脊髓再灌注损伤后细胞间黏附分子1及白细胞介素1β表达的变化

背景:目前国外有探讨细胞因子和黏附分子在缺血再灌注损伤时的表达,但均未涉及内源性细胞因子和微血管内皮细胞表面黏附分子在损伤后相关性的研究,对内源性白细胞介素1在损伤中的表达也仅限于mRNA水平。目的:探讨细胞间黏附分子1及其调节因子白细胞介素1β的表达在脊髓缺血再灌注损伤中作用机制。设计:随机分组设计、动物实验。单位:吉林大学体育学院运动医学系。材料:实验于2003-03/2004-01在吉林大学中日联谊医院中心实验室完成。选择健康雄性Wistar大鼠77只,随机数字表法分为正常对照组7只,单纯缺血组14只和缺血再灌注组56只。单纯缺血组:阻断血流30min7只,阻断血流60min7只;缺血再灌注组:根据脊髓缺血30min后再灌注30,60min,2,4,6,9,12,24h又分为8个时相点,每个时相点7只。方法:采用Zivin法复制脊髓缺血再灌注损伤动物模型。采用反转录-聚合酶链反应、免疫组织化学及免疫荧光激光共聚焦扫描显微镜技术检测脊髓缺血再灌注损伤后血管内皮细胞间黏附分子1mRNA和白细胞介素1βmRNA表达量。主要观察指标:白细胞介素1βmRNA表达、白细胞介素1多肽活性、细胞间黏附分子1mRNA和蛋白的表达、髓过氧化物酶活性。结果:纳入动物77只,均进入结果分析。①缺血再灌注组白细胞介素1βmRNA(A值)表达量明显高于单纯缺血组和正常对照组,差异显著(分别为1.07±0.33,0.60±0.22,0.57±0.12,t=3.7517,11.8526,P<0.01)。②缺血再灌注组白细胞介素1多肽活性(A值)明显高于单纯缺血组和正常对照组,差异显著[分别为(33.7±3.2),(23.8±4.5),(23.1±2.1),t=2.7988,9.9627,P<0.01]。③缺血再灌注组细胞间黏附分子1mRNA(A值)明显高于单纯缺血组和正常对照组,差异显著[分别为0.94±0.12,0.52±0.11,0.51±0.10,t=0.3270,6.1274,P<0.01]。④缺血再灌注4,6,12h各组细胞间黏附分子1蛋白的表达明显高于单纯缺血组和正常对照组,差异显著[分别为(316.90±26.00),(361.40±18.00),(406.00±23.00),(164.21±2.00),(180.00±32.00)μg/L,t=1.4103,9.1193,P<0.01]。⑤缺血再灌注12h组髓过氧化物酶活性明显高于单纯缺血组和正常对照组,差异显著[分别为(15.00±2.00),(7.50±1.67),(6.67±1.00)nkat/g,t=3.0122,P<0.01]。结论:再灌注损伤后脊髓内炎症反应是导致血脊髓屏障损害的重要分子基础,在继发性脊髓损伤过程中起到重要作用。     

