新疆维吾尔族2型糖尿病患者外周血单核细胞核因子-κB和糖皮质激素受体的表达及意义

目的探讨外周血单个核细胞(PBMC)核因子-κB(NF-κB)、糖皮质激素受体(GR)的表达与新疆维吾尔族2型糖尿病(T2DM)的关系。方法初步诊断为T2DM的维吾尔族患者142例(糖尿病组),采用Western-blot法检测外周血PBMC NF-κB和GR蛋白表达水平的变化,并选取140例健康体检者作为对照组。结果糖尿病组NF-κB表达水平高于对照组,GR表达水平低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 NF-κB和GR表达相互拮抗,在糖尿病发病中起着重要作用。     

Tim-3在T1DM患者外周血单个核细胞中的表达及意义

目的探究T细胞免疫球蛋白黏蛋白3(Tim-3)在1型糖尿病(T1DM)患者中的表达情况及其在T1DM发病过程中可能的作用。方法流式细胞术检测32例T1DM患者与26例健康对照者Tim-3+细胞比例;Real Time-qPCR方法检测外周血单个核细胞(PBMC)中Tim-3mRNA表达水平,同时检测糖化血红蛋白(HbA1C),胰岛素自身抗体(ICA)和谷氨酸脱羧酶65(GAD65)等临床相关指标。结果T1DM患者Tim-3+细胞比例为7.91±4.35,明显高于对照组1.73±1.77;Tim-3mRNA相对含量0.80±0.06,明显高于对照组相应检测值10.25±0.04,各项检测指标两组之间比较差异均有统计学意义(P0.05);Tim-3mRNA水平与T1DM患者GAD65呈显著正相关性,与HbA1C及ICA无显著相关性。此外,Tim-3+细胞比例与T1DM患者HbA1C及GAD65均呈显著正相关性,与ICA无显著相关性。结论Tim-3在T1DM患者中表达明显上升,并与相关临床症状相关,提示Tim-3在T1DM发生发展中发挥一定的作用。     

糖尿病患者血清γ-谷氨酰基转肽酶水平变化及其检测价值

目的探讨2型糖尿病(T2DM)患者血清γ-谷氨酰基转肽酶(GGT)水平变化及其临床检测价值。方法选择临床确诊的住院和门诊T2DM患者126例,同期健康对照组50例,两组分别进行血清GGT和血糖(Glu)水平检测,进行对比分析。结果 (1)T2DM患者血清GGT和Glu水平均显著高于健康对照组(P0.01)。(2)126例T2DM患者中有41例阳性,阳性率为32.5%。结论T2DM患者体内存在血清GGT的异常表达,T2DM患者伴血清GGT升高者较多见,血清GGT水平检测可作为T2DM病情判定以及治疗效果观察的指标,对预测T2DM发生、发展具有辅助诊断价值。     

白介素-8基因与早期糖尿病大血管并发症的关系

目的研究早期2型糖尿病(T2DM)患者白介素-8的变化。方法随机选择无并发症新诊断的T2DM患者,应用酶联免疫吸附法(ELISA)和逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)技术检测白介素-8(IL-8)mRNA转录半定量水平和蛋白表达;并观察T2DM组患者口服75g葡萄糖2小时后IL-8的变化;分析血糖以及血浆真胰岛素水平对IL-8的影响。结果IL-8mRNA半定量均明显高于健康对照组,而两组血浆中IL-8浓度差异无统计学意义;服糖后血糖与IL-8mRNA呈相关性。T2DM患者IL-8与血浆真胰岛素水平无相关性。结论单纯血糖升高可以引起IL-8介导单核细胞的粘附及通过内皮细胞这一过程,血糖可能为独立的动脉粥样硬化相关因子。     

