甲型副伤寒沙门氏菌主动外排多重耐药基因与表达研究

目的 调查临床分离甲型副伤寒沙门氏菌对常用抗生素的耐药情况与多重耐药主动外排基因acrB的检测、序列分析及其表达水平。方法 用琼脂二倍稀释法测定7种抗生素对甲型副伤寒沙门氏菌的抗菌活性。以基因库序列为参考设计引物PCR扩增acrB、测序并用RT-PCR方法检测其表达。结果 12株甲型副伤寒沙门氏菌对氧氟沙星、环丙沙星、头孢噻肟、哌拉西林、氯霉素、四环素、庆大霉素的耐药率除氯霉素为0外。其余均为8．33％。对三类不同种类抗菌药物多种耐药者l株。所有细菌均检测到多重耐药外排基因acrB．测序结果与参考沙门氏菌序列(No．AL627267)比较，有l处碱基差异。与大肠埃希氏菌(No．ECU00734)比较，碱基同源性为84．4l％(70／449)，提示其碱基序列同源性均极高。分别选取对两类抗菌药物耐药及敏感甲型副伤寒沙门氏菌各一株进行RT-PCR检测，结果 两株细菌均检测到多重耐药外排基因acrB的表达。结论甲型副伤寒沙门氏菌对喹诺酮类、第三代头孢菌素类等药物耐药率低，但有多重耐药。甲型副伤寒沙门氏菌中均存在acrAB主动外排系统。与大肠埃希氏菌同源性高，可检测到其表达。主动外排机制可能是甲型副伤寒沙门氏菌形成多重耐药的主要原因之一。     

多重PCR技术检测沙门菌两种四环素耐药基因

应用两对特异性引物同时检测四环素耐药基因tetB和tetC通过对35株沙门菌分离株的四环素耐药性检测，表明所有沙门菌分离株均含tetC基因，与药敏试验结果阳性符合率65．7％，8株同时含有tetB基因，与药敏试验结果阳性符合率100％，tetB基因和tetC基因双阳性的菌株与药敏试验结果阳性符合率也为100％。取其中部分菌株扩增出tetB和tetC基因片段进行序列分析，5株菌的tetB基因扩增产物序列完全相同，与质粒pRT11相应序列同源性达99．7％；14株菌的tetC基因扩增产物与质粒pBR322中的相应序列同源性为100％。证实沙门菌耐药基因普遍存在，且同时含有tetB和tetC基因的菌株表现耐药。多重PCR技术同时检测两种四环素耐药基因，适合大量样本的检测，对开展沙门菌四环素多种耐药基因的分子流行病学监测提供了有效途径。     

多重耐药鲍曼不动杆菌的主动外排泵基因对β-内酰胺类抗菌药物耐药性的影响

目的 探讨对β-内酰胺类抗菌药物耐药的多重耐药鲍曼不动杆菌主动外排泵基因在耐药机制中表达情况.方法 多重耐药鲍曼不动杆菌96株,分析其对9种β-内酰胺类抗菌药物的耐药性.以加入泵抑制剂羰基氰氯苯腙(CCCP)后最低抑菌浓度(MIC)降低至≤1/4为标准,筛选出34株外排泵表型阳性的鲍曼不动杆菌,用聚合酶联链反应(PCR)扩增法对其行外排泵蛋白基因adeB进行检测和分析.结果 多重耐药鲍曼不动杆菌对头孢噻肟、头孢他啶、头孢曲松、头孢吡肟、头孢哌酮/舒巴坦的耐药率分别为92.3％,86.6％,83.0％,70.8％,68.3％;对氨苄西林、哌拉西林、哌拉西林/他唑巴坦、氨苄西林/舒巴坦的耐药率分别为90.1％,77.5％,72.4％和67.3％.34株外排泵表型阳性的鲍曼不动杆菌检测到adeB基因有33株,检出阳性率97.06％.对33株鲍曼不动杆菌的外排泵基因adeB进行测序,经比对所测序列与Genebank中序列同源性为100.0％.结论 主动外排泵基因是多重耐药鲍曼不动杆菌对β-内酰胺类抗菌药物耐药的一个重要因素.     

