PKC在NGF促进胚胎大鼠脊髓神经元生长发育中的作用

目的：研究蛋白激酶C(PKC)在神经生长因子（NGF）促进胚胎大鼠脊髓神经元生长发育中的作用。方法：体外培养胚胎大鼠颈段脊髓神经元，施加NGF，观测神经元生长发育情况并检测胞膜及胞浆PKC活性。结果：培养2，4d时，实验组与对照组相比细胞膜PKC活性增强；膜质比增高，4，7d时神经元存活数量增多，神经突起生长明显增强。结论：在NGF促进体外培养的胚胎大鼠脊髓神经元生长发育过程中，PKC有可能发挥了正向调节作用。     

BDNF和NT-3对体外培养胎鼠脊髓神经元生长发育的影响

目的:观察脑源性神经生长因子(BDNF)和神经营养因子-3(NT-3)单独及联合应用对体外培养胚胎大鼠脊髓神经元存活和生长发育的影响。方法:胚胎大鼠脊髓神经细胞原代培养,倒置相差显微镜下进行细胞记数和显微测量,观察神经元存活和生长分化的状况。结果:BDNF和NT-3均能促进培养胚胎大鼠脊髓神经元的存活,BDNF的作用效果更好。BDNF主要促进胞体发育;NT-3主要促进突出分化和伸长,二者有互补作用。结论:BDNF和NT-3能促进体外培养大鼠发育期脊髓神经元存活、分化和生长,其作用具有选择性。     

bFGF、NGF对高温影响神经细胞存活的保护作用

目的 :研究高温对原代培养神经细胞存活的影响以及bFGF和NGF对高温处理后神经细胞存活的保护作用。方法 :应用神经细胞原代培养、MTT、NSE ELISA测定技术。结果 :①高温处理后神经细胞活性明显降低 ;②外源性bFGF、NGF均不同程度地增加了神经细胞活性 ,其抗体均不同程度地使神经细胞活性降低 ,但二者联合应用神经细胞活性增加不明显 ;③NSE ELISA检测结果与MTT检测结果一致 ,但特异性和敏感性更高。结论 :外源性bFGF和NGF对高温处理后神经细胞存活具有保护作用。     

aFGF对染铅大鼠海马神经元细胞浆ERK活性的保护作用

目的:探讨酸性成纤维细胞生长因子(aFGF)对染铅的原代培养大鼠脑神经元细胞外调节蛋白激酶(ERK)活性的影响.方法:神经元培养4～8 d后,用0.6μg/L aFGF及不同浓度铅处理细胞,用改良Takai法测定ERK活性.结果:神经元染铅30 min,在0.1～2.0μmol/L铅浓度范围内,ERK比活性明显升高,呈浓度依赖性,尤其1.0～2.0μmol/L时最高.用aFGF预处理后再染铅时,在1.0～5.0μmol/L时ERK比活性与对照组比较无明显差异.结论:ERK比活性随着染铅浓度不同而发生改变.aFGF可保护神经元避免铅对ERK活性的影响.     

丝胶对2型糖尿病大鼠脊髓前角神经元NGF表达的影响

目的：研究丝胶对2型糖尿病大鼠脊髓前角神经元神经生长因子（Nerve growth factor,NGF）表达的影响。方法：40只SD大鼠随机分为4组,正常对照组、糖尿病模型组、丝胶治疗组和阳性对照组,每组均为10只。链脲佐菌素（Streptozotocin,STZ）连续腹腔注射制作2型糖尿病大鼠模型。待模型成功建立后,模型组大鼠不作任何处理,丝胶治疗组大鼠给予丝胶灌胃（2．4g／kg／d）,阳性对照组大鼠给予二甲双胍（55．33mg／kg／d）灌胃。应用免疫组织化学染色法观察脊髓前角神经元NGF的表达,并采用MiVnt图像分析系统对免疫组化染色阳性结果进行定量分析。结果：糖尿病模型组大鼠脊髓前角神经元NGF的表达明显低于正常对照大鼠（P〈0．01）;与糖尿病模型组大鼠比较,丝胶治疗组与阳性对照组大鼠脊髓前角神经元NGF的表达明显增高（P〈0．01）,且丝胶组与阳性对照组比较无明显差别（P〉0．05）。结论：丝胶可明显提高2型糖尿病大鼠脊髓前角神经元NGF的表达,发挥对糖尿病神经病变的保护作用。     