电针治疗大鼠脑缺血再灌注期血清白细胞介素8水平的调节

目的:通过观察脑缺血后不同时间段白细胞介素8血清的表达及电针对其表达的调节,以探讨电针治疗缺血性脑损伤的可能作用。方法:实验于2005-08/11在南方医科大学附属南方医院神经内科实验室内进行。取135只雄性清洁级SD大鼠随机数字法分成假手术组,缺血再灌注3,6,12,24h组,缺血再灌注3,6,12,24h 电针组。每组15只。采用大脑中动脉线栓法建立大鼠局灶性脑缺血1h后再灌注模型,于造模成功后电针缺血再灌注 电针组大鼠的足三里、内关穴,频率2Hz,电压1.5V,连续波30min/次。再利用夹心酶联免疫吸附法,检测每组白细胞介素8浓度;并对每组进行神经功能缺陷评分。结果:实验过程中有2只动物死亡,133只动物进入结果分析。①缺血再灌注3h白细胞介素8表达开始增加,6h达高峰,12h开始下降,24h恢复正常;其中缺血再灌注3,6及12h组与假手术组比较差异有显著性意义[假手术组(73.56±8.27)μg/L,缺血再灌注3h(85.18±9.56)μg/L,6h(109.82±10.82)μg/L,12h(95.27±9.71)μg/L,24h(75.61±8.43)μg/L,P<0.05]。②缺血再灌注3,6,12h 电针组血清白细胞介素8与缺血再灌注相应时间点组比较,差异有显著性意义[缺血再灌注3h 电针组(80.39±8.68)μg/L,缺血再灌注6h 电针组(98.35±9.29)μg/L,缺血再灌注12h 电针组(86.81±8.09)μg/L,P<0.05]。③缺血再灌注3,6,12,24h 电针组神经功能缺陷评分与相应时间点缺血再灌注组比较明显降低[缺血再灌注3,6,12,24h 电针组分别为(2.85±0.38),(3.06±0.55),(2.98±0.46),(3.02±0.52)分;缺血再灌注3,6,12,24h组分别为(3.38±0.57),(3.86±0.43),(3.52±0.52),(3.56±0.62)分,P<0.05]。结论:电针治疗能降低大鼠脑缺血再灌注期血清白细胞介素8水平。     

大鼠全脑缺血再灌注损伤后脑内白细胞介素1β变化及红景天苷的影响

目的:观察红景天属植物红景天的主要有效成分红景天苷对全脑缺血再灌注大鼠脑组织内白细胞介素1β含量的影响,探讨其对脑缺血再灌注损伤的保护作用。方法:实验于2004-04/2005-04在武装警察部队医学院中心实验室完成。①选用健康成年Wistar雄性大鼠24只。随机将大鼠分为3组:红景天苷组、模型组及假手术组,每组8只。红景天苷组:红景天苷[由华东理工大学生物反应器工程国家重点实验室生物分离研究室提供(生产批号:20040112,纯度>95%)]36mg/(kg·d)灌胃。模型组和假手术组:按给药组相同体积每日蒸馏水灌胃。各组连续灌胃7d后,用改良的Pulsinelli4-血管阻断法,复制大鼠急性全脑缺血30min再灌注60min损伤模型,造模成功后即刻断头取脑。②采用酶联免疫吸附法测定大鼠脑组织匀浆中白细胞介素1β含量。③计量资料差异比较采用LSD方差分析。结果:大鼠24只均进入结果分析。大鼠脑匀浆液中白细胞介素1β含量:模型组明显高于假手术组、红景天苷药物组[(85.00±24.05),(43.90±22.67),(45.1±17.02)ng/g,P<0.01]。红景天苷药物组与假手术组比较,差异不明显(P>0.05)。结论:红景天苷可抑制大鼠缺血再灌注所引起的白细胞介素1β表达的增加,对缺血再灌注损伤鼠脑具有保护作用。     

肠缺血再灌注大鼠肺及血液白细胞介素6、白细胞介素8和肿瘤坏死因子α变化与辅酶Q10的干预

目的:观察大鼠肠缺血再灌注时肺及血液白细胞介素6、白细胞介素8和肿瘤坏死因子α的变化以及辅酶Q10的影响。方法:实验于2006-12/2007-02在滨州医学院药理学实验室和免疫学实验室(山东省重点学科三级实验室)完成。①实验分组:清洁级健康Wistar大鼠30只,体质量290～390g,随机数字表法分为假手术组、肠缺血再灌注组,辅酶Q10处理组(缺血再灌注 辅酶Q10),每组10只。②实验方法:建立肠缺血再灌注模型,钝性分离肠系膜上动脉的根部,假手术组不作其他处理;肠缺血再灌注组再灌前30min时经股静脉注入生理盐水10mL/kg;辅酶Q10处理组再灌前30min时经股静脉注入辅酶Q1010mg/kg。③实验评估:酶联免疫吸附法(ELISA)检测各组动物血液、肺组织匀浆及肺泡灌洗液中的白细胞介素6、白细胞介素8和肿瘤坏死因子α含量;光镜下观察肺组织形态学变化。肺泡灌洗液沉渣进行白细胞计数和分类。结果:纳入大鼠30只,均进入结果分析。①肺组织形态学变化:假手术组肺组织无病理改变;肠缺血再灌注组肺间质明显水肿,中性粒细胞浸润,有少量的出血和纤维蛋白渗出;辅酶Q10处理组肺间质轻度水肿,少量的中性粒细胞。②肺泡灌洗液白细胞计数组间无显著性差异,多形核细胞分类肠缺血再灌注组明显高于假手术组(P<0.05),而辅酶Q10处理组与其他两组间差异无显著性意义(P>0.05)。③各组动物血液、肺组织匀浆及肺泡灌洗液中的白细胞介素6、白细胞介素8和肿瘤坏死因子α含量:与假手术组比较,肠缺血再灌注组血液、肺组织匀浆及肺泡灌洗液中白细胞介素6、白细胞介素8和肿瘤坏死因子α显著升高(P<0.05或P<0.01)。与肠缺血再灌注组比较,辅酶Q10处理组血液、肺组织匀浆和肺泡灌洗液中白细胞介素6含量显著降低(P<0.05);白细胞介素8和肿瘤坏死因子α含量在血液中显著降低(P<0.05);而在肺组织匀浆中含量未见显著降低(P>0.05);在肺泡灌洗液中含量亦未见显著降低(P>0.05)。结论:辅酶Q10可能通过抑制白细胞介素6、白细胞介素8和肿瘤坏死因子α炎性因子的释放,对大鼠肠缺血再灌后肺损伤有一定的保护作用。     