急性弥漫性腹膜炎SIRS患者Toll样受体及炎症介质的表达变化

目的观察急性弥漫性腹膜炎并发全身炎症反应综合征(SIRS)患者外周血单个核细胞(PBMC)Toll样受体(TLR)2,4mRNA及下游炎症介质的表达变化,探讨TLR与SIRS的关系。方法72例急性弥漫性腹膜炎患者分为SIRS组(45例)与非SIRS组(27例),另设40例健康志愿者为对照组。采用鲎试剂法检测血浆LPS水平,RT-PCR法检测PBMC中TLR2,4mRNA的表达,ELISA法检测血清TNF-α和IL-6的表达。结果72例急性弥漫性腹膜炎患者血浆LPS浓度、PBMC中TLR2,4mRNA及血清TNF-α和IL-6表达均显著增高,且SIRS组增高较非SIRS组有显著统计学意义(P<0.01)。结论急性弥漫性腹膜炎SIRS患者PBMC中TLR2,4基因表达显著增加,提示TLR在急性弥漫性腹膜炎SIRS的发生发展过程中发挥了重要的作用。     

慢性肝病患者外周血单个核细胞白蛋白基因表达的临床意义

目的：探讨慢性肝病患者外周血单个核细胞（PBMC）白蛋白mRNA表达的临床意义。方法：50例慢性乙型病毒性肝炎患者（CHB组）、40例肝炎后肝硬化患者（肝硬化组）和40名肝功能正常的健康人（健康对照组）予荧光定量PCR检测血清HBVDNA,采用逆转录巢式荧光定量PCR检测PBMC白蛋白mRNA表达。结果：CHB组50例患者中,血清HBVDNA阳性30例（60％）;PBMC白蛋白mRNA阳性19例（38％）。肝硬化组40例患者中,血清HBVDNA阳性31例（78％）;PBMC白蛋白mRNA阳性14例（35％）。健康对照组PBMC白蛋白mRNA阳性2例（5％）。CHB组及肝硬化组的HBVDNA及PBMC白蛋白mRNA阳性率均明显高于健康对照组（P〈0．01）。CHB组活动期和肝硬化组失代偿期患者PBMC白蛋白mRNA阳性率明显升高。结论：PBMC白蛋白mRNA的阳性表达与肝细胞的损害程度有关,且具无创性,可考虑作为慢性肝病进展的辅助参考指标之一。     

RA患者外周血DcR3表达水平与疾病活动性相关分析

目的探讨DcR3在类风湿性关节炎(RA)发病过程中表达水平的变化及其与疾病活动性关系.方法选择39例RA患者为实验组,26例健康体检者为对照组,采用实时荧光定量PCR(FQ-PCR)检测RA患者外周血单个核细胞DcR3mRNA的基因表达水平,采用 ELISA法检测患者血清中DcR3、IL-4和IFN-γ水平,并将检测结果与DAS28评分进行相关性分析.结果活动期RA患者PBMC中DcR3mRNA表达水平高于缓解期RA患者和健康对照组,差异有显著性(P<0.05);活动期RA患者血清DcR3和IFN-γ水平显著高于缓解期RA患者和健康对照组(P均<0.01);IFN-γ/IL-4比值显示,活动期RA患者显著高于健康对照组和缓解期RA患者(P均<0.01);RA患者外周血DcR3mRNA水平和血清IFN-γ/IL-4比值与DAS28评分呈显著正相关趋势.结论活动期RA患者外周血DcR3蛋白与PBMC中DcR3mRNA表达水平显著升高,可能通过促Th2等作用参与RA的发生发展,与疾病的活动性密切相关.     

