法舒地尔对大鼠脑缺血再灌注损伤炎症反应的影响

目的：观察法舒地尔对大鼠脑缺血再灌注损伤炎症反应的影响,探讨其抗炎机制。方法：大脑中动脉线栓法（MCAO）制作大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤模型,缺血1.5h再灌注24h。法舒地尔术前腹腔注射给药15mg/kg,术后12h再次给药。术后对大鼠神经功能进行评分,TTC染色观察脑梗死体积;用干湿重法测定脑含水量;分光光度法测定髓过氧化物酶（MPO）活性;伊文思兰法（EB）测定血脑屏障的损伤程度;免疫组化检测大鼠脑缺血区细胞间黏附分子-1（ICAM-1）、血管细胞黏附分子-1（VCAM-1）、NF-κB p65的表达;ELISA法检测IL-8的含量;Western blot法检测单核细胞趋化蛋白-1（MCP-1）和核抽提物中NF-κBp65蛋白的表达;RT-PCR检测NF-κB p65mRNA的表达。结果：法舒地尔能明显改善脑缺血再灌注损伤大鼠神经缺陷症状,缩小脑梗死体积,明显降低缺血侧脑组织的含水量、EB含量及MPO活性;显著抑制ICAM-1、VCAM-1、IL-8和MCP-1蛋白的表达;降低NF-κB p65mRNA和蛋白的表达;减少脑组织核抽提物中NF-κB p65的蛋白量（P〈0.05vsMCAO组）。结论：法舒地尔通过抑制NF-κBp65的活化,进而抑制黏附分子及趋化因子的表达,减轻脑缺血再灌注损伤的炎症反应。     

阿奇霉素对单侧输尿管梗阻大鼠NF-κBp65和MCP-1及ColⅢ表达的影响

目的研究阿奇霉素对单侧输尿管梗阻（UUO）大鼠肾间质核因子-κB（NF-κB）、单核细胞趋化因子-1（MCP-1）、胶原Ⅲ（ColⅢ）表达的影响,探讨其对肾间质纤维化的作用机制。方法采用单侧输尿管结扎肾间质纤维化模型,将60只SD大鼠随机分为3组：假手术组（正常对照组）,单侧输尿管结扎组（模型组）,阿奇霉素组（治疗组）,分别于术后第3、7、14天处死3组大鼠。用HE和MASSON染色法观察肾脏病理改变,用免疫组化方法检测NF-κBp65、MCP-1、ColⅢ表达情况。结果模型组NF-κBp65、mCP-1、ColⅢ在肾间质表达明显增强,与正常对照组比较差异有统计学意义（P〈0.05）;治疗组各因子的表达下调,与相应时间点模型组比较差异有统计学意义（P〈0.05）。结论阿奇霉素可降低NF-κBp65、MCP-1、ColⅢ的表达,缓解肾间质纤维化。     

丁基苯酞对慢性脑缺血大鼠NF-κBp65、ICAM-1的影响

目的观察慢性脑缺血大鼠海马CA1区神经元核因子-κBp65（nuclear-κBp65,NF-κB p65）、ICAM-1的表达,探讨丁基苯酞（DBT）在慢性脑缺血中的作用。方法采用双侧颈总动脉持久性结扎（2-VO）制备慢性脑缺血模型,同时设立对照组及丁基苯酞低剂量及高剂量治疗组。采用光镜大鼠海马CA1区组织形态学变化;采用免疫组织化学方法检测NF-κBp65及ICAM-1的表达。结果与对照组相比,模型组海马CA1区神经元严重受损,NF-κBp65、ICAM-1显著升高（P〈0.01）,丁基苯酞治疗后,海马区形态学明显改善,海马CA1区NF-κBp65、ICAM-1表达明显减少（P〈0.01）。结论丁基苯酞可能通过减少慢性脑缺血大鼠NF-κBp65、ICAM-1在海马神经元中的表达,减轻神经元变性、坏死,抑制炎症反应,从而减轻慢性脑缺血大鼠的脑损伤。     

