DART-MS/MS法直接实时检测保健食品中非法添加的6个PDE5抑制剂的应用研究

目的:建立一种可以快速检测保健食品中非法添加6个磷酸二酯酶5(PDE5)抑制剂西地那非、他达拉非、红地那非、羟基豪莫西地那非、氨基他达拉非、伪伐地那非的方法。方法:采用直接实时分析(DART)离子源结合三重四极杆质谱,DART离子源的样品传输速度为0.2 mm·s-1,载气温度为450℃。Agilent 6410B Triple Quad LC/MS毛细管电压4 kV,干燥气流速为10 L·min-1。扫描模式为子离子全扫描,扫描范围为50～550 amu。待测成分的前体离子为m/z 475.1(西地那非),m/z467.2(红地那非),m/z 505.1(羟基豪莫西地那非),m/z 390.1(他达拉非),m/z 391.2(氨基他达拉非),m/z 460.3(伪伐地那非)。通过对照品与样品的二级质谱图对比进行样品中非法添加成分的定性鉴别。结果:若干批市售保健食品中有4批检出西地那非,1批检出他达拉非。检出限达1μg·g-1,检测时间仅为几分钟。结论:DART-MS可用于固体样品中添加PDE5抑制剂类成分的快速检测,用于药品快速检验中批量样品的初筛更有优势。     

HPLC-MS/MS用批量检测缓解体力疲劳类保健食品中西地那非及其类似物

摘 要 目的：检测100批缓解体力疲劳类保健食品中违法添加西地那非、他达拉非、伐地那非、红地那非、豪莫西地那非、羟基豪莫西地那非、那莫西地那非、氨基他达拉非、伪伐地那非、硫代艾地那非、那红地那非等11种化学物质。方法: 采用HPLC MS/MS液质联用,以LUNA C18（250 mm×4.6 mm, 5 μm）为色谱柱;以磷酸三乙胺溶液、乙腈和甲醇梯度洗脱,流速为1 ml·min^-1;ESI正离子模式,一级、二级质谱全扫描,进行HPLC MS/MS的定性及定量分析。结果:100批样品中85批检出非法添加化学物质仅有西地那非,且大部分含量集中在5~15 mg/粒。结论:液质联用方法,可以作为基层药检所批量快速筛查缓解体力疲劳类保健食品中非法添加化学物质有力工具。     

UPLC-DAD-Q-TOF-MS/MS测定缓解体力疲劳类保健品中非法添加的化学物质

目的：利用超高效液相-串联四级杆-飞行时间液质联用系统（UPLC-DAD-Q-TOF-MS/MS）,建立快速可靠灵敏的测定缓解体力疲劳类保健食品中违法添加西地那非、他达拉非、伐地那非、红地那非、豪莫西地那非、羟基豪莫西地那非、那莫西地那非、氨基他达拉非、伪伐地那非、硫代艾地那非、那红地那非和育亨宾等12种化学药品的液质联用检测方法。方法：采用UPLC-DAD-Q-TOF-MS/MS液质联用仪,以Agilent ZORBAX Eclipse plus C18为色谱柱;以0.1%甲酸-0.01 mol/L乙酸铵水溶液和甲醇梯度洗脱,流速为0.3 mL/min;ESI正离子模式,一级、二级质谱全扫描,进行 UPLC-DAD-Q-TOF-MS/MS的定性及定量分析。结果：经方法学验证,本方法在2～80μg/mL浓度范围内线性良好、精密度（RSD%）小于2%、回收率在80.5%～98.7%之间。结论：本方法快速、准确、灵敏度高、分离度高,为快速筛查缓解体力疲劳类保健食品中非法添加化学物质提供有力工具。     

