泻白散对小鼠过敏性哮喘气道炎症的作用及机制

目的:评价泻白散对哮喘小鼠变应性气道炎症的影响。方法:BALB/c小鼠60只,随机分为正常组、模型组、泻白散高剂量组(12 g·kg-1)、中剂量组(6 g·kg-1)、低剂量组(3 g·kg-1)、地塞米松阳性对照组(2 mg·kg-1),共6组。各组小鼠(除正常组外)于第1,8天腹腔、皮下分别给予0.1 mL的致敏液(0.2 mL致敏液含卵蛋白(OVA)0.1 mg,氢氧化铝0.02 mg),第15~28天各组(除正常组)给予5%的OVA雾化激发,每次雾化激发20 min,每次雾化前30 min各组小鼠按体重给予相应的药物;空白组以等体积生理盐水代替致敏液,并用生理盐水雾化激发相同的时间。相应的药物治疗2周后,取血做嗜酸性细胞(EOS)计数,取肺泡灌洗液(BALF)做细胞分类计数。采用酶联免疫法(ELISA)法测定BALF中的白介素-6(IL-6)及肿瘤坏死因子α(TNF-α)含量。采用Western blot法检测肺组织GATA结合蛋白3(GATA3)与Th1细胞特异性转录因子(T-bet)蛋白表达。结果:泻白散高、中、低剂量组使哮喘小鼠血中EOS的含量明显降低(P<0.01,P<0.05),对淋巴细胞及中性粒细胞没有明显的影响;使肺泡灌洗液中的EOS明显下降(P<0.01,P<0.05),对肺泡灌洗液的单核细胞及中性粒细胞没有明显的影响;病理显示,各给药组小鼠肺部病变减轻。泻白散高、中、低剂量组能显著降低哮喘小鼠BALF中IL-6及TNF-α的含量,能显著降低哮喘小鼠肺部GATA3蛋白表达,并能提高哮喘小鼠肺部T-bet蛋白表达。结论:泻白散能有效的抗哮喘,其作用机制可能是通过调节GATA3与T-bet蛋白的表达。     

穴位贴敷诱发接触性皮炎对支气管哮喘复发及血中转录因子T-bet/GATA-3的影响

目的:观察穴位贴敷诱发接触性皮炎对预防支气管哮喘复发及血中转录因子T-bet/GATA-3的影响。方法 :选取穴位贴敷治疗的哮喘患者37例,根据贴敷后是否出现接触性皮炎,分为治疗组(出现接触性皮炎)18例和对照组(未出现接触性皮炎)19例。比较2组患者治疗后3个月、6个月与治疗前1年同时期哮喘控制测试(ACT)评分变化情况,并检测2组患者治疗前后血中T-bet、GATA-3mRNA的表达及比值的变化情况。结果 :2组治疗后3个月ACT评分均较治疗前1年同期明显增高(P0.05);治疗组治疗后6个月ACT评分较治疗前1年同期明显增高(P0.05)。2组治疗后T-betmRNA表达均较治疗前明显升高(P0.01,P0.05),且治疗组治疗后T-bet/GATA-3比值较治疗前明显升高(P0.05),组间比较无统计学差异(P0.05)。结论 :采用穴位贴敷治疗支气管哮喘患者,无论是否出现接触性皮炎均能有效预防哮喘的复发,且出现接触性皮炎者临床疗效维持时间更长,其作用机制可能与增加了血中T-betmRNA的表达,调节了辅助性T淋巴细胞的免疫失衡有关。     

二陈汤加味对慢性阻塞性肺疾病大鼠肺组织GATA3，T-bet mRNA表达的影响

目的:观察二陈汤加味对慢性阻塞性肺疾病(COPD)大鼠肺组织锌指蛋白3(GATA3),T盒转录因子(T-bet)的影响。方法:将70只SD大鼠随机分为7组,每组10只,分别为正常组,模型组,二陈汤加味低、中、高剂量组(5,10,20 g·kg~(-1)),消咳喘组(5 g·kg~(-1)),二陈汤组。以烟熏合并脂多糖(LPS)气管滴注的方法制备COPD大鼠模型。成功造模后,治疗组灌胃给药,正常组及模型组灌胃等体积生理盐水。酶联免疫吸附测定(ELISA)测定大鼠血清中白细胞介素-10(IL-10),白细胞介素-12(IL-12)的含量。实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)检测GATA3,T-bet mRNA表达,免疫组化(IHC)检测其肺组织GATA3,T-bet的蛋白表达。结果:与正常组比较,模型组大鼠血清中IL-10水平显著降低,IL-12显著升高(P 0. 01);肺组织GATA3的蛋白和mRNA表达显著降低,T-bet的表达显著升高(P 0. 01)。与模型组比较,各治疗组血清中IL-10水平均有不同程度的升高,IL-12则不同程度的降低(P 0. 05)。各治疗组大鼠肺组织GATA3 mRNA和蛋白表达均明显增多,T-bet则受到了抑制(P 0. 05)。结论:二陈汤加味可能是通过降低IL-12,增加IL-10的含量,并抑制T-bet,兴奋GATA3的蛋白和mRNA表达,来减轻COPD大鼠肺组织炎症,改善肺功能的,并阻止COPD的免疫紊乱。     

