β-胡萝卜素对人舌鳞癌Tca8113细胞增殖和端粒酶活性的影响

目的 观察β-胡萝卜素对体外培养的人舌鳞癌Tca8113细胞的细胞毒性、细胞周期、细胞凋亡以及端粒酶活性的影响.方法 四唑蓝法检测30、 50、 60和70 μmol/L 4种浓度β-胡萝卜素对Tca8113细胞增殖的抑制作用,流式细胞仪观察β-胡萝卜素处理后Tca8113细胞周期改变及细胞凋亡,端粒重复片段扩增银染法检测细胞端粒酶活性的变化.结果 从50 μmol/L开始,随β-胡萝卜素浓度的提高,对Tca8113细胞增殖抑制作用越来越强.70 μmol/L β-胡萝卜素作用Tca8113细胞4 d后,抑制率超过50%,细胞生长曲线的"S"形趋于平缓.70 μmol/L β-胡萝卜素作用Tca8113细胞3 d后,流式细胞仪检测未出现亚二倍体的"凋亡峰".与空白对照组相比,实验组S期细胞减少约50%(P<0.05),G0/G1期细胞同时显著增加(P<0.05),G2/M期细胞变化无统计学意义(P>0.05).β-胡萝卜素处理Tca8113细胞后,端粒酶活性显著下调.结论 β-胡萝卜素可以通过减少DNA合成,阻滞细胞于G0/G1期,抑制舌癌Tca8113细胞的增殖,抑制效果随浓度的增加而明显.作用机制可能与下调肿瘤细胞端粒酶活性、导致细胞死亡有关.     

端粒酶RNA反义寡核苷酸对舌癌细胞系Tca8113细胞增殖和端粒酶活性的影响

目的探讨端粒酶RNA反义寡核苷酸对舌癌细胞系Tca8113细胞增殖和端粒酶活性的影响。方法反义寡核苷酸(AS-ONS)作用于Tca8113细胞;采用MTT法测定AS-ONS对Tca8113细胞的毒性;倒置相差显微镜观察细胞生长状况及形态学改变;透射电镜观察细胞超微结构;测定Tca8113细胞端粒酶活性。结果AS-ONS可明显地抑制Tca8113细胞的生长,其生长抑制随剂量的增加而增强,具有浓度依赖性;AS-ONS对于Tca8113细胞端粒酶活性抑制作用具有时间依赖性。不同浓度AS-ONS作用于Tca8113细胞,其细胞毒性作用较弱;在倒置显微镜下可见AS-ONS组随药物浓度增高,细胞生长出现抑制。透射电镜观察到AS-ONS组作用的细胞细胞膜破损,细胞核内染色质凝聚,边集,并穿过核膜溢入胞质中,胞质部分溶解,线粒体空胞变性;AS-ONS对端粒酶活性抑制效果非常明显。结论反义寡核苷酸AS-ONS可明显地抑制Tca8113细胞的生长,并具有剂量依赖性和时间依赖性;靶向于端粒酶RNA的反义寡核苷酸可明显地抑制Tca8113细胞端粒酶活性,细胞增殖受到明显抑制。     

反义hTR对舌鳞癌细胞系Tca8113作用的初步探讨

目的：观察反义hTR对人舌鳞癌细胞系Tca8113的影响及其与细胞周期和凋亡的关系。方法：脂质体介导真核表达载体PBBS212－hTR转染Tca8113细胞系，运用流式细胞仪技术观察细胞周期的改变和凋亡，并结合免疫组化和原位杂交技术分析转染前后某些基因表达的变化，结果：转染反义hTR的Tca8113细胞克隆生长减缓，群体倍增时间较未转染和转染空质粒组明显延长，流式细胞仪显示转染细胞PI指数下降，有亚二倍体凋亡峰出现，转染后细胞p21基因表达水平显著增高，裸鼠移植瘤实验显示转染后的Tca8113致瘤性减弱，结论：反义hTR可引起细胞通过细胞周期关卡受阻而显著抑制Tca8113细胞的生长，同时激活了某些凋亡程序而导致细胞凋亡，端粒酶可能是肿瘤基因治疗的理想靶点。     

