内皮素-1受体拮抗剂对高脂血症家兔血管内皮功能的影响

目的探讨内皮素-1受体拮抗剂对高脂血症家兔血管内皮功能的影响。方法 24只雄性新西兰大白兔随机分为对照组、模型组和BQ-123干预的内皮素-1拮抗剂组(拮抗剂组),每组8只。对照组饲喂普通饲料,模型组和拮抗剂组均饲喂高脂饲料,第6周时对照组和模型组兔静脉注射生理盐水4mL/d,连续5周,拮抗剂组静脉滴注选择性内皮素A受体拮抗剂BQ-123 4mL/d,30min滴完,连续5周。10周后检测3组血清总胆固醇、三酰甘油、高密度脂蛋白胆固醇和低密度脂蛋白胆固醇水平;采用免疫组织化学SP法检测兔主动脉组织内皮素-1和C反应蛋白(C-reactive protein,CRP)表达水平,采用PCR法检测兔主动脉组织CRP mRNA表达情况。结果拮抗剂组血清总胆固醇[(4.12±0.92)mmol/L]、三酰甘油[(1.43±0.58)mmol/L]、低密度脂蛋白胆固醇[(1.99±0.86)mmol/L]水平均低于模型组[(6.36±1.23)、(2.14±0.70)、(2.79±0.87)mmol/L](P0.05),血清高密度脂蛋白胆固醇水平[(2.15±0.56)mmol/L]高于模型组[(1.02±0.42)mmol/L](P0.05);模型组和拮抗剂组动脉粥样硬化病变相对面积(32.06%、12.35%)明显高于对照组(3.78%)(P0.01),模型组高于拮抗剂组(P0.05);拮抗剂组内膜厚度[(226.00±4.25)μm]、中膜厚度[(142.00±1.86)μm]、内膜面积[(0.34±0.04)μm2]、中膜面积[(0.46±0.04)μm2]均较模型组[(325.00±5.68)μm、(185.00±2.07)μm、(0.52±0.04)μm2、(0.73±0.05)μm2]明显下降(P0.05),与对照组比较差异无统计学意义(P0.05);拮抗剂组主动脉组织内皮素-1(1.39±0.78)、CRP mRNA(3.42±1.23)水平较模型组(3.98±0.76、6.37±1.66)明显下降(P0.05);主动脉组织中内皮素-1与CRP mRNA表达水平呈正相关(r=0.346,P=0.024)。结论内皮素-1激活的内皮素A受体可导致家兔动脉粥样硬化斑块CRP表达上调,选择性内皮素A受体拮抗剂可预防家兔动脉粥样硬化进展。     

sRAGE对动脉粥样硬化家兔主动脉组织ICAM-1及NF-κB表达的影响

目的观察可溶性晚期糖基化终末产物受体(sRAGE)对动脉粥样硬化(AS)家兔主动脉组织细胞间粘附分子-1(ICAM-1)及核转录因子κB(NF-κB)表达的影响,探讨sRAGE抗动脉粥样硬化的可能机制。方法 24只家兔随机分为对照组、动脉粥样硬化模型组、sRAGE组及辛伐他汀组,每组各6只。对照组饲喂普通饲料,其余三组均饲喂高脂饲料10周,第6周起sRAGE组开始腹腔注射sRAGE,辛伐他汀组添加药物饲料。10周后检测家兔血清总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)和低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)水平;采用免疫组织化学法检测主动脉组织ICAM-1和NF-κB表达水平;蛋白质印迹法检测主动脉组织ICAM-1蛋白表达水平。结果与对照组比较,AS模型组血清TC、TG、LDL-C水平明显升高,HDL-C水平明显降低(P0.05);sRAGE组血清总胆固醇、甘油三酯、LDL-C水平均低于AS模型组(P0.05),血清HDL-C水平高于AS模型组(P0.05),而与辛伐他汀组比较差异无统计学意义(P0.05)。与对照组相比,AS模型组主动脉组织中ICAM-1、NF-κB的表达水平明显升高(P0.05);与AS模型组比较,sRAGE组主动脉组织中ICAM-1、NF-κB的表达水平显著下降(P0.05),而与辛伐他汀组比较差异无统计学意义(P0.05)。结论 sRAGE可能通过抑制NF-κB及ICAM-1的表达,从而发挥抗动脉粥样硬化作用。     

