胞增殖，具有抗肿瘤作用。     

昆布多糖硫酸酯对非激素依赖型人前列腺癌细胞PC-3的作用研究

目的研究昆布多糖硫酸酯(LAMS)对体外培养的非激素依赖型人前列腺癌细胞株PC-3的作用。方法利用WST-8法检测LAMS对体外培养的非激素依赖型人前列腺癌细胞株PC-3细胞生长的抑制作用,利用流式细胞术(FCM)分析LAMS对细胞周期和凋亡的影响,利用荧光显微镜观察PC-3细胞形态。结果随着LAMS浓度的增加和作用时间的延长,对非激素依赖型人前列腺癌细胞株PC-3细胞的生长抑制率逐渐增高,呈时间-剂量效应;流式细胞仪分析,PC-3细胞凋亡率逐渐增高;但PC-3细胞的凋亡率与作用时间的延长无明显关系;荧光显微镜观察,PC-3细胞凋亡小体逐渐增多,甚至出现细胞死亡;随着LAMS浓度增加PC-3细胞G1期细胞比例逐渐减少,S+G2期细胞比例呈剂量依赖性增加,表明存在S+G2期阻滞。结论LAMS能抑制体外PC-3细胞的生长,并促进其S+G2期阻滞和凋亡,可能是其抑制前列腺癌的机制之一。     

黄芩苷抑制大鼠胰岛细胞瘤细胞株增殖的分子机制研究

目的 探索黄芩苷对大鼠胰岛细胞瘤细胞的影响及作用的分子机制。方法 应用光学显微镜、MTT测定、流式细胞仪、报告基因分析以及Western Blot等方法,探讨黄芩苷对细胞增殖和细胞周期的影响及作用分子机制。结果 黄芩苷处理大鼠胰岛细胞瘤细胞后,分裂相细胞显著减少,细胞增殖受到抑制,细胞的生存率下降,随黄芩苷浓度的增加和／或作用时间的延长,抑制率呈上升趋势,并出现凋亡细胞;胰岛细胞瘤细胞株凋亡过程中caspase-3活性以时间依赖性方式增高;通过流式细胞仪检测细胞周期发现,随黄芩苷处理浓度增加,S期细胞逐渐减少,从38．2％下降至9．4％,G0／G1期细胞所占百分率逐渐增加,从56．4％上升至85．9％,细胞出现G1阻滞;同时,细胞周期蛋白基因启动子活性显著下调,细胞周期蛋白表达明显降低。结论 黄芩苷能诱导细胞凋亡,其作用可能与caspase-3活化有关;黄芩苷还能以剂量依赖性方式和时间依赖性方式抑制胰岛细胞瘤细胞增殖,黄芩苷诱导细胞周期蛋白基因转录和表达下调可能在其中起着重要作用。     

黄芩苷对人黑色素瘤A375细胞增殖的影响

目的:探讨黄芩苷对人黑色素瘤A375细胞株体外增殖的抑制作用。方法:选用人黑色素瘤A375细胞进行体外培养,以不同浓度的黄芩苷分别处理黑色素瘤A375细胞,连续6天使用倒置显微镜进行观察,计数,绘制生长曲线;以不同浓度(0.1～50μmol/L)的黄芩苷分别处理黑色素瘤A375细胞细胞24、48、72h后,用MTT法检测细胞生长抑制率;流式细胞仪检测细胞凋亡率。结果:生长曲线及MTT法显示黄芩苷对黑色素瘤A375细胞有抑制作用,并呈剂量和时间依赖性;流式细胞仪检测到细胞在黄芩苷作用后,细胞凋亡率增加。结论:黄芩苷对人黑色素瘤A375细胞具有明显抑制作用,细胞凋亡可能是其机制之一。     

