四色流式细胞术分析骨髓增生异常综合征原始细胞免疫表型

为了研究骨髓增生异常综合征（MDS）患者骨髓原始细胞免疫表型特征，应用四色流式细胞术对常规设门及二次设门策略选取的29例MDS患者的骨髓细胞悬液中，CD34^＋细胞进行免疫表型分析。结果表明：①随着MDS的进展（RA／RAS→RAEB→RAEB—T），根据CD45／SSC图中选取的原始细胞群中，CD34^＋细胞比例逐渐增高．分别为8．0％、46．4％、76．8％，各亚型之间差别有显著意义（P〈0．05）。②在CD45 vs SSC散点图上，设门所取的原始细胞抗原表达随着RA／RAS→RAEB→RAEBT的进展，HLA—DR、CD13、CD33、CD117表达逐渐增高，CD15表达逐渐减低，差别均有显著意义（P〈0.05）。③在CD45VSCD34散点图上二次设门取CD34^＋原始细胞行抗原表达的分析，同样异常表达HLA—DR及髓系抗原CD13、CD33和CD117，比例高于常规分析法（P〈0．05），CD15比例减低，在RA／RAS中CD13、CD33、CD117和HLA—DR的表达较常规分析的原始细胞比例明显增高（P〈0.05），相关抗原的表达率在各亚型间差别无显著意义（P〉0．05）。结论：常规设门法能反映MDS疾病的进展，而二次设门策略则更能反映MDS原始细胞的生物学特征，CD34的异常表达代表原始细胞的不成熟性和异质性，在临床高度怀疑但形态学和细胞遗传学不能诊断时，原始细胞免疫分型对MDS的诊断更具意义。     

流式细胞免疫表型测定在诊断骨髓增生异常综合征中的意义

应用骨髓和外周血的形态学及细胞遗传学检查可对有明确病态造血和异常核型的骨髓增生异常综合征（MDS）患者做出诊断。然而，仍有相当数量的患者缺乏上述证据。最近的一些研究表明，可以应用流式细胞仪（FCM）检测MDS患者骨髓造血细胞表面免疫标记以反映其系特异性和阶段特异性紊乱，从而将MDS与其他非恶性血细胞减少性疾病区分开。本文对这一领域的相关研究进展，诸如FCM在MDS中的应用、FCM参数与MDS形态学及细胞遗传学诊断的相关性及FCM参数与MDS分型和预后的关系等进行了综述。     

骨髓增生异常综合征患者细胞免疫表型异常

本研究探讨骨髓增生异常综合征（MOS）患者细胞免疫表型异常,确定其在MDS诊断中的价值。应用流式细胞术（FCM）检测136例血细胞减少伴骨髓病态造血患者的细胞免疫表型,采用流式细胞术积分系统（FCSS）对检测结果进行判断,确定阳性结果的敏感性与特异性,并与传统的诊断方法进行相关性检验。结果表明：136例患者中有111例临床确诊为MDS,非MDS患者25例。在111例MDS患者中FCSS判断为阳性结果的有85例,判断为中间结果的有18例,阴性结果8例;而在非MDs组,FCSS确定为阴性结果的有24例,判断为中间结果的有1例,无阳性结果病例。FCSS的诊断敏感性为76．6％,特异性为100％,与传统的诊断方法具有良好的相关性（R=0．613,P=0．000）。结论：MDS患者具有多项免疫表型异常,并可以累及多个细胞群体,其中主要免疫表型异常和累及2个以上细胞群体是MDS与非MDS的鉴别要点。     

骨髓增生异常综合征患者骨髓细胞免疫表型研究及意义

为探讨骨髓增生异常综合征（MDS）各亚型的骨髓细胞免疫表型变化及临床意义，采用免疫酶标法检测30例MDS患各亚型36例次骨髓细胞抗原的表达，并进行临床追踪观察及检测。研究结果表明，髓系细胞抗原表达明显异常，早期髓系细胞抗原CD13，CD33阳性表达率明显增加，较成熟细胞抗原CD15阳性表达率减少；单核细胞抗原CD14及淋巴细胞抗原CD7，CD10无显异常，干／祖细胞抗原CD34在MDS的RAEB／RAEB－t组显增加，RA和RAS组则增加不明显；早期红系细胞及各增殖期细胞抗原CD71在MDS各亚型均明显高于对照组。结论说明MDS患骨髓细胞免疫表型存在多系异常，且对协助诊断及判断预后有一定意义。     