铜绿假单胞菌MexAB-OprM主动外排表型筛选和外排基因检测

目的 研究解放军总医院临床分离的多重耐药铜绿假单胞菌的主动外排系统，为指导临床合理选择抗生素提供依据。方法 采用外排泵抑制剂（苯丙氨酸-精氨酸-β萘酰胺）与喹诺酮类抗生素，以微量肉汤稀释法测定加与不加外排泵抑制剂时环丙沙星与左氧氟沙星的最低抑菌浓度（MIC）值，并计算MIC值的变化，根据加与不加外排泵抑制剂MIC值降低3个稀释度及以上筛选主动外排表型阳性菌株；PCR扩增外排表型阳性菌的耐药基因oprM、mexB和mexR，并对3株菌进行mexR基因测序分析；RT-PCR检测oprM基因的mRNA水平，分析耐药基因的表达情况。结果 苯丙氨酸-精氨酸-β萘酰胺能极大的降低左氧氟沙星和环丙沙星的MIC值，70株多重耐药铜绿假单胞菌中46株表型阳性（65．7％），其中PCR检测oprM、mexB和mexR基因同时阳性菌株42株（91．3％），仅oprM基因阳性2株（4．3％），oprM、mexB和mexR基因均阴性2株（4．3％）。RT-PCR产物测定A值（A260／A280）与PAO1对照阳性菌株13株，以PAO1的oprM／rpoD的A值为对照阳性菌株4株，同时满足A值（A260／A280）和oprM／rpoD比值均高于PA01的菌株3株。测序结果与GenBank中已知的mexR基因比对，其中2株同源性为100％，1株第434位核苷酸插入2bp（AT）。结论 中国人民解放军总医院多重耐药铜绿假单胞菌大多存在主动外排的耐药机制，其耐药与外排泵过度表达相关。     

致病性猪沙门菌四环素耐药基因tetB的PCR检测

目的检测临床分离猪源致病性沙门菌四环素的耐药基因,确定沙门菌四环素耐药基因类型。方法用KB法测定分离株对四环素等21种抗生素的耐药情况,用PCR方法检测四环素耐药基因tetA、tetB、tetC、tetD、tetE、tetG及tetK,并对扩增产物进行测序。结果临床分离株全部对四环素耐药,33株沙门菌中有29株扩增出tetB特异性片段,基因序列与参考菌的同源性为99%,tetB检测与药敏试验阳性符合率为87.9%。结论tetB的PCR检测对四环素耐药性具有较高的特异性,tetB基因是决定本试验中临床分离株四环素耐药的主要基因,为四环素耐药性的分子流行病学监测提供了依据。     

伤寒沙门菌sufC基因缺陷变异株的制备

目的为深入研究sufC基因在伤寒沙门菌中的功能作用,制备sufC基因缺陷变异株。方法根据GeneBank公布的伤寒沙门菌sufC基因序列,设计sufC缺失用PCR特异性引物,制备缺失sufC基因的同源性核苷酸片段,连接自杀质粒后导入伤寒沙门菌野生株,诱导同源重组,重组菌经PCR观察及序列分析鉴定,将完全重组稳定的相应菌株作为伤寒沙门菌sufC基因缺陷变异株,并经测序分析加以确定。结果 PCR及序列分析证实,缺陷变异株的sufC基因缺失495个碱基。结论伤寒沙门菌sufC基因缺陷株构建成功,为进一步研究其在伤寒沙门菌中的功能作用奠定了基础。     

腹泻沙门菌血清型分布及耐药情况分析

目的：研究2010至2013年北京市西城区沙门菌的血清型分布及耐药情况,为流行病学和腹泻病治疗提供科学依据。方法对本地区2010至2013年腹泻监测系统采集的1538例腹泻病例样本分离出的沙门氏菌进行血清分型,并采用纸片扩散法进行药物敏感性试验。结果1538例腹泻病例样本分离出86株沙门菌株,共分为5种血清群、34种沙门菌型。其中优势血清群为 B 群（33.72％）,山夫登堡沙门氏菌和肠炎沙门氏菌两种血清型检出率最高,分别占18.61％、8.14％。药敏试验显示耐药菌株除对哌拉西林/他唑巴坦、头孢吡肟、亚胺培南、美罗培南完全敏感外,对其余19种抗生素均产生一定耐药性,其中对哌拉西林、氨苄西林的耐药水平最高（23.26％、22.09％）。26株菌为耐药菌株中,53.85％（14株）的耐药菌株同时对3种以上（含3种）抗生素耐药,38.46％（10株）的耐药菌株同时对4种以上（含4种）抗生素耐药,具有多重耐药性的血清型集中在乙型副伤寒沙门氏菌、鼠伤寒沙门氏菌、印第安纳沙门氏菌及奥雷宁堡沙门氏菌。结论本地区腹泻患者检出沙门菌属以山夫登堡沙门氏菌最高,肠炎沙门菌次之;对青霉素类药物的耐药性最高,同时各血清型沙门菌均有不同程度的耐药及严重的多重耐药;应进一步加强对腹泻患者沙门菌感染的主动监测。     