补肾壮阳类保健品中7种非法添加成分的检测

目的：建立液质联用方法同时测定7种磷酸二酯酶5型（PDE5）抑制剂类化学成分的方法。方法：HPLC-MS/MS,以含0.1%乙酸的0.02mol·L－1乙酸铵溶液、甲醇和乙腈为流动相,梯度洗脱。利用标准物质建立7种药物（西地那非、豪莫西地那非、羟基豪莫西地那非、他达拉非、氨基他达拉非、伐地那非、伪伐地那非）的标准谱库,通过与其保留时间和一、二级质谱图的比较对非法添加的药物进行验证。结果：建立了快速分离检测保健药品和食品中7种非法添加成分的方法,检测限低于500ng。结论：本方法专属性强、灵敏度高,适用于补肾壮阳类中成药及抗疲劳、免疫调节保健食品中非法添加成分的筛选及确证。     

HPLC-DAD法检测补肾壮阳和改善前列腺功能保健品中非法添加的17种化学药物

摘要：目的:应用高效液相色谱-二极管阵列检测（HPLC-DAD）技术,建立检测补肾壮阳和改善前列腺功能保健品中可能添加的盐酸特拉唑嗪、那红地那非、红地那非、甲磺酸酚妥拉明、枸橼酸羟基豪莫西地那非、枸橼酸西地那非、豪莫西地那非、氨基他达拉非、他达拉非、伪伐地那非、硫代艾地那非、非那雄胺、那莫西地那非、依立雄胺、度他雄胺、盐酸伐地那非和盐酸哌唑嗪等17种化学药物的方法。方法:采用Alltima C18色谱柱（250 mm×4.6 mm, 5μm）,以乙腈-0.017 mol·L-1磷酸溶液为流动相,梯度或等度洗脱,流速1.0 ml·min-1,柱温25℃,检测波长220,240,274 nm,进样量10μl。结果:17种化学成分在一定质量浓度范围内与峰面积呈良好的线性关系（相关系数r≥0.999 8）;固体样品和液体样品低、中、高3个浓度的平均回收率分别为98.67%～100.4%和98.28%～100.3%,RSD分别为0.43%～1.2%和0.48%～1.4%（n=9）;检测限为0.003 2～0.073μg·ml-1;定量限为0.010～0.22μg·ml-1。应用该方法对13批样品进行检测,其中1批检出氨基他达拉非,并采用超高效液相色谱-四极杆串联飞行时间质谱（UPLC/Q-TOF-MS）进一步确证。结论:该方法简便、准确、易于推广,适用于补肾壮阳和改善前列腺功能保健品中17种非法添加化学药物的检测。     

高效液相色谱-串联质谱法同时测定保健食品中3种违禁药物

目的 建立保健食品中他达拉非、西地那非和伐地那非3种违禁药物的高效液相色谱-串联质谱检测方法.方法 样品采用乙腈提取,经超声,Agilent Eclipse XDB-C18色谱柱(4.6×150mm,5.μm)分离,等度洗脱,在LC-MS/MS多反应监测(MRM)模式下进行定性及定量分析.结果 3种药物的检出限:他达拉非0.0166mg· kg-1,西地那非为0.0075mg·kg-1,伐地那非为0.0204mg·kg-1,在10～ 100ng·mL-1范围内,10ng·mL-1、50ng·mL-1、100ng·mL-13个添加水平的平均回收率为93.9％～98.8％,相对标准偏差(RSD,n=3)为1.7％ ～3.1％.结论 该方法能够快速、准确、灵敏地对保健食品中非法添加的他达拉非、西地那非和伐地那非进行定性及定量测定.     

高效液相色谱-串联质谱法测定保健食品中西地那非、他达拉非和伐地那非

目的 建立保健食品中他达拉非、西地那非和伐地那非3种药物的液相色谱-串联质谱检测方法.方法 样品采用甲醇提取,经超声、离心,Agilent ZORBAX C18色谱柱（50mm×2.1mm,1.8μm）分离,梯度洗脱,在LC-MS/MS多反应监测（MRM）模式下进行定性及定量分析.结果 3种药物的检出限：西地那非为：1.0mg·kg-1,他达拉非和伐地那非为：0.2mg·kg-1,在191.7～317.8mg·kg-1范围内,3个添加水平的平均回收率为105.4%～113.4%,相对标准偏差（RSD,n=3）为2.1%～5.7%.结论 该方法可快速、准确地对保健食品中非法添加的西地那非、他达拉非和伐地那非进行定性和定量测定.     