骨髓增生异常综合征髓系细胞免疫表型及其临床意义的研究

探讨骨髓增生异常综合征髓系细胞免疫表型的变化及其临床意义，应用一组单克隆抗体，采用免疫酶标法对５１例ＭＤＳ、２１例 再生了阉生贫血、２１例阵发性睡眠性血红蛋白尿症、１０例急性髓系白轿病患者及１５名正常人骨髓细胞膜表面抗原ＣＤ１３、ＣＤ１４、ＣＤ３３和ＣＤ１５进行检测，同时还检测ＭＤＳ患者的骨髓细胞形态、染色体核型及姊妹染色单体分染并按分型进行促分化、促造血和小剂量化疗ＭＤＳ骨髓单个核细胞较正常人表     

骨髓增生异常综合征免疫表型研究进展

骨髓增生异常综合征（MDS）是一组血液系统异质性的疾病,表现为骨髓原始细胞的形态和数目异常,无效造血及不同程度的外周血细胞减少并易转变为急性髓系白血病。本文就MDS疾病的骨髓形态学检查,骨髓活检,染色体核型分析,免疫分型等问题,特别是流式细胞术免疫分型技术检测对MDS诊断和预后意义的研究进展作一综述。     

骨髓细胞免疫表型分析在低幼稚细胞骨髓增生异常综合征诊断中的价值

本研究旨在探讨低幼稚细胞骨髓增生异常综合征（MDS）患者细胞免疫表型特征,确定其在诊断中的价值。应用流式细胞术（FCM）检测222例血细胞减少伴骨髓病态造血、骨髓幼稚细胞数〈5％的患者的细胞免疫表型;测定成熟粒细胞群和单核细胞群的抗原跨阶段表达（粒系或单核系cD34或CD117表达或成熟粒细胞群HLA—DR的表达）,抗原跨系列表达（粒系或单核系CD7或CD56表达）,CD45／SSC异常（成熟粒细胞群或单核细胞群）,分化抗原表达（粒细胞群CD13／CD16和单核细胞群HLA-DR表达缺失）;确定阳性结果的敏感性与特异性。结果表明：在222例患者中经临床检测及鉴别诊断,有127例确定诊断为MDS,95例为非MDS（药物性粒细胞减少,自身免疫性血细胞减少及特发性血小板减少）。在成熟粒细胞群抗原跨阶段、跨系列表达,CD45／SSC及抗原分化异常的敏感性分别为51．5％、30．7％、49．6％和60．6％,其特异性分别为100％、100％、88．4％和52．6％。单核细胞群抗原跨阶段、跨系列表达、CIM5／SSC及抗原分化异常的敏感性分别为2．3％、11％、37％和12．6％。特异性均为100％。在如上观察的粒细胞群和单核细胞群的8个项目中,≥2项异常的敏感性为77．9％,特异性为95．8％,阳性结果预测值为96．1％。结论：抗原的跨阶段表达、跨系列表达及CIM5／SSC异常具有较高的特异性,但敏感性差;而分化抗原异常虽敏感性较高但特异性差。多项表达畀常对于MDS的诊断具有较高的诊断特异性及敏感性。     

