不同囊胚形成时间对冻融单囊胚移植周期妊娠结局的影响

目的探讨在冻融单囊胚移植周期中,囊胚形成时间对妊娠结局的影响。方法回顾性分析2013年1月至2017年8月在深圳中山泌尿外科医院行冻融单囊胚移植的1 761个周期的临床资料,根据囊胚形成时间和胚胎质量分为4组,其中移植胚胎为第5天(D5)优质囊胚者设为A1组(n=635);移植胚胎为D5非优质囊胚设为A2组(n=199);移植胚胎为D6优质囊胚设为B1组(n=418),移植胚胎为D6非优质囊胚设为B2组(n=509)。比较各组间的临床妊娠率、早期流产率、活产率等,利用多因素Logistic回归分析女方年龄、不孕年限、女方体重指数(BMI)及囊胚形成时间对临床妊娠结局的影响。结果 A1组与B1组的BMI、HCG阳性率、临床妊娠率、早期流产率、活产率、早产率比较均无显著性差异(P0.05);两组的年龄及不孕年限比较均有显著性差异(P0.05)。A2组与B2组的不孕年限、BMI、早期流产率、早产率比较均无显著性差异(P0.05),两组的年龄比较有显著性差异(P0.05);A2组的HCG阳性率、临床妊娠率、活产率均显著高于B2组(P0.05)。多因素Logistic回归分析发现,非优质胚胎组中,囊胚形成时间是引起两组间临床妊娠率差异的显著因素[OR=2.240,95%CI(1.592-3.152)](P0.05)。结论在冻融单囊胚移植时,若移植胚胎为优胚,则囊胚形成时间对于妊娠结局无显著影响;但当移植囊胚为非优胚时,囊胚形成时间对妊娠结局有显著影响,D5囊胚移植妊娠结局优于D6囊胚移植。     

低等级胚胎囊胚培养及冻融周期移植后临床结局分析

目的评价低等级胚胎囊胚培养的价值,并观察其囊胚移植后的临床结局。方法共纳入684个周期,将新鲜周期剩余无冷冻价值的低等级胚胎继续行囊胚培养,当有囊胚形成时给予冷冻保存,若新鲜周期移植后未妊娠,则行冻融周期囊胚移植。统计分析鲜胚周期低等级胚胎囊胚形成率、妊娠率及冻融周期囊胚移植的妊娠结局。结果在684个鲜胚周期中,有3 536个胚胎继续行囊胚培养,其中475个周期有1 187个囊胚形成,囊胚形成率为33.6%,209个周期无囊胚形成。有囊胚形成新鲜胚胎移植周期临床妊娠率(48.8%)及种植率(32.3%)较无囊胚形成新鲜胚胎移植周期临床妊娠率(29.8%)及种植率(17.4%)增高,差异有统计学意义(P0.05)。新鲜胚胎周期未妊娠者有111个周期行冻融周期囊胚移植,囊胚移植后临床妊娠率(40.5%)、种植率(27.4%)、流产率(8.9%),与同时期卵裂期胚胎冻融周期(n=2 156)的临床妊娠率(43.0%)、种植率(24.0%)、流产率(7.8%)比较,两组间差异无统计学意义(P0.05);冻融囊胚移植组异位妊娠率高于同期卵裂期冻胚移植组(8.9%vs.3.7%)(P0.05)。结论卵裂期形态学评分为低等级的胚胎依然有囊胚培养的价值,有助于增加累积妊娠率。     

冷冻精液对IVF的胚胎质量影响的研究

目的探讨在体外受精胚胎移植(IVF-ET)中提前冷冻精液对胚胎质量的影响。方法回顾性分析2012年1月至2014年12月进入IVF周期取精困难男性患者75例,均采用提前冷冻精子,其中在取卵当天重新获取新鲜精液组45例(A组),使用冷冻精子组30例(B组),比较两组受精率、平均卵裂球数、平均碎片率、优质胚胎率、囊胚形成率和临床妊娠率。结果 A组与B组相比,正常受精率、优质胚胎率、平均卵裂球数、平均碎片率、优质胚胎率、囊胚形成率和临床妊娠率均无统计学差异(P0.05)。结论在IVF-ET中,预知取卵当天男方取精困难采用提前冷冻精子,这可能不会影响胚胎质量和发育潜能。     