5-氟尿嘧啶对人舌癌细胞的抑制作用和对端粒酶活性的影响

目的 :研究 5 -氟尿嘧啶对人舌癌Tca8113细胞的抑制作用和对端粒酶活性的影响 ,进一步探讨它的抗癌机理。方法 :应用MTT法、双层琼脂培养法、倒置显微镜观察、HE染色观察、透射电镜观察研究细胞用药前后的生长增殖活性和大体及超微结构变化 ,用免疫组化法、TRAP -PCR -ELISA法研究细胞用药前后部分癌基因表达及端粒酶活性的变化。结果 :5 -氟尿嘧啶对人舌癌Tca8113细胞有明显的抑制作用且呈浓度依赖性 ,对细胞大体形态和超微结构有明显的改变 ,下调c -myc、bac - 2的表达 ,抑制端粒酶活性且有一定的时间依赖性 (用 876ng/ml5 -氟尿嘧啶处理舌癌细胞后 12h、2 4h、4 8h、72h、96h端粒酶活性分别为 0 .76± 0 .0 3、0 .4 5± 0 .0 6、0 .32± 0 .0 5、0 .14± 0 .0 2 ,阴性 )。结论 :5 -氟尿嘧啶可以明显抑制Tca8113细胞的增殖活性及其转移复发倾向 ,还可以作用于线粒体 ,在下调c -myc、bac - 2表达的同时抑制端粒酶活性     

舌鳞癌预后与细胞增殖和凋亡的关系

目的：探讨舌鳞癌预后与细胞增殖和凋亡的关系。方法：采用TUNEL法和免疫组织化学法检测52例舌鳞癌细胞中自发性凋亡水平及Bax、Bcl-2、增殖细胞核抗原（proliferating cell nuclea antigen,PCNA)的表达，及其与预后的关系。结果：舌鳞癌中凋亡指数（apoptosis index,AI)、Bcl-2、Bax和PCNA表达的阳性率分别为55．8％、65．4％、73．1％和100．0％。单因素生存分析显示：舌癌患者生存率降低与Bax低表达（P＝0．0020）、PCNA高表达（P＝0．0179）、Bcl-2/Bax比值＞1（P＝0．0072）和高TNM分期（P＝0．0351）有关，但与Bcl-2表达和凋亡指数无关（P＝0．885，P＝0．3536）。结论：Bax、PCNA、Bcl-2/Bax比值和TNM分期一样具有预后价值，综合分析这些指标有助于识别舌癌的生物学特性并准确判断患者的预后。     

链球菌722制剂对人舌鳞癌Tca8113细胞直接作用的实验研究

本文作者报告了链球菌７２２制剂对人舌鳞状细胞癌Ｔｃａ８１１３细胞直接作用的观察，结果表明，虽然癌细胞在０．２～１．０ＫＥ／ｍｌ浓度持续作用下，丧失了集落形成的能力，镜下连续观察见细胞生长抑制；抽去７２２后细胞立即恢复原生长速度增殖。在荷人舌癌裸小鼠的瘤内、瘤周和腹腔内注射，由于裸小鼠先天缺乏Ｔ细胞免疫功能，均未见移植瘤缩小。提示：７２２对癌细胞的直接作用是暂时和可逆的，其抗癌作用主要是通过促进机体     

羟基喜树碱、平阳霉素对人舌癌细胞的抑制作用及端粒酶活性的影响

目的 :观察体外羟基喜树碱、平阳霉素单独和联合应用对人舌癌Tca 8113细胞的生长抑制及端粒酶活性的影响。方法 :采用MTT法、软琼脂克隆形成法、透射电镜观察法、流式细胞术 ,TRAP PCR ELISA法研究。结果 :羟基喜树碱、平阳霉素单用及合用对Tca 8113细胞均有很好的抑制作用 ,且以合用效果最强 ,羟基喜树碱、平阳霉素使Tca 8113细胞的克隆形成率降低 ,超微结构、细胞周期发生明显变化 ,抑制端粒酶活性且有一定的时间依赖性。结论 :羟基喜树碱、平阳霉素对人舌癌Tca 8113细胞在体外有很好的抑制作用且联合应用效果更佳。     

舌鳞癌细胞系Tca8113 Fas表达水平与凋亡的关系

目的研究舌鳞癌Tca8113细胞Fas表达水平与细胞凋亡的关系,了解细胞凋亡的相关机制。方法采用脂质体法将含Fas基因片段的真核表达重组质粒pBK-Fas导入舌鳞癌Tca8113细胞,检测转染前后FasmRNA表达水平、Fas蛋白阳性表达率和阳性表达强度。以及细胞凋亡指数,分析细胞凋亡的相关因素。结果Fas转染不提高舌鳞癌Tca8113细胞Fas蛋白阳性表达率(P>0.05),但能提高FasmRNA表达水平、Fas蛋白表达强度,以及细胞凋亡指数。各项指标分别由转染前的0.201±0.015,31.02±4.63,0.88%±0.16%上升到0.399±0.073,54.32±6.38和10.21%±1.46%,统计分析均有显著性差异(P<0.01)。结论Fas介导Tca8113凋亡与Fas蛋白阳性率可能无关,而与Fas蛋白阳性强度有关。Fas蛋白激活细胞凋亡可能存在阈值。只有Fas表达达到一定强度,细胞凋亡才被激活。     