芒果甙对K562细胞端粒酶活性和细胞周期的影响

目的:研究芒果甙对白血病K562细胞端粒酶活性及其细胞周期的影响。方法:采用端粒重复序列扩增(telomeric repeat amplification protocol,TRAP)PCR-ELISA方法检测K562细胞经芒果甙作用前后端粒酶活性的变化,应用流式细胞仪检测细胞周期的分布。结果:经芒果甙作用后,K562细胞端粒酶活性下降,随药物浓度增加和作用时间的延长,其抑制作用增强;芒果甙作用24小时后,K562细胞G2/M期细胞增多,S期细胞减少,出现G2/M期阻滞,并呈现剂量依赖性。结论:芒果甙能抑制K562细胞的端粒酶活性,其机制可能与其细胞周期阻滞作用有关。     

黄芩苷抑制肝癌HepG-2细胞增殖的实验研究

目的观察黄芩苷对肝癌HepG-2细胞增殖的影响。方法采用MTT比色法观察黄芩苷抑制肝癌HepG-2细胞增殖；采用流式细胞仪检测黄芩苷对HepG-2细胞周期分布的影响。结果黄芩苷可抑制肝癌HepG-2细胞增殖，其作用具有时间和浓度依赖性；黄芩苷可诱导细胞凋亡，同时改变细胞周期分布，多数细胞阻滞于S期，与对照组比较，细胞凋亡率差异有显著性。结论黄芩苷可诱导肝癌HepG-2细胞凋亡，改变细胞周期分布，从而抑制细胞增殖。     

漆树黄酮对人肝癌细胞株HepG2增殖、生长周期和细胞凋亡的影响

目的 观察漆树黄酮对人肝癌细胞株HepG2细胞生长增殖和生长周期的影响,并初步探讨其作用机制.方法 采用 MTT比色法研究漆树黄酮对人肝癌细胞株HepG2细胞生长抑制作用;通过流式细胞仪检测DNA含量,分析细胞周期的分布.结果 MTT实验结果表明较高浓度的漆树黄酮对人肝癌细胞株HepG2细胞具有直接的抑制作用,并呈剂量和时间依赖性,200 μmol·L-1 的漆树黄酮作用于人肝癌细胞株HepG2细胞72 h后,对细胞生长的抑制率最高可达53.78%,同对照组相比(P<0.01);流式细胞术实验结果表明,不同浓度的漆树黄酮作用于人肝癌细胞株HepG2 12 h后,可使G1期肿瘤细胞增多,引起G1期阻滞,作用时间为24 h、48 h时,则可引起S期阻滞;同时,不同浓度的漆树黄酮在不同的时间点都可使HepG2细胞出现明显的凋亡峰.结论 漆树黄酮具有直接抑制肿瘤细胞生长的作用,其机制可能与引起细胞周期阻滞和诱导凋亡有关.     

常春藤皂苷元对前列腺癌DU145细胞增殖、迁移和侵袭能力的影响

目的:探讨常春藤皂苷元对前列腺癌细胞增殖、迁移和侵袭能力的影响,以及可能的机制。方法:培养人前列腺癌细胞株DU145,分别加入不同浓度常春藤皂苷元(25、50、100μg/ml)作用于DU145细胞,继续培养12、24、36、48h,采用MTT法检测不同浓度常春藤皂苷元对DU145细胞增殖的影响;流式细胞术检测细胞凋亡;利用Transwell小室检测细胞迁移和侵袭能力;利用实时荧光定量PCR检测Bcl-2、Bax、PI3K、Akt基因表达,利用Western blot检测Bcl-2、Bax、PI3K、p-PI3K、Akt和p-Akt蛋白表达。结果:随着常春藤皂苷元浓度(25、50、100μg/ml)的增加,可显著抑制DU145细胞的增殖,这种抑制作用具有时间和剂量依赖性;随着常春藤皂苷元浓度(25、50、100μg/ml)的增加,DU145细胞细胞凋亡率升高;与对照组相比,常春藤皂苷元能显著抑制DU145细胞迁移和侵袭能力;常春藤皂苷元不同浓度组处理DU145细胞48h后,随着常春藤皂苷元浓度升高,Bcl-2、PI3K、Akt mRNA和蛋白相对表达量下降,而Bax mRNA和蛋白相对表达量升高。结论:常春藤皂苷元可抑制前列腺癌细胞增殖、迁移及侵袭能力,促进细胞凋亡发生,且表现出一定的剂量-反应关系,其机制可能与抑制PI3K/Akt信号通路有关。     