姐妹胚胎体外囊胚形成能力对体外受精-胚胎移植临床结局的预测作用研究

目的探讨姐妹胚胎(sibling embryo)体外囊胚形成能力对Day 3体外受精-胚胎移植(IVF-ET)临床结局的预测作用。方法回顾性分析2012年5月至2013年3月在本中心行Day 3IVF-ET后剩余姐妹胚胎继续培养囊胚患者的临床数据。根据有无囊胚形成分为A、B组,比较两组临床妊娠率、胚胎种植率和流产率。根据囊胚形成率将A组分为3个亚组(Group 1:囊胚形成率25%;Group 2:25%≤囊胚形成率50%;Group 3:囊胚形成率≥50%),比较3组临床妊娠率、胚胎种植率和流产率的差异。分析Day 3移植胚胎临床妊娠率及种植率与姐妹胚胎体外培养形成囊胚个数的相关性。结果有囊胚形成组(A组)1 109例,无囊胚形成组(B组)474例。两组平均年龄、不育年限、移植胚胎数均无显著性差异(P0.05)。A组临床妊娠率(58.3%)和胚胎种植率(38.1%)均显著高于B组(46.4%、30.2%)(P0.01),两组流产率(11.9%vs.11.4%)相似(P0.05)。Group 3胚胎种植率最高,流产率最低;Group 1胚胎种植率及临床妊娠率最低,流产率最高,三组间临床结局无统计学差异(P0.05)。Day 3植入胚胎临床妊娠率与姐妹胚胎体外囊胚形成个数呈显著正相关(r=0.725,P0.05),种植率与囊胚形成个数相关性不显著(r=0.489,P0.05)。结论姐妹胚胎(sibling embryo)体外囊胚形成能力是预测Day 3IVF-ET临床结局的有效因子。     

在OHSS高危患者中卵裂期胚胎移植与囊胚移植的临床结局分析

目的比较卵裂期胚胎移植与囊胚移植在卵巢过度刺激综合征(OHSS)高危患者首次冷冻复苏周期中应用的临床结局。方法回顾性分析2014年1月至2015年6月在本中心进行体外受精的首次冷冻复苏周期OHSS高危患者,均有卵裂期胚胎冷冻和囊胚冷冻,总例数为232例,将卵裂期胚胎移植组设为A组共84例,囊胚移植组设为B组共148例;分析两组患者年龄、体重指数、基础激素水平、内膜厚度及临床结局。结果 A组患者84例,行卵裂期胚胎移植,临床妊娠61例,临床妊娠率72.62%;B组患者148例,临床妊娠125例,临床妊娠率84.46%,临床妊娠率有统计学差异(P0.05)。两组患者的年龄、基础激素水平、体重指数、内膜厚度均无统计学意义(P0.05)。结论在体外受精-胚胎移植中,OHSS高危患者可以优先考虑囊胚移植。     

剖宫产史对体外受精鲜胚移植妊娠结局的影响

目的探讨体外受精-胚胎移植(IVF-ET)周期中,既往剖宫产史对IVF鲜胚移植周期临床妊娠结局的影响。方法回顾性分析2015年1月1日至2018年9月30日期间在我院生殖中心进行IVF助孕治疗的1 987例患者的临床资料,根据既往不同的分娩史将患者分为剖宫产史组(756例)和阴道分娩史组(1 231例)。比较两组患者IVF鲜胚移植周期的临床妊娠结局。结果剖宫产组临床妊娠共373人,临床妊娠率49.34%;阴道分娩史组临床妊娠共713人,临床妊娠率57.92%,两组间总临床妊娠率比较有显著性差异(P<0.05)。两组间囊胚移植妊娠结局比较,阴道分娩史组的双囊胚移植早期流产率显著低于剖宫产史组(P<0.05),但单囊胚移植临床妊娠率、双胎率、早期流产率、异位妊娠率及双囊胚移植其他各指标间比较均无显著性差异(P>0.05)。两组间卵裂期胚胎移植妊娠结局比较,阴道分娩史组的总妊娠率、双卵裂胚移植的妊娠率及双胎妊娠率均显著高于剖宫产史组(P<0.05),但单卵裂胚移植临床妊娠率、双胎率、早期流产率、异位妊娠率在两组间比较均无显著性差异(P>0.05)。结论剖宫产史并不明显影响IVF助孕单卵裂期胚胎/单囊胚鲜胚移植的临床妊娠结局,双卵裂期胚胎及双囊胚移植后的临床妊娠结局差异是否与剖宫产史有关还需要进一步证实。     