舌鳞癌的端粒与端粒酶研究新进展

端粒是真核生物细胞染色体末端的一个特殊结构，与细胞生长、增殖、衰老，肿瘤发生等密切相关。端粒酶主要包括端粒酶逆转录酶和端粒酶RNA组分，口腔鳞癌组织中端粒酶阳性表达率约为65％～97％。以端粒酶及其调节蛋白为靶点的基因治疗，特别是靶向沉默端粒酶及其亚组分，已成为舌鳞癌基因治疗的研究热点。本文简要评述近年来国内外舌鳞癌端粒与端粒酶的研究进展。     

人内皮抑素基因导入对裸鼠舌鳞癌移植瘤的抑制影响

目的:探讨经体内注入人内皮抑素(humanendostatin,hES)基因治疗口腔鳞癌的可行性。方法:荷瘤人舌鳞癌Tca8113细胞裸鼠瘤体内和肌内分别注射含hES的基因质粒,观察转入hES基因对舌鳞癌移植瘤生长的影响,免疫组织化学检测肿瘤组织中hES及血管内皮细胞生长因子(vascularvesselendotheliacellgrowthfactor,VEGF)的表达,Weidern法行肿瘤微血管密度(microvesseldensity,MVD)计数,流式细胞仪检测肿瘤细胞凋亡率,采用精确概率法和单因素方差分析进行统计学处理。结果:荷瘤注射hES后第16天,瘤体注射组抑瘤率为75.0%,肌内注射组抑瘤率为66.1%(P<0.01)。免疫组织化学检测结果显示,hES在瘤体注射组和肌内注射组肿瘤中的表达率分别为90.0%和85.0%,均高于对照组的20.0%(P<0.01)。2实验组肿瘤MVD值分别为18.60±3.44和16.70±2.63,均低于对照组的22.40±3.41(P<0.01)。流式细胞仪检测发现,瘤体注射和肌内注射hES基因质粒后,肿瘤细胞凋亡率分别为11.36%±3.20%和8.08%±2.00%,均高于对照组的1.80%±0.50%(P<0.01)。结论:注射hES基因具有抑制舌鳞癌Tca8113细胞移植瘤生长的效应。     

PD184352对舌鳞状细胞癌细胞增殖及ERK蛋白表达的影响

目的:体外观察PD184352对人舌癌细胞Tca8113细胞增殖及ERK蛋白表达的影响。方法:采用MTT比色试验法观察PD184352对Tca8113细胞增殖的影响,免疫细胞化学观察ERK蛋白的表达。结果:随着PD184352作用浓度和作用时间的增加,其对舌癌细胞增殖抑制率显著增高(P<0.05)。当100μmol/L的PD184352刺激Tca8113细胞72h后,对舌鳞状细胞癌细胞抑制率达到69.2%。加入PD184352后ERK蛋白在舌鳞状细胞癌细胞系Tca8113中表达降低(P<0.05),随着浓度的增加而更为明显。结论:体外PD184352对Tca8113细胞增殖有抑制作用,该作用可能与及抑制ERK蛋白表达有关。     

阿霉素诱导鸟嘌呤-四联体形成对Tca8113细胞端粒酶及细胞周期的影响

目的：探讨阿霉素影响端粒酶活性、端粒酶mRNA表达、细胞周期及周期蛋白表达的分子作用机制。方法：采用端粒重复序列扩增法（TRAP）、改良TRAP—G4法和RT—PCR法检测Tca8113细胞端粒酶活性变化、端粒酶hTERT和TP1mRNA水平；流式细胞仪分析细胞周期；采用Western印迹法测定CyclinB1和CyclinA表达水平。采用SPSS10．0软件包对数据进行t检验。结果：所有实验浓度阿霉素均可降低Tca8113细胞端粒酶活性．当端粒酶作用底物变为5＇-（GGGATr），GGGTT-3’时，端粒延伸反应完全受到抑制；5μg/ml阿霉素作用24h后，hTERT和TP1mRNA表达降低，CyclinB1表达明显增强，G2／M期细胞百分率显著下降。结论：阿霉素抑制端粒酶活性、降低端粒酶表达、影响细胞周期及CyclinB1表达的作用机制与其诱导鸟嘌呤-四联体形成有关。     

EGFR抑制剂西妥昔对舌鳞癌多药耐药细胞Tca8113/CBP细胞内阿霉素浓度的影响

目的 探讨表皮生长因子受体(EGFR)抑制剂西妥昔在舌鳞癌多药耐药中的作用.方法 Westernblot方法检测舌癌细胞系Tca8113及多药耐药细胞系Tca8113/CBP EGFR的表达,流式细胞术检测EGFR受到抑制后舌癌多药耐药细胞Tca8113/CBP细胞内阿霉素浓度的影响.结果 细胞系Tca8113和Tca8113/CBP均有EGFR的表达(P＞0.05).EGFR受到抑制后,Tca8113/CBP细胞内阿霉素浓度升高(P＜0.05).结论 EGFR抑制剂西妥昔可使舌癌多药耐药细胞细胞内药物浓度升高.     