大鼠脊髓缺血再灌注损伤后炎性细胞因子的变化及其意义

目的:探讨炎性细胞因子在脊髓缺血再灌注损伤中的作用。方法:实验于2004-04/2005-05在解放军第三军医大学附属西南医院神经医学中心完成。健康SD大鼠42只,随机分为对照组(6只)、单纯缺血组(6只)、缺血再灌注组(30只)。2%戊巴比妥钠35mg/kg腹腔注射麻醉后,制成脊髓缺血再灌注损伤模型。用PeriFluxPF3激光多普勒血灌流监测仪直视下监测脊髓血流量。分别取损伤段脊髓标本80～100mg,剥离脊髓组织外膜,冻存备用。同时取心腔血2mL于干燥管中,2000g离心10min,取血清-20℃保存待测,动态测定脊髓组织及血浆中肿瘤坏死因子α、白细胞介素1β、白细胞介素8含量变化。缺血再灌注组再灌注1,2,6,12,24h各取6只进行检测。结果:实验大鼠42只均进入结果分析。①脊髓组织肿瘤坏死因子α含量于再灌注1h后即明显高于对照组[(9.11±0.96),(7.87±1.02)μg/g,P<0.05],随再灌注时间的延长,脊髓组织内肿瘤坏死因子α含量逐渐增高。血浆肿瘤坏死因子α含量于再灌注24h后才开始升高[再灌注24h:(2.13±0.24)μg/L,对照组:(1.68±0.28)μg/L,P<0.05]。②脊髓组织白细胞介素1β含量于再灌注6h后明显高于对照组[(3.21±0.28),(2.18±0.33)μg/g,P<0.05],于再灌注24h后仍维持于较高水平。血浆白细胞介素1β含量无明显改变。③再灌注6h后脊髓组织内白细胞介素8含量开始明显增加[(3.24±0.32),(2.50±0.41)μg/g,P<0.05],持续至再灌注24h后仍明显高于对照组。血浆中白细胞介素8含量无明显变化。结论:肿瘤坏死因子α、白细胞介素1β、白细胞介素8相继释放增加并持续至再灌注后24h仍维持较高水平,各因子的血浆变化滞后于脊髓组织变化。炎性细胞因子参与了早期脊髓缺血再灌注损伤的发生展过程。     

