异博定对白血病K562细胞耐药性的逆转作用

目的：研究异博定对Ｐ－糖蛋白（Ｐｇｐ）介导的人类白血病Ｋ５６２细胞多药药作用。方法：用台盼蓝拒染法检测药物敏感性及异博定对细胞耐药性的影响,用免疫组织化学法检测Ｐｇｐ的表达,用汉式细胞仪检测细胞柔红霉素（ＤＮＲ）积聚。结果：ＤＮＲ诱导的耐药细胞Ｋ５６２／Ｄ对ＤＮＲ,长春新碱（ＶＣＲ）、高三尖杉脂碱（ＨＨＴ）、鬼臼药物积聚增加,明显地逆转了Ｋ５６２／Ｄ细胞对ＤＮＲ、ＶＣＲ、ＭＩＴ、ＨＨＨＴ、ＶＰ－１     

洛美利嗪逆转K562/A02细胞多药耐药的研究

目的 :研究洛美利嗪对肿瘤多药耐药的逆转作用 ,探讨洛美利嗪逆转肿瘤细胞多药耐药的机制。方法 :以人红白血病细胞系K5 6 2及其耐药细胞系K5 6 2 /A0 2 (耐阿霉素 )为研究对象 ,采用MTT法检测细胞毒作用 ;免疫组化测定法检测P 糖蛋白 (P glycoprotein ,P gp)表达水平 ;RT PCR法检测mdr1mRNA水平 ;以流式细胞术测定两种细胞系内罗丹明 12 3(Rh12 3)的潴留来反映P gp的外排功能。结果 :与K5 6 2细胞系相比 ,K5 6 2 /A0 2耐药细胞系mdr1mRNA及P gp高表达 ,Rh12 3潴留减少。洛美利嗪 (10 μmol/L)对K5 6 2 /A0 2细胞的mdr1mRNA及P gp表达水平无明显影响 (P >0 .0 5 )。洛美利嗪对K5 6 2 /A0 2细胞的阿霉素 (ADM)、长春新碱 (VCR)细胞毒性有剂量相关性增敏作用。洛美利嗪能增加K5 6 2 /A0 2耐药细胞系的Rh12 3潴留。结论 :洛美利嗪对K5 6 2 /A0 2细胞的ADM、VCR细胞毒性有剂量相关性增敏作用 ,其机制可能与增加细胞内药物浓度有关。     

苦瓜蛋白对K562／A02耐药逆转作用的研究

[目的]观察苦瓜蛋白对K562／A02细胞多药耐药的逆转及对PgP表达、功能的影响。[方法]采用CCK-8法测IC50,用流式细胞仪测定苦瓜蛋白对K562／A02细胞上P-gp表达及细胞内ADM潴留的影响。[结果]苦瓜蛋白能提高K562／A02对多种化疗药物敏感性,使P-gP蛋白表达下降,提高细胞内ADM的浓度。[结论]苦瓜蛋白能部分逆转K562／A02的耐药性,逆转机制与下调P-gP蛋白的表达有关。     

红霉素对人类白血病细胞系CCRF-CEM/VLB100耐药性逆转作用的研究

本文报告,亲脂性抗生素红霉素在体外培养条件下,成功地逆转了人类淋巴细胞白血病细胞系CCRF-CEM/VLB100对长春花碱的耐药性。免疫荧光检测证实,耐药细胞膜上有P-糖蛋白高表达,阳性率为94％;敏感细胞则无P-糖蛋白表达。耐药细胞经红霉素作用后,P-糖蛋白阳性半降至30％以下。据此认为,红霉素使耐药细胞膜上P-糖蛋白表达降低,阻断了耐药细胞泵出药物的功能,可能是其逆转耐药性的基础。我们首次将红霉素用于人类白血病细胞系,对耐药性逆转作用的实验研究及临床应用均有积极的意义。     