GnRH-a降调节-HRT内膜准备方案在PCOS首次FET移植失败人群中的应用

目的比较应用长效促性腺激素释放激素激动剂(GnRH-a)降调节-激素替代治疗(HRT)内膜准备方案(降调节-HRT)和HRT内膜准备方案对首次冻融胚胎移植(FET)移植失败的PCOS患者FET周期妊娠结局的影响。方法回顾性分析2016年1月至2019年5月河南省人民医院生殖中心就诊的首次FET失败的PCOS患者的临床资料(共553个周期),根据在子宫内膜准备过程中是否应用长效GnRH-a降调节,将553个周期分成2组:降调节-HRT组(A组,221个周期),HRT组(B组,332个周期),再根据胚胎情况分为不同亚组:降调节-HRT卵裂期组(A1组,101个周期),HRT卵裂期组(B1组,122个周期),降调节-HRT囊胚组(A2组,120个周期),HRT囊胚组(B2组,210个周期)。分别比较A组与B组、A1组与B1组、A2组与B2组患者的一般情况、实验室指标及妊娠结局。结果纳入的553个周期,总妊娠率为64.92%。B组的囊胚移植比例显著高于A组(P0.05);两组的种植率、临床妊娠率、早期流产率及宫外孕率比较均无显著性差异(P0.05)。A1与B1组的一般资料及实验室各指标比较均无显著性差异(P0.05);A1组的临床妊娠率、胚胎种植率有高于B1组的趋势,早期流产率有低于B1组的趋势,但尚无显著性差异(P0.05)。A2与B2组的一般资料及实验室指标比较均无显著性差异(P0.05);两组的临床妊娠率、胚胎种植率、早期流产率及宫外孕率相近,组间比较均无显著性差异(P0.05)。以临床妊娠为因变量,进行Logistic回归分析提示:卵裂期胚胎移植组:平均移植胚胎数、是否行GnRH-a降调节是临床妊娠的主要影响因素;囊胚移植组:平均移植胚胎数、平均移植优胚数是临床妊娠的主要影响因素。结论降调节-HRT在首次FET移植失败的PCOS患者行卵裂期胚胎移植时有改善其临床妊娠率、胚胎种植率的趋势,但尚无统计学意义。     

三种移植策略在反复种植失败患者冻融胚胎移植周期中的应用比较

目的通过比较序贯移植、内膜机械刺激与囊胚移植三种移植方案在反复种植失败(RIF)患者冻融胚胎移植周期中的应用结果,为临床选择RIF的干预策略提供参考。方法回顾性分析2016年6月至2017年12月在我院因反复种植失败拟再次行冻融胚胎移植患者共228例,研究组按照移植方案不同分为三组:A组(序贯移植组):移植1枚卵裂期胚胎+1枚囊胚(40例);B组(内膜机械性刺激组):根据胚胎移植时间及数量的不同分为两个亚组,B1组:子宫内膜机械性刺激+1枚囊胚移植(52例);B2组:内膜机械性刺激+2枚卵裂期胚胎移植(47例);C组(囊胚移植组):移植1枚囊胚(40例)。对照组为移植2枚卵裂期胚胎(49例)。结果 A组临床妊娠率(67.52%)、种植率(41.25%)显著高于对照组(分别为36.73%、21.43%,P均0.05);B1组种植率显著高于对照组(44.23%vs 21.43%,P0.05);多胎率、早期流产率、异位妊娠率各组间无统计学差异(P0.05)。结论 RIF患者选择序贯移植、内膜机械性刺激+囊胚移植及囊胚移植三种移植策略均有改善妊娠结局的趋势;三者中序贯移植较传统卵裂期胚胎移植相比,可显著提高临床妊娠率和种植率;序贯移植可以降低因囊胚培养失败无胚胎移植的风险,但同时可能增加多胎率的风险。临床上需要根据患者的具体情况选择个体化移植策略。     