南通地区伤寒沙门菌质粒介导的耐药性转移的初步研究

目的 通过对南通地区伤寒沙门菌的耐药性分析,并对其携带的质粒进行PCR检测、分类其上的耐药基因,从而阐明定位于质粒上的整合子介导的耐药性传播的分子机制.方法 收集2009-2011年间南通地区的食源性伤寒沙门菌67株,采用K-B纸片扩散法进行药敏试验确定其耐药谱;筛选出多重耐药性菌株,提取质粒;选择携带质粒的耐药性菌株,以大肠埃希菌为受体进行接合试验.结果 南通地区沙门菌74.6％的沙门菌株(50/67)对抗生素产生耐药性,其中31.3％(50/67)对超过一种抗生素有耐药性,发展成为多重耐药性沙门菌.南通地区分离的株沙门菌仅少量携带质粒,且携带的质粒数量较少15％(10/67),质粒大小分布于DNA Marker的0.6～4Kb间,且1.4Kb大小的质粒出现频率较高(7/10).结论 本地区不同来源的沙门菌检出比率较高,且对氨苄西林和哌拉西林等药物呈现较高的耐药性.本地区分离的株沙门菌携带质粒较少,且大小(＜2Kb或＞2Kb)出现频率有差异.但两者于耐药性传播都有关联.     

PFGE和质粒图谱分析人和猪来源德尔卑沙门菌多重耐药株的同源性

目的 分析人和猪来源的德尔卑沙门菌的分子同源性,为研究多重耐药性在人畜之间传播提供分子生物学技术依据.方法 药敏试验检测人和猪来源的德尔卑沙门菌多重耐药株对10种抗菌药物的敏感性;用脉冲凝胶电泳方法(PFGE)检测菌株间的分子同源性;结合实验或电转移试验获得目标质粒,质粒酶切图谱检测质粒的同源性.PCR分析染色体介导喹诺酮耐药基因gyrA和arC,质粒可介导的喹诺酮耐药基因qnrA/qnrB/qnrC/qnrS、aac(6)-Ⅰ b-cr、qepA和oqxAB.结果 共收集48株德尔卑沙门菌,经药敏试验筛选获得11株多重耐药株(MDR),人源性8株,猪源性3株.11株菌除对氨苄青霉素、氯霉素、链霉素、磺胺和四环素(R型:ACSSuT)耐药外,所有菌株也对萘啶酸和环丙沙星耐药,6株对左氧氟沙星耐药,5株对头孢曲松耐药.PFGE分析,11株菌共分为6个克隆,3株动物源性菌株与8株人源性菌株无克隆相关性.喹诺酮耐药基因分析显示,有5株和3株动物源株检测到gyrA的Ser83Leu或/和Asp87Asn突变,6株人源株和3株动物源株检测到parC的Ser80Ile或/和Thr57Ser突变.质粒电泳分析显示,所有菌株都存在1-4条质粒条带,大小介于2～180kb,其中3株人源性菌株和1株动物源性株都存在4kb左右大小的质粒;2株动物源性菌株仅存在20 kb大小质粒.用结合实验和电转移方法,分析4kb质粒结构,证实4个质粒的酶切图谱完全一致,质粒中均存在介导外排基因oqxAB和喹诺酮耐药基因aac(6')-Ⅰ b-cr.结论 人和猪来源的德尔卑沙门菌多重耐药株中质粒介导的外排基因oqxAB和喹诺酮耐药基因aac(6')-Ⅰ b-c是喹诺酮重要的耐药机制,可能在沙门菌间传递,导致对喹诺酮类高耐药性.通过人和猪的接触或间接途径,沙门菌有传播喹诺酮耐药性的风险,同一种质粒可在人和动物中转移而传播该耐药机制.     