土槿乙酸诱导前列腺癌DU-145细胞周期阻滞的机制研究

目的:探讨土槿乙酸(pseudolaric acid B,PLAB)对人前列腺癌细胞株DU-145细胞增殖和细胞周期的影响.方法:MTT法检测PLAB对细胞生长抑制作用;Hoechst 33342荧光染色分析细胞死亡特征;流式细胞术检测细胞周期;Real-time PCR和Western blot检测周期相关基因cyclin B1,CDK1和cyclin D1的表达变化.结果:PLAB明显抑制DU-145细胞生长,且抑制作用呈浓度-作用时间依赖性(P＜0.05),其24,48,72 h的IC50分别为4.53,2.39,2.08 μmol·L-1.5μmol·L-1PLAB处理细胞24 h,细胞出现核染色质凝集、凋亡小体等典型凋亡特征,随着PLAB浓度升高,G2/M期细胞比例明显增大并表现出时间依赖性(P＜0.05),同时伴有cyclin B1和CDK1呈高表达状态(P＜0.05),cyclin D1呈低表达状态(P＜0.05).结论:PLAB可抑制DU-145细胞生长,引起细胞G2/M期阻滞,伴随cyclin B1和CDK1呈高表达状态,可能与其调控周期相关蛋白降解有关.     

广藿香醇对人雄激素非依赖性前列腺癌细胞DU145生长的抑制作用及机制

目的:观察广藿香醇(pachouli alcohol,PA)对人雄激素非依赖性前列腺癌细胞DU145的凋亡诱导效应及增殖抑制作用,探讨其发生机制。方法:广藿香醇10,20,40,80,160 mg·L-1作用在密度为6×107/L DU145细胞24,48,72 h后,采用四甲基偶氮唑盐法(MTT)检测广藿香醇对细胞的生长抑制作用;透射电镜观察药物诱导细胞凋亡形态变化;Annexin V-FITC,PI双标记法流式细胞仪检测药物诱发细胞凋亡的改变;Western blot检测半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3(Caspase-3)、B细胞淋巴瘤/白血病-2蛋白(Bcl-2)、Bcl-2关联X蛋白(Bax)、凋亡抑制蛋白Livin的表达。结果:MTT法检测提示广藿香醇处理组细胞增殖抑制作用明显,10,20,40,80,160 mg·L-1广藿香醇对DU145的24,48,72 h抑制率分别为5.73%,16.67%,22.61%;13.42%,25.03%,39.68%;25.92%,31.46%,52.76%;39.61%,54.68%,73.52%;56.42%,77.35%,91.58%,呈剂量-时间依赖性(P<0.05)。透射电镜显示药物作用后细胞出现凋亡形态改变。流式细胞仪检测提示广藿香醇作用使细胞凋亡率明显升高,与对照组比较有统计学意义(P<0.05)。Western blot检测提示广藿香醇可增强细胞Caspase-3,Bax的表达,下调Livin,Bcl-2蛋白的表达。结论:广藿香醇能抑制DU145细胞增殖,其作用机制可能与诱导细胞凋亡效应有关。     

肿节风对人前列腺癌DU-145细胞增殖和凋亡的影响

目的:探讨中药肿节风溶液对人前列腺癌DU-145细胞增殖和凋亡的影响。方法:采用细胞培养的方法,用不同浓度的肿节风溶液作用于DU-145细胞48h,用MTT法检测用药后细胞的增殖情况,用流式细胞技术检测细胞的周期和凋亡状况。结果:肿节风溶液作用48h后,DU-145细胞表现形态和数量改变,出现数量减少,形态不规则,不同程度的细胞皱缩,边缘毛糙,染色质凝集或细胞核固缩碎裂;细胞增殖受到抑制,细胞周期阻滞于G2/M期,细胞凋亡率明显增加并呈一定的量效关系。结论:肿节风溶液促使人前列腺癌DU-145细胞形态改变,增殖抑制,细胞周期阻滞和加速细胞凋亡。     