平阳霉素抑制舌鳞癌细胞系的量效和时效关系及可能的抗癌机制

目的:探讨平阳霉素体外抑制口腔鳞癌细胞系的量效和时效关系及可能的抗癌机制。方法:用不同浓度的平阳霉素培养人舌鳞癌细胞系Tca8113不同时间,以MTT法和荧光显微镜观察细胞增殖抑制情况,流式细胞术分析细胞凋亡率。结果:MTT法和荧光观察显示:不同浓度平阳霉素组间细胞生长抑制率有显著差异(P<0.05),浓度越高,抗增殖效应越明显;随药物作用时间延长,肿瘤细胞生长受抑制递增(P<0.05)。流式细胞术显示:凋亡率随药物浓度增加而增加,但与作用时间长短无关。低浓度药物无法诱导细胞凋亡。结论:平阳霉素在体外能明显抑制人舌鳞癌细胞系Tca8113生长,并具有浓度和时间依赖性。其抗癌机制可能包括细胞毒作用和启动程序化死亡信号等。     

EGFR 抑制剂对舌鳞癌多药耐药细胞 Tca8113／CBP耐药蛋白的影响

目的：探讨表皮生长因子受体（ EGFR）抑制剂在舌鳞癌多药耐药中的作用。方法：免疫细胞化学技术和Western blot方法检测舌癌细胞系Tca8113及多药耐药细胞系Tca8113／CBP EGFR的表达,Western blot检测EGFR受到抑制后舌癌多药耐药细胞Tca8113／CBP耐药蛋白MRP,GTS-π的表达。结果：细胞系Tca8113和Tca8113／CBP均有EGFR的表达（P＞0．05）,EGFR受到抑制后细胞Tca8113／CBP的多药耐药蛋白MRP,GST-π的表达均下降（P＜0．05）。结论：抑制EGFR可下调舌癌多药耐药细胞耐药蛋白的表达。     

维甲酸诱导Tca8113细胞凋亡及其机理探讨

目的：研究维甲酸在体外对Tca8113（人舌部细胞系）细胞系凋亡的诱导作用。方法：在细胞培养液体系中加入不同浓度的维甲酸（Retinoic Acid，RA）进行诱导，以流式细胞仪检测细胞凋亡率及细胞周期时相变化，同时应用光镜、电子显微镜技术检测细胞形态学改变。结果：RA对Tca8113细胞凋亡率为23％，细胞周期时相变化以G1期细胞为显著。光镜下观察经RA诱导后的Tca8113细胞变圆、细胞间隙变大，游离细胞增多。电子显微镜观察细胞核凝固变小、凋亡小体增加，细胞内线粒体肿胀、变性。结论：RA能够诱导Tca81173细胞发生凋亡，G1期细胞受阻，不能进入S期。     

雷公藤内酯醇对人口腔鳞状细胞癌细胞株Tca8113作用的实验研究

目的 观察雷公藤内酯醇对人口腔鳞状细胞癌细胞株Tca8113的抑制作用,并与传统化疗药物顺铂的作用相比较,评价其作为抗头颈部恶性肿瘤药物的价值.方法噻唑蓝比色法检测雷公藤内酯醇和顺铂对Tca8113增殖的抑制作用,形态学观察经药物作用后细胞的生长情况.结果雷公藤内酯醇对Tca8113的增殖有明显抑制作用,呈量-效、时-...     

Cox-2在舌鳞癌细胞Tca8113增殖机制中的作用

目的:观察并探讨Cox-2在舌鳞癌细胞(Tca8113)增殖机制中的作用。方法:通过免疫细胞化学检测Cox-2在Tca8113细胞中的表达;再通过建立裸鼠荷瘤模型及应用Cox-2特异性抑制剂(SC236)进行干预的方法,观察SC236对Tca8113细胞的增殖活性、致瘤性和成瘤速度的影响。结果:在Tca8113细胞中存在Cox-2的表达;将Tca8113细胞接种于裸鼠颈部皮下可成功诱导出组织学形态与人舌鳞癌基本一致、且表达Cox-2的移植瘤。SC236能够显著抑制Tca8113细胞及其诱导的移植瘤的生长(P<0.01),并明显延缓Tca8113细胞的成瘤速度(P<0.05)。结论:Cox-2在Tca8113细胞的增殖过程中可能发挥重要作用;Cox-2特异性抑制剂可显著抑制Tca8113细胞及其诱导的移植瘤的增殖和生长。