志贺菌主动外排系统对氟喹诺酮类抗生素耐药性的影响

目的 探讨主动外排系统AcrAB-TolC在志贺菌对氟喹诺酮类抗生素耐药性中的作用.方法 K-B纸片扩散法及MIC测定2009-2011年天津地区临床分离的144株志贺菌的药敏情况;加入泵抑制剂CCCP(羰基氰氯苯腙)检测耐药菌株对氟喹诺类抗生素敏感性的变化;应用定量PCR研究外排泵基因acrAB-tolC表达以探讨外排泵在菌株对氟喹诺酮耐药中的作用.结果 144株志贺菌中,共有5株志贺菌对环丙沙星等氟喹诺酮类抗生素耐药,均为福氏志贺菌.加入泵抑制剂后,5株志贺菌对5种氟喹诺酮类抗生素的MIC下降了4～16倍,而对照菌株对上述药物的MIC没有变化或仅下降至原值的1/2.实时定量PCR结果表明耐药菌株外排泵基因acrA、acrB和tolC的mRNA水平显著高于敏感野生株(P＜0.05).结论 本地区志贺菌临床株对氟喹诺酮类抗生素环丙沙星及氧氟沙星耐药率最高,为3.47％.AcrAB-TolC外排泵基因的高表达是导致志贺菌对氟喹诺酮类抗生素耐药的主要原因之一.     

多重耐药大肠埃希菌16S rRNA甲基化酶、氨基糖苷类修饰酶基因研究

目的了解多重耐药大肠埃希菌(ECO)氨基糖苷类药物耐药机制。方法采用PCR检测20株多重耐药ECO菌11种16S rRNA甲基化酶和氨基糖苷类修饰酶基因。结果1株检出16S rRNA甲基化酶基因(5.0%),并为新亚型;16株检出氨基糖苷类修饰酶基因(80.0%)。15号株rmtB基因测得序列翻译成氨基酸序列与美国核酸库(GenBank)已登录的rmtB氨基酸不同,为新亚型。结论本组多重耐药ECO菌氨基糖苷类耐药机制与产16S rRNA甲基化酶和产氨基糖苷类修饰酶相关。多重耐药ECO菌存在新的氨基糖苷类药物耐药机制。     

产AmpC酶大肠埃希菌中整合子的研究

目的:观察25株产AmpC酶大肠埃希菌中整合子的分类、结构及其在介导AmpC酶基因转移中的作用。方法:采用微量稀释法测定20种抗生素对试验菌株的敏感性。利用多重聚合酶链反应(PCR)方法检测整合酶基因(intI)及其定位,对其阳性菌株可变区(Int)扩增产物进行测序分析。结果:这25株菌对多种抗生素耐药。20株Ⅰ类整合酶基因阳性(80%);所携带的耐药基因盒绝大多数为aadA5和dfr17;未发现携带AmpC基因盒的整合子。结论:Ⅰ类整合子广泛地存在于产AmpC酶的大肠杆菌中;耐药基因盒是整合子阳性菌株对氨基糖苷类、磺胺类药物及氯霉素耐药的主要原因,但对介导AmpC酶基因转移,不起主要作用。     

安徽省产质粒介导AmpC酶大肠埃希菌的耐药性及基因型分析

目的 了解2007年安徽地区产质粒介导AmpC酶的大肠埃希菌枪出率及产酶株基因型.方法 三维实验进行AmpC酶筛选;并行转移接合实验,PCR检测AmpC酶基因,琼脂稀释法进行药物敏感试验.结果 21株大肠埃希菌三维实验阳性,占所有临床分离菌株的5.9%(21/355),19株经PCR检测携带ampC基因,16株转移接合成功,经序列分析表明,9株CIT阳性结果,6株DHA阳性结果,3株EBC阳性结果;1株同时携带EBC及DHA基因.其中有1株EBC型新基因被枪出(序列号为FJ237369);药敏结果显示临床分离菌株及接合子对多种抗菌药物耐药,对头孢吡肟,亚胺培南,美罗培南相对较敏感.结论 安徽地区大肠埃希菌产质粒介导AmpC酶以CIT型和DHA型为主,同时存在变异型,临床可选用第四代头孢菌素类抗菌药物,碳青霉烯类抗菌药物抗感染治疗.     