2型糖尿病患者PRMT1的表达水平与胰岛素抵抗的相关性研究

目的 探讨2型糖尿病(T2DM)患者蛋白质精氨酸甲基转移酶1(PRMT1)的表达水平与胰岛素抵抗(IR)的相关性。方法 回顾性选取2021年4月至2022年7月在上海市奉贤区中心医院就诊的T2DM患者89例为T2DM组,另选取同期在上海市奉贤区中心医院进行体检的健康者60名作为对照组,收集整理所有患者的临床基本资料。采用实时荧光定量PCR法检测两组血清PRMT1 mRNA相对表达量并进行比较;检测T2DM组和对照组空腹胰岛素(FINS)、空腹血糖、餐后2 h血糖(2 hPG)、糖化血红蛋白(HbA1c)水平,计算胰岛素抵抗指数(HOMA-IR),并进行比较分析;检测两组脂代谢指标[甘油三酯、总胆固醇、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)]进行比较分析;采用Pearson相关性分析T2DM患者HOMA-IR与PRMT1相对表达量、脂代谢指标的相关性;采用Logistic回归分析T2DM患者IR发生的影响因素。结果 T2DM组患者PRMT1、FINS、空腹血糖和HOMA-IR水平分别为1.56±0.40、(12.94±3.88) mU/L、(9.56±2.24...     

重症肌无力患者外周血单个核细胞中KLF4、RORγt与miR-206水平变化的临床意义

目的检测重症肌无力患者外周血单个核细胞(PBMC)中锌指样转录因子4(KLF4)、孤儿核受体γt(RORγt)、microRNA-206的表达水平,探讨它们在重症肌无力患者发病中的作用。方法采集重症肌无力患者及健康对照者清晨空腹外周血标本,梯度离心得到人PBMC。采用实时荧光定量聚合酶链反应检测PBMC中KLF4、RORγt mRNA、microRNA-206的相对表达量。结果重症肌无力患者PBMC中KLF4mRNA为0.594±0.181,健康对照者为0.089±0.025;重症肌无力患者PBMC中RORγt mRNA表达水平为0.570±0.266,健康对照者为0.067±0.016,重症肌无力患者均显著高于健康对照组,差异均有统计学意义(P0.05)。重症肌无力患者PBMC中microRNA-206表达水平为0.053±0.018,健康对照者为0.134±0.056,重症肌无力患者显著低于健康对照组,差异有统计学意义(P0.05)。重症肌无力患者PBMC中KLF4、RORγt相对表达量与microRNA-206表达水平均呈负相关(r=-0.675,P0.05,r=-0.806,P0.05)。结论重症肌无力患者PBMC中KLF4mRNA、RORγtmRNA的表达水平增高及microRNA-206表达水平下降,和疾病的发生和发展有密切的关系。     

白细胞介素-37在类风湿关节炎患者外周血单个核细胞中的表达及意义

目的探讨类风湿关节炎(RA)患者外周血单个核细胞(PBMC)中白细胞介素(IL)-37的表达水平及意义。方法选取RA患者60例,其中活动期和稳定期各30例纳入研究。另外,以健康体检者30例作为对照组。收集上述人群外周血标本,分离外周血中的血清和PBMC,用实时荧光定量PCR检测PBMC中IL-37 mRNA的表达水平;用ELISA法检测血清中IL-37的水平,同时检测血清中类风湿因子(RF)和抗环瓜氨酸肽(CCP)抗体水平,并对其进行比较分析。结果RA患者PBMC中IL-37 mRNA及血清IL-37表达水平均显著高于对照组(P<0.05),而RA活动期患者PBMC IL-37 mRNA和血清IL-37表达水平均显著高于稳定期患者(P<0.05)。RA患者血清中IL-37的水平与RF及抗CCP水平均呈正相关(r分别为0.384、0.468,P<0.05)。RA活动期与稳定期患者血清IL-37水平与RA患者病情诊断评分均呈正相关(r分别为0.792、0.563,P<0.05)。结论抑炎性因子IL-37在RA患者中呈高表达,在RA的疾病发展进程中可能起着负向调节作用。     