电针干预脑缺血再灌注大鼠梗死体积及脑内白细胞介素1β蛋白表达的变化

目的:观察急性脑缺血再灌注大鼠脑梗死体积和脑内白细胞介素1β蛋白表达的变化情况,探讨电针干预急性脑缺血病理过程的作用途径。方法:实验于2005-05/08在河南中医学院实验中心完成。①分组:SD大鼠55只,采用随机数字表法随机分为假手术组5只,电针组25只,模型组25只。②模型制备:电针组和模型组参照Koizumi等建立的方法制备模型,经颈外动脉插入尼龙线,阻塞颈内动脉颅内段到达大脑中动脉分支处的起始部,引起大脑中动脉供血区的急性脑缺血,假手术组尼龙线不插到大脑中动脉起始部位,插入深度约12mm左右,其余步骤同模型组。③针刺方法:电针组造模后常规剪毛消毒用0.35mm×40mm毫针快速刺入皮下向左前下方(相当于人体曲鬓穴处)平刺,进针深度约0.8cm,另于风府穴直刺一针,深度约0.5cm。于缺血后10min给予电针,连接全能脉冲电疗仪,百会接阳极,风府接阴极,电针频率7Hz,强度6mA,30min/次。模型组造模后不进行任何处理。④缺血再灌注24h后电针组和对照组分别取5只大鼠用TTC染色法测定脑梗死体积。⑤电针组和模型组分为缺血再灌注2,6,12,24h4个观测时间点,每个时间点5只大鼠。应用免疫组化方法观察各组大鼠白细胞介素1β蛋白表达的变化。结果:55只大鼠均进入结果分析。①大鼠缺血2h再灌注24h后,模型组脑梗死体积大于电针组梗死体积[(137.76±19.90),(84.46±22.30)mm3,P<0.05]。②假手术组大鼠白细胞介素1β在皮质、纹状体呈基础水平表达,模型组和电针组脑缺血再灌注后2h白细胞介素1β表达开始增强,于再灌注后12h达高峰,但电针组再灌注后2,6,12,24h白细胞介素1β表达均较模型组弱(皮质:0.17±0.01,0.21±0.01;0.20±0.02,0.25±0.01;0.27±0.02,0.32±0.02;0.26±0.01,0.28±0.01,P均<0.05～0.01;纹状体:0.18±0.20,0.24±0.02;0.22±0.02,0.27±0.02;0.35±0.01,0.37±0.01;0.31±0.01;0.34±0.01,P均<0.05～0.01)。结论:电针可明显抑制皮质及纹状体白细胞介素1β蛋白的表达,同时缩小梗死的体积,说明电针对缺血性脑损伤的保护效应可能与其抑制脑内白细胞介素1β蛋白的表达有关。     

白细胞介素11预防大鼠肠道缺血性损伤的机制探讨

目的 探讨重组人白细胞介素11(recombinant human interleukin-11，rhIL-11)预处理对大鼠肠道缺血再灌注损伤保护作用的分子机制。方法 夹闭大鼠肠系膜上动脉1h后松夹建立缺血再灌注模型。将56只雄性Wistar大鼠随机分为正常对照组(A)、单纯缺血再灌注组(B)、生理盐水对照组(C)和rhIL-11预处理组(D)。C组和D组分别于夹闭前2天给予生理盐水(0.25ml／只／d)或rhIL-11(600μg／kg／d)。于再灌注6h和24h时分别处死各组大鼠，以凋亡细胞原位末端标记技术(TdT-mediated d-UTP nick end labeling,TUNEL)检测组织中细胞凋亡情况，用免疫组织化学法检测抗凋亡因子bcl-2及蛋白激酶caspase3和caspase8的表达水平。同时以苏木素-伊红(hematoxylin-eosin，HE)染色观察形态学病理改变。结果 HE及TUNEL检测显示，rhIL-11预处理组大鼠肠屏障功能的损伤程度较B、C组显著减轻，凋亡细胞数量减少，caspase3和caspase8的表达水平也低于B、C组，而bcl-2的表达量增加。结论 rhIL-11预处理对大鼠缺血再灌注损伤的保护作用可能与抑制caspase3和caspase8的表达，激活bcl-2的表达有关。     

