160例急性淋巴细胞白血病MICM分型及其治疗和预后相关性的研究

目的 研究儿童急性淋巴细胞白血病（ALL）的MICM分型及其与治疗、预后的相关性。方法 采用细胞形态学检查、染色体R带或C带核型分析、流式细胞仪细胞免疫表型检测和套式逆转录聚合酶链反应（RT－PCR）检测TEL－AML1、BCR－ABL融合基因转录本。结果 在160例儿童ALL中，76例为L1型，73例为L2型，5例为L3型，6例不能分类。在核型分析的151例中，75例（49．7％）有克隆性染色体异常。包括超二倍体16例，假二倍体12例，亚二倍体26例，染色体易位21例。后者包括t（4；11）7例，t（9；22）6例，其他少见易位8例。进行过免疫表型分析的128例中，64例（50％）为B系表达，38例（29．7％）为T系表达，14例（10．9％）为T、B混合表达，6例为B系、髓系混合表达，3例为T系、髓系混合表达，其他3例。套式RT－PCR检测到TEL－AML1融合基因转录本11例、BCR－ABL融合基因转录本2例。125例ALL患儿分别接受DOLP（柔红霉素、长春新碱、左旋门冬酰胺酶、泼尼松或左旋门冬酰胺酶、泼尼松或地塞米松）方案治疗，其中116例（92．85）获得完全缓解（CR）。CR达2年以上者16例，1年以上者28例，6个月以上者17例。结论 MICM分型由于能反映ALL的本质，因而比FAB分型更精确、完善，并且对于指导临床用药、提高ALL患儿缓解率和长期生存率有重要价值。     

TELAML-1和bcl-2与小儿急性淋巴细胞性白血病早期治疗反应的关系

目的：　探讨TEL AML1融合基因在小儿急性淋巴细胞白血病 (acutelymphocyteleukemia,ALL)发病过程中的意义。方法：　用逆转录聚合酶反应(RT PCR)检测了42例初诊ALL病例及正常对照10例的TEL AML1融合基因和bcl 2的表达,并与其早期治疗反应进行了比较性研究。结果：　实验组TEL AML1阳性表达10例,阴性率23.8% ,bcl 2阳性表达27例,阳性率64.3%;TEL AML1阳性病例bcl 2的表达明显低于阴性病例(P<0.01);TEL AML1阳性病例高危ALL明显低于阴性病例 (P<0.05);TEL AML1阳性病例的地塞米松诱导试验的阳性率高于阴性组(P<0.05)。结论：　TEL AML1出现往往预后较好。RT PCR可作为有效的测定方法。     

儿童急性淋巴细胞白血病常见融合基因的检测及意义

目的建立逆转录-巢式PCR检测融合基因的方法,检测4种常见融合基因在儿童急性淋巴细胞白血病中阳性率,并对阳性患儿进行初步临床资料分析。方法对收治的92例初发的急性淋巴细胞白血病(ALL)患儿,于化疗开始前抽取骨髓标本1.5～2.0 ml,采用巢式RT-PCR方法检测最常见的4种融合基因:TEL/AML1、E2A/PBX1、m-BCR/ABL和AF4/MLL。结果92例ALL患儿中TEL/AML1阳性21例,阳性率22.8%,占B细胞性ALL的24.7%(20/81例);6例E2A/PBX1阳性(6.5%),在前B细胞性ALL中占20.0%(3/15例);2例AF4/MLL阳性(2.2%),在婴儿ALL中占33.3%(2/6例);仅检测到1例m-BCR/ABL阳性(1.1%)。结论巢式RT-PCR方法是检测融合基因有效、敏感的方法。TEL/AML1在儿童ALL中阳性率最高,尤其是在B细胞性ALL中,该融合基因阳性的患儿病情较轻。     