Mohnarin2006——2007年度报告：尿标本细菌耐药监测研究

目的了解我国尿路感染细菌分布及耐药状况。方法采用纸片法、MIC法或E-test法,使用WHONET5.4软件进行分析,对卫生部全国细菌耐药性监测网(Mohnarin)所属84家三级甲等医院2006年6月1日~2007年5月31日从尿标本中分离的菌株进行分析。结果1共分离菌株15167株,其中革兰阳性菌4160株,革兰阴性菌11007株,分别占27.4%和72.6%。分离量最多的为大肠埃希菌6838株(45.1%)、肠球菌属2222株(14.7%)和肺炎克雷伯菌1035株(6.8%);2大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌对氟喹诺酮类的耐药率分别为70%和45%;对头孢噻肟耐药率分别为45.2%与42.5%;3屎肠球菌对各种抗菌药物的耐药率明显高于粪肠球菌,粪肠球菌、屎肠球菌中分别有1.2%、3.2%对万古霉素耐药,有1.4%、3.9%对替考拉宁耐药;4表葡菌和金葡菌对头孢西丁的耐药率分别为74.4%和36.0%,未发现对糖肽类中介或耐药的金葡菌,表葡菌对替考拉宁有3.9%的中介率。结论我国尿路感染主要致病菌以大肠埃希菌为代表的革兰阴性杆菌为主,但肠球菌等革兰阳性菌所占比例有所增多;致病菌对喹诺酮类、第三代头孢菌素的耐药率进一步升高。     

大肠埃希菌对氨基糖苷类抗生素的耐药谱及其产ESBLs的研究

目的了解临床分离的54株大肠埃希菌对氨基糖类苷类抗生素的耐药谱及产ESBLs情况,分析氨基糖苷类修饰酶AAC(3)-II的检出率及该酶的一些特征。方法采用MIC法测定临床分离的54株大肠埃希菌对7种氨基糖苷类抗生素的耐药谱,用NCCLS推荐的酶抑制剂增强纸片扩散法检测产ESBLs菌株,并通过聚合酶链反应、克隆测序和测定重组菌耐药谱对aac(3)-II基因进行研究。结果54株大肠埃希菌对阿米卡星、庆大霉素、卡那霉素、妥布霉素、链霉素、大观霉素和奈替米星的耐药率分别为14.8%、77.8%、59.3%、66.7%、68.5%、61.1%、22.2%;共检测出产ESBLs菌株34株,占63.0%;aac(3)-II基因在54株大肠埃希菌中检出率为88.5%;质粒转化菌产ESBLs且同时检出aac(3)-II基因。重组菌BL21(DE3)/pET26::aac(3)-II对庆大霉素和卡那霉素有耐药性,对其余5种氨基糖苷类抗生素没有表现出耐药性。结论大肠埃希菌对庆大霉素的耐药率最高,对阿米卡星的耐药率最低;耐氨基糖苷类抗生素的大肠埃希菌与其产ESBLs有相关性;重组菌BL21(DE3)/pET26::aac(3)-II仅对庆大霉素和卡那霉素产生耐药。     

近3年分离大肠埃希菌耐药性的分析

目的 了解我院2014年1月1日-2016年12月31日3年间分离的1584株大肠埃希菌耐药性,指导临床用药。方法 常规培养分离细菌,用法国梅里埃Vitek2-CompactT全自动鉴定药敏分析仪及配套试剂。结果 1584株大肠埃希菌中来自尿液710株(44.8%);血液197株(12.4%);分泌物193株(12.1%);痰液169株(10.6%);胸腹水30株(1.9%)。其科室分布列前3位的分别为：泌尿外科326株(22.4%);肾内科180株(11.4%);重症监护室(ICU)165株(10.4%)。3年间产ESBLs大肠埃希菌的检出率分别为63.9%、58.7%和60.5%。产ESBLs大肠埃希菌对大多数抗菌药物的耐药率明显高于非产ESBLs大肠埃希菌,其对临床常用抗菌药物的耐药率呈逐年上升趋势,2016年发现3株对亚胺培南耐药的大肠埃希菌。结论 产ESBLs大肠埃希菌对绝大部分抗生素的耐药率居高不下,应密切关注大肠埃希菌耐药性变迁,防止多重耐药菌株的传播流行。     