白细胞介素1和诱导型一氧化氮合酶在兔肢体缺血再灌注后关节软骨中的表达

目的:观察肢体缺血再灌注损伤后兔膝关节软骨中诱导型一氧化氮合酶和白细胞介素1的表达规律并探讨其相关性。方法:实验于2005-01/06在泰山医学院形态学实验室完成。①实验分组:健康新西兰兔35只,随机分为缺血再灌注2h,4h,8h,24h,3d,7d,14d组,每组5只。②实验方法:手术显露右后肢股动静脉,用血管夹完全阻断血运4h后恢复血运,建立兔右后肢原位缺血再灌注模型。分别于再灌注2h、4h、8h、24h、3d、7d、14d空气栓塞处死动物,切取免股骨髁软骨1.0cm×0.5cm大小制备切片。③实验评估:用免疫组化和免疫荧光法观察关节软骨内诱导型一氧化氮合酶、白细胞介素1的表达情况。结果:①肢体缺血再灌注2h后白细胞介素1在兔膝关节软骨内即有明显增高,8h达高峰,24h开始减少,3d后明显下降。②肢体缺血再灌注2h后开始出现诱导型一氧化氮合酶酶阳性细胞,其荧光强度在8h达高峰,在24h开始减少,3d后明显下降。③诱导型一氧化氮合酶阳性颗粒分布区与白细胞介素1阳性细胞分布区域一致,主要集中在同源细胞族和增殖区。④肢体缺血再灌注损伤后关节软骨内白细胞介素1与诱导型一氧化氮合酶的表达高度正相关(r=0.867,P=0.011)。结论:肢体缺血再灌注损伤后白细胞介素1和诱导型一氧化氮合酶在关节软骨内大量表达,呈时间依从性变化;诱导型一氧化氮合酶和白细胞介素1在肢体缺血再灌注后关节软骨损伤中起到重要作用。     

卡巴胆碱对肠部分缺血再灌注家兔血浆细胞因子含量的影响

目的:探讨拟胆碱药卡巴胆碱对肠部分缺血再灌注损伤家兔血浆促炎细胞因子肿瘤坏死因子α、白细胞介素6和抗炎细胞因子白细胞介素10含量的影响。方法:实验于2005-01/05在解放军第三四医院完成。大耳白兔45只,随机分为卡巴胆碱治疗组20只、肠部分缺血再灌注组20只、假手术对照组5只。卡巴胆碱治疗组在部分阻断肠系膜上动脉2h后肠内注射卡巴胆碱30mg/kg。肠部分缺血再灌注组用自制血流阻断器阻断肠系膜上动脉血流50%,4h后恢复灌流。假手术对照组不阻断肠系膜上动脉。各组分别于阻断前及阻断后2,4,8h,1,2,3d测定血浆促炎细胞因子肿瘤坏死因子α、白细胞介素6及抗炎细胞因子白细胞介素10的含量。结果:进入结果分析实验兔40只,卡巴胆碱治疗组18只、肠部分缺血再灌注组17只、假手术对照组5只。①家兔肠部分缺血再灌注损伤后,血浆肿瘤坏死因子α、白细胞介素6及白细胞介素10含量明显升高。②肠内注射卡巴胆碱后,血浆肿瘤坏死因子α含量在术后1d显著降低,白细胞介素6含量在阻断4及8h显著降低,与肠部分缺血再灌注组相比差异显著。③肠缺血再灌注组与卡巴胆碱治疗组血浆白细胞介素10含量相比无显著差异。结论:卡巴胆碱能明显抑制促炎细胞因子肿瘤坏死因子α和白细胞介素6的产生和释放,而对抗炎细胞因子白细胞介素10的影响甚微。表明拟胆碱药-卡巴胆碱具有明显的抗炎作用。     