家兔主动脉粥样斑块内血管内皮生长因子表达与煦少火胶囊的干预

目的:根据《素问·阴阳应象大论》"少火之气壮"的理论研制的"煦少火"复方中药在冠心病的治疗中虽取得较好的效果,但其作用途径需深入探讨。实验观察了其对家兔动脉粥样斑块血管内皮生长因子表达的影响,以验证作用机制。方法:实验于2005-01/2007-05在河北医科大学中西医结合基础实验室完成。①材料:清洁级健康新西兰纯种雄性大白兔64只,体质量(2.5±0.5)kg;煦少火胶囊(由附子、西洋参、石菖蒲、丹参、枳壳等组成);通心络胶囊(石家庄以岭药业股份有限公司),辛伐他汀(北京万生药业有限公司)。②分组:将兔随机分成5组:空白对照组、高脂造模组、辛伐他汀组、通心络组、煦少火胶囊组,每组各12只。③给药:空白对照组喂正常饲料,其余各组均喂高脂肪饲料8周,构建实验性家兔主动脉粥样硬化模型。辛伐他汀组喂服辛伐他汀药液[2.5mg/(kg·d)];通心络组喂服通心络药液[1.0g/(kg·d)];煦少火胶囊组喂服煦少火药液[1.0g/(kg·d)],继续喂养4周。④评估:观察各组血清低密度脂蛋白胆固醇,一氧化氮,乳酸脱氢酶及血管形态学的变化;采用免疫组织化学,反转录聚合酶链式反应及WesternBlot蛋白印迹方法,从不同水平观察煦少火胶囊、通心络及辛伐他汀对动脉粥样斑块血管内皮生长因子表达的影响。结果:4只兔验证模型是否成功。60只家兔进入结果分析。①与空白对照组比较,高脂模型组的血清总胆固醇、三酰甘油、低密度脂蛋白胆固醇增高,高密度脂蛋白胆固醇降低(均P<0.01);血清乳酸脱氢酶增高,一氧化氮降低(均P<0.01);光镜下观察家兔整条主动脉内膜粗糙不平,有大量粥样硬化斑块形成;血管内皮生长因子免疫组织化学染色为强阳性表达(P<0.01),反转录-聚合酶链反应分析呈现强亮度条带(P<0.05),Westernblot蛋白印迹分析增高(P<0.01)。②与高脂模型组比较,煦少火组、通心络组、辛伐他汀组的血清总胆固醇、三酰甘油、低密度脂蛋白胆固醇降低,(均P<0.01);血清乳酸脱氢酶降低,一氧化氮升高(均P<0.01);主动脉内膜粥样硬化斑块较少、程度轻,主要限于主动脉弓段和分叉处(P<0.01);血管内皮生长因子免疫组织化学染色为弱阳性表达(P<0.01),反转录-聚合酶链反应分析可见模糊条带;Western blot蛋白印迹分析降低(均P<0.01)。结论:"煦少火胶囊"减少动脉粥样斑块血管内皮生长因子表达,降低血清低密度脂蛋白胆固醇及乳酸脱氢酶的浓度,升高一氧化氮浓度;其可通过降低血管内皮生长因子在粥样斑块中的表达,实现稳定粥样斑块,延缓动脉粥样硬化进程的作用。     