胚胎脊髓移植对脊髓内源性NGF影响的实验观察

目的：观察胚胎脊髓移植后，脊髓内源性神经生长因子（ＮＧＦ）ｍＲＮＡ的表达及ＮＧＦ多肽的合成。方法：采用分子生物学和免疫组化方法。结果：胚胎脊髓移植可以促进和在一定时间内增加损伤脊髓内ＮＧＦ ｍＲＮＡ的表达和ＮＧＦ多肽的合成；胚胎脊髓植入后早期能在宿主脊髓内表达和合成ＮＧＦ；损伤和移植条件下，ＮＧＦｍＲＮＡ的表达与合成主要在脊髓前角神经元。结论：内源性ＮＧＦ在移植后的损伤脊髓中可能对再生轴突起重要地     

bFGF、NGF对高温影响神经细胞存活的保护作用

目的：研究高温对原代培养神经细胞存活的影响以及bFGF和NGF对高温处理后神经细胞存活的保护作用。方法：应用神经细胞原代培养、MTT、NSE-ELISA测定技术。结果：①高温处理后神经细胞活性明显降低;②外源性bFGF、NGF均不同程度地增加了神经细胞活性,其抗体均不同程度地使神经细胞活性降低,但二者联合应用神经细胞活性增加不明显;③NSE-ELISA检测结果与MTT检测结果一致,但特异性和敏感性更高。结论：外源性bFGF和NGF对高温处理后神经细胞存活具有保护作用。     

aFGF对大鼠胃粘膜溃疡的促愈合作用

目的：观察酸性成纤维生细胞长因子（aFGF）对大鼠胃粘膜溃疡愈合的影响。方法：用醋酸酐诱发大鼠胃粘膜溃疡建立动物溃疡模型，以aFGF多克隆抗体作为抗体通过免疫组化方法观察aFGF在溃疡区的表达情况。结果：aFGF在溃疡区肉芽组织细胞浆中有高度表达，aFGF使溃疡区中微血管数目明显增加。结论：aFGF通过促进血管生长，及内皮细胞、成纤维细胞、平滑肌细胞、胶原等增殖作用加速消化性溃疡的愈合。     

大鼠损伤脊髓提取液对新生大鼠DRNGs体外培养的影响

目的：探讨损伤脊髓提取液对新生大鼠DRGNs（Dorsal Root Ganglion neuron,背根节神经元）轴突生长和延长的影响。方法：将正常、假手术及全瘫脊髓提取液同新生大鼠DRGsN共同培养,观察神经轴突平均长度和轴突远端微管（TubulinβIII）荧光表达。结果：全瘫组DRGNs平均轴突长度明显缩短,生长锥塌陷,轴突远端和生长锥的TubulinβIII表达明显减弱,与空白组比较有显著统计学差异;假手术组DRGNs平均轴突长度比空白组略缩短,但生长锥无塌陷,轴突远端和生长锥TubulinβIII表达强;正常组DRGNs平均轴突长度与空白组比较无差异,轴突远端TubulinβIII表达明显。结论：完全瘫痪脊髓提取液能明显抑制DRGNs轴突生长,导致生长锥塌陷;假手术脊髓提取液能轻度抑制轴突生长,但生长锥无明显塌陷;正常脊髓提取液不影响轴突生长。     

自发性高血压大鼠脊髓中间外侧核含一氧化氮合酶神经元的研究

目的：研究新的神经递质ＮＯ在脊髓血压调节中枢的作用机理。方法：用ＮＤＰ组化方法观察ＮＯＳ在脊髓ＩＭＬ的分布。结果：ＮＯＳ细胞分布正常（ＷＫＹ）和自发性高血压大鼠（ＳＨＲ）脊髓ＩＭＬ全长。ＳＨＲ在Ｃ＿８～Ｔ＿４节段，ＮＯＳ细胞多于ＷＫＹ；在中胸以下节段ＮＯＳ细胞分布少于ＷＫＹ，均有显著性差异。结论：ＮＯ局部作用可能调节交感神经的兴奋性。ＳＨＲ交感神经紧张性增高，可能与中胸以下ＮＯＳ减少有关；ＮＯＳ在Ｃ＿８～Ｔ＿４节段增加可能与心脏向心性肥厚的代偿性活动有关。     

胚胎大鼠脊髓运动神经元体外培养方法的优化

目的建立一种胚胎大鼠脊髓运动神经元的体外分离培养方法。方法采用原代培养的方法,从孕15天胚胎大鼠的脊髓腹侧组织中分离脊髓前角神经元,通过差速贴壁法纯化培养细胞,应用神经元特异性的烯醇化酶抗体和抗神经微丝抗体-SMI32单克隆抗体对培养细胞进行鉴定。结果纯化培养体系中神经元占培养细胞的90％以上,其中70％左右为脊髓运动神经元(spina lmotor neurons,SMNS)。结论通过差速贴壁法纯化分离培养的SMNS体外生长状态良好,纯度高,可作为神经科学领域的重要研究手段。     