氨氯地平衍生物CJX2对K562/DOX细胞阿霉素耐药的逆转作用

目的:研究氨氯地平衍生物CJX2对K562/DOX细胞阿霉素耐药的逆转作用。方法:应用流式细胞仪和MTT法观察了CJX2对K562/DOX细胞P-糖蛋白(P-glycoprotein,Pgp)的抑制作用及对K562/DOX细胞阿霉素耐药的逆转作用。结果:CJX2能剂量相关性地增加K562/DOX细胞对罗丹明123(rhodamine123,Rh123)的摄取以及细胞内Rh123的累积,明显抑制Pgp介导的Rh123外排,显著增强阿霉素对K562/DOX细胞的细胞毒作用,提高细胞caspase3活性,增加K562/DOX细胞内阿霉素水平。结论:氨氯地平衍生物CJX2能显著抑制Pgp的外排功能,逆转Pgp介导的K562/DOX细胞的多药耐药性。     

多药耐药逆转剂抗白血病细胞多药耐药性的作用

白血病细胞对化疗药物产生多药耐药性是联合化疗失败的最重要原因之一.虽然大量研究表明白血病耐药的机制很多,包括细胞膜药物泵分子的诱导、细胞浆内药物代谢酶活性或代谢途径的改变、白血病细胞凋亡机制的改变等,但P-糖蛋白(P-glycoprotein,P-gp)在白血病细胞膜上的表达仍是目前研究发现最主要的耐药机制.     

Thapsigargin逆转K562/A02细胞多药耐药性的实验研究

目的 探讨内质网Ca^2 -ATP酶抑制剂thapsigargin对白血病多药耐药细胞株K562／A02化疗敏感性的影响。方法 用MTT比色法检测K562／A02细胞耐药性、thapsigargin的增殖抑制活性及其对K562／A02细胞化疗敏感性的影响；丫啶橙(AO)／溴化乙锭(EB)染色荧光显微镜观察thapsigargin处理后K562／A02细胞形态改变；流式细胞仪(FCM)检测P-糖蛋白(P-gp)表达；荧光显微镜检测Pgp功能。结果 ①thapsigargin对K562和K562／A02细胞的增殖抑制活性呈剂量和时间依赖性，K562／A02细胞较K562细胞对thapsigargin更敏感，thapsigargin诱导K562／A02细胞呈现典型的凋亡细胞形态学改变。②K562／A02细胞对阿霉素(ADM)、柔红霉素(DNR)、长春新碱(VCR)、依托泊苷(VP-16)、高三尖杉酯碱(HHT)和米托蒽醌(MXT)均出现不同程度的耐药性；thapsigargin抑制K562／A02细胞P-gP功能而对其表达无影响，thapsigargin能增加K562／A02细胞对ADM、DNR、VCR、VP-16、HHT和MXT的化疗敏感性。结论 Thapsigargin能诱导白血病多药耐药细胞株K562／A02细胞凋亡并能部分逆转K562／A02的多药耐药性；thapsigargin的多药耐药逆转功能可能与其凋亡诱导作用和抑制PgP功能有关。     

白血病K562/ADM细胞耐药性与白血病干细胞及耐药蛋白表达的关系

目的 观察白血病药物敏感和耐受细胞中白血病干细胞(ISC)、耐药蛋白表达和耐药性的关系.方法 以白血病多药耐药株K562/ADM细胞及其亲本K562细胞为模型,MTT比色法测定细胞的药物耐受性;流式细胞术检测细胞免疫标志、P-糖蛋白(P-gp)和乳腺癌耐药蛋白(BCRP)的表达;甲基纤维素集落形成法检测细胞的自我更新和增殖潜能.结果 K562/ADM细胞对阿霉素、柔红霉素和鬼臼乙叉苷高度耐受.K562/ADM细胞中CD34+、CD123+和CD34+CD38-细胞含量均显著高于K562细胞,LSC细胞相对含量是K562细胞的4.12倍;共表达P-gP和BCRP的K562/ADM细胞比K562细胞高11.25倍,其中CD34+ CD38- CD123+ BCRP+和CD34+ CD38- P-gp+ BCRP+细胞数量分别为K562细胞的3.66倍和11.37倍.K562/ADM细胞集落形成率是K562细胞的4.17倍,与LSC含量相当.结论 白血病K562/ADM耐药细胞中存在的高表达耐药蛋白的耐药性LSC是其多药物耐受性的根源.     