白芍总苷对大鼠脓毒症的抗炎作用及机制研究

目的 观察白芍总苷对脓毒症的抗炎效果及作用途径.方法 将SD大鼠随机分为对照组、模型组及干预组,以盲肠结扎手术制作脓毒症模型.干预组在脓毒症模型基础上给予白芍总苷干预.48 h后采用酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测各组血清白细胞介素(IL)-1、IL-6及肿瘤坏死因子(TNF)-α水平,反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)法检测各组大鼠肺组织中Toll样受体-4(TLR-4) mRNA及核因子-κB(NF-κB) p65 mRNA的表达.结果 与对照组比较,模型组大鼠48 h死亡率高,所测血清IL-1、IL-6及TNF-α水平明显增高,干预组大鼠血清IL-1、IL-6及TNF-α水平(P＜0.05),存活率提高.与对照组比较,模型组减少肺组织中TLR-4 mRNA及NF-κB p65 mRNA的表达均明显上调(P＜0.05);干预组减少肺组织中TLR-4 mRNA及NF-κB p65 mRNA的表达降低.结论 白芍总苷对脓毒症大鼠具有抗炎作用,可降低大鼠血清IL-1、IL-6及TNF-α水平.其作用机制可能与白芍总苷下调TLR-4/NF-κB信号途径有关.     

氯胺酮对重症急性胰腺炎肺损伤大鼠NF-κB的影响

目的探讨氯胺酮对重症急性胰腺炎肺损伤大鼠NF-κB的影响。方法60只健康雄性SD大鼠,随机分为对照组,SAP组和氟胺酮干预组（KTM组）,每组20只。应用逆行胰胆管泵注5％牛磺胆酸钠诱导大鼠重症急性胰腺炎。氯胺酮干预组术后腹腔给予4mg／kg氯胺酮。造模后12h检测肺湿重干重比,肺泡灌洗液中蛋白含量和中性粒细胞百分比,并应用原位杂交法检测造模后6h,12h肺组织NF-κBp65mRNA的表达。结果NF-KBp65mRNA在SAP时除肺泡的细胞质内有表达外,出现细胞核内表达,随时间的延长表达逐渐增加,KTM组NF—KBp65mRNA的表达明显下降。结论NF—κB活化与sAP的肺损伤密切相关,氯胺酮可以通过抑制NF-KBp65mRNA的表达起到肺保护作用。     

核转录因子-κB在急性肺损伤小鼠中的动态表达

目的研究核转录因子-κB（NF-κB）在脂多糖诱发的急性肺损伤小鼠中的动态表达情况。方法健康纯种昆明鼠25只,随机分为5组,包括正常对照组（腹腔注射等量生理盐水）,4组LPS组（腹腔注射LPS）。LPS组在腹腔注射脂多糖后的不同时间点（1、3、9、12h）处死小鼠,检测相关指标。通过动脉血氧分压（PaO2）检测肺功能;普遗光镜观察HE染色肺组织的病理变化;Western blotting和免疫组化法检测NF-κBp65在蛋白水平上的表达差异。结果LPS注射后1h,PaO2明显下降并有炎症反应的病理变化;小鼠肺组织中的NF-κBp65呈双峰表达,峰值分别为1h和9h。结论NF-κB在脂多糖所致急性肺损伤的炎症反应中发挥着重要作用。     

布地奈德对哮喘大鼠IKK/NF-κB信号通道影响的实验研究

目的:观察布地奈德混悬液(Bud,商品名:普米克令舒)对哮喘大鼠肺组织IκB激酶(IKKβ)mRNA表达及核转录因子(NF-κB)活化的影响.方法:复制哮喘大鼠模型,分为正常组、哮喘组和布地奈德混悬液雾化组,用原位杂交法检测肺组织IKKβ mRNA表达,免疫组化检测肺组织NF-κBp65蛋白活性,双抗体夹心酶联免疫法(ELISA)检测血清及支气管肺泡灌洗液(BALF)中IL-5 的浓度.结果:哮喘组肺组织IKKβ mRNA(0.203±0.038)及NF-κBp65(0.256±0.063)表达量均显著高于正常组(分别为 0.015±0.006,0.034±0.008,P＜0.01).布地奈德混悬液雾化组肺组织IKKβ mRNA (0.101±0.010)和NF-κBp65(0.062±0.014)表达均显著低于哮喘组(P均<0.01).结论:哮喘组肺组织IKKβ mRNA、NF-κBp65表达显著增强,Bud雾化吸入能有效抑制哮喘大鼠肺组织IKKβ mRNA的表达及NF-κBp65的活性,证明Bud能有效抑制IKK/NF-κB信号通道的活性.     