多参数流式细胞术检测41例维吾尔族骨髓增生异常综合征患者粒、单核细胞免疫表型的临床意义

目的：探讨维吾尔族骨髓增生异常综合征（MDS）患者粒、单核细胞免疫表型特点及其在诊断分型和预后中的临床意义。方法应用多参数流式细胞术（flow cytometry ,FCM ）,对41例MDS患者和30例非MDS（non-MDS）患者粒、单核细胞免疫标志的表达率进行检测。结果 MDS与 non-MDS相比,粒细胞群比例显著降低（P＝0．021）,单核细胞比例显著升高（P＝0．000）;粒、单核细胞群比例在MDS亚型间均无显著差异（P＞0．05）;CD10、CD11b、CD15、CD16和CD66d在成熟粒细胞群表达显著增高（P值分别为：0．012、0．027、0．016、0．005和0．024）,CD33、CD13、HLA-DR、CD56及CD117表达均无显著差异（P值分别为0．058、0．337、0．649、0．096和0．081）,CD10在RAEB-II型表达显著低于RAEB-I型（P＝0．001）,CD13和 HLA-DR在RC-MD型表达显著低于RAEB-I和RAEB-II型（P分别为0．013、0．005和0．018、0．003）,其余抗原亚型间比较均无显著差异（P＞0．05）;CD15、CD33和CD64在单核细胞群表达均显著升高（P值分别为：0．001、0．007和0．000）,CD7、HLA-DR、CD14、CD13、CD61和CD56表达均无显著差异（ P值分别为：0．075、0．066、0．408、0．153、0．137和0．322）,所有抗原亚型间比较均无显著差异（ P＞0．05）。结论多参数FCM检测能够发现维吾尔族MDS患者粒、单核细胞异常免疫表型特点,为临床上对MDS患者诊断分型和预后评价提供更多有价值的客观信息。     

骨髓增生异常综合征的骨髓细胞免疫表型分析

骨髓增生异常综合征（MDS）是造血干细胞的异质性疾病，其外周血表现为一系、两系或三系减少，骨髓以病态造血为特征，具有向白血病转化的风险性。目前MDS的诊断还是以形态学为基础，结合临床及染色体的检查及随访来确诊。但是形态学的检查具有主观性，且细胞形态的改变有时会受药物等因素的影响而干扰诊断，而MDS患者也不会100％出现染色体异常，     

骨髓增生异常综合征患者骨髓细胞的免疫表型及预后分析

骨髓增生异常综合征患者骨髓细胞的免疫表型及预后分析苗榕生马金元为更好了解骨髓增生异常综合征（ＭＤＳ）各型转化及最终转化为白血病的内在因素，寻求一种诊断及判断预后的客观方法，我们用免疫荧光法对３２例ＭＤＳ患者的骨髓有核细胞（ＢＭＣ）表面标记进行了动态观...     

多参数流式细胞术在慢性粒单核细胞白血病、骨髓增生异常综合症及急性单核细胞白血病免疫表型鉴别中的应用及其意义

本研究应用多参数流式细胞术分析慢性粒单核细胞白血病(CMML),骨髓增生异常综合症(DMS)以及急性单核细胞白血病(AML-M5b)的免疫表型特点,探究其在诊断及鉴别诊断上述疾病中的意义和价值。应用多参数流式细胞术比较分析14例CMML患者、48例MDS患者、46例AML-M5b患者及18例正常人骨髓标本的免疫分型特点。结果表明,CMML患者单核细胞比例明显高于MDS、AML-M5b患者及正常人骨髓(P<0.05),后3者之间无显著差别。MDS患者骨髓原始细胞比例明显高于正常骨髓标本(P<0.05),但与CMML患者无明显差别。AML-M5b患者骨髓成熟粒细胞比例较CMML、MDS患者及正常骨髓标本明显减低(P<0.05)。MDS、AML-M5b及CMML患者骨髓CD45/SSC特点与正常骨髓标本均存在一定差异。CMML患者骨髓具有CD2、CD56异常表达及CD14拖尾现象,与MDS、AML-M5b及正常骨髓标本相比差异显著(P<0.05)。MDS与CMML患者骨髓单核细胞CD15表达缺失或减低现象较正常骨髓标本及AML-M 5b患者显著,且CMML患者异常率高于MDS患者(P<0.05),两者粒细胞群均有显著CD13/CD11b/CD16表达规律异常现象,但两者间无显著差异。其他抗原表达呈不同程度异常,无统计学差异。结论 MDS、CMML及AML-M5b骨髓细胞免疫表型均具有各自的特点及不同程度的相似处。多参数流式细胞术综合分析其免疫表型,对于区分CMML、MDS以及AML-M5b具有重要鉴别意义。其中单核细胞比例增高,伴有CD2、CD56异常表达,CD14拖尾现象,CD15缺失或减低及成熟粒细胞CD13-CD11b-CD16表达规律异常,对CMML诊断具有重要意义。     