大蒜生理活性物质对胃癌细胞和黑色素瘤细胞抑制作用的研究

目的:研究大蒜生理活性物质对人胃癌细胞MGC-9和小鼠黑色素瘤细胞B16细胞增殖及细胞周期的影响。方法:用倒置显微镜观察细胞形态,噻唑蓝(MTT)比色法测定细胞增殖抑制率;流式细胞仪检测B16细胞周期分布的影响。结果:经大蒜素及其前体物质蒜氨酸、蒜氨酸酶和蒜氨酸+蒜氨酸酶处理后,MGC-9和B16细胞不同程度变圆,体积缩小,脱壁细胞增多;除蒜氨酸酶外,蒜氨酸、大蒜素和蒜氨酸+蒜氨酸酶都能诱导MGC-9和B16产生时间和剂量依赖性的增殖抑制作用,其中蒜氨酸+蒜氨酸酶的作用尤为显著。大蒜素和蒜氨酸+蒜氨酸酶阻滞B16细胞于G0/G1期。结论:本文由大蒜提取物处理后结果与已发表的临床研究相一致。     

冬凌草甲素对人鼻咽癌细胞CNE-2的抑制作用

目的探讨冬凌草甲素对人鼻咽癌细胞CNE-2的抑制作用,为其临床应用提供理论依据。方法SRB法检测冬凌草甲素对CNE-2细胞生长的抑制作用,流式细胞仪分析细胞周期的变化、检测细胞凋亡的发生。结果冬凌草甲素抑制CNE-2细胞的生长,引起细胞死亡;冬凌草甲素诱导CNE-2细胞发生凋亡和坏死,流式细胞分析发现“亚G1期峰”;冬凌草甲素作用后CNE-2细胞的G2/M期比例增多。结论凋亡和坏死同为冬凌草甲素抑制CNE-2细胞生长的机制,可能与改变细胞周期有关,且具有浓度依赖性。     

粉防己碱联合奈达铂抗人肝癌7402细胞作用的实验研究

目的:探讨粉防己碱与奈达铂联合应用对人肝癌细胞株7402的影响及其作用机制。方法:经不同浓度的粉防己碱和(或)奈达铂处理7402细胞后,采用MTT法测定细胞的增殖抑制效应;AO/EB荧光染色、流式细胞术观察细胞凋亡及细胞周期变化;免疫组织化学法观察凋亡相关基因表达的变化。结果:与粉防己碱或奈达铂单药作用相比,粉防己碱与奈达铂联合应用可显著增强人肝癌细胞增殖抑制作用和诱导肝癌细胞凋亡作用,联合用药后细胞周期分布发生改变,S期和G2/M期细胞比例下降,G0/G1期细胞比例上升,癌细胞Bc l-2基因表达明显下降,BAX表达显著增强。结论:粉防己碱与奈达铂联合应用具有显著协同抗肝癌作用,其机制可能与增强诱导肝癌细胞凋亡、细胞周期调控以及凋亡相关基因表达的调控有关。     

苦参碱对人胃癌细胞NCI-N87体外的增殖抑制作用

目的探讨不同浓度苦参碱对体外培养的人胃癌细胞NCI-N87的增殖抑制作用。方法NCI-N87细胞经不同浓度苦参碱处理后,采用CCK-8法检测药物对肿瘤细胞的抑制作用,观察细胞形态学改变,检测细胞DNA分布。结果苦参碱浓度>3.0mg/ml,细胞毒作用较大;浓度在0.5～2.0mg/ml时,对肿瘤细胞的生长有抑制作用,且呈时间剂量依赖性;浓度在0.1mg/ml时,对肿瘤细胞生长几乎无抑制作用。苦参碱作用后可增加G1期细胞所占的百分比,阻止细胞进入S期。结论苦参碱对人胃癌细胞NCI-N87增殖有抑制作用,并能阻抑细胞周期的进程。     

