人类精子库及冻精人工授精的初步经验

本文对我院人类精子库的建立及应用做了初步报道。较详细地介绍了自制的、简便的精液冷贮用设备,精液保护剂的配制,降温冻贮过程及其复温使用方法。从1985年1月至1986年2月我库用冷冻精液实施人工授精118例,确知怀孕及生育者33例。文章结合我国国情,对精子库的建立、管理、应用以及供精人工授精涉及的问题进行了讨论。     

交替应用新鲜精液与冻贮精液的人工授精术(附27例报告)

人工授精可分别采用新鲜精液(下称鲜精)。或低温冻贮精液(下称冻精)。鲜精的精子存活率较高,更近于自然授精,较为优越,只是同一供精者要在受者排卵期前后反复提供精液,使用不便,精液质量也不易恒定。而使用冻精则颇为便利。但几乎所有报告都认为冻精致孕的成功率低于鲜精。为了避免两者的缺点,提高人工授精的成功率。我们在同一治疗周期内交替使用同一供精者的一次鲜精,2～3次冻精进行人工授精。1987年3月～11月我院无选择地(随机)对27例受者使用上述方法施行人工授精受者一般情况如下:1.年龄:小于25岁者4人。25岁至30岁者11人。30岁至36岁者12人。2.婚龄:3年以下者10人。4年到6年     

人精子超低温冻贮技术的研究(一)——不同的冻贮方法、冷平衡时间对精子存活率的影响

关于精液冻贮技术虽国外已做了大量的研究,但一些研究结果不无矛盾。为了寻找适合我国使用的简便、有效的精液冻贮方法,我库从1984年12月开始,以液氮为致冷源,用自行研制的精液冷冻设备,对人精子超低温冻贮技术进行了一系列比较性研究。从1985年2月至1986年2月,共做冻精人工授精118例,181周期。确知怀孕和已生育者33例,周期成功率为18.23%(另文报道)。现将精子冻贮技术的实验研究结果报道如下。     

人类精液细管一步冷冻法研究

本文介绍了一种作者自创的人类精液快速冷冻保存方法———精液细管一步冷冻法。通过与电脑程序化逐步冷冻法、液氮蒸气逐步冷冻法，以及其它常用的快速精液冷冻法在冻融后精子复苏率（ 本研究结果：６８ ．３ ±８ ．６ ％ ） ，临床人工授精效果（ 本研究结果：妊娠率４２ ．８ ％ ；流产率１１ ％ ） 以及操作特点等方面进行比较，显示精液细管一步冷冻法是一种操作较简便，并能保持用细管作为精液冻贮容器所具有的精子库贮存量大、标本易存取和可与常用人工授精器械（ 法国凯苏设计的，目前国外流行使用的 Ａ Ｉ Ｄ 器材） 配合使用等优点，同时又具有良好的临床人工授精效果的人类精液快速冻贮方法。     

冷冻精液行供精人工授精685例临床观察

目的比较ICI和IUI的成功率,评价人类精子库的冻精质量。方法对用我库的冷冻精液行供精人工授精(AID)治疗有适应证妇女685例的临床资料进行回顾性分析。精液冻后平均活率为(62.23±26.78)%,平均密度为(38.17±13.62)×106/ml。结果供精人工授精685例,共有1385个周期中214例获临床妊娠,周期妊娠率15.5%,受孕率31.2%,二种AID方法的成功率无显著性差异(P>0.05)。结论我院人类精子库的冷冻精液各项指标均达到并超过部颁标准,可用作供精人工授精。     

T-G型CPM及速缓冻贮法对人精子的影响

Ｔ Ｇ型冷冻保护剂 (ｃｒｙｏｐｒｅｓｅｒｖａｔｉｖｅｍｅｄｉｕｍ ,ＣＰＭ )是一种新型无卵黄复合型ＣＰＭ ,我们采用Ｔ Ｇ型ＣＰＭ ,以速缓冻法冻贮 45份人精液近 1年 ,探讨Ｔ Ｇ型ＣＰＭ及其保护下速缓冻法对人精子结构和功能的影响。材料与方法　已育健康男子精液45份。 10份精液不加ＣＰＭ ,35份加Ｔ Ｇ型ＣＰＭ ,均以速缓冻法分别进行冻贮。每份精液冷冻前后行精液常规对比分析、精尾低渗肿胀试验、精子穿卵试验、精子染色体分析及精子超微结构观察。缓冻法ＣＰＭ 4℃预冷 ,与精液 1∶1混匀 ,4℃ 2 0ｍｉｎ后 ,置液氮蒸气距液面2ｃ…     