一步法多重RT-PCR对儿童急性淋巴细胞白血病常见融合基因的检测及意义

目的 探讨一步法多重RT-PCR 对儿童急性淋巴细胞白血病(ALL)常见4 种融合基因的检测效果。方法 2003 年1 月至2010 年12 月确诊的ALL 患儿76 例,采集所有患儿骨髓标本,提取细胞总RNA,一步法多重RT-PCR 或常规巢式PCR 法对E2A/PBX1、MLL/AF4、BCR/ABL 和TEL/AML1 融合基因进行检测;DNA测序对PCR 结果进行验证。结果 一步法多重RT-PCR 及DNA 测序验证显示76 例ALL 患儿中,TEL/AML1融合基因阳性12 例(产物长度分别为298 bp 9 例,259 bp 3 例), E2A/PBX1 融合基因阳性3 例(产物长度373 bp), BCR/ABL 融合基因阳性1 例(产物长度2124 bp),MLL/AF4 融合基因阳性7 例(产物长度分别为427 bp 1 例,673 bp 6 例),与常规巢式PCR 检出结果一致。结论 一步法多重RT-PCR 可应用于儿童ALL 常见融合基因的检测。     

急性淋巴细胞白血病患儿染色体改变及预后分析

目的应用染色体核型分析技术,探讨染色体核型异常对儿童急性淋巴细胞白血病(ALL)患儿预后判断的意义。方法回顾性分析2007年-2014年收治的初诊且伴染色体异常ALL患儿共65例的临床资料。结果 (1) 65例异常核型中单纯数目异常者21例(32%),单纯结构异常者14例(22%),数目及结构同时异常者30例(46%);(2)染色体结构异常者中,t(12;21)2例,t(9;22)6例,t(1;19)3例,t(4;11)2例。染色体数量异常者中,超二倍体核型最多,有29例(57%);(3)至随访截止时间,本组病例中生存49例,死亡11例,失访5例,复发9例。超二倍体和t(12;21)预后好,亚二倍体、t(1;19)和t(4;11)预后差;(4)本组患儿融合基因阳性22例,包括BCR/ABL6例,MLL2例,TEL/AML1 8例,E2A/PBX1 6例。与染色体结果比对,8例TEL/AML1仅测得2例t(12;21),6例E2A/PBX1中测得2例t(1;19),另外一例t(1;19)对应的融合基因阴性。结论 (1)本组ALL患儿染色体改变以数目及结构同时异常为主,数目异常中以超二倍体核型最为常见。(2)染色体核型与ALL预后有密切联系。(3)t(12;21)及t(1;19)染色体检测阳性率低于融合基因阳性率。     

TEL/AML1 基因阳性急性淋巴细胞白血病患儿CCLG-ALL-2008方案疗效分析

目的探讨CCLG-ALL-2008方案治疗TEL/AML1融合基因阳性儿童急性淋巴细胞白血病(ALL)效果以及影响因素。方法回顾分析2008年6月至2014年12月初诊并治疗的99例TEL/AML1融合基因阳性患儿及329例无特异性融合基因的B系ALL患儿的临床和生物学特征,随访至2015年10月,观察两组患儿的生存状态和影响因素。结果两组患儿初诊时的年龄和外周血白细胞数相近;在诱导缓解治疗第8天的泼尼松敏感实验、第15天骨髓呈M3状态、第33天和第12周微小残留病灶(MRD)1.0×10-3的比例两组患儿的差异均无统计学意义(P0.05)。随访期间,TEL/AML1融合基因阳性患儿的复发率为14.14%(14/99),无特异性融合基因组为20.97%(69/329),差异无统计学意义(χ2=2.27,P=0.132);无特异性融合基因组病死率(16.72%)高于TEL/AML1融合基因阳性组(8.08%),差异有统计学意义(χ2=4.52,P=0.033)。TEL/AML1融合基因阳性组与无特异性融合基因组的5年总生存率(OS)分别为(86.1±4.9)%和(79.0±2.8)%,5年无复发生存率(RFS)分别为(80.7±5.1)%和(72.0±3.1)%,5年无事件生存率(EFS)分别为(78.9±5.1)%和(69.6±3.1)%,差异均无统计学意义(P0.05)。COX模型分析显示第12周MRD水平是影响OS、RFS、EFS的独立预后因素(P均0.001)。结论接受CCLG-ALL-2008方案治疗的ALL患儿,TEL/AML1融合基因阳性是预后良好的指标,第12周MRD≥1.0×10-3应推荐更强烈的治疗方案。     