小白菊内酯对硝基酪氨酸诱导的肾小球系膜细胞核转录因子-κB和单核细胞趋化蛋白-1表达的影响

目的观察小白菊内酯（PTL）对硝基酪氨酸（NT）诱导的大鼠肾小球系膜细胞核转录因子-κB（NF—κB）及单核细胞趋化蛋白-1（MCP-1）表达的影响。方法通过体外培养的系膜细胞进行研究。设立低糖对照组（糖浓度为5．6mmol／L）、NT试验组（100μmol／L）及吡咯二流氨基甲酸酯（PDTC）干预组（100μmol／L）和含PTL（1,5,10μmol／L）的干预组。以实时荧光定量PCR检测MCP-1mRNA的表达;用酶联免疫（ELISA）法检测培养细胞上清中MCP-1;WesternBlot方法检测系膜细胞核内NF—κBp65蛋白的表达。结果NT诱导系膜细胞24h后,MCP-1分泌明显增强（P〈0．01）,小白菊内酯（1,5,10μmol／L）对NT诱导的系膜细胞分泌的MCP-1的抑制作用随浓度增大而逐渐增强。系膜细胞在低浓度葡萄糖作用下可低水平表达MCP-1mRNA,NT作用24h后MCP-1mRNA表达明显增强（P〈0．01）,PTL可明显下调NT诱导的MCP-1mRNA表达（P〈0．01）。在NT作用1h后,系膜细胞核内的NF—κBp65蛋白核内表达增强（P〈0．05）,PTL能部分抑制NT诱导的系膜细胞NF—κBp65进入细胞核内（P〈0．05）。结论在体外含NT培养条件下,小白菊内酯可部分逆转NT诱导的系膜细胞NF—κBp65进入细胞核内,进-步抑制MCP-1mRNA及蛋白在系膜细胞的表达,提示小白菊内酯对MCP-1的影响可能与NF—κB的抑制有关。     

牛蒡子改善糖尿病大鼠肾脏病变机制的探讨

目的探讨牛蒡子对糖尿病大鼠肾脏保护作用及其可能机制。方法腹腔内注射链脲佐菌素制备糖尿病模型,分析各组大鼠肾组织NF-κB、单核细胞趋化蛋白-1（MCP-1）、纤粘蛋白（FN）的表达,并分析NF-κB与24h尿蛋白及血肌酐相关性。结果糖尿病组肾小球中NF-κB、MCP-1和FN表达高于对照组（P〈L0.01）。与糖尿病组相比,牛蒡子明显抑制NF-κB活化,降低MCP-1、FN表达（P〈0.05）,减少24h尿蛋白排泄（P,0.01）,改善肾功能指标及肾组织病理学损害。结论牛蒡子对糖尿病大鼠肾脏病变具有明显防治作用。抑制NF-κB的活化可能是牛蒡子发挥肾脏保护作用的机制之一。     

百草枯中毒急性肺损伤的作用机制及丙酮酸乙酯干预研究

目的 探讨高迁移组蛋白B1(HMGB1)/Toll样受体4(TLR-4)在百草枯(PQ)中毒导致急性肺损伤作用机制及丙酮酸乙酯(EP)干预研究.方法 将90只SD大鼠均分为对照组、百草枯中毒组、丙酮酸乙酯治疗组,建立大鼠急性百草枯中毒动物模型后,分别于实验后的6、12、24、48 h、3 d每组随机处死6只大鼠,检测三组大鼠肺组织中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、HMGB1、白细胞介素-1(IL-1)和TLR-4mRNA变化;并测定三组大鼠血清中丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)活性变化.结果 与对照组相比,PQ中毒组和EP治疗组染毒后6、12、24、48 h、3 d各时间点,肺组织TNF-α mRNA、HMGB1 mRNA、IL-1 mRNA、TLR-4 mRNA的表达量和丙二醛含量明显升高(均P<0.05),SOD 活力降低(均P<0.05);与PQ中毒组相比,EP治疗组在染毒后12、48 h时间点大鼠肺组织HMGB1 mRNA、TLR-4 mRNA、IL-1 mRNA、TNF-α mRNA表达量及血清MDA含量均降低(均P<0.05),血清SOD 活力均升高(均P<0.05).结论 百草枯中毒急性肺损伤的机制主要与氧化应激、细胞膜脂质过氧化及免疫系统炎症级联放大效应有关,丙酮酸乙酯可通过抑制该过程从而减轻急性肺损伤程度.     