烫伤后红细胞对白细胞介素-8结合能力的调控

目的:观察白细胞介素-8自烧伤创面释放入血后与红细胞的结合情况,以及对血浆白细胞介素-8浓度的影响。方法:实验于2004-12/2005-01在第三军医大学西南医院烧伤研究所1004实验室完成。选取清洁级SD大鼠36只,按随机数字表法将大鼠分为烫伤组(按烫伤后2,6,12,24,48h分为5个区组)和假烫伤对照组,6只/组。烫伤组95℃持续18s造成Ⅲ度烫伤,假烫伤对照组30℃持续18s假烫伤。两组处理完毕后分别于2,6,12,24,48h无菌采血,测定不同时相点全血中红细胞数量变化,血浆中及红细胞膜上白细胞介素-8浓度变化采用夹心酶联免疫吸附法。结果:实验纳入大鼠36只,全部进入结果分析。①各组烫伤后红细胞数量、红细胞表面及血浆内白细胞介素-8浓度的变化:与假烫伤对照组比较,烫伤组红细胞数量在烫伤后2,6,12,24h呈逐渐上升趋势[(6.0883±0.31877),(7.9800±0.38616),(8.1083±0.21424),(8.3267±0.17420),(8.5400±0.47844)×1012/L,P<0.05];烫伤组红细胞表面白细胞介素-8浓度在烫伤后2,6,12,24h均明显下降[(232.98±32.03),(151.75±34.275),(134.59±28.34),(171.67±46.00),(213.85±85.48)ng/L,P<0.05];烫伤组血浆内白细胞介素-8浓度在烫伤后2,6,12,24h均明显升高[(85.01±17.22),(133.96±23.70),(121.54±25.29),(118.77±23.88),(113.69±23.34)ng/L,P<0.05]。②各组烫伤后红细胞表面及血浆中白细胞介素-8浓度的比较:烫伤6h内,当红细胞结合白细胞介素-8的能力较低时,血浆中白细胞介素-8浓度较高;6h后,随着红细胞表面结合白细胞介素-8能力逐渐恢复,血浆中白细胞介素-8的浓度逐渐降低。两者成反比关系。结论:大鼠烫伤后6h内红细胞结合白细胞介素-8的能力是下降的,并引起白细胞介素-8自红细胞表面释放,这可能是血浆内白细胞介素-8早期升高的原因之一;但伤后48h红细胞结合白细胞介素-8异常增高,或许是导致此时血浆内白细胞介素-8回落的原因之一。提示烫伤后红细胞结合白细胞介素-8的能力对血浆白细胞介素-8的水平具有调控作用。     

Ⅰ期尘肺患者血清白细胞介素12、白细胞介素12p70、白细胞介素10和白细胞介素18含量的变化

目的探讨血清白细胞介素12(IL-12)、白细胞介素12p70(IL-12p70)、白细胞介素10(IL-10)和白细胞介素18(IL-18)水平在Ⅰ期尘肺发生发展中的作用。方法采用双抗体夹心酶联免疫吸附测定(ELISA)法检测79例Ⅰ期尘肺患者(其中包括44例煤工尘肺患者和35例矽肺患者)、42例具有相同接尘史但未患尘肺的井下煤矿工人(接尘对照)及41例井上健康查体人员(正常对照)的血清IL-12、IL-12p70、IL-10和IL-18的含量。结果矽肺组IL-12和IL-10水平明显高于两对照组,组间差异有统计学意义(均P<0.05);煤工尘肺组IL-12和IL-10水平虽高于两对照组,但差异均无统计学意义(P>0.05);煤工尘肺组和矽肺组IL-12p70水平较两对照组均明显增高,差异具有统计学意义(P<0.01);而IL-18水平在各组间无明显改变(P>0.05)。煤工尘肺Ⅰ期、矽肺Ⅰ期及其对应的Ⅰ期合并高血压、冠心病和Ⅰ期并发慢性阻塞性肺疾病中4项指标水平比较,其差异无统计学意义(均P>0.05);煤工尘肺Ⅰ期和矽肺Ⅰ期患者不同接尘年限间比较,4项指标水平均未发现明显改变(P>0.05)。Ⅰ期尘肺患者血清IL-12、IL-12p70及IL-10三者之间呈正相关,而与IL-18均无相关性。结论Ⅰ期尘肺患者体内细胞因子网络紊乱可能与尘肺发病机制有关。     

白细胞介素-4、白细胞介素-8、白细胞介素-9在支气管哮喘患儿血清中的表达及临床意义

目的 观察白细胞介素(IL)-4、IL-8、IL-9在支气管哮喘患儿血清中的表达,并探讨其临床意义.方法 选取支气管哮喘急性发作期、临床缓解期患儿各43例,分别设为发作组和缓解组,另选取同期体检健康儿童37例作为对照组,检测所有儿童的血清IL-4、IL-8、IL-9水平.结果 IL-4、IL-8、IL-9在对照组、缓解组、发作组儿童血清中的表达水平均呈递增趋势,组间比较均有显著差异(P＜0.01).结论 血清IL-4、IL-8、IL-9水平与支气管哮喘的发生、发展过程密切相关,临床可作为支气管哮喘病情进展的参考指标.     