基于FAERS数据库的4种磷酸二酯酶5抑制剂安全性分析

目的 对真实世界不良事件报告数据进行挖掘,分析4种磷酸二酯酶5(PDE5)抑制剂的上市后安全性特征。方法 检索美国食品药品监督管理局（FDA）不良事件报告系统（FAERS）,分别收集2012年第二季度至2022第三季度以西地那非、他达拉非、伐地那非和阿伐那非为首要怀疑药物的不良事件（ADE）报告数据,并进行系统-器官分类（SOC）和首选术语（PT）标准化映射分析,根据报告比值比（ROR）法和信息成分分析（IC）法筛选出药品不良反应（ADR）的有效不相称测定信号,并对高强度信号进行分析。结果 共纳入西地那非ADE报告27 695例、他达拉非16 683例、伐地那非718例、阿伐那非222例,4种药物ADE报告的SOC主要类型较为类似。在高强度ADR信号方面,整体信号强度（按ROR值）为西地那非>他达拉非>伐地那非,未检测出阿伐那非的有效ADR信号。其中西地那非ADR信号主要集中于生殖系统并出现多个恶性皮肤肿瘤相关ADR信号,他达拉非的恶性皮肤肿瘤相关ADR信号强度明显高于其他药物、且其大部分高强度信号尚未被说明书收载,伐地那非则主要为生殖系统疾病和眼器官疾病。结论 4种PDE...     

液相色谱-质谱联用同时测定西洋参制剂中人参皂苷Rg1、Re、Rb1及抗疲劳类非法添加含量

目的 建立同时测定西洋参制剂中人参皂苷Rg1、Re、Rb1及抗疲劳类非法添加含量的液相色谱-质谱联用方法.方法采用Agilent ZORBAX SB-C18色谱柱（3.0mm×150mm,3.5μm）,流动相A为含0.1%乙酸的20mmol·L-1乙酸铵溶液,流动相B为甲醇∶乙腈（3：2）的混合溶液,采用线性梯度洗脱;流速为200μL·min-1,柱温35℃.质谱条件采用电喷雾离子化（ESI）方式,正负离子模式,以多级反应监控（MRM）模式对西地那非、伐地那非、他达拉非、人参皂苷Rg1、Re和Rb1进行含量测定.结果 西地那非、伐地那非、他达拉非、人参皂苷Rg1、Re和Rb1分别在2.99～59.85,0.43～8.60,3.32～66.42,3.16～63.29,2.63～52.68,4.15～82.93μg·mL-1浓度范围内与峰面积呈良好线性关系.西洋参制剂中西地那非、伐地那非、他达拉非、人参皂苷Rg1、Re和Rb1的平均加样回收率均介于92.9%～103.3%之间.结论 本法简单、快速、灵敏、准确,可用于西洋参制剂中西地那非、伐地那非、他达拉非、人参皂苷Rg1、人参皂苷Re和Rb1含量测定,为该药的质量控制提供依据.     

男性对西地那非、伐地那非和他达拉非认识的研究

目的调查男性对西地那非、伐地那非和他达拉非的认识,从而指导临床实践。方法男性非ED患者70人,采用自行设计表格,主要调查PDE5抑制剂的使用方法和注意事项。结果和结论男性知道西地那非,但几乎不知道伐地那非和他达拉非;大多数男性不知道这些药物的使用方法和注意事项,这可能会影响药物的治疗效果和安全性,甚至使ED的药物治疗失败,今后应加强患者的用药指导。     