TEL-AML_1阳性儿童急性淋巴细胞白血病近期疗效分析

目的探讨TEL-AML1融合基因阳性儿童急性淋巴细胞白血病(ALL)的临床和预后特征。方法应用RT-PCR技术,对213例初诊ALL患儿骨髓进行t(12;21)染色体检测和TEL-AML1融合基因检测。结果213例ALL中25例(11.7%)存在t(12;21)染色体改变和TEL-AML1融合基因阳性,25例患儿发病时平均年龄5.8岁(2～10岁),均为非T细胞系免疫表型,以普通型ALL为主,经诱导化疗后全部得到完全缓解。结论t(12;21)/TEL-AML1表达是儿童ALL较为常见的遗传学改变,该类型儿童ALL经化疗预后良好。     

儿童急性淋巴细胞性白血病124例遗传学异常分析

目的探讨儿童急性淋巴细胞性白血病（ALL）的遗传学特征。方法采用流式细胞仪检测免疫分型,染色体R带或G带显带技术进行染色体核型分析,多重聚合酶链反应（多重PCR）方法同时筛选29种急性白血病常见的染色体易位。结果112例患儿进行染色体检查,异常核型中包括〉47的超二倍体36例,亚二倍体14例,染色体易位13例。对116例ALL患儿进行了多重聚合酶链反应检测。B系ALL中检测到：TEL-AML1融合基因13例、MLL相关基因13例,E2A-PBX1融合基因4例、E2A-HLF融合基因4例、BCR-ABL融合基因3例、TLS-ERG融合基因2例,HOX11融合基因32例。7例T系ALL中检测到SIL-TAL1D融合基因4例。结论本组病例多重PCR的融合基因检出率为50％;染色体异常检出率为60％。多重PCR检出的融合基因加上染色体核型分析检出的畸变,使ALL患儿的遗传学异常的检出率达到77％。全面准确的细胞遗传学检查是ALL诊断、分型和预后评估的可靠依据。     

172例TEL/AML1阳性急性淋巴细胞白血病生物学特征分析

目的分析伴有TEL/AML1融合基因阳性急性淋巴细胞白血病(ALL)儿童群体生物学特征。方法回顾性分析2008年1月—2015年4月就诊的172例年龄≤18岁初诊伴有TEL/AML1阳性ALL患儿(根据MICM标准诊断分型)临床特点。结果 TEL/AML1阳性患儿占同期新诊断(n=940) ALL患儿的18. 3%。发病中位年龄为4(1～13)岁。完成染色体检查的160例患儿中均未发现有t(12; 21)(p13; q22)异位。行多参数流式细胞仪检查163例,结果提示免疫表型均为B细胞表型。在诊断时没有患者发生中枢神经系统白血病。在中位随访时间为65(1～123)个月时,27例复发(复发组),145例(84. 3%)获得持续完全缓解(非复发组)。分析复发组和非复发组的生物学特征,结果发现两组发病时在激素预治疗的敏感性、危险度分组以及染色体异常诸方面有统计学显著差异。结论 TEL/AML1阳性患儿发病年龄小;免疫分型为B细胞型、激素预治疗敏感、核型分析未发现t(12; 21)(p13; q22)异位;发病时多无中枢神经系统白血病的发生;复发组患者激素预治疗不敏感者多、危险度分组为高危组的患者比例高,非随机次要染色体异常的患者多见。     