新诊断2型糖尿病患者外周血单个核细胞蛋白酪氨酸磷酸酶1B的表达

目的探讨蛋白酪氨酸磷酸酶1B（proteintyrosinephosphatase1B,PTPIB）在新诊断的2型糖尿病患者外周血单个核细胞（peripheralbloodmononuclearcell,PBMC）中的表达水平及意义。方法采用实时荧光定量PCR法检测20例新诊断2型糖尿病患者（糖尿病组）和20例血糖正常者（对照组）PBMC中PTPIBmRNA的表达,分析其与体质量指数（bodymassindex,BMI）、空腹血糖（fastingplasmaglucose,FPG）、空腹胰岛素（fastinginsulin,FINS）、稳态模型的胰岛素抵抗指数（homeostasismodelassessmentofinsulinresistance,HOMA—IR）、血脂的相关性。结果糖尿病组PBMC中PTPIBmRNA水平（1．05±0．19）明显高于对照组（0．53±0．17）（P〈0．01）,且PTPIBmRNA表达与BMI、FPG、FINS、HOMA—IR、三酰甘油和总胆固醇呈正相关（r=0．58,r=0．78,r=0．55,r=0．73,r=0．68,r=0．59,P均〈O．01）。结论PTPIB在新诊断2型糖尿病患者PBMC中表达较血糖正常者增加,其高表达与新诊断2型糖尿病胰岛素抵抗相关。     

使用不同透析膜时IL-8表达的改变

目的 了解不同透析膜对血液透析患者IL-8表达的影响。方法 采用酶联免疫吸附试验(ELISA)测定IL-8血浆水平及外周血单个核细胞(PBMC)培养上清液IL-8水平,逆转录多聚酶链反应(RT-PCR)检测基因表达。结果 聚砜膜组的IL-8血浆水平及mRNA表达低于铜仿膜组及铜氨膜组,而铜仿膜组及铜氨膜组之间无显著差异。各组透析后的IL-8血浆水平及mRNA表达均较透析前升高。铜仿膜组透析前PBMC受LPS刺激后产生的IL-8多于聚砜膜组,血透后聚砜膜组产生的IL-8较透析前升高,而铜仿膜组较透析前无明显改变。结论 再生纤维素膜(尤其是铜仿膜)导致IL-8表达改变的能力强于聚砜膜,测量IL-8表达有助于评价不同透析膜的生物相容性。     

1型糖尿病酮症酸中毒并发非甲状腺疾病病态综合征者3型脱碘酶mRNA水平研究

目的:探讨1型糖尿病(T1DM)合并酮症酸中毒(DKA)及正常甲状腺病态综合征(ESS)患者3型脱碘酶(D3) mRNA水平的变化及其发生机制.方法:T1DM并DKA及ESS患者28例,于确诊24 h内及DKA纠正后7d及14 d采血,选取同期住院的不伴感染、甲状腺疾病、缺氧、手术或禁食的同年龄同性别患者30例为对照组.采用放射免疫分析法检测血清T3、T4、FT3、FT4及TSH,采用Real-time PCR法测定血液D3 mRNA的表达水平.结果:DKA患者T3、FT3及FT4水平明显低于对照组,随着DKA的纠正,其水平逐渐回升,直至DKA后14d,FT3及FT4恢复至对照组水平,而T3仍未恢复至对照组水平.与之相对应,DKA者D3mRNA水平明显高于对照组,随着DKA的纠正,D3 mRNA水平逐渐下降,14 d仍未降至对照组水平.结论:D3 mRNA水平的变化可能是T1 DM合并DKA患者发生ESS的关键.     

支气管哮喘患者外周血单个核细胞中IL-9 mRNA检测及临床意义

目的检测支气管哮喘患者外周血单个核细胞(PBMC)中IL-9mRNA水平,探讨IL-9在支气管哮喘发生、发展中的意义。方法收集支气管哮喘患者和健康对照者外周血标本,分离PBMC,经佛波酯和离子霉素刺激活化后提取总RNA并逆转录成cDNA。采用实时定量PCR(qRT-PCR)方法检测IL-9mRNA的表达水平。采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测血浆中总IgE浓度。结果建立人IL-9的SYBRGreenⅠ检测方法。支气管哮喘急性发作期患者PBMC中IL-9mRNA水平显著高于健康对照组(P0.05),而临床缓解组和健康对照组间差异无统计学意义(P0.05)。支气管哮喘急性发作期患者PBMC中IL-9mRNA水平与总IgE浓度呈正相关。结论支气管哮喘患者PBMC中IL-9mRNA水平升高,与疾病的发生、发展关系密切。     