壮医针挑疗法对哮喘小鼠肺组织中胸腺基质淋巴细胞生成素、T盒转录因子和锌指蛋白3mRNA表达的影响

目的:观察壮医针挑疗法对哮喘小鼠肺组织中T盒转录因子(T-bet)和锌指蛋白3(GATA 3)mRNA表达以及胸腺基质淋巴细胞生成素(TSLP)的影响,探讨其治疗哮喘的机制。方法:成年雌性BALB/c小鼠30只,随机分为对照组、模型组、针挑组,每组10只。采用卵清蛋白致敏及激发制备哮喘小鼠模型。选取"大椎""肺俞""定喘""风门""肾俞"及"脾俞"等穴,每天针挑1次,共治疗7次。采用RT-PCR法检测肺组织T-bet及GATA 3mRNA表达水平;免疫荧光法检测TSLP表达;HE染色观察肺组织病理变化。结果:和对照组比较,模型组小鼠肺内TSLP、GATA 3mRNA相对表达量均显著升高(P0.01),而Tbet mRNA相对表达量降低(P0.05)。和模型组比较,针挑组小鼠肺内TSLP、GATA 3mRNA相对表达量显著降低(P0.01),而T-bet mRNA相对表达量升高(P0.05)。针挑组小鼠肺组织上皮增厚减轻,气管血管周围炎性反应细胞浸润较少。结论:降低肺组织TSLP含量和GATA 3mRNA表达,提高T-bet mRNA表达,可能是壮医针挑疗法治疗哮喘的机制之一。     

甲炎康泰对自身免疫性甲状腺炎大鼠T-bet/GATA3的影响＊

目的 观察甲炎康泰（JYKT）复方颗粒对自身免疫性甲状腺炎（autoimmune thyroiditis，AIT）大鼠Th1/Th2细胞转录因子T-bet/GATA3的影响。方法 50只Lewis大鼠，雌性，每组10只随机分为正常对照组、模型组、JYKT低、中、高剂量组。模型组与给药组大鼠皮下多点注射猪甲状腺球蛋白和弗化剂的方法建立自身免疫性甲状腺炎大鼠（AIT大鼠），大鼠造模6周后，正常、模型组大鼠每日予以0.9 mL/100 g双蒸水，中药组大鼠予以同体积药物混悬液连续8周。给药结束后RT-PCR检测各组大鼠脾脏中T-bet、GATA3 mRNA的表达情况；Western Blot检测各组大鼠脾脏中T-bet、GATA3的蛋白表达情况；免疫组化法测定大鼠甲状腺组织T-bet、GATA3蛋白的表达情况。结果 与正常组比较，模型组T-bet、GATA3 mRNA及蛋白表达均显著上升（P < 0.01）；与模型组比较，甲炎康泰低、中、高剂量组T-bet、GATA3 mRNA及蛋白均下降（P < 0.05，P < 0.01）。结论 T-bet/GATA3是影响Th1/Th2平衡的关键转录因子，甲炎康泰可调控T-bet/GATA3表达，从而影响了自身免疫性甲状腺炎的发生与发展。     

益气温阳护卫法对哮喘大鼠GATA3_mRNA表达的影响

目的:探讨益气温阳护卫法对哮喘大鼠Th细胞异常分化相关分子基因表达影响。方法:50只SPF级雄性SD大鼠随机分为正常对照组、哮喘模型组、益气温阳护卫组、地塞米松组和卡介菌多糖核酸组,每组10只。采用TaqMan Realtime PCR测定各组外周血单个核细胞(PBMC)中GATA3_mRNA的表达变化。结果:哮喘模型组PBMC中GATA3_mRNA表达显著高于正常对照组(P<0.01),益气温阳护卫组、地塞米松组和卡介菌多糖核酸组PBMC中GATA3_mRNA的表达显著低于哮喘模型组(P<0.01),且与正常对照组PBMC中GATA3_mRNA的表达相当。结论:益气温阳护卫法调节Th1/Th2细胞亚群趋于平衡可能是通过抑制哮喘大鼠GATA3_mRNA的表达实现,从而达到防治哮喘的作用。     