精液冻存时间对精液质量及受孕能力的影响

目的旨在探讨供精精液冻存时间对精液质量及受孕能力的影响。方法回顾性分析广东省人类精子库280对夫妇使用供精冷冻精液成功怀孕在再次生育时使用同一供精者精液用于人工授精技术的临床使用、随访反馈等相关资料。结果已确认妊娠的人工授精周期复苏后供精精液质量如下:精子浓度,首次生育时(67.5±19.8)×10^6/m L,再次生育时(69.3±21.7)×10^6/m L,两组差异无统计学意义(P>0.05);前向运动精子百分比,首次生育时(54.7±8.8)%,再次生育时(51.0±7.0)%,两组差异有统计学意义(P<0.05)。再次生育精液与首次生育精液的冻存时间差与前向运动精子百分比差的相关性无统计学意义(P>0.05)。再次生育时精液周期妊娠率为20.9%,与同期首次生育的周期妊娠率21.49%相比,差异无统计学意义(P>0.05)。结论再次生育时精液质量与首次生育时比较略下降,提示精液冷冻保存时间的延长对精子活力有影响,但冷冻保存时间的长短与对精液质量影响大小的相关性无统计学意义。     

人类精子库自体精液冻存失败原因分析及应对策略

目的:分析人类精子库意愿自精保存者保存精液失败的原因,针对性提出应对策略,尽可能提高自体精液冻存成功率,同时也为人类精子库自体精液冻存业务拓展提供建议.方法:回顾性分析广东省人类精子库2016年1月1日至2019年12月31日1156例意愿自精保存者的基本资料、存精理由和存精失败的原因等信息.结果:1156例意愿自精保...     

捐精志愿者精液冷冻保存前后细菌培养的初步研究

目的:通过比较捐精志愿者精液冷冻保存前(冻前)和冷冻保存后(冻后)的细菌培养情况,分析导致精液冷冻过程中细菌污染的因素.方法:按照WHO《人类精液检查与处理实验室手册》(第5版)用精子冻存液将精液样本按1∶1(v/v)的比例进行稀释.实验前对取精杯、精子冻存液和哥伦比亚血琼脂培养基进行细菌培养,均无菌生长.对3112例...     

深低温保存同种主动脉移植治疗中心型肺癌

深低温保存同种主动脉移植治疗中心型肺癌王吉秋崔向东林乐胜沈毅王培涛刘金刚我院液氮深低温冻贮（－１９６℃）具有活性的同种主动脉（ｖｉａｂｌｅａｏｒｔｉｃａｌｏｇｒａｆｔ，ＶＡＡ）基础、动物实验取得良好结果［１～６］。１９９１年７月～１９９４年９月，应用...     

消费驿站

卫生部重申:未批一家人类精子库卫生部发布说明,根据于2001年8月1日起实施的《人类辅助生殖技术管理办法》和《人类精子库管理办法》,设置人类精于库和开展除丈夫精液人工授精以外的人类辅助生殖技术,必须经卫生部批准;开展丈夫精液人工授精技术,必须经省、自治区、直辖市人民政府卫生行政部门批准。任何机构未经批准,不得擅自开展相关技术。迄今为止,尚未批准任何一家人类精子库的建立。     