2016—2018年某医院CRE临床分布、耐药性及碳青霉烯酶基因检测

目的 了解耐碳青霉烯类肠杆菌科细菌(carbapenem-resistant Enterobacteriaceae, CRE)的临床分布、耐药性及碳青霉烯酶基因型,为临床抗感染治疗及医院感染防控提供依据。方法 收集2016年1月至2018年12月蚌埠医学院第一附属医院临床分离的CRE菌株,采用VITEK 2 Compact全自动细菌鉴定药敏分析仪进行药敏实验。药敏结果判读参照CLSI 2018版标准,WHONET 5.6软件统计分析。PCR方法检测常见碳青霉烯酶基因。结果 2016年1月至2018年12月我院临床标本中共分离出626株CRE,总检出率为12.46%。其中主要为肺炎克雷伯菌和大肠埃希菌,分别占84.35%(528/626)和9.27%(58/626)。标本来源主要为痰56.87%(356/626)、尿液12.14%(76/626)、血液10.38%(65/626)。病区分布主要为急诊内科32.75%(205/626)和重症监护病房25.08%(157/626)。626株CRE菌株对甲氧苄啶-磺胺甲噁唑和阿米卡星耐药率分别为56.07%和69.65%,其余在测试的抗菌药物耐药率均高于80%。626株CRE中602株检出携带常见碳青霉烯酶基因。602株菌主要包括肺炎克雷伯菌515株(510株携带blaKPC-2基因,5株携带blaNDM-1基因,2株携带blaIPM基因);大肠埃希菌54株(43株携带blaKPC-2基因,13株携带blaNDM-1基因,1株携带blaIPM基因)。其中3株大肠埃希菌和2株肺炎克雷伯菌同时检出blaKPC-2基因和blaNDM-1基因。未检出blaVIM和blaOXA-48基因。结论     

2016—2018年某医院CRE临床分布、耐药性及碳青霉烯酶基因检测

目的 了解耐碳青霉烯类肠杆菌科细菌(carbapenem-resistant Enterobacteriaceae, CRE)的临床分布、耐药性及碳青霉烯酶基因型,为临床抗感染治疗及医院感染防控提供依据。方法 收集2016年1月至2018年12月蚌埠医学院第一附属医院临床分离的CRE菌株,采用VITEK 2 Compact全自动细菌鉴定药敏分析仪进行药敏实验。药敏结果判读参照CLSI 2018版标准,WHONET 5.6软件统计分析。PCR方法检测常见碳青霉烯酶基因。结果 2016年1月至2018年12月我院临床标本中共分离出626株CRE,总检出率为12.46%。其中主要为肺炎克雷伯菌和大肠埃希菌,分别占84.35%(528/626)和9.27%(58/626)。标本来源主要为痰56.87%(356/626)、尿液12.14%(76/626)、血液10.38%(65/626)。病区分布主要为急诊内科32.75%(205/626)和重症监护病房25.08%(157/626)。626株CRE菌株对甲氧苄啶-磺胺甲噁唑和阿米卡星耐药率分别为56.07%和69.65%,其余在测试的抗菌药物耐药率均高于80%。626株CRE中602株检出携带常见碳青霉烯酶基因。602株菌主要包括肺炎克雷伯菌515株(510株携带blaKPC-2基因,5株携带blaNDM-1基因,2株携带blaIPM基因);大肠埃希菌54株(43株携带blaKPC-2基因,13株携带blaNDM-1基因,1株携带blaIPM基因)。其中3株大肠埃希菌和2株肺炎克雷伯菌同时检出blaKPC-2基因和blaNDM-1基因。未检出blaVIM和blaOXA-48基因。结论 CRE菌株对常用抗菌药物耐药严重,主要的碳青霉烯酶基因为blaKPC-2型。应加强对CRE菌株的医院感染防控。     

多重耐药菌中质粒介导喹诺酮耐药基因的检测和分析

目的分析广州医学院第一附属医院临床分离的60株多重耐药大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌质粒介导的喹诺酮耐药基因存在状况。方法采用VITEK-2全自动细菌鉴定仪检测大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌对抗生素的药物敏感性,选择多重耐药的大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌作为研究对象,用多重PCR法进行质粒介导的喹诺酮耐药基因的检测和分析。结果检测出耐药基因qnrA型2株,qnrB型耐药基因15株,aac（6’）-Ib基因9株,其中aac（6’）-Ib—cr型耐药基因5株。其中有1株肺炎克雷伯菌检测到同时含有qnrA和aac（6’）-Ib—cr基因;还有3株肺炎克雷伯菌检测到同时含有qnrB和aac（6’）-Ib—cr基因。未检测到qnrC、qnrD、qnrS、qepA型的耐药基因。结论临床分离的多重耐药大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌含有多种质粒介导的喹诺酮耐药基因,应引起临床的重视。