骨髓增生异常综合征患者细胞及体液免疫功能分析

目的 探讨骨髓增生异常综合征( myelodysplastic syndrome,MDS)患者细胞免疫和体液免疫水平的变化及意义.方法 采用流式细胞术(FCM)检测30例健康志愿者(健康对照组)及31例确诊但未治疗的MDS患者(低危、中危和高危)外周血淋巴细胞亚群,包括CD3+T淋巴细胞及其亚群、CD3 CD19+B淋巴细胞和CD3(CDI6CD56)+自然杀伤(NK)细胞比例.结果 与健康对照组比较,MDS患者的T淋巴细胞、B淋巴细胞和NK细胞总数均明显减低.另外,在T淋巴细胞亚群中,CD3+ CD4+的辅助性T细胞(Th)表达降低,CD3+ CD8+的抑制性T细胞(Ts)表达增高,Th/Ts比值倒置,比例失衡;且随着MDS疾病的进展,Ts细胞的表达逐渐增加,但低危、中危和高危3组间的差异无统计学意义,NK细胞的表达逐渐降低,但差异无统计学意义(P＞0.05),MDS 3组间T淋巴细胞和Th/Ts比值差异无统计学意义.结论 MDS患者的细胞和体液免疫功能均降低,淋巴细胞亚群检测可用来评估MDS患者免疫功能状态.     

骨髓增生异常综合征患者T淋巴细胞亚群的特征分析

目的：检测和分析骨髓增生异常综合征（M DS）患者T淋巴细胞亚群的分布,评估M DS患者免疫功能状态。方法：采用FC 500流式细胞仪对35例M DS患者和10例正常对照组外周血标本进行T淋巴细胞亚群检测。结果：M DS组的辅助性细胞T细胞（T h）,辅助性细胞T细胞/抑制性T细胞（T h/T s）和自然杀伤细胞（NK）的表达均低于正常对照组,T s细胞的表达高于正常对照组;随着M DS疾病的进展,抑制性T细胞（T s）的表达是逐渐增加的,其中只有RA/RA S组与RAEB组之间差异有显著性（P=0.027）;M DS患者各组间T h,T h/T s比值和NK细胞的表达均无差异性。结论：T h,T s和NK细胞参与人体重要免疫功能,T淋巴细胞亚群免疫失调,则导致细胞免疫功能紊乱,T h,T s和T h/T s比值成为监测人体免疫功能、反映机体免疫状态的重要指标。     

microRNA-124在白血病及骨髓增生异常综合征患者中的表达异常及其意义

本研究旨在探讨microRNA-124(miR-124)在白血病及骨髓增生异常综合征(MDS)骨髓细胞中的表达异常及其意义。采用茎环法实时荧光定量qRT-PCR技术检测10例正常骨髓组织、18例新确诊的白血病患者和15例MDS患者骨髓单个核细胞中miR-124的相对表达量;应用定量甲基化特异性聚合酶链反应检测部分MDS标本has-miR-124-1启动子甲基化水平。结果表明,部分白血病及MDS患者miR-124表达水平下调,其中下调至1/3以下的白血病患者比例为2/18,下调至1/3以下的MDS患者比例为5/15,下调至1/4以下的MDS患者比例为3/15。组间比较结果显示,miR-124在白血病组中的表达与正常骨髓相比差异无统计学显著意义(P=0.725),但在MDS标本中的表达水平降低有统计学显著意义(P=0.031);在7/11的MDS患者检测到miR-124启动子区甲基化水平升高,其中包括所有5例miR-124表达下调的患者。miR-124表达量与其启动子区域甲基化水平有相关性(R2=0.339,P=0.018)。结论:在部分MDS患者存在miR-124表达受抑,可能与其基因甲基化异常有关。     

多参数流式细胞术测定多发性骨髓瘤细胞免疫标记的研究

本研究探讨多发性骨髓瘤(MM)的免疫表型特征及其意义。采用多参数流式细胞术直接免疫荧光技术,CD38/SSC设门,对33例MM患者及12例浆细胞反应性增多症患者的骨髓标本进行免疫分型检测,并辅以瘤细胞的形态学检查。结果表明:形态学检查观察到瘤细胞比例为6.0%-76.0%;流式细胞术CD38/SSC设门后可见到一群CD38强阳性细胞,比例为0.99%-57.54%;多数MM细胞表型为CD38st+CD138+CD19-CD56+(78.8%),部分患者伴有CD20(12.1%)、CD33(15.2%)、CD117(30.3%)、HLA-DR(9.1%)抗原表达,其余抗原表达均为阴性;27例(81.8%)MM患者检测到cκ或cλ的单克隆限制性,其余cκ及cλ均为阴性。结论:利用CD38/SSC设门方法的流式细胞术对MM进行免疫分型,根据细胞表面抗原的异质性,可鉴别良性或恶性浆细胞,为判断预后及靶向治疗提供依据。     