氨氯地平衍生物CJX1对K562/DOX细胞阿霉素耐药的逆转作用

目的:研究氨氯地平衍生物CJX1对K5 6 2 /DOX细胞阿霉素耐药的逆转作用。方法:应用流式细胞仪和MTT法观察了CJX1对K5 6 2 /DOX细胞P- 糖蛋白(P -gp)的抑制作用及对K5 6 2 /DOX细胞阿霉素耐药的逆转作用。结果:CJX1能剂量相关性地增加K5 6 2 /DOX细胞内罗丹明12 3(Rh 12 3)的累计,明显抑制P -gp介导的Rh 12 3外排,显著增强阿霉素对K5 6 2 /DOX细胞的细胞毒作用,增加K5 6 2 /DOX细胞内阿霉素水平。结论:氨氯地平衍生物CJX1能显著抑制P gp的外排功能,逆转K5 6 2 /DOX细胞的多药耐药性。     

白血病K562/ADM细胞耐药性与白血病干细胞及耐药蛋白表达的关系

Objective To investigate the drug resistance, proportion of leukemia stem cells (LSC) and expression of P-glycoprotein (P-gp) and breast cancer resistance protein (BCRP) in drug-sensitive and multidrug-resistant leukemia cell population. Methods The multidrug-resistant leukemia K562/ADM cell and its parental K562 cell were used as the model cells. The drug sensitivity was tested with a MTI" assay. Flow cytometry was employed to detect the immunophenotype of stem celia and the expression of P-gp and BCRP. The serf-renewal and proliferating potential were examined with methylcellulose colony-formlng unit assay. Results K562/ADM cells were highly resistant to adriamycin, daunorubincin and etoposide. The amount of CD34+, CD123+ and CD34+ CD38- cells in K562/ADM cells was much higher than that in K562 cells, and the proportion of CD34+ CD38-CD123+ cells(LSC) in K562/ADM cells was (5.23 ± 0. 21) % versus (1.27 ± 0. 17) % in K562 cells, which was 4. 12-fold higher than that in K562 cells. Both P-gp and BCRP were overexpressed in K562/ADM cells relative to K562 cells, and the K562/ADM cells co-expressing P-gp and BCRP were 11.25-fold higher over K562 cells. The proportion of CD34+ CD38- CD123+BCRP+ and CD34+ CD38- P-gp+ BCRP+cells in K562/ADM cells were (4. 13±0.40)% and (5. 80 ± 1.19)% respectively, which were 3.66- and 11. 37-fold higher than the same cells in K562 cells [(1.13 ± 0. 15) % and (0. 51 ± 0. 01) %]. Furthermore, drug-resistant K562/ADM cells displayed 4. 17-time greater colony-forming ability over the parent K562 cells, corresponding to the proportion of LSCs in K562/ADM cells. Conclusions The ABC transporters-overexpressing LSC population exists in drug-resistant leukemic K562/ADM cells relative to drug-sensitive K562 cells, and the drug-resistant LSCs may be the source of chemotherapeutic resistance of leukemia.     

异博定对乳腺癌细胞多药耐药性逆转作用的研究

目的：检测异博定逆转乳腺癌耐药细胞株对阿霉素的耐药性。方法：ＭＴＴ法检测细胞的抑制率变化，流式细胞仪检查异博定对ＭＣＦ－７／Ａｄｒ细胞的药物浓度变化。结果：异博定可提高肿瘤细胞的药物浓度（Ｐ＜０．０１），并且使ＭＣＦ－７／Ａｄｒ细胞对阿霉素的敏感性增加２０倍。结论：本实验证实异博定可增加细胞内抗肿瘤药物浓度，逆转细胞的耐药性，为临床应用异博定逆转肿瘤的耐药性提供了理论基础。     