新鲜周期卵裂胚移植策略对35～38岁患者妊娠结局的影响

目的探讨不同的新鲜周期卵裂胚移植策略对35~38岁患者妊娠结局的影响。方法回顾性分析2015年3~12月和2016年3~12月在中山大学附属第一医院生殖医学中心首次行新鲜周期卵裂胚移植的患者的临床资料。2015年3~12月行鲜胚移植的210例为A组,2016年3~12月行鲜胚移植的241例为B组;A组中移植3个卵裂胚的140例为A1组,B组中移植2个卵裂胚的225例为B1组,比较各组患者的基本资料和妊娠结局。结果 A、B组患者Gn天数及用量、获卵数、正常受精数、可利用胚胎数和优质胚胎数等比较均无显著性差异(P0.05);B组的平均移植胚胎数[(1.9±0.2)个]显著低于A组[(2.6±0.6)个](P0.05)。A、B两组的种植率、临床妊娠率、早期流产率和活产率比较均无显著性差异(P0.05);B组的多胎率(29.20%)显著低于A组(43.64%)(P0.05)。A1组的获卵数和可利用胚胎数显著高于B1组(P0.05);两组的种植率、临床妊娠率、早期流产率和活产率比较无显著性差异(P0.05);B1组的多胎率(30.28%)显著低于A1组(49.38%)(P0.05)。结论新的卵裂胚移植策略减低了35~38岁首次行新鲜卵裂胚移植患者的移植胚胎数,降低了多胎率,但对种植率、临床妊娠率和活产率无明显影响。     

黄体期长效长方案中HCG扳机日最大卵泡直径对妊娠结局的影响

目的探究黄体期长效长方案中HCG扳机日适合的最大卵泡直径。方法根据HCG扳机日最大卵泡直径分为A组(≥17mm且≤19mm)、B组(19mm且≤21mm)、C组(21mm),分析三组之间一般基础资料、促排卵治疗数据、胚胎实验室数据(包括受精及胚胎培养)、胚胎移植及妊娠结局。结果 C组Gn总天数、Gn总量显著大于A、B两组(P0.05);A组受精数、2PN数、2PN率、2PN卵裂数、优胚数、囊胚数、囊胚形成率显著高于C组(P0.05),C组2PN卵裂率显著高于B组(P0.05);所有首次移植周期总的临床妊娠率及新鲜移植周期临床妊娠率C组均显著高于A、B组(P0.05),而冻融移植周期临床妊娠率各组间无统计学差异(P0.05);各组间所有首次移植周期、新鲜移植周期、冻融移植周期的活产率、早期流产率、晚期流产率、足月产率、早产率和多胎率均无统计学差异(P0.05)。结论黄体期长效长方案中HCG扳机日最大卵泡直径大于21mm时,在新鲜移植周期能获得最高的临床妊娠率;而在17～19mm时,有较高妊娠率的同时也能获得较多的冷冻储存胚胎数。     