浙江省人类精子库供精者精液参数及精子耐冻性变化分析

目的 了解供精者捐精过程中精液参数、精子耐冻性变化以及为人类精子库实验室质量控制提供部分依据;方法 13261份精液样本均来自2006年9月至2010年12月浙江省人类精子库的1513例合格的供精者,年龄20～42周岁,职业以学生为主,对所有精液标本进行精液常规分析;达到冷冻标准的精液标本进行冷冻及冷冻复苏后精液常规分析.结果 1513例供精者中,每次捐精均合格的为343例,占22.7%;每次捐精(至少连续3次)均不合格的为68例,占4.5%;捐赠精液至少一次不合格的为1102例,占72.8%.捐赠的13261份精液中,有10158份冷冻复苏后达到外供标准,占76.6%;不合格的捐赠精液为3103份,占23.4%,其中,未达到冷冻标准的为1565份,占所有捐赠精液的11.8%;冷冻复苏后未达到外供标准(不耐冻精液)为1538份,占所有捐赠精液的11.6%.结论 人类精子库供精者每次捐赠的精液不仅精液参数变化较大,其耐冻性变化也很大;所捐赠的精液不合格比例较高.     

冷冻精子受精能力的综合评价

目的：观察不同冷冻期冷冻精子的受精能力。方法：应用精液常规分析（ＳＦＡ）、精子尾部低渗肿胀试验（ＨＯＳ）、去透明带地鼠卵穿透试验（ＨＯＰ）及冷冻精液人工授精（ＡＩＤ）对冷冻前后及不同冻存期的精液标本进行综合性检测。结果：１０份正常精液标本的冷冻精子活动率、ＨＯＳ值、ＨＯＰ值均明显低于冷冻前（Ｐ＜０．００１），而不同冻存期的精液行ＡＩＤ术后的总妊娠率与新鲜精液ＡＩＤ术的总妊娠率比较，则基本相同。结论：精子细胞膜虽在冷冻复温过程中受到一定的损伤，使精子活动率和受精能力下降。但是，精液的长期冻存及精子细胞膜部分改变并不完全影响精子的受精能力。     

胚胎冻贮的研究现状

194 9年 ,Ｐｏｌｇｅ首先冻贮哺乳动物精子获得成功。50年代开始了对胚胎冻贮的研究。 1972年英国Ｗｈｉｔｔｉｎｇｈａｍ首先成功地冻贮了小鼠胚胎。 1983年澳大利亚Ｔｒｏｕｓｏｎ和Ｍｏｈｒ等成功地冻贮了人体胚胎并作宫内移植获得成功。克服冷冻损伤 ,提高复温后胚胎的存活率 ,是胚胎冻贮面临的最主要问题。一、胚胎冷冻的原理 (ＧｅｎｅｒａｌＣｒｙｏｂｉｏｌｏｇｉｃＰｒｉｎｃｉｐｌｅｓｏｆＥｍｂｒｙｏ)冷冻既可保存活细胞 ,也可以对它们造成损害。低温能抑制生物体的生化活动 ,降低新陈代谢而使细胞得以保存。细胞生存所需的基本…     

人精子超低温冻贮技术的研究(三)——不同的甘油浓度、初冻温度和药物对精子存活率的影响

材料和方法基本材料和方法同上文研究(一)。不同之处在各实验栏中注明。一、不同的甘油浓度对冻贮复温后的精子存活率的影响实验用10份精液标本。每份精液液化后均分为5份,按精液:保护剂=1:1之比,分别添加五种不同的保护剂,细管法分装,冷平衡30分钟,-110℃初冻温度冷冻,保护剂按甘油浓度不同分 A、B、C、D、E 五组,与精液混合后甘油最终浓度依次为3%、     

冷冻精子受精能力的综合评价

目的：观察不同冷冻期冷冻精子的受精能力。方法：应用精液常规分析（ＳＦＡ）、精子尾部低涌肿胀试验（ＨＯＳ）、去透明带地鼠卵穿透试验（ＨＯＳ）及冷冻人工授精（ＡＩＤ）对冷冻前后及不同冻存期的精液标本进行综合性检测。结果：１０份正常精液标本的冷冻精子活动率，ＨＯＳ值，ＨＯＰ值均明显低于冷冻前（Ｐ〈０．００１），而不同冻存期的精液行ＡＩＤ术后的总妊娠率与新鲜精液ＡＩＤ术的总妊娠率比较，则基本相同。结论：精     