毛细支气管炎患儿血清白细胞介素-4、白细胞介素-8水平的临床意义及对策

目的通过检测毛细支气管炎(以下简称毛支)患儿血清白细胞介素-4(IL-4)、白细胞介素-8(IL-8)水平,研究其在发病中的临床意义及探讨相应的治疗对策。方法研究对象为106例住院毛支患儿(毛支组),随机选择其中40例为红霉素治疗组,31例为常规治疗组;另选34例正常小儿为对照组。采用双抗体夹心酶联免疫吸附法(ELISA),分别在毛支患儿急性期(入院当时)及恢复期(住院7 d后)检测血清IL-4、IL-8水平,正常小儿一次性检测。各组进行比较,并观察治疗7 d有效率。结果毛支组急性期血清IL-4水平与恢复期及对照组比较差异均无统计学意义(P>0.05);毛支组急性期IL-8水平高于恢复期,差异有统计学意义(P<0.05),与对照组比较,差异有统计学意义(P<0.05);红霉素治疗组恢复期血清IL-8水平低于常规治疗组,差异有统计学意义(P<0.05);红霉素治疗组的7天有效率高于常规治疗组(P<0.05)。结论 IL-4可能未参与毛支的发病,嗜酸性粒细胞并不是引起毛支的主要细胞,毛支可能不是过敏性炎症;IL-8参与毛支的病理过程,毛支气道炎症细胞可能以中性粒细胞为主;红霉素具有抗炎和免疫调节作用,可用于佐治毛支。     

Helicobacter pylori infection enhances mucosal interleukin-1β, interleukin-6, and the soluble receptor of interleukin-2

It is thought thatHelicobacter pylori colonization of the gastric mucosa might stimulate the production of several cytokines, which might trigger and maintain the gastric inflammation associated withHelicobacter pylori infection. In the present study we evaluated interleukin-1β, interleukin-6, and the soluble receptor of interleukin-2 both in mucosal homogenates and in the sera ofHelicobacter pylori-infected (39 cases) and uninfected (40 cases) patients to investigate whether there was any relationship between variations in cytokines and (1) the severity ofHelicobacter pylori-associated gastritis or (2) CagA-positiveHelicobacter pylori strains. Mucosal, but not serum levels of interleukins-1 and-6 and interleukin-2 receptor were significantly higher in infected than uninfected patients, Serum levels ofHelicobacter pylori antibodies were significantly higher in infected than uninfected patients, These levels correlated with mucosal interleukin-1β. The degree of antral or body inflammatory grade was higher in infected than in uninfected patients; cytokines levels were higher in patients with high-grade gastritis, most of whom wereHelicobacter pylori positive. Patients infected with CagA-positive strains also had higher levels of interleukin-1β, but not of interleukin-2 receptor or interleukin-6. In conclusion,Helicobacter pylori infection results in a local increase in interleukins-1β and-6 and interleukin-2 receptor associated with high-grade mucosal inflammation. Interleukin-1β seems to favor anti-Helicobacter pylori antibody production, and mucosal levels are enhanced mainly in patients infected with cytotoxicHelicobacter pylori strains.     

白细胞介素-18和白细胞介素-12在儿童1型糖尿病酮症酸中毒中的作用

目的探讨白细胞介素-18(IL-18)、白细胞介素-12(IL-12)和干扰素-γ(INF-γ)在儿童1型糖尿病酮症酸中毒(DKA)中的作用。方法采用酶联免疫吸附(ELISA)方法检测61例儿童1型糖尿病(T1DM)患儿(其中28例伴DKA,33例无DKA)和30例正常对照者IL-18、IFN-γ和IL-12的血清水平。结果(1)T1DM患儿中血清IL-18水平明显比对照组高[(691．99±381．42) pg/ml vs(310．02±265．32)pg/ml,P=0．03],而两组间IFN-γ和IL-12水平则无差别。(2)DKA组患儿中IL-18和IFN-γ血清水平明显高于无DKA组[(759．25±353．82)pg/ml vs(634．93±399．79)pg/ ml,P=0．001和(9．35±8．06)pg/ml vs(5．21±6．47)pg/ml,P=0．044],而两组间IL-12血清水平则无差别。(3)IL-18和IFN-γ呈相关趋势,而与IL-12正相关。结论DKA患儿IL-18和IFN-γ血清水平明显升高,提示其可能在DKA的发生、发展中起重要作用。     