冻融胚胎囊胚培养中胚胎质量与囊胚形成之间关系

目的探讨在冻融胚胎囊胚培养中,冻融胚胎的质量与囊胚形成率之间关系,为临床运用提供依据。方法对2013~2016年在江门市中心医院行冻融胚胎囊胚培养的449名患者共478个周期进行回顾性分析,按不同年龄、解冻后胚胎存活状态、D3胚胎细胞数、D3胚胎细胞评级、D3胚胎质量等分组比较解冻后囊胚培养的囊胚形成率、可用囊胚形成率、优质囊胚形成率,分析各因素与可用/优质囊胚形成的相关性。结果随着年龄增长,患者解冻后胚胎的囊胚形成率、可用囊胚形成率、优质囊胚形成率均有下降,但无统计学差异(P0.05);解冻后胚胎的囊胚形成率、可用囊胚形成率、优质囊胚形成率在解冻后全存活胚胎组显著高于半存活胚胎组(P0.05)、D3优质胚胎组显著高于非优质胚胎组(P0.05)、7~9细胞与9细胞胚胎组显著高于7细胞组(P0.05),D3 A+B级胚胎组的优质囊胚形成率显著高于C+D级胚胎组(19.82%vs.14.83%)(P0.05);Logistic分析结果表明,患者年龄、胚胎解冻存活状态、D3胚胎细胞数与可用囊胚形成显著相关(P0.05),患者年龄、胚胎解冻存活状态、D3胚胎细胞数、D3胚胎细胞评级与优质囊胚形成显著有关(P0.05)。结论在冻融胚胎囊胚培养中,患者年龄、胚胎解冻存活状态、D3胚胎细胞数、D3胚胎细胞评级影响囊胚的形成及质量,其中胚胎解冻后存活状态对可用/优质囊胚形成的预测价值最大。     

废弃胚胎的标准

在体外受精-胚胎移植(IVF-ET)技术中,人类的配子和胚胎存在大量浪费的现象,如约20％的卵子受精失败、约35％的胚胎被直接作为废弃胚胎而丢弃、约60％胚胎在体外培养过程中不能发育到囊胚[1].即使胚胎被移植入子宫,也是大部分不能着床.人类胚胎的低利用率除了与超排卵、体外培养、胚胎评估选择方法和内膜接受性等有关外,还与人类自身的生理相关.在自然状态下,生育年龄妇女每周期的妊娠率也仅为15％～20％,而流产率则高达10％～15％[2].     

零原核胚胎利用价值的探讨

目的比较未见原核(0PN)与正常原核(2PN)来源优质囊胚的妊娠结局,探讨0PN胚胎的利用价值。方法收集2013年1月至2014年12月在本中心行助孕治疗、鲜胚移植失败或取消移植后行冻融优质囊胚移植的784例患者为研究对象,以移植0PN来源冻融优质囊胚的患者为0PN组,移植2PN来源冻融优质囊胚的患者为2PN组,分析0PN、2PN卵裂胚的优质囊胚形成率,并比较两组患者的胚胎种植率、临床妊娠率和流产率等。结果 0PN卵裂胚的总优质囊胚形成率显著低于2PN卵裂胚(37.17%vs.44.49%),但第3天卵裂球8细胞以上胚胎优质囊胚形成率0PN胚胎显著高于2PN胚胎(67.45%vs.57.16%)(P均0.01)。囊胚移植后0PN组的种植率(71.15%vs.53.74%)、临床妊娠率(80.00%vs.64.32%)、抱婴率(68.00%vs.55.71%)显著高于2PN组(P均0.05);两组出生婴儿体重、身长、Apgar评分、畸形率等比较无显著性差异(P0.05)。结论 0PN来源优质囊胚的利用价值值得关注。0PN胚胎可能只是在设定的观察时间内未观察到原核,而并不一定是异常受精。对于无可利用优质胚胎的患者,临床上可以将0PN胚胎继续培养至囊胚,然后进行移植,以提高患者的胚胎利用率和临床妊娠率。但因为0PN胚胎存在染色体异常的可能性仍较大,建议能结合遗传学筛查技术,以获得更确切的信息,指导临床应用。     

Photobiomodulation of avian embryos by red laser

Lasers in Medical Science - The current research focuses on the effect of variable doses of red laser on the chick embryonic development. He-Ne laser of 632-nm wavelength was used as an irradiation...     

小鼠着床前胚胎miRNA表达的实验研究

目的研究微小RNA(miRNA)在小鼠着床前胚胎各发育阶段的表达谱,探讨miRNA在着床前胚胎发育中的作用和意义。方法建立小鼠超排卵、交配和胚胎收集系统,采用miRNA扩增、miRNA芯片和荧光实时定量逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)的方法研究小鼠着床前胚胎miRNA表达。结果小鼠卵母细胞、2细胞胚胎、4~8细胞胚胎和囊胚分别表达55、53、62和72个miRNA;四个发育阶段共筛查到表达94个miRNA,32个在各发育阶段均表达,62个在不同发育阶段特异性表达。实时荧光定量PCR方法验证mmu-miR-721在小鼠着床前胚胎中表达。结论小鼠着床前胚胎表达大量的miRNA,其可能对胚胎发育和胚胎细胞的分化起重要调控作用。     