优选精子宫内授精12例报告

有不少不孕症患者因男方因素如精子数少、活动力低、液化不良、非精子细胞较多,以及抗精子抗体阳性等,而影响精子与卵子结合而致不孕。本文报道采用丈夫精液优选后人工授精,即在人工授精前清除精液中杂质,死精子及精浆中的抗精子抗体等成分,     

中国男性生育力保存：多中心六年回顾性分析

精子低温冷冻技术可有效保存男性生育能力，中国在此方面的开展情况目前尚无研究报道。本研究对中国多家人类精子库及生殖中心（上海市人类精子库，湖南省中信湘雅生殖与遗传专科医院人类精子库，浙江省人类精子库，沈阳东方集团菁华医院）自2003年1月至2008年12月期问的白精保存资料进行回顾性研究，内容包括：冻存原因、精液冷冻前参数、冻存精液使用率、辅助生殖方式及结局等。在过去六年期间，共有l548名男性在上述4家医疗机构行精液冷冻。其中1．9％（30／1548）系肿瘤患者，在肿瘤种类分布中，以睾丸肿瘤和何杰金氏病最为常见。88．9％（1374／1548）男性准备行辅助生殖（ART）治疗，主要原因为预防取卵当日无法顺利取精，或夫妻分居期间有生育要求。8．6％（134／1548）男性患有生殖系统疾病，如不射精症、严重或极度少弱精子症、梗阻性无精子症等。另有0．8％（15／1548）的男性近期无生育计划，出于规避未来精液质量下降风险行精液冻存，其中7N为高危职业者，3例为计划行输精管结扎节育术者，5N为有未来生育可能者。冷冻精液的总利用率为22．67％（352／1548），共生育子代119例，其中肿瘤患者组为6．7％（2／30），采用ICSI技术出生子代1例；辅助生殖患者组为23．2％（319／1374），出生子代106例，男性生殖疾病组为23．1％（31／134），出生子代12例。各组精液参数均不同，肿瘤患者组及生殖疾病组男性精液质量较差，绝大多数使用冷冻精液结合IVF或ICSI技术受孕。精液冷冻是一种有效的补救和预防措施，但大多数情况下，特别是肿瘤患者未能充分利用这一医疗手段，对其缺乏认知，肿瘤治疗的急迫性和经济因素是使用率低下的主要原因。在中国大力推行生殖保险概念普及化可使生殖保险得以充分利用。     

脂肪颗粒组织在不同冻存条件下低温保护剂的筛选

目的:寻求不同温度下脂肪组织冻存时的适宜低温保护剂。方法:在-16℃(普通家用冻箱)、-80℃(深低温冰箱)及-196℃(液氮)条件下,加入不同的低温保护剂,冷冻脂肪组织,24h后测定肌酸激酶活力,并与贮存前酶活力做比较。结果:液氮组以15%二甲基亚砜,6%丙二醇为低温保护剂时脂肪组织活力最高,达贮存前的76%,深低温冰箱组以15%二甲基亚砜组活力最高,达66%,而普通冰箱组最高也仅为46%。结论:低温保护剂能明显保持冷冻脂肪组织活力,不同冻存条件下其最适宜的低温保护剂各异。     

冻储时间对冷冻精子复苏率的影响

目的 :探讨冻储时间对冷冻精子复苏率的影响 ,以期找到最佳复苏时间。　方法 :取 88份正常供精者标本进行精液常规分析 ,精液用程序降温仪通过三步降温法冻存后置 - 196℃液氮中冻储 ,88份冻存标本随机分成 5组 ,分别于冻存后的 1d(Ⅰ组 ,n =14 )、7d(Ⅱ组 ,n =2 4 )、30d(Ⅲ组 ,n =19)、180d(Ⅳ组 ,n =18)、30 0d(Ⅴ组 ,n =12 )取出 ,37℃水浴复苏 ,再次进行精液常规分析。计算冷冻复苏率。　结果 :5组间的复苏率差异均无显著性 (P均 >0 .0 5 ) ,冻储时间与复苏率之间无相关性 (r=- 0 .0 5 ,P >0 .0 5 )。　结论 :程序降温仪冻存精液标本置 - 196℃液氮后 2 4h即可复苏分析 ,便于人类精子库耐冻实验批量筛查