Lentiviral-mediated interleukin-4 and interleukin-13 RNA interference decrease airway inflammation and hyperresponsiveness

Interleukin (IL)-4 and IL-13 are two key cytokines released from activated T helper type 2 (Th2) cells and strongly associated with asthma and allergic disease. We applied silencing of the IL-4 and IL-13 gene expression by RNA interference delivered by a lentiviral vector to evaluate the therapeutic role of IL-4 and IL13 short hairpin RNAs (shRNAs) in a murine model of asthma. Mice were sensitized with ovalbumin (OVA), and one treatment of IL-4 and IL-13 shRNA lentiviral vector (Lenti-si-IL-4 and Lenti-si-IL-13) was instilled intratracheally 48?hr before challenge. After three challenges of OVA antigen, mice were assessed for airway inflammation and hyperresponsiveness. With infection of Lenti-si-IL-4 and Lenti-si-IL-13 in EL-4 cells, both RNA and protein expressions of IL-4 and IL-13 were obviously abrogated. Furthermore, intratracheal instillation of Lenti-si-IL-4 and Lenti-si-IL-13 in OVA-immunized mice resulted in a strong inhibition of local IL-4 and IL-13 cytokine release. Treatment with Lenti-si-IL-4 and Lenti-si-IL-13 successfully alleviated OVA-induced airway eosinophilia and Th2 cell cytokine release. Finally, to determine airway hyperresponsiveness by enhanced pause and pulmonary resistance in noninvasive and invasive body plethysmography, we found that administration of Lenti-si-IL-4 and Lenti-si-IL-13 markedly decreased airway hyperresponsiveness in OVA-immunized mice. These results suggest that inhibition of IL-4 and IL-13 gene expression by shRNA lentiviral vector markedly inhibits antigen-induced airway inflammation and hyperresponsiveness in mice.     

Regulation of T helper type 2 cell immunity by interleukin-4 and interleukin-13

Type 2 cytokine responses are typical of immune reactions to parasitic helminth infections, allergies, and asthma, and are characterised by the production of the cytokines interleukin (IL)-4, IL-5, IL-9, and IL-13 by subsets of T helper type 2 (Th2) cells. These cytokines form a complex network of molecular and cellular interactions that mediate protective immunity to worm infection, but also induce inappropriate inflammatory responses to allergic challenge. Although considerable attention has been given to the roles played by IL-4 in Th2 responses, the identification of the related cytokine IL-13 has led to a re-evaluation of how these two molecules combine in the generation of Th2 immunity. Recent reports have highlighted that in certain challenges, IL-4 and IL-13 act in combination to ensure the rapid onset of a Th2-like response. However, these studies have also identified specific responses that are attributable to the individual cytokines. For example, IL-13 appears to play a more dominant role than IL-4 in the expulsion of certain gastrointestinal parasites. In contrast, following schistosome infection, IL-13 induces a detrimental hepatic fibrosis, while IL-4 protects against endotoxemia. These results emphasise the complexity of the cytokine network, and highlight the care that needs to be taken when designing therapeutic intervention.     

白细胞介素4和白细胞介素10基因多态性与胃癌易感性的关系

目的：分析白细胞介素4(IL-4)rs2070874,白细胞介素10(IL-10)rs1800871、rs1800872基因型及其基因频率在汉族成年胃癌患者与正常对照人群中的分布情况,探讨 IL-4,IL-10基因多态性与胃癌临床易感性的关系。方法病例组胃癌患者84例,正常对照组105例,两组均留取外周静脉血提取 DNA,利用直接测序法对 IL-4 rs2070874,IL-10 rs1800871、rs1800872进行基因型测定,分析各位点多态性与胃癌临床易感性关系。结果 IL-4 rs2070874基因多态性在病例组与对照组等位基因之间、基因型之间的分布差异有统计学意义(P <0.05);IL-10 rs1800871、rs1800872基因多态性在病例组与对照组等位基因之间、基因型之间的分布差异无统计学意义(P >0.05)。结论 IL-4 rs2070874基因多态性与胃癌感染易感性有关,而 IL-10 rs1800871、rs1800872位点基因多态性与胃癌易感性可能不相关。