“废弃”胚胎继续囊胚培养及其妊娠结局分析

目的探讨常规评价体系中的“废弃”胚胎继续囊胚培养后的临床价值。方法回顾性分析2015年1月至2020年1月在西北妇女儿童医院生殖中心第1次行IVF/ICSI-ET治疗、因D3无可利用胚胎(D3胚胎评分均为Ⅳ级或F级)而行囊胚“试培养”的246例患者的临床资料,并根据“试培养”结局不同分为成功组(54例)和失败组(192例),比较两组患者的基础资料及获卵情况;将成功形成囊胚并移植的患者根据其移植周期不同分为新鲜移植组(41例)和冻融移植组(10例),观察两组患者的妊娠结局。结果246例患者因D3无可移植胚胎行囊胚“试培养”,囊胚形成率和优质囊胚形成率分别为9.50%和5.85%。“试培养”失败组原发性不孕比例显著高于成功组(74.48%vs.57.41%,P<0.05)。54例患者获得囊胚后其中41例行新鲜周期囊胚移植(新鲜移植组),10例患者囊胚复苏成功,行冻融囊胚移植(冻融移植组)。新鲜周期组的临床妊娠率和活产率分别为53.66%和48.78%;冻融移植组的临床妊娠率为50.00%,自然流产率为60.00%,活产率为20.00%。所有新生儿均未见出生缺陷。结论“废弃”胚胎行囊胚培养具有一定的临床价值;对于D3无可用胚胎移植的患者,利用“废弃”胚胎行囊胚“试培养”不失为一种补救治疗的方法。     

Time-lapse是否能预测胚胎染色体整倍性？

Time-lapse技术推进了胚胎评估的方法学,为胚胎评估带来了新的视角。Time-lapse系统理论上应具有预测胚胎染色体整倍性的潜力,但还需临床研究证实。     

Mouse embryos cultured in amniotic fluid

One thousand mouse embryos were collected over a period of 6 weeks and randomly assigned to either amniotic fluid aspirated during routine amniocentesis from normal 16 weeks pregnant patients or Earle's medium. The embryos were cultured for 72 hours at 37 degrees C in 5% carbon dioxide in air. Osmolarity, pH, partial arterial carbon dioxide pressure and HCO3- were checked before culture and again at the end of culture. Embryos were assessed according to the stage of development, namely degenerate embryos, morulae and blastocysts. The blastocysts were further divided according to their stage of development. There was a significant improvement in blastulation rate to fully expanded blastocysts in the embryos cultured in the amniotic fluid. The amniotic fluid was fairly variable in composition, pH and osmolarity, whereas the Earle's medium was very uniform in composition between trials. It was concluded that amniotic fluid drawn at 16 weeks from normal women is a good culture medium for mice embryos.     

Introduction of DT40 cells into chick embryos

Aim: To examine the transfection of exogenous genes into chick embryos, applying the characteristics of avian leukosis virus (ALV)-induced chicken B cell line DT40 to the production of chimeric birds. Methods: The DT40 cells incorporated with exogenous gene (lacZ constructs encoding Escherichia coli β-galactosidase: β-gal) were introduced into chick embryos by the injection of cells into stage X blastoderm. Manipulated eggs were incubated for 3 (trial 1) or 6 (trial 2) days, and the expression of lacZ DNA was detected by a histochemical staining method of β-galactosidase and polymerase chain reaction (PCR) analysis. Results: The survival rates of the manipulated embryos incubated for 3 days (stage 18-20: trial 1) and 6 days (stage 28, 30: trial 2) were about 42% and 38%, respectively. The expression rates of the lacZ gene in the embryos in the trials 1 and 2 were about 60 % and 23 %, respectively, for the survived embryos. Conclusion: The rate of embryonic viability and expression rate of introduced genes were not so high, but it suggested the possibility of utilizing the DT40 cells as a vector for carrying exogenous genes into chick embryos.