辛伐他汀、氨氯地平对实验性兔动脉粥样硬化进程中NOS/NO系统的影响

目的探讨诱导型一氧化氮合酶(iNOS)-一氧化氮(NO)系统在动脉粥样硬化进程中的变化、相互关系及辛伐他汀、氨氯地平对动脉粥样硬化进程中iNOS-NO的影响。方法 24只家兔予以高胆固醇饮食8周,8周后随机分为三组(n=8),三组均停用高胆固醇饮食,改普通饮食8周;模型组不用干预,另外两组分别喂饲辛伐他汀及氨氯地平进行药物干预。另取8只家兔予以普通饮食16周作为对照组。结果与对照组比较,模型组血脂水平明显升高,血清NO含量明显降低,iNOS表达明显升高(P均<0.01)。与模型组比较辛伐他汀组血浆TC、TG、LDL-C、ox-LDL-C下降明显(P<0.01),HDL-C升高(P<0.01);血清NO含量明显升高(P<0.01),iNOS表达明显减少(P<0.05)。而氨氯地平组血脂水平与模型组比较无统计学差异(P>0.05);血清NO含量亦无统计学差异(P>0.05),但iNOS表达明显减少(P<0.05)。结论动脉粥样硬化进程中,辛伐他汀、氨氯地平均可以通过下调血红素加氧酶/NO系统而延缓动脉粥样硬化进程。     

辛伐他汀对实验性兔动脉粥样硬化进程中HO/CO系统的影响

目的探讨血红素加氧酶(HO)一氧化碳(CO)系统在动脉粥样硬化中的变化、相互关系及辛伐他汀对动脉粥样硬化进程中血红素加氧酶-一氧化碳的影响。方法家兔予以高胆固醇饮食(n=16)8周,8周后改用普通饮食并随机分为3组,模型组停用高胆固醇饮食,改普通饮食(n=8);辛伐他汀组给予喂饲辛伐他汀进行药物干预8周。同时设正常对照组(n=8):给予普通饲料喂养16周。然后取静脉血分别用Chalmers A.H、硝酸还原酶法测定各实验组血中CO,取主动脉组织用免疫组织化学方法测定主动脉组织中HO-1的表达;并比较组间各项参数的差异。结果与对照组比较,模型组血脂水平明显升高,血浆一氧化碳水平明显升高,血红素加氧酶-1表达明显升高(P均<0.01)。与模型组比较辛伐他汀组血浆TC、TG、LDL下降明显(P<0.01),HDL升高(P<0.01);血浆一氧化碳水平明显降低(P<0.01),血红素加氧酶-1表达明显减少(P<0.01)。结论动脉粥样硬化进程中,辛伐他汀可以通过下调血红素加氧酶/一氧化碳系统而延缓动脉粥样硬化进程。     

内皮素受体拮抗剂对博莱霉素所致大鼠肺纤维化模型的影响

目的探讨内皮素受体拮抗剂BQ-123对肺纤维化大鼠的治疗作用。方法实验分为模型组、治疗组及对照组。模型组用博莱霉素5mg/kg气管内注射复制大鼠肺纤维化模型,治疗组予内皮素受体拮抗剂BQ-12350μg/kg每周2次腹腔注射,对照组以等量生理盐水替代。造模后d28d处死大鼠,测定肺泡灌洗液中细胞计数及分类、肺组织及肺泡灌洗液中内皮素含量、肺组织羟脯氨酸含量,并进行组织病理学观察。结果模型组、治疗组支气管肺泡灌洗液(BALF)中细胞总数均显著高于对照组(P<0.01),各组间细胞分类无统计学差异;上述两组肺组织及BALF中内皮素均高于对照组(P<0.05、P<0.01);模型组羟脯氨酸明显高于对照组(P<0.01),治疗组羟脯氨酸降低(P<0.05);组织病理学提示模型组Ⅰ型和Ⅲ型胶原蛋白表达增加,治疗组较之模型组有不同程度减少。结论内皮素参与肺纤维化的发病过程,内皮素受体拮抗剂BQ-123对肺纤维化大鼠具有一定的治疗作用。     