T-bet/GATA3与哮喘的相关性及川芎嗪治疗哮喘的研究进展

目的了解Th1/Th2中特异性转录因子T-bet/GATA3与哮喘的相关性及川芎嗪治疗哮喘的研究现状。方法应用现代信息技术,通过互联网等查阅近年来国内外相关资料并进行分析、整理、总结,对Th1/Th2中特异性转录因子T-bet/GATA3的生物学特征、转录因子T-bet/GATA3与哮喘发病机制的相关性、川芎嗪对哮喘的治疗及其与转录因子T-bet/GATA3关系进行综述。结果转录因子T-bet/GATA3在哮喘发病中起到复杂的生物调节作用,动物实验显示,川芎嗪治疗哮喘有效,川芎嗪能促进转录因子T-bet水平的表达,降低转录因子GATA3水平的表达。结论深入研究转录因子T-bet/GATA3、哮喘及川芎嗪之间的相关性,为哮喘的临床分级和治疗提供新的思路。     

穴位敷贴对过敏性哮喘豚鼠Th/Th2失衡的免疫调节效应

目的:观察豚鼠血清中白介素-4(IL-4)、γ-干扰素(IFN-γ)含量以及T-bet和GATA-3 mRNA的表达情况,探讨穴位敷贴对过敏性哮喘的免疫调节机制。方法:将30只雄性豚鼠随机分为正常组、模型组、穴位组、非穴位组、阳性对照组(氨茶碱组),每组6只。以卵清白蛋白致敏激发法建立哮喘模型,采用ELISA法检测豚鼠血清中IL-4、IFN-γ含量,RT-PCR法检测肺组织T-bet和GATA-3 mRNA的表达。结果:穴位组与非穴位组IL-4血清含量、GATA-3 mRNA表达明显低于模型组,IFN-γ含量、T-bet mRNA表达明显高于模型组(P<0.01),非穴位组血清IL-4、IFN-γ含量,T-bet mRNA和GATA-3 mRNA的表达与穴位组相比有显著性差异(P<0.01)。结论:穴位敷贴可以通过调节转录因子的表达,从而改变Th0细胞分化方向,影响特征性细胞因子的分泌,纠正Th1/Th2比例失衡,这是穴位敷贴控制哮喘气道炎症的一种可能的机制,且药物敷贴于穴位处较之非穴位处能够发挥更好的疗效。     

艾灸预处理对大负荷训练运动员外周血转录因子T-bet和GATA-3 mRNA表达的影响

目的:探讨艾灸预处理对运动员大负荷训练阶段运动性免疫机能失衡的防治作用机制。方法:12名男子中长跑运动员,随机分为对照组(6名)和观察组(6名)。在大负荷训练阶段,对照组只训练,观察组在每天下午训练后灸关元、足三里穴(双)或关元、三阴交穴(双),每天灸一组,两组穴位交替治疗。分别在大负荷运动训练前、大负荷运动训练3周后、调整训练1周后采用实时荧光定量PCR技术检测外周血白细胞转录因子T-bet(T-box expressed in T cells)和GATA-3(GATA binding protein 3)mRNA的表达。结果:(1)两组运动员T-bet mRNA的表达均表现为上升的趋势,对照组上升了4.52%,观察组上升了14.8%,但两组间和组内比较差异均无统计学意义(P>0.05)。(2)GATA-3mRNA表达,对照组调整训练后与大负荷训练前和大负荷训练后相比均明显上升(P<0.05),观察组调整训练后与同期对照组相比显著下降(P<0.05)。(3)T-bet、GATA-3mRNA比值,对照组大负荷训练后比大负荷训练前增高了13.58%,调整训练后比大负荷训练前降低了29.63%,整体上呈现下降趋势;观察组大负荷训练后比大负荷训练前增高75.16%,调整训练后比大负荷训练前仍增高35.4%,整体上呈现上升趋势。结论:(1)中长跑运动员调整训练后GATA-3mRNA明显增高,上调T辅助淋巴细胞(Th)2型细胞因子产生,导致了Th 1/Th 2平衡向Th 2漂移;(2)艾灸预处理抑制了运动员大负荷训练后GATA-3mRNA过度表达,可能是维持运动员Th 1/Th 2动态平衡的机制之一。     