应用CD45/SSC设门的流式细胞术对骨髓增生异常综合征免疫分型

目的:探讨骨髓增生异常综合征(MDS)患者的免疫表型特片。方法:对54例 MDS 患者的骨髓细胞悬液应用三色流式细胞术和一组单克隆抗体对 CD45/SSC 设门提取的原始细胞进行免疫表型分析。结果:54例 MDS中,原始细胞阳性表达 CD34、CD13、CD33、CD2、CD7、CD10和 CD19的患者分别为27例(50.0%)、43例(79.6%)、39例(72.2%)、8例(14.8%)、18例(33.3%)、4例(7.4%)和3例(5.5%);9/9例(100%)患者呈 HLA-DR 阳性,3/9例(33.3%)患者CD117阳性,5/47例(10.6%)患者 CD14阳性,2/8例(25.0%)患者 CD15阳性,1/14例(7.1%)患者 CD3阳性.2/37例(5.4%)患者 CD20阳性,15/15例(100%)患者 CD22均阴性。难治性贫血/伴环形铁粒幼细胞的难治性贫血(RA/RARS)、伴原始细胞增多的难治性贫血(RAEB)和转变中的 RAEB(RAEB-T)3组间各免疫表型差异无显著性。结论:免疫分型是 MDS 诊断中对细胞形态学和细胞遗传学检查的重要补充。     

流式细胞术在多发性骨髓瘤诊断中的应用

目的探讨流式细胞术免疫分型在多发性骨髓瘤（MM）诊断中的价值。方法应用多参数流式细胞仪检测35例MM和10例继发性单克隆免疫球蛋白血症骨髓细胞免疫表型。结果 35例MM患者表达CD38、CD138强阳性,平均荧光强度（MFI）分别为695.2±120.69、56.23±436.2。CD45阴性或弱阳性。33例MM患者CD19阴性。32例MM患者表达CD56强阳性,MFI为779.9±241.0。10例继发性单克隆免疫球蛋白血症患者表达CD38、CD138强阳性,MFI分别为621.3±82.8、549.6±132.7。CD45表达均阳性。8例患者CD19阳性。CD56均阴性,MFI为24.61±13.1。MM患者CD44表达荧光强度明显高于继发性单克隆免疫球蛋白血症（P〈0.01）。结论应用多参数流式细胞仪检测细胞表面CD38、CD138、CD19、CD56、CD45、CD44抗原表达情况,可方便区分骨髓瘤和良性浆细胞,是MM的重要诊断依据。     

129例急性白血病免疫表型特点分析

目的 了解急性白血病瘤细胞抗原表达特点,为急性白血病免疫分型诊断提供科学依据.方法 利用四色流式细胞学检验技术,以CD45/SSC双参数散点图设门法,测定129例急性白血病患者瘤细胞的抗原表达.结果 129例急性白血病中,cMPO在AML高表达,在ALL无表达.cCD79a和cCD22在B-ALL高表达,在AML和T-ALL无表达.cCD3和cTCRαβ在T-ALL高表达,在AML和B-ALL无表达.CD34是急性白血病瘤细胞低分化阶段的判断指标.CD64和CD14是单核细胞系诊断的重要指标,在M4和M5高表达.CD41和CD61在M7高表达.流式免疫分型和形态学检查诊断急性白血病的总符合率96.1%.结论 急性白血病瘤细胞免疫表型具有规律性,异常的抗原表达是瘤细胞诊断的依据,残存的正常抗原表达是急性白血病分类诊断的依据.瘤细胞绝对数量上的多寡不影响疾病的诊断,却是疾病疗效和复发的判断指标.流式白血病免疫分型在形态不典型白血病、跨系表达白血病及混合型白血病的诊断中具有独到优点.