5型磷酸二酯酶抑制药治疗肺动脉高压进展

5型磷酸二酯酶(cGMP降解酶)抑制药通过NO/cGMP通路扩张血管。由于肺血管系统表达大量的5型磷酸二酯酶,5型磷酸二酯酶抑制药在肺动脉高压中的临床疗效受到重视。西地那非、伐地那非、他达拉非是口服的、强效选择性5型磷酸二酯酶抑制药。多项临床试验证实5型磷酸二酯酶抑制药治疗肺动脉高压疗效显著,目前有关西地那非、伐地那非、他达拉非远期疗效及联合应用等仍需更多循证医学研究证实。     

LC-QMS法检测壮阳制剂中非法掺入的豪莫西地那非

目的：建立壮阳制剂中非法掺入的豪莫西地那非的专属性检测方法。方法：壮阳制剂的提取液通过液相色谱．串联四极杆质谱分析,利用相对分子质量、二级质谱碎片信息、液相色谱保留时间3方面信息,对壮阳制剂制剂中非法掺入的西地那非衍生物豪莫西地那非进行定性鉴别。结果：在受试壮阳制剂中,有1种被检测到掺有豪莫西地那非。结论：该方法选择性强,灵敏度高,可作为壮阳制剂中非法掺入豪莫西地那非的有效检测方法。     

LC-MS/MS法同时测定人血清中卡马西平和拉莫三嗪浓度

目的:建立同时测定人血清中卡马西平和拉莫三嗪浓度的方法。方法:采用液-质联用法,以伐地那非和红地那非为内标,血清经乙腈直接沉淀后进样分析。色谱柱为XbridgeTMPhenyl,流动相为含0.02%甲酸的水溶液-含0.02%甲酸的乙腈溶液(60∶40),流速为0.3mL·min-1。电喷雾离子源,正离子多反应监测扫描分析,卡马西平和内标伐地那非的离子对分别为m/z237→194和m/z489→72;拉莫三嗪和内标红地那非的离子对分别为m/z256→43和m/z467→111。结果:卡马西平和拉莫三嗪血药浓度分别在5～500μg·L-1(r=0.9988)和100～10000μg·L-1(r=0.9964)范围内线性关系良好,定量下限分别为5、100μg·L-1。日内、日间RSD均<8%;平均提取回收率分别在88.9%～100.9%和89.5%～100.3%范围内。结论:本方法样品处理简便,适用于临床血药浓度监测及药动学研究。     

男性勃起功能障碍治疗药阿伐那非

由Vivus公司开发的新型男性勃起功能障碍（ED）治疗药阿伐那非（avanafil,stendra）于2012年4月在美国获准上市,成为美国市场上继西地那非（伟哥）、他达拉非（西力士）、伐地那非（乐威壮）及其口服崩解片Staxyn之后的第5种口服治疗ED药物。美国FDA药物评估与研究中心药物评估Ⅲ部主任VictoriaKusiak医学博士称：     

LC-MS/MS内标法测定人血浆中西地那非的浓度

目的:建立LC-MS/MS法检测人血浆中西地那非的浓度。方法:以地西泮为内标,血浆样品经MTBE液液萃取后,采用Waters XTerraMS C18(150mm×2.1mm,5μm)柱分离,流动相为甲醇:10mmol/L醋酸铵=85∶15(V/V),流速为0.30mL/min。然后采用电喷雾离子源(ESI源)正离子多反应监测(MRM)扫描分析,西地那非和内标地西泮的离子选择通道分别为:m/z475.3→58.1和285.5→154.0。结果:西地那非的线性范围为1.50～765.90ng/mL,最低检测浓度为1.50ng/mL,日内和日间变异均<15%。结论:本法适用于西地那非的人体药物代谢动力学研究。     

关注药物安全性

西地那非,他达拉非和瓦地那非的新视觉丧失标签美国FDA为辉瑞公司的西地那非(sildenafil,Viagra)及其他两个磷酸二酯酶抑制剂,礼莱公司的他达拉非(tadalafil,Cialis)和拜耳公司的瓦地那非(vardenafil)换上新标签,标签中有如下段落:“非动脉性前部缺血性视神经病变(NAION),引起视力下降,包括永久性视力丧失,已在磷酸二酯酶抑制剂包括(西地那非/瓦地那非/他达拉非)上市后发生个案报告。大多数病人有解剖学或血管等原因而发生NAION的危险,这些危险因素包括但不限于以下情况:视神经杯盘比低、年龄超过50岁、糖尿病、高血压、冠状动脉病、…     