从TH1/TH2细胞平衡角度探讨清肺口服液对感染RSV小鼠内T-bet、GATA3水平的影响

目的:从TH1/TH2细胞平衡角度观察清肺口服液对感染RSV肺炎小鼠肺组织内T-bet、GATA3及IL-12的影响,并对其作用机制进行初步探讨。方法:将45只BABL/c小鼠随机分为5组,正常对照组,模型组,利巴韦林组,清肺(3.4 g/mL)组,清肺(10.2 g/mL)组。每组9只,用RSV(Long株)病毒予小鼠滴鼻造模,病毒激发24 h后,分给药72 h后处死小鼠,立即取小鼠肺组织行病理分析,及肺细胞中RT-PCR检测T-bet和GATA3蛋白表达水平,ELISA方法检测肺泡灌洗液(BALF)中IL-12的含量,流式细胞术方法检测小鼠脾脏细胞IL-4和INF-γ表达含量。结果:小鼠模型组与各给药组小鼠肺组织均有T-bet和IL-12(P<0.05,P<0.01)显著升高,GATA3显著降低。结论:清肺口服液具有调节TH1/TH2平衡,并对于感染rsv小鼠体内T-bet及IL-12细胞因子具有明显提升作用,而对GATA3则有明显抑制效果,从而进一步证明了清肺口服液治疗RSV病毒性肺炎有效性。     

补肾中药对哮喘缓解期患儿Th1/Th2平衡的影响

目的探讨补肾中药调节T1／Th2平衡治疗哮喘的分子机制。方法哮喘缓解期儿童20例,抽取静脉抗凝血分离单个核细胞（peripheral blood mononuelear cells,PBMC）。每份血样均分为3部分,分为空白组、喘可治（CKZ）Ⅰ组和CKZⅡ组,加入不同浓度的药物体外培养48h,分别收集细胞沉淀。荧光定量PCR检测T—bet mRNA、GATA-3 mRNA的表达强度及细胞因子IFN-γ mRNA、IL-4 mRNA的表达水平。结果不同剂量CKZ干预后,PBMC中T—bet mRNA的表达均较空白组显著增强,以CKZⅡ组的差异更为明显（P〈0．01）;CKZ组与空白组比较,GATA-3 mRNA的表达强度差异无显著性;CKZ组的IFN-γ mRNA的表达较空白组增强,其中CKZⅡ组与空白组比较差异有显著性（P〈0．05）;CKZⅡ组IL-4 mRNA的表达强度较空白组显著减低（P〈0．01）。CKZ组的T—bet／GATA-3比值与空白组比较,差异无显著性（P〉0．05）;CKZ组的IFN-γ／IL-4的比值较空白组上升,其中CKZⅡ组与空白组相比显著升高（P〈0．05）。结论补肾中药CKZ可以通过转录因子和细胞因子多个环节,增强Th1细胞的功能,同时抑制Th2细胞的功能,对Th1／Th2平衡具有多层次的调节作用。     

基于T-bet/GATA-3表达研究化痰祛瘀法对哮喘小鼠气道炎症及免疫失衡的影响

目的:研究转录因子T-bet和GATA-3在哮喘模型小鼠疾病进展过程中的改变及其意义及其在Th1/Th2失衡中的作用,探讨化痰祛瘀法对支气管哮喘防治作用的机理。方法:通过卵蛋白致敏、激发建立支气管哮喘小鼠模型,于激发后7天和21天分批取材,用RT-PCR法检测肺组织匀浆中T-bet、GATA-3 mRNA表达。结果:激发7天后:与空白组比较:模型组T-bet明显降低,GATA-3明显升高,T-bet/GATA-3比值明显降低;两用药组T-bet及T-bet/GATA-3比值均明显降低,组间无明显差异。与模型组比较:两用药组T-bet均无明显变化,GATA-3均明显降低,T-bet/GATA-3比值均明显升高;组间无明显差异。哮喘激发21天后:与空白组比较:模型组T-bet明显降低,GATA-3明显升高,T-bet/GATA-3比值明显降低;两用药组T-bet及T-bet/GATA-3比值均明显降低。与模型组比较:地塞米松组T-bet无明显差异,GATA-3明显降低,T-bet/GATA-3比值明显升高;中药组T-bet明显升高,GATA-3明显降低,T-bet/GATA-3比值明显升高;两组间无明显差异。结论:BALB/c小鼠经OVA致敏及雾化激发后,使转录因子T-bet/GATA-3表达失衡,模型小鼠出现气道炎症及气道重建的相关表现,符合中医病机中的"痰瘀互结"。化痰祛瘀法对T-bet/GATA-3表达失衡具有双向纠偏的调节作用。对改善气道慢性炎症及气道重建方面,其疗效与地塞米松相近,但作用环节较对照组更为广泛,且随用药时间延长,有累加效应。     