慢性阻塞性肺疾病患者外周血单个核细胞中TLR3、TLR7、TLR8及TLR9 mRNA的表达

目的观察慢性阻塞性肺疾病(COPD)患者外周血单个核细胞中TLR3、TLR7、TLR8及TLR9mRNA的表达。方法用密度梯度离心法分离COPD患者和健康人外周血单个核细胞后,提取总RNA并逆转录为cDNA,用实时定量PCR检测TLR3、TLR7、TLR8及TLR9mRNA的拷贝数。结果COPD患者外周血单个核细胞的TLR3和TLR9mRNA表达较正常健康人明显增高(P<0.05),而TLR7和TLR8mRNA的表达在COPD患者和正常健康人之间却无显著差异(P>0.05)。在COPD患者中,急性期和稳定期患者的TLR3、TLR7、TLR8和TLR9无显著差异(P>0.05)。结论TLR3和TLR9的升高可能是COPD患者对病毒敏感性增高的一个重要机制。     

白细胞介素-6在2型糖尿病患者腹部皮下和网膜脂肪组织中的表达及其与胰岛素抵抗的关系

目的探讨白细胞介素石（IL-6）基因在2型糖尿病（T2DM）患者腹部皮下和网膜脂肪组织中的表达情况，及其与胰岛素抵抗的关系。方法用半定量RT-PCR方法检测22例正常人（对照组）和20例T2DM（糖尿病组）患者的大网膜与皮下脂肪组织IL-6mRNA的表达水平，并测量体重、血压、腰围、臀围、血糖、空腹胰岛素、血脂和胰岛素敏感指数（IAI）。结果①糖尿病组网膜和皮下脂肪的IL-6mRNA表达量均高于对照组（P〈0．05）；对照组网膜组织的IL-6mRNA表达量高于皮下脂肪组织（P〈0．05）．而糖尿病组网膜和皮下脂肪组织差异无显著性（P〉0．05）。②将两组数据合并，网膜和皮下脂肪的IL-6mRNA表达量与腰臀比、胰岛素抵抗指数（HOMA-IR）呈正相关（P〈0．05），与血浆IAI呈负相关（P〈0．05），与其他因素均无相关性（均P〉0．05）。③多元逐步回归分析发现，皮下脂肪IL-6mRNA表达量与HOMA—IR、腰臀比相关（P〈0．05），网膜IL-6mRNA表达量与HOMA—IR相关（P〈0．05）。结论，12DM患者网膜和皮下脂肪组织IL-6mRNA表达水平升高，可以作为胰岛素抵抗的一个重要参数。     

2型糖尿病患者CA242水平与唾液酸及Lewis血型物质的关系

目的 探讨2型糖尿病(T2DM)患者血清中CA242水平与唾液酸及Lewis血型物质的关系.方法 用凝集法、ABC-ELISA法、酶法和免疫比浊法分别检测2 000例T2DM患者及500名健康对照者的Lewis血型以及血清中CA242、唾液酸(SA)、糖化血红蛋白(HbAle)水平,并分析它们之间的关系.结果 T2DM患者CA242水平和阳性率分别为(20 470±14 860)U/L、6.0%(121/2 000),明显高于健康对照者的(10 950±8 490)U/L、0.4%(2/500),差异有统计学意义(t′=18.87,χ~2=26.1,P均<0.01).T2DM患者SA水平为(51.5±18.6)μg/L,明显低于健康对照者的(56.3±13.8)μg/L,差异有统计学意义(t′=6.45,P<0.01).CA242阳性T2DM患者的CA242水平与sA呈负相关(r=-0.693,P<0.01),与HbAIc呈正相关(r=0.547,P<0.01).98.3%(119/121)CA242阳性T2DM患者的Lewis血型属于I型链结构.CA242阳性的T2DM患者治疗后,CA242水平显著下降,SA水平明显升高,治疗前后的CA242和SA水平分别为30 570(27 040-42 630)、(22 35013 400)U/I.和(44.5±13.5)、(55.5±17.2)μg/L,差异有统计学意义(U=5.32,t′=5.53,P均相似文献   