阿霉素纳米粒对白血病耐药细胞株K562/DOX耐药逆转作用的研究

目的　合成阿霉素聚氰基丙烯酸异丁酯纳米粒 ,观察其对阿霉素耐受性细胞株K5 6 2 (K5 6 2 /DOX)耐药性逆转效果并探讨可能机制。方法　采用乳液聚合法合成纳米粒 ,透射电镜观察计算粒径 ,分光光度法计算包封率 ;以梯度浓度的阿霉素纳米粒处理培养的K5 6 2 /DOX细胞 ,噻唑蓝比色法 (MTT)检测K5 6 2 /DOX细胞的半数生长抑制浓度 (IC50 )并计算逆转倍数 ;流式细胞术检测细胞内药物浓度 ;TUNEL法检测药物诱导后凋亡的发生及凋亡率。结果　阿霉素纳米粒平均粒径 (98 5± 3 7)nm ,包封率为 95 % ;MTT结果显示阿霉素纳米粒对K5 6 2 /DOX细胞的生长抑制率较单纯阿霉素显著增高 ,阿霉素纳米粒对K5 6 2 /DOX的耐药逆转倍数为 6 2 ;TUNEL检测经 10 μg/ml阿霉素纳米粒处理后的K5 6 2 /DOX平均凋亡率为 38 7%。结论　以聚氰基丙烯酸异丁酯纳米粒为载体的阿霉素可增强诱导K5 6 2 /DOX细胞凋亡的效率和有效逆转其耐药性。     

中药复方君子汤对白血病细胞株K562/VCR耐药性的逆转作用

观察中药复方君子汤(FFJZ)对白血病耐药细胞株K562/VCR细胞耐药性的逆转效果.方法 采用MTT法、流式细胞仪术分别检测FFJZ、环孢霉素A(CsA)和维拉帕米(VRP)作用于白血病耐药细胞株K562/VCR的耐药指数、逆转指数及细胞内ADM的浓度,与CsA、VRP进行比较. 结果 FFJZ、CsA和VRP在...     

凋亡调节蛋白的表达与K562／VCR多药耐药性的关系

目的探讨K562/VCR细胞中凋亡调节蛋白表达的变化与其多药耐药性(MDR)的关系。方法通过免疫细胞化学法和免疫印迹法(westernblot)对凋亡调节蛋白Bcl-2、Bcl-X     

中药复方君子汤联合阿霉素逆转白血病K562/VCR细胞多药耐药及诱导凋亡的机制研究

【目的】探讨中药复方君子汤(FFJZ)联合阿霉素(DOX)逆转白血病K562/VCR细胞多药耐药及诱导凋亡的机制。【方法】采用CCK8法检测细胞耐药性及耐药性逆转作用;采用流式细胞术检测细胞总凋亡率和早期凋亡率;采用实时荧光定量逆转录—聚合酶链反应(RT-PCR)检测多药耐药基因1(MDR1)、P糖蛋白(P-gp)、乳腺癌耐药相关蛋白(BCRP)、B淋巴细胞瘤-2相关X蛋白(Bax)和B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)的基因表达水平;Western blot法检测Bax、Bcl-2蛋白表达。【结果】CCK-8检测结果显示:无细胞毒性的FFJZ(6 mg/m L)、DOX(5 mg/m L)单独用药可显著降低K562/VCR的半数抑制浓度指数(IC_(50))(P0.05),两药联合应用对K562/VCR逆转指数显著高于单独应用(P0.05)。流式细胞术结果显示:作用浓度为4、6 mg/m L的FFJZ联合DOX(5 mg/m L)能够提高K562/VCR细胞总凋亡率和早期凋亡率,与DOX对照组比较差异有统计学意义(P0.05)。RT-PCR结果显示:FFJZ联合DOX应用可下调MDR1、BCRP、P-gp m RNA表达,与DOX对照组比较,差异无统计学意义(P0.05);FFJZ联合DOX应用可上调Bax m RNA、下调Bcl-2 m RNA表达,与DOX对照组比较,差异有统计学意义(P0.01)。Western blot结果显示:FFJZ联合DOX与对照组比较,Bax蛋白表达显著上调(P0.05),Bcl-2蛋白表达显著下调(P0.05),与Bax、Bcl-2 m RNA表达一致。【结论】无细胞毒性的FFJZ、DOX对K562/VCR细胞耐药性均有逆转作用,两药联合应用具有明显的协同效应,其机制可能与其上调促凋亡基因Bax和下调抗凋亡基因Bcl-2的表达有关。     