急性百草枯中毒大鼠肺组织线粒体中VDAC表达

目的：探讨急性百草枯中毒大鼠肺组织线粒体中线粒体电压依赖性阴离子通路（voltage-dependent anion chan-nel,VDAC）的表达变化。方法选取成年健康Wister大鼠200只,雌雄各半,随机分为对照组及染毒组。其中对照组100只,用1ml生理盐水一次性灌胃;染毒组100只,将百草枯（paraquat,PQ）按50mg/kg用生理盐水稀释到1ml,一次性灌胃染毒。分别于灌生理盐水及灌药后1、24、72、120、168h各取20只大鼠,麻醉下解剖大鼠留取肺组织标本,分离提取线粒体并测定其VDAC的含量。结果染毒后的大鼠VDAC的表达明显高于对照组,并且差异具有统计学意义（P〈0.001）。结论百草枯中毒可上调大鼠肺组织线粒体VDAC的表达,VDAC可能通过不同途径参与了急性肺损伤的过程。     

姜黄素对溶血磷脂酰胆碱诱导内皮细胞炎症因子产生的影响

目的：观察姜黄素对溶血磷脂酰胆碱（LPC）诱导内皮细胞炎症因子产生的影响,探讨姜黄素抗动脉粥样硬化（AS）的作用机制。方法：体外培养的人脐静脉内皮细胞（HUVECs）,待细胞生长到融合状态时加入不同浓度（25、50、100mg／L）的姜黄素预处理30min,然后加入LPC（5mg／L）作用24h,用酶联免疫吸附法（ELISA）检测上清液中细胞间黏附分子-1（ICAM-1）、单核细胞趋化蛋白-1（MCP-1）、IL-6和TNF-α的含量;实时荧光定量PCR（real-time PCR）检测ICAM—1、MCP-1、IL-6和TNF-α mRNA的表达;蛋白印迹法（Wesiem blot）和免疫细胞化学染色法检测核因子-κBp65（NF-κBp65）蛋白的表达。结果：LPC能明显增加HUVECs ICAM-1、MCP-1、IL-6、TNF-α mRNA和NF-κB p65蛋白的表达以及上清液中ICAM-1、MCP-1、IL-6、TNF-α的含量,而预先应用不同浓度的姜黄素干预后,上述效应明显减弱,并且具有剂量依赖性。结论：姜黄素抑制炎症因子的产生可能与其抑制NF—κB的活性有关。     

依普利酮对糖尿病肾病大鼠的保护机制研究

目的 探讨依普利酮对糖尿病肾病（diabetic nephropathy,DN）大鼠的保护机制。方法 DN模型大鼠随机分成模型组、依普利酮组（40 mg·kg^-1）、阳性对照组（缬沙坦,20 mg·kg^-1）,另设正常组。灌胃给药8周。全自动生化分析仪检测24 h尿蛋白、血肌酐及血糖化血红蛋白水平;HE染色行肾组织病理形态学观察;ELISA检测肾组织IL-6、TNF-α和MCP-1水平;qPCR检测TLR4、NF-κB p65 mRNA水平,Western blot法检测肾组织TLR4、NF-κB p65蛋白水平。结果 与模型组比较,依普利酮组大鼠24 h尿蛋白、血肌酐及血糖化血红蛋白水平均明显下降（P<0.05或P<0.01）;肾组织病理变化有不同程度的改善;肾组织IL-6、TNF-α和MCP-1水平均明显下降（P<0.05或P<0.01）,TLR4、NF-κB p65 mRNA水平和TLR4、NF-κB p65蛋白水平明显下降（P<0.01）。结论 依普利酮能有效地改善DN大鼠的炎症水平,机制可能与下调IL-6、TNF-α、MCP-1、TLR4、NF-κB p65水平有关。     