复方丹参滴丸对家兔血脂水平和颈动脉粥样硬化斑块的影响

目的:探讨复方丹参滴丸对喂饲高脂饲料后家兔血脂水平和颈动脉硬化斑块的影响。 方法:48只家兔随机分为5组:正常对照组、动脉粥样硬化模型组、辛伐他汀组、复方丹参滴丸大、小剂量组。正常对照组喂饲基础饲料,其余4组均于每日喂饲40g高脂饲料,不足部分给予基础饲料,治疗组同时给药,辛伐他汀剂量为4mg/kg,小剂量复方丹参为0.013g/(kg·d),大剂量为0.117g/(kg·d);分别于实验前、实验12周末,经耳缘静脉抽 血,测定血脂含量。取血后空气栓塞处死家兔,迅速剥离颈动脉,进行病理学检查。 结果:复方丹参滴丸能显著降低实验家兔血清总胆固醇、三酰甘油、低密度脂蛋白(low density lipoprotein,LDL),升高血清高密度脂蛋白(high density lipoprotein,HDL)。并能减低血管内膜厚度(intima thickness,IT)及内中膜的厚度(intima-medium thickness,IMT)及其比率。与模型组相比辛伐他汀组及复方丹参小、大剂量组对内中膜厚度的抑制率分别为32％,24％,41％。 结论:复方丹参滴丸能减低实验性家兔血脂水平,抑制颈动脉粥样硬化的形成。     

内皮素受体拮抗剂对博莱霉素所致肺纤维化大鼠基质金属蛋白酶表达的影响

目的 探讨内皮素受体拮抗剂BQ-123对肺纤维化大鼠基质金属蛋白酶-1表达的影响.方法 实验分为模型组、治疗组及对照组三组.模型组用博莱霉素5 mg/kg气管内注射复制大鼠肺纤维化模型,治疗组予以内皮素受体拮抗剂BQ-123 50 μg/kg每周2次腹腔注射,对照组以等量生理盐水替代.造模后第28天处死大鼠,用半定量逆转录聚分酶链反应(RT-PCR)测定基质金属蛋白酶-1 mRNA的表达,酶联免疫吸附(ELISA)法测定基质金属蛋白酶-1蛋白的表达.结果 模型组基质金属蛋白酶-1 mRNA表达显著低于对照组(P＜0.01),治疗组较之模型组明显增加(P＜0.01).ELISA检测提示模型组基质金属蛋白酶-1蛋白含量低于对照组(P＜0.05),治疗组蛋白含量较之模型组明显增加(P＜0.01).结论 肺纤维化大鼠基质金属蛋白酶-1水平降低,应用内皮素受体拮抗剂治疗可提高基质金属蛋白酶-1的表达.     

复方丹参滴丸对家兔血脂水平和颈动脉粥样硬化斑块的影响

目的：探讨复方丹参滴丸对喂饲高脂饲料后家兔血脂水平和颈动脉硬化斑块的影响。方法：48只家兔随机分为5组：正常对照组、动脉粥样硬化模型组、辛伐他汀组、复方丹参滴丸大、小剂量组一正常对照组喂饲基础饲料，其余4组均于每日喂饲40g高脂饲料，不足部分给予基础饲料，治疗组同时给药，辛伐他汀剂量为4mg／kg，小剂量复方丹参为0．013g／(kg&;#183;d)，大剂量为0.117g／(kg&;#183;d)；分别于实验前、实验12周末，经耳缘静脉抽血，测定血脂含量。取血后空气栓塞处死家兔，迅速剥离颈动脉，进行病理学检查。结果：复方丹参滴丸能显著降低实验家兔血清总胆固醇、三酰甘油、低密度脂蛋白(low density lipoprotein，LDL)，升高血清高密度脂蛋白(high density lipoprotein，HDL)。并能减低血管内膜厚度(intima thickness，IT)及内中膜的厚度(intima-medium thickness，IMT)及其比率。与模型组相比辛伐他汀组及复方丹参小、大剂量组对内中膜厚度的抑制率分别为32％，24％，41％。结论：复方丹参滴丸能减低实验性家兔血脂水平，抑制颈动脉粥样硬化的形成。     