紫杉醇、硒酸酯多糖序贯给药对乳腺癌MCF-7细胞抑制作用的研究

目的:研究硒酸酯多糖与紫杉醇单独及序贯给药对体外培养乳腺癌MCF-7细胞的生长抑制作用及对细胞周期的影响。方法:采用MTT法及SRB法检测药物对乳腺癌MCF-7细胞体外杀伤作用,应用金氏公式判断联合用药效果,流式细胞仪检测细胞周期及凋亡率。结果:MTT及SRB法结果显示,药物对MCF-7细胞的抑制作用呈剂量依赖性,两者联合作用效果优于单独作用组,30mg/L的硒酸酯多糖与0.5～2nmol/L紫杉醇联合应用表现为协同作用,与4nmol/L紫杉醇联合应用表现为相加作用。流式细胞术结果显示,紫杉醇作用于G1期,同时添加组及序贯给药组既可发生S期和G2/M期周期阻滞,又可诱导凋亡,但凋亡率低于Taxol单独组。结论:紫杉醇与硒酸酯多糖对乳腺癌MCF-7细胞有协同抑制增殖和诱导凋亡的作用。     

蜈蚣提取物诱导宫颈癌HeLa细胞凋亡及其机制的研究

目的研究蜈蚣提取物对宫颈癌HeLa细胞生长的抑制及其作用机制。方法观察不同浓度的不同蜈蚣提取物对宫颈癌HeLa细胞的生长抑制情况:运用体外细胞培养技术,以不同浓度的蜈蚣提取物以及阳性对照药顺铂作用于培养的HeLa细胞48h,采用MTT法测定细胞代谢率,以流式细胞术观察DNA含量和凋亡的变化情况,DNA片断化分析和western Blot测定Bax,Caspase 3蛋白水平的表达。结果HeLa细胞用4,8,16mg/ml的乙醚、乙醇蜈蚣提取物处理48h后,细胞存活率显著降低;DNA周期改变明显,亚G1峰与对照组有显著性差异;DNA-Ladder典型;Western Blot提示蜈蚣提取物作用HeLa细胞后Bax,caspase 3蛋白表达,凋亡率显著增高。结论中药蜈蚣乙醚、乙醇提取物在体外对宫颈癌HeLa细胞的生长有明显地抑制作用,机制与改变细胞DNA周期,促进凋亡有关。     

甜橙黄酮对人胃癌AGS细胞增殖和凋亡的作用及其机制研究

目的:探讨甜橙黄酮对人胃癌AGS细胞增殖和凋亡的作用及其机制.方法:采用MTT法观察甜橙黄酮对AGS胃癌细胞生长的抑制作用;流式细胞仪检测甜橙黄酮对细胞周期的影响;Annexin V-FITC/PI标记定量检测细胞凋亡率,DNA片段化分析进一步验证甜橙黄酮对细胞凋亡的作用;Hoechst 33342染色后倒置荧光显微镜观察凋亡细胞形态;Westem blot检测对p21和p53蛋白表达的影响.结果:甜橙黄酮可明显抑制 AGS胃癌细胞的增殖,呈时间和剂量依赖性;甜橙黄酮可阻滞细胞于G2/M期和增加AGS胃癌细胞凋亡率,并随剂量增大作用增强;60 pmol·L-1甜橙黄酮作用48 h产生凋亡特有的梯形条带;Hoechst 33342染色观察到甜橙黄酮给药组出现细胞核浓缩、边缘化以及凋亡小体等细胞凋亡的形态特征;甜橙黄酮可呈剂量依赖地增强p21和p53蛋白表达.结论:甜橙黄酮可显著抑制人AGS胃癌细胞的增殖,使细胞阻滞于G2/M期,并可诱导细胞凋亡,其机制可能与上调p21和p53蛋白有关.