螺内酯阻抑百草枯中毒大鼠肺纤维化的机制探讨

目的观察螺内酯能否阻抑百草枯（PQ）中毒大鼠肺纤维化及探讨其可能的作用机制。方法54只雄性SD大鼠随机分为对照组、PQ染毒组（一次性PQ80mg／kg灌胃）和螺内酯干预组（一次性PQ80mg／kg灌胃并予每天1次螺内酯100mg／kg灌胃）。各组大鼠于染毒后第7、14、28天分批处死,取肺组织行HE染色、Masson染色并做肺泡炎、肺纤维化评分,计算肺系数,测血浆及肺组织醛固酮（ALD）含量及肺羟脯氨酸含量,应用免疫组化法测肺组织转化生长因子-β1（TGF-β1）及α-平滑肌肌动蛋白（α—SMA）蛋白的表达。结果染毒组和干预组血浆、肺组织ALD含量均较对照组升高,第14天始差异有统计学意义（P〈0．05）;干预组各时间点大鼠肺泡炎和肺纤维化程度积分、肺系数、肺羟脯氨酸含量均低于染毒组（P〈0．01）;干预组第14天始肺组织TGF—β1、α-SMA蛋白的表达均低于染毒组（P〈0．05或P〈0．01）。结论ALD、TGFβ1、α—SMA可能均参与PQ中毒致肺纤维化的发病进程。螺内酯对PQ中毒大鼠肺纤维化有一定程度的阻抑作用,可能与其抑制ALD受体,并减少肺部TGF-β1和aSMA的表达有关。     

NF-κBp65和MMP-9在非小细胞肺癌中的表达及意义

探讨NF-κBp65和MMP-9蛋白在非小细胞肺癌组织中的表达及其临床病理意义。方法：采用免疫组织化学的方法检测95例非小细胞肺癌（NSCLC组）和27例癌旁正常肺组织（对照组）中NF-κBp65和MMP-9蛋白的表达水平并分析其临床意义。结果:（1）NF-κBp65蛋白在NSCLC癌组织中的阳性表达（44.2%）明显高于癌旁正常肺组织（22.2%）,差异有统计学意义（χ2 =4.26,P<0.05）。（2）NF-κBp65在不同组织学分型、分化程度、TNM分期患者表达差异均有统计学意义(P<0.05或P<0.01),而不同年龄、性别及肿瘤大小患者HMGB1蛋白表达率差异均无统计学意义(P＞0.05)。 (3) MMP-9蛋白在晚期(Ⅲ期)NSCLC组织中的阳性表达率高于早中期(I-Ⅱ期)者,且差异有统计学意义(P<0.05);在腺鳞癌中的阳性表达率显著高于腺癌和鳞癌(P<0.01),且随着肿瘤分化程度的降低其阳性表达率逐渐升高,差异有统计学意义（P<0.05)）;另外不同年龄、性别及肿瘤大小患者MMP-9蛋白表达均有差异,但无统计学意义（P>0.05）。（4）NF-κBp65表达情况与MMP-9呈明显正相关（r=0.217,P<0.05）,两者的表达均与NSCLC的淋巴结转移有关。结论： NF-κBp65与MMP-9的高表达可能与NSCLC的转移有关。     

同型半胱氨酸对人脐静脉内皮细胞IκB和NF-κB表达的影响

目的:观察同型半胱氨酸(Hcy)对人脐静脉内皮细胞(HUVECs)核因子(NF)-κB的表达、激活的影响及其诱导动脉粥样硬化形成的分子机制。方法:将体外培养的HUVECs分为对照组、2.5(H1)、5(H2)、10(H3)及15mmol/L(H4)5组,培养24h。通过四甲基噻唑氮蓝(MTT)比色法测定细胞活力,采用RT-PCR法检测NF-κBp65mRNA的表达,Westernblot检测NF-κB抑制蛋白-α(IκB-α)的蛋白降解,免疫组化法检测NF-κB的核转移趋势。结果:H2、H3、H4组HUVECs细胞活力较对照组明显下降(P<0.01);Hcy可使NF-κBp65mRNA的表达明显增强(P<0.05或P<0.01);Hcy可促进IκB-α蛋白降解,且呈现明显的剂量依赖性;Hcy处理HUVECs后,大量的NF-κBp65从细胞质进入细胞核。结论:Hcy可通过增强NF-κBp65mRNA的表达,加速IκB-α蛋白的降解,促进NF-κBp65的释放、活化,从而转移进细胞核,调节其下游的趋化因子、细胞黏附分子的表达,促进动脉粥样硬化的形成和发展。     