人重组aFGF对鼠胚神经上皮细胞分化及受体表达的影响

目的 观察人重组酸性成纤维细胞生长因子（ａＦＧＦ）对原代培养鼠胚神经上皮细胞分化及受体表达的影响,方法 应用神经细胞原代培养,免疫细胞化学及图像分析。结果 ａＦＧＦ可使神经元特异性烯醇化酶（ＮＳＥ）阳性细胞数增加,胞体增大,细胞培养第７天其作用明显,ＮＳＥ免疫阳性着色发布下神经细胞胞质和突起中,在培养第３,７,１０天,ａＦＧＦ可促进其受体ｆｌｇ蛋白的表达,结论ａＦＧＦ可诱导鼠胚神经上皮细胞分化及受     

补阳还五汤对脊髓损伤大鼠脊髓神经细胞凋亡的影响

目的：探讨补阳还五汤（BYHWD）对脊髓损伤（SCI）大鼠脊髓神经细胞凋亡的影响。方法：30只Wistar大鼠随机分为SCI模型组、假手术组和BYHWD组,每组10只大鼠。SCI模型组和BYHWD组建立大鼠SCI模型, BYHWD组大鼠给予BYHWD（20ml/kg）灌胃2周。用药结束后处死大鼠,采用TUNEL法检测脊髓神经细胞的凋亡情况。结果：与假手术组大鼠比较,模型组大鼠神经细胞凋亡指数明显升高（P ＜0.05）;与模型组大鼠比较,BYHWD组大鼠神经细胞凋亡指数明显降低（P ＜0.05）。结论：BYHWD可通过抑制SCI大鼠脊髓神经细胞凋亡对SCI时脊髓损伤发挥保护作用。     

NGF对大鼠离体中脑神经元的存活和突起生长的影响

研究神经生长因子（ＮＧＦ）对中脑神经元的突起生长和促生存作用。方法采用体外培养法进行形态学观察与测量。结果每个视野的细胞数ＮＧＦ组较对照组明显增多，（ＮＧＦ组为２２．８７±４．８５个，对照组为１５．４７±２．６１个，Ｐ＜０．０１）；ＮＧＦ组细胞突起个数（１．９６７±０．８１个／细胞）多于对照组（１．５３３±０．８２个／细胞），Ｐ＜０．０５；但两组细胞突起长度却无明显差别（ＮＧＦ组为６１．２５±３３．５μｍ，对照组为５７．８６±２８．４μｍ，Ｐ＞０．０５）。结论ＮＧＦ对大鼠离休中脑神经元的生长发育有明显的促进作用     

神经营养因子NGF、BDNF对鼠胚基底前脑胆碱能神经元发育生长的协同作用

目的：探讨神经营养因子ＮＧＦ、ＢＤＮＦ联合使用时对鼠胚基义离胆碱能神经元发育生长的协同作用。方法：实验分成ＮＧＦ、ＢＤＮＦ、ＮＧＦ＋ＢＤＮＦ和对照４组。采用细胞培养和脑内移植手段及ＡＣｈＥ组化染色、显微测量和图象分析等技术。检测各组胚基底前脑培养４天和８天时的ＡＣｈＥ阳性神经元数、胞体直径、胞体发出的突直数及最长突起长度以及胚基底前脑移植至脑内４．５个月时移植区内ＡＣｈＥ阳性元数、细胞面积和纤维密     

脊髓损伤后bFGF和GFAP的变化及其意义

目的：研究脊髓损伤后碱性成纤维细胞因子和胶质纤维酸性蛋白的变化及其两者的相关性,探讨脊髓损伤后脊髓的自身保护机制以及星形胶质细胞在脊髓损伤中的作用。方法：用免疫组织化学,组织学染色和图像分析的方法检测损伤脊髓碱性成纤维细胞及胶质纤维酸性蛋白表达的动态变化。结果：脊髓损伤后1d损伤脊髓中碱性成纤维细胞的表达明显增高,7d达到高峰,14d末回落,而胶质纤维酸性蛋白表达则在1－14d内呈进行性增高趋势,两指标相关性显著（r=0.777,P=0.001),结论：脊髓损伤后反应性星形细胞胶质化对脊髓的再生和自身修复起着重要作用,提示脊髓本身存在自身保护机制。