反义核酸对肿瘤细胞多药抗性的抑制：作用靶点及作用方？…

为了用反义寡聚ＤＮＡ调控要霉素肿瘤细胞ＫＢ－Ａ－１的多药抗性,对反义核酸的预作用位点、作用方式和硫代化类似物进行了研究。筛选得到两段对应于翻译起始区（３）和Ｐ－糖蛋白ＡＴＰ结合位点（９）的２０聚反义片段,发现反义核酸的使用次数对结果的检测有很大影响,采用５μｍｏｌ／Ｌ５μｍｏｌ／Ｌ的反义片段９连续处理４ｄ,实现了将近５０％抑制效果,而其正义和错义链在１０μｍｏｌ／Ｌ沈度的同样处理条件下则没有检测到     

多药耐药相关蛋白及P-糖蛋白在胃癌组织中表达的意义

目的 :分析多药耐药相关蛋白 (multidrug resistance associated protein,MRP)、P-糖蛋白 (P- gp)在胃癌组织中表达 ,研究其与胃癌生物学行为及预后的关系。方法 :采用免疫组化法检测 5 3例胃癌组织 MRP、P- gp表达的情况 ,分析其与相关临床资料的关系。结果 :MRP、P- gp表达与临床分期、浸润深度、组织学类型无关。MRP表达与淋巴结转移显著相关 (P <0 .0 1)。 MRP、P- gp表达与 5年生存率无关。结论 :MRP在胃癌组织中的单一表达能一定程度上反映胃癌的生物学行为。 MRP、P- gp均不能较好的反映胃癌的预后     

参芪扶正注射液对K562/ADM多药耐药的影响

目的研究参芪扶正注射液对K562耐药细胞株（K562／ADM）多药耐药的影响。方法采用MTT法检测参芪扶正注射液的细胞毒性；采用PI单染色流式细胞术检测ADM加以及不加参芪扶正注射液处理K562／ADM后的细胞凋亡率；采用直接免疫荧光法流式细胞术检测参芪扶正注射液处理K562／ADM细胞的Bcl-2基因表达水平。结果（1）参芪扶正注射液在10μL／mL时对K562／ADM增殖无抑制作用；（2）参芪扶正注射液明显增加ADM对K562／ADM的毒性作用（P〈0.05），参芪扶正注射液在10μL／mL时耐药逆转倍数为1．71；（3）参芪扶正注射液可明显增强ADM对K562／ADM的促凋亡作用（P〈0．05）；（4）参芪扶正注射液可明显抑制K562／ADM的Bcl-2基因表达（P〈0.05）。结论参苠扶正注射液可以逆转K562／ADM耐药性，其可能机制是促进细胞凋亡和下调Bcl-2表达。     

粉防己甲素逆转耐药细胞株K_(562)/VCR多药耐药的研究

粉防己甲素(Tet)可逆转耐药细胞株K_(562)/VCR对长春新碱(VCR)、足叶乙甙(VP—16)、阿霉素(Dox)和柔红霉素(Dau)的多药耐药。2×10~(-7)～5×10~(-6)μmol/L处理细胞后,VCR、VP—16、Dox和Dau对K_(562)/VCR的半数抑制剂量(IC_(50))分别减少3.4～45.5、1.5～38.5、2.6～9.7和3.2～33.1倍。1×10~(-6)μmol/L Tet与0.02～0.2μmol/L的上述抗癌药共同处理细胞后,其细胞集落数分别减少44.3～84.5、56.4～79.0,52.6～97.4和63.9～10.0％。本文结果表明,Tet是一有效的肿瘤多药耐药逆转剂。