宫颈癌患者外周血和癌组织中TH17细胞水平的变化及其临床意义

目的检测宫颈癌患者外周血单个核细胞(PBMC)和癌组织中TH17细胞(CD3+CD8-IL-17+)的比例并分析其转录因子的表达水平,探讨TH17细胞在宫颈癌发展进程中的作用。方法收集42例宫颈癌患者外周血和癌组织标本,15例体检健康者外周血标本及15例正常宫颈组织标本。用流式细胞术检测PBMC和癌组织中TH17细胞的比例以及PBMC中CCR5、CCR6、CXCR4水平。用实时荧光定量聚合酶链反应(QRT-PCR)技术测定癌组织标本中RANTES、CXCL12和CCL20的mRNA表达水平。结果与对照组比较,宫颈癌患者外周血和癌组织中TH17细胞比例均升高(P<0.01和P<0.05),尤以宫颈癌晚期为著。宫颈癌患者PBMC中TH17细胞表面CCR6显著升高(P<0.01)。癌组织中CCL20 mRNA水平亦升高(P<0.05),RANTES、CXCL12水平无显著差异(P>0.05)。结论宫颈癌患者外周血和癌组织存在高TH17细胞水平,且随病程的进展呈现强势表达状态,监测TH17细胞水平及其特异性转录因子表达状态,有助于病程的判断。     

类风湿性关节炎患者早期外周血单个核细胞Toll样受体2、4表达及意义

目的探讨类风湿性关节炎(RA)早期患者外周血单个核细胞(PBMC)Toll样受体(TLR)2、TLR4对其配体双糖链蛋白多糖(BGN)、脂多糖(LPS)的刺激反应性,阐明PBMC TLR2、TLR4在RA疾病早期中的作用。方法采用流式细胞术、实时荧光定量逆转录(RT)-聚合酶链反应(PCR)、酶联免疫吸附试验(ELISA)分别检测BGN和LPS刺激前后,RA组和健康对照组外周血CD14+单核细胞TLR4+细胞频率、PBMC TLR2 mRNA和TLR4mRNA及上清液白细胞介素6(IL-6)和肿瘤坏死因子α(TNFα)的含量变化。结果 RA早期患者TLR2 mRNA明显升高、TLR4 mRNA下降(P<0.01);经LPS刺激后,RA患者TLR4 mRNA升高3.50倍,而健康对照组下降到0.11倍;LPS和BGN促进了各组PBMC产生IL-6、TNFα,但RA早期患者组上升的倍数明显高于健康对照组。结论 PBMC TLR2、TLR4参与早期RA的发生、发展。     

原发性肝癌患者PBMC AFP mRNA表达与其微转移的相关性研究

目的　探讨 PHC患者 PBMC AFP m RNA表达与微转移的相关性。方法　应用巢式 RT- PCR检测 10 2例PHC、2 2例转移性肝癌及其他恶性肿瘤 ,16例慢性乙型肝炎、2 2例肝硬化和 4 0例献血员中 PBMC AFP m RNA表达水平。结果　AFP m RNA在献血员、转移性肝癌及其他恶性肿瘤、慢性乙型肝炎患者 PBMC中均为阴性 ;在 PHC组 PBMC中 AFP m RNA的检出率 (5 6 .86 % ,5 8/10 2 )明显高于肝硬化组 (9.0 9% ,2 /2 2 ,P<0 .0 5 )。 PBMC AFP m RNA的表达与临床分期、门静脉癌栓、肝内转移、远处转移明显相关 (<0 .0 5 ) ,而与肿瘤直径、数目及血清 AFP浓度无明显相关 (>0 .0 5 )。结论　巢式 RT- PCR检测 PHC患者 PBMC AFP m RNA是一种早期发现 PHC血道播散的可靠而又敏感的实验方法。