儿童Pre-B急性淋巴细胞白血病和急性髓系白血病特异遗传亚型

目的总结儿童急性白血病(AL)特异遗传亚型的发生率和特征,为评估预后提供依据。方法对365例AL患儿进行骨髓染色体核型检测分析白血病细胞的遗传学特点,荧光原位杂交(FISH)检测特异基因及相应位点拷贝数变异。结果 175例前体B急性淋巴细胞白血病(Pre-B ALL)和54例急性髓系白血病(AML)存在特异亚型。在Pre-B ALL中,高超二倍体最常见(33%),t(12;21)/ETV6-RUNX1、t(4;11)/MLL重排、t(9;22)、t(1;19)和iAMP21占比分别为22%、5%、3%、7%和1%。在AML中,MLL重排最常见(18%),其中t(9;11)型占56%;BCR/ABL阳性1例,FISH证实是隐匿核型ins(22;9);t(8;21)、t(15;17)和inv(16)分别占12%、15%和8%。倍体水平显示ALL高超二倍体和AML超二倍体获得染色体方式为非随机性。值得注意的是特异亚型中的变异型和不同附加异常,如额外融合,del(9p),del(12p),dup(1q)和非整倍体等畸变。结论儿童Pre-B ALL和AML中特异遗传亚型的发生率与西方儿童相似,揭示遗传异质性可能有助于预后研究。     

Characteristics of patients with TEL-AML1-positive acute lymphoblastic leukemia with single or multiple fusions

BACKGROUND: The TEL-AML1 fusion in precursor-B ALL is generated by a cryptic 12;21 translocation that is detectable by fluorescence in situ hybridization (FISH). It is generally considered a favorable prognostic indicator. Some TEL-AML1+ ALL patients present at diagnosis with extra copies of the fusion, enumerated by FISH. The aim of the study was to determine whether additional copies of TEL-AML1 have clinical significance. PROCEDURE: Charts of all TEL-AML1+ ALL patients at the UM and Children's Hospitals and Clinics of Minnesota between 1996 and 2004 were reviewed. RESULTS: Eight patients (7 males/1 female, mean age 46 months) with two or more TEL-AML1 fusion signals and 24 with single TEL-AML1 fusion signals (18 males/6 females, mean age 52 months) were identified. There was no statistically significant difference in age or gender between the two groups. Patients with double TEL-AML1+ had a higher frequency of myeloid markers CD13 (P = 0.04) or CD33 (P = 0.003) than single TEL-AML1+ patients. Single TEL-AML1+ patients had higher WBC (P = 0.04) than double TEL-AML1+ patients. A trend toward slower therapy response was seen in double TEL-AML1+ patients versus single, (1 of 7 [14%] <5% marrow blasts on Day 7 vs. 13 of 23 [56%], P = 0.09). Double TEL-AML1+ patients had a higher relapse rate (P = 0.09) than single TEL-AML1+ patients. CONCLUSIONS: Utilizing FISH to distinguish subgroups of TEL-AML1 fusion patients may have important prognostic implications. The presence of an extra fusion may portend poorer prognosis. A larger and longer-term follow-up study will be required to verify the possible clinical significance of the presence of multiple TEL-AML1 fusions.     

Loss at 12p detected by comparative genomic hybridization (CGH): association with TEL-AML1 fusion and favorable prognostic features in childhood acute lymphoblastic leukemia (ALL). A multi-institutional study.

BACKGROUND: Genetic aberrations provide prognostic information in childhood ALL. The proportion of patients with detectable aberrations can be increased by combining G-banding with comparative genomic hybridization (CGH). PROCEDURE: We studied 79 children with ALL by CGH and G-banding, and explored the relationship of these findings to clinical features and outcome. RESULTS: CGH revealed DNA copy number changes in 57 patients (72%), 9 of whom had normal karyotype by G-banding. Gains were more frequent than losses, and changes of whole chromosomes more frequent than partial aberrations. Two frequent partial losses were found; at 9p and 12p. The 9 patients with loss at 12p were studied for the deletion of TEL (ETV6) gene and the fusion of TEL and AML1 genes by fluorescent in situ hybridization (FISH). Eight out of the 9 children with loss at 12p harbored the TEL-AML1 translocation and all 9 had the deletion of a nontranslocated TEL allele. All 9 had precursor-B phenotype and L1 morphology, and 8/9 had WBC below 50 x 10(9)/liter. All children were treated according to Nordic ALL protocols, had a good response to treatment based on day 15 bone marrow morphology, and 7 out of the 9 survived in continuous complete remission (median follow-up 74 months). CONCLUSIONS: CGH is a valuable tool in screening for genetic aberrations in childhood ALL. DNA copy number losses detected at 12p associate with TEL-AML1 fusion as well as with favorable prognostic features.