蜂胶对高脂饲料诱导的动脉粥样硬化家兔的干预效应

目的：观察蜂胶对高脂诱导的动脉粥样硬化的干预作用.方法：实验于2003-05/11在泰山医学院动物室、诊断学实验室和形态学实验室完成.选择雄性新西兰家兔24只,随机分为4组,对照组、模型组、蜂胶组及卡托普利组各6只.①对照组：喂饲基础颗粒饲料.②模型组：喂饲高脂饲料（基础颗粒饲料＋100 g/L猪油＋10 g/L胆固醇）.③蜂胶组：在喂饲高脂饲料的基础上,灌胃蜂胶0.35 g/d.④卡托普利组：在喂饲高脂饲料的基础上,灌胃给予卡托普利15 mg/d.每只家兔约食饲料110～140 g/d,12周末处死,取血清及动脉标本待查.①测定血清总胆固醇,三酰甘油,高、低密度脂蛋白胆固醇水平采用酶法.②测定血清超氧化物歧化酶、丙二醛、一氧化氮水平测分别采用黄嘌呤氧化酶法、硫代巴比妥酸法、硝酸还原酶法.③组织学观察：麻醉处死动物后立即解剖分离主动脉,记录主动脉壁粥样斑块大小.截取主动脉降部切片后光镜下观察主动脉壁及内膜损伤程度.④免疫组化法检测：增殖细胞核抗原染色、原位细胞凋亡染色均使用链酶亲和素-过氧化物酶法.把增殖细胞核抗原切片及原位细胞凋亡切片放在光镜下各取10个视野,计数每个视野斑块中的阳性细胞数均值作为阳性细胞数.把苏木精-伊红切片放在光镜下取与前面切片相同部位的10个视野,计数每个视野斑块中所有细胞数的均值作为细胞总数.增殖指数=增殖细胞核抗原染色阳性细胞数/细胞总数&;#215;100%;凋亡指数=原位细胞凋亡染色阳性细胞数/细胞总数&;#215;100%.结果：所有家兔全部进入结果分析,无脱落.①各组家兔动脉粥样硬化的病理改变：模型组出现典型动脉粥样硬化病理变化,全部动脉内皮下层明显增生、增厚,为多量泡沫细胞聚集形成,伴有纤维组织、无定型物质及钙盐沉积.蜂胶组也有病理改变,但内皮下仅轻、中度增生,泡沫细胞聚集,未见纤维组织和无定型物质.②各组家兔血脂水平的比较：蜂胶组、卡托普利组家兔的总胆固醇和低密度脂蛋白胆固醇水平均明显低于模型组（P＜0.01）,而蜂胶组显著低于卡托普利组（P＜0.01）.卡托普利组、蜂胶组家兔的三酰甘油水平显著低于模型组（P＜0.05～0.01）.③各组家兔血清超氧化物歧化酶、丙二醛及一氧化氮水平的影响：蜂胶组家兔超氧化物歧化酶水平明显高于模型组和卡托普利组（P＜0.01）.蜂胶组血清丙二醛含量显著低于模型组和卡托普利组（P＜0.05～0.01）.蜂胶组、卡托普利组血清NO2^-/NO3^-含量显著高于模型组（P＜0.05）.④各组家兔免疫组化法检测结果：蜂胶组、卡托普利组家兔的增殖指数、凋亡指数均显著低于模型组（P＜0.01）.结论：蜂胶能有效地预防实验性动脉粥样硬化的形成,其作用途径可能和其降低斑块细胞的增殖和凋亡以及降脂、抗氧化、保护内皮作用有关.