犬血浆中氨氯地平和阿托伐他汀的LC-MS／MS测定

建立了LC-MS/MS法同时测定犬血浆中氨氯地平和阿托伐他汀的含量.用甲醇沉淀血样中的蛋白质.采用C18色谱柱,2 mmol/L醋酸胺溶液(含0.5%甲酸).甲醇(32:68)为流动相,以地西泮为内标,电喷雾离子化,正离子多反应监测,检测离子分别为m/z409.2→m/z 238.1(氨氯地平)、m/z 559.2→m/z 440.5(阿托伐他汀)和m/z285.1→m/z 193.1(地西泮).结果氨氯地平和阿托伐他汀在0.1～20ng/ml和0.2～50 ng/ml度范围内线性关系良好,定量限为0.1和0.2 ng/ml,方法回收率均大于94%,日内、日间RSD均小于9%.     

基于酶解法采用超高效液相色谱-串联质谱法检测阿胶、黄明胶、鹿角胶中猪皮特征肽

目的:建立基于酶解法采用超高效液相色谱-串联质谱法(UPLC-MS/MS法)检测阿胶、黄明胶和鹿角胶中猪皮特征肽。方法:采用胰蛋白酶进行酶解处理;使用Xbridge BEH-C₁₈色谱柱(100 mm×2.1 mm, 2.5μm),柱温30℃,以0.1%甲酸水溶液(A)-0.1%甲酸乙腈溶液(B)为流动相,梯度洗脱(0～1 min, 95%A;1～5 min, 95%A→70%A;5～5.1 min, 70%A→10%A;5.1～7 min, 10%A;7～7.1 min, 10%A→95%A;7.1～10 min, 95%A),流速0.4 mL·min^-1,进样量为2μL;电喷雾离子源(ESI~+),采用多重反应监测模式(MRM),正离子模式,对猪皮特征肽目标离子m/z 406.5(双电荷)→657.3和m/z 406.5(双电荷)→556.3进行检测。结果:阿胶、黄明胶、鹿角胶中分别掺入猪皮特征肽,质量浓度范围为5～500 ng·mL^-1时,测得浓度与色谱峰面积成正比,线性方程分别为Y=3.020 4X+8.998(...     

同时检查中成药中添加枸橼酸西地那非或他达拉非的方法研究

目的：建立同时检查中成药中添加枸橼酸西地那非或他达拉非的方法。方法：分别采用薄层色谱、高效液相法及高效液相色谱一二极管阵列检测器光谱法以确定是否添加枸橼酸西地那非或他达拉非。结果：薄层色谱中枸橼酸西地那非和他达拉非的斑点分离效果好，斑点清晰、重现性好；高效液相色谱中西地那非和他达拉非分离效果良好，出峰时间合适；二极管阵列检测光谱法对西地那非和他达拉非的紫外吸收光谱进一步确定薄层色谱与高效液相色谱检查结果。采用本文所建立的方法检测出2批中成药中含有他达拉非。结论：所建立的方法简单、可靠，重现性好，可用于同时检查中成药中是否非法添加枸橼酸西地那非或他达拉非。     

性保健品中可能违禁添加7种药物的LC-MS/MS法测定

建立了LC-MS/MS法测定性保健品中可能违禁添加的两地那非、他达那非、甲磺酸酚妥拉明、红地那非、盐酸伐地那非、还阳酚和还阳碱7种药物.采用C18色谱柱,以0.02%甲酸-乙腈为流动相,梯度洗脱,以D3-他达那非为内标,上述7种药物分别在0.1～10、0.3～30、0.015～1.5、0.05～5、0.4～40、0.25～25和1～100 μg/ml浓度范围内线性关系良好,回收率为85.29%～119.5%,RSD均小于5%.