麻杏芎葶合剂对哮喘模型大鼠气道炎症的调控作用

目的 观察麻杏芎葶合剂对哮喘大鼠气道炎症的作用及机制.方法 SD大鼠100只随机分为6组:正常对照组、模型对照组各16只;麻杏芎葶合剂低、中、高剂量组(低、中、高剂量组),地塞米松组各17只.采用卵白蛋白溶液皮下注射和超声雾化器激发建立哮喘大鼠模型,各组给予相应药物7天后处死,取肺组织进行HE染色观察病理变化;采用免疫组织化学法和原位分子杂交(ISH)法检测肺组织的神经生长因子(NGF)及NGF mRNA水平;采用免疫组化学法检测肺组织蛋白激酶C(PKC)及基质金属蛋白酶-9(MMP-9)水平;采用RT-PCR法检测肺组织转录因子T-bet mRNA,GATA-3 mRNA;采用ELISA法检测血清细胞因子白介素-4(IL-4)、干扰素-γ(IFN-γ)表达.结果 与模型对照组比较,低、中、高剂量组肺组织炎性细胞浸润减少,支气管周围水肿减轻,气道上皮损伤减小.与模型对照组比较,中、低剂量组T-bet mRNA、GATA-3 mRNA及T-bet mRNA/GATA-3 mRNA比值明显下降(P＜0.01);低、中、高剂量组及地塞米松组NGF mRNA和NGF蛋白表达明显低于模型对照组(P＜0.01);低、中、高剂量组CGRP表达低于模型对照组(P＜0.05或P＜0.01),低、中、高剂量组与地塞米松组比较差异有统计学意义(P＜0.05或P＜0.01).与模型对照组比较,中、低剂量组IFN-γ/IL-4比值明显下降(P＜0.05或P＜0.01). 结论 麻杏芎葶合剂能够减少炎性细胞在肺组织中的浸润,减轻哮喘气道炎症反应,缓解哮喘病情.     

Effects of seasonal changes on T-helper 1/T-helper 2 immune balance and eczema onset in ratsOA

Objective: To explore the impact of seasonal changes on the T-helper 1(Th1)/T-helper 2(Th2) immune balance of the body in order to elucidate the internal immunological mechanisms underlying seasonal eczema.Methods: Eighty 4-week-old male Sprague-Dawley rats were divided into 5 season groups kept in corresponding season simulation environments, and subdivided into the model group and the control group. The Eczema Area and Severity Index(EASI) and scratching frequency were evaluated. The serum lev...     

黄芪当归配伍对气道变应性炎症大鼠鼻黏膜及肺组织GATA-3、T-bet表达的影响

目的:通过研究黄芪当归配伍对气道变应性炎症模型大鼠鼻黏膜及肺组织GATA-3、T-bet表达的影响,探讨黄芪当归配伍治疗气道变应性炎症的作用机制。方法:采用卵清蛋白(OVA)喷雾的方法致敏造成大鼠气道变应性炎症模型,分别用黄芪、当归、黄芪当归配伍灌胃给药治疗。用免疫组化法测定鼻黏膜中及肺组织中GATA-3、T-bet的表达。结果:模型组鼻黏膜及肺组织GATA-3表达增加,而T-bet表达降低。当归组可降低肺组织GATA-3表达,增加鼻黏膜T-bet的表达;黄芪组可降低肺组织GATA-3表达,升高鼻黏膜及肺组织T-bet表达;芪归组可降低鼻黏膜及肺组织GATA-3表达,升高鼻黏膜和肺组织T-bet表达。各给药组均可降低鼻黏膜及肺组织中GATA-3/T-bet比值。结论:黄芪当归配伍可能通过对GATA-3/T-bet的影响,调节气道变应性炎症中Th1/Th2细胞因子平衡,从而对气道变应性炎症有抑制作用。