白芍总苷对免疫性肝纤维化大鼠肝组织NF-κB和TGF-β1蛋白表达的影响

目的研究免疫性肝纤维化大鼠肝组织中核转录因子-κB(nuclear factor-κB,NF-κB)和转化生长因子β1(trans-forming growth factor beta1,TGF-β1)的变化以及白芍总苷(TGP)对两者蛋白表达的影响。方法采用猪血清诱导建立大鼠肝纤维化模型,肝组织HE染色和V-G染色观察肝组织损伤及胶原表达变化;免疫组化S-P法观察NF-κB p65和TGF-β1蛋白表达;显微摄像及图像分析检测胶原、NF-κBp65和TGF-β1蛋白的表达量。结果与正常组比较,模型组大鼠肝组织明显破坏,胶原合成增加,NF-κB p65和TGF-β1表达增强(P<0.01);与模型组比较,TGP治疗组肝组织破坏减轻,纤维化程度也明显改善,胶原面积、NF-κB p65和TGF-β1表达均明显减少(P<0.01),三者呈相关性。结论NF-κB介导TGF-β1产生或活化在免疫性肝纤维化过程中可能发挥着重要作用,而TGP抑制纤维化大鼠肝组织NF-κB和TGF-β1的表达可能是TGP的抗肝纤维化主要作用机制之一。     

百草枯中毒致大鼠肺纤维化模型中肺组织的PAI-1mRNA表达

目的 观察纤溶酶原激活物抑制因子-1(PAI-1)在百草枯致大鼠肺纤维化模型中肺组织的表达情况.方法 42只健康成年雌性SD大鼠随机分为对照组和染毒组,分别观察7、14和28 d.染毒组于实验开始一次性百革枯(40mg/kg)灌胃染毒,对照组予以等量生理盐水.取肺组织行病理组织学检查,并采用RT-PCR法测定PAI-1 mRNA的表达.结果 百草枯染毒后大鼠肺泡炎、肺纤维化程度积分明显增高;肺组织PAI-1 mRNA表达(7、14、28 d分别为1.30±0.37,2.39±0.17、0.56±0.05)明显高于同期对照组(0.07±0.02),差异有统计学意义(P<0.01).结论 百草枯中毒大鼠肺组织PAI-1 mRNA水平的表达明显上调.     

TLR9和NF-κBp65在大鼠溃疡性结肠炎模型结肠组织中的表达

目的观察TLR9(Toll样受体9)、NF-κBp65(核因子-κBp65)在大鼠溃疡性结肠炎(UC)模型结肠组织中的表达。方法应用复合法(2,4-二硝基氯苯+乙酸)制备大鼠UC模型,观察和评估结肠黏膜的大体形态和组织学变化。以免疫组化Elivision法检测TLR9、NF-κBp65的表达。结果造模后可见大鼠肠黏膜有大量炎性细胞浸润,累及黏膜下层和固有层。与正常对照组相比,模型组结肠组织TLR9、NF-κBp65表达显著升高(P0.01)。结论 TLR9、NF-κBp65在UC发病机制中具有重要作用。     

核因子-κB、增殖性细胞核抗原在宫颈癌组织中的表达及意义

目的探讨核因子-κB（NF-κB）、增殖性细胞核抗原（PCNA）在宫颈癌组织中的表达及其意义。方法采用免疫组织化学方法,检测45例宫颈癌组织及30例正常宫颈组织中NF—κBp65、PCNA的表达。结果宫颈癌组织中NF-κBp65、PCNA表达率均明显高于正常组织（P〈0．05）。Ⅰb、Ⅱa期宫颈癌组织NF—κBp65、PCNA表达明显高于Ⅰa期宫颈癌组织（P〈0．05）,低分化者表达明显高于中、高分化者（P〈0．05）,有淋巴结转移者明显高于无淋巴结转移者（P〈0．05）;且NF-κBp65与PCNA的表达呈正相关（r=0．705,P〈0．05）。结论NF-κB、PCNA与宫颈癌的发病、侵袭和转移密切相关。