蛋白酶抑制剂对内毒素致大鼠急性肺损伤的保护作用

目的:静脉应用蛋白酶抑制剂以了解其对内毒素所致的大鼠肺损伤的保护作用及其机制.方法:雄性Wistar大鼠32只,体重(250～270 g),分为对照组(C,n=8)、内毒素组(A,n=8)、大剂量治疗组(U,n=8)及小剂量治疗组(V,n=8),除对照组外,其他组均给予内毒素(5 mg/kg),治疗组同时给予内毒素和乌司他丁注射(U组100 000 u/kg,V组50 000 u/kg).2 h后测定血清内皮素,进行动脉血气分析,取肺组织观察大体标本形态和光镜下的组织病理形态,测定肺组织血管通透性变化、湿/干质量比值、髓过氧化物酶活性、脂质过氧化产物[丙二醛(malonaldehyde,MDA)和共轭二烯(conjugated-diene,C-diene)].结果:光镜下可见对照组肺组织学正常,内毒素组肺间质弥漫性出血,肺泡腔内可见大量粒细胞聚集、浸润,并可见弥漫性肺泡间隔增厚,而乌司他丁治疗组上述病理表现明显减轻.肺组织湿/干质量比值和每克肺组织伊文思蓝含量在内毒素组分别为(5.41±0.06)和(27.64±2.48)μg,对照组分别为(4.95±0.08)和(12.99±2.83)μg,组间比较差异有统计学意义;U组为(5.0±0.05)和(19.47±2.09)μg;V组为(4.98±0.06)和(21.44±3.12)μg,明显低于内毒素组,U组和V组间差异无统计学意义.血清内皮素及髓过氧化物水平内毒素组分别为(948.23±103.45)u/g和(152.90±8.41)u/g,高于对照组的(729.38±88.64)u/g和(54.62±15.49)u/g,U组为(633.27±93.27)u/g和(119.40±11.32)u/g,V组为(671.87±105.45)u/g和(129.55±9.57)u/g,则低于内毒素组,U组和V组间差异无统计学意义.肺组织脂质过氧化产物水平内毒素组[(MDA(73.95±4.62)nmol/g;C-diene(10.96±0.81)nmol/g]明显高于对照组[MDA(39.65±6.21)nmol/g;C-diene(3.34±0.51)nmol/g],治疗组[U组:MDA(51.26±5.56)nmol/g,C-diene(7.59±0.84)nmol/g;V组:MDA(59.87±4.62)nmol/g,C-diene(8.79±0.45)nmol/g]则较内毒素组明显降低,MDA水平U组低于V组.结论:乌司他丁明显降低肺组织的炎症反应,减轻肺组织的损害,对内毒素所致大鼠肺损伤具有一定的保护作用.     

Protection of carbon monoxide intraperitoneal administration from rat intestine injury induced by lipopolysaccharide

Background Treatment with inhaled carbon monoxide （CO） has been shown to ameliorate intestinal injury in experimental animals induced by lipopolysaccharide （LPS） or ischemia-reperfusion. We hypothesized that CO intraperitoneal administration （i.p.） might provide similar protection to inhaled gas. This study aimed to investigate the effects of continuous 2 L/min of 250 ppm CO i.p. on rat intestine injury induced by LPS and to try to develop a more practical means of delivering the gas. Methods A total of 72 male Sprague-Dawley rats were randomly assigned to 4 groups： control group, CO i.p. group, LPS group and LPS＋CO i.p. group. One hour after intravenously received 5 mg/kg LPS, the rats in LPS group and LPS＋CO i.p. group were exposed to room air and 2 L/min of 250 ppm CO i.p., respectively, and the rats of control group and CO i.p. group intravenously received an equal volume of 0.9% NaCI and 1 hour later, were exposed to room air and 2 L/min of 250 ppm CO i.p., respectively. One, 3 and 6 hour of each group after treated with room air or CO i.p., the animals （n=-6 for each time point） were sacrificed and intestinal tissues were collected for determinating the levels of platelet activator factor （PAF） and intercellular adhesion molecule-1 （ICAM-1） with enzyme-lined immunosorbent assays. The maleic dialdehyde （MDA） content and the myeloperoxidase （MPO） activity were determined with a chemical method. The phosphorylated p38 mitogen activated protein kinase （MAPK） expression was assayed with Western blotting and the cell apoptotic rate with flow cytometery. The arterial oxygenation was measured by blood gas analysis, and the pathology determined by light microscope. Results After treatment with 2 L/min of 250 ppm CO i.p., the increase of PAF, ICAM-1, MDA, MPO, and cell apoptotic rate induced by LPS was markedly reduced （P 〈0.05 or 0.01）, and accompanied by ameliorating intestine injury. Western blotting showed that these effects of CO i.p. were mediated by p38 MAPK pathway. There were no significant differences in all observed parameters between control group and CO i.p. group. Conclusion The injury to the intestine via anti-oxidant, anti-inflammation and anti-apoptosis, which may involve the p38 MAPK pathway, was induced by 2 L/min of 250 ppm CO i.p. exerting potent protection against LPS.     

高浓度富氢生理盐水对脂多糖诱导大鼠急性肺损伤的作用

［摘要］ 目的探讨高浓度富氢生理盐水对腹腔注射脂多糖诱导急性肺损伤的影响。 方法选取60只清洁级SD雄性大鼠,随机分为空白组、高浓度富氢生理盐水组、脂多糖组、脂多糖+高浓度富氢生理盐水组各15只。脂多糖组、脂多糖+富氢生理盐水组腹腔内注射脂多糖10 mg/kg制备大鼠脓毒症模型。富氢生理盐水组、脂多糖+富氢生理盐水组治疗组在术后即刻、3 h、6 h、12 h、18 h,以5 mL/kg高浓度富氢生理盐水腹腔注射。空白组、脂多糖组给予等量生理盐水腹腔注射。取支气管肺泡灌洗液检测中性粒细胞计数,取肺组织检测丙二醛(malondialdehyde,MDA)含量及超氧化物歧化酶（superoxide dismutase,SOD）、过氧化氢酶（catalase,CAT）、谷胱甘肽过氧化物酶（glutathione peroxidase,GSH-Px）活性,Western blot检测肺组织中核因子E-2-相关因子2（nuclear factor erythroid-2-related factor-2,Nrf2）和血红素加氧酶1（hemeoxygenase-1,HO-1）的表达,比较组间差异。 结果与脂多糖组比较,脂多糖+富氢生理盐水组大鼠7 d平均生存时间延长（P＜0.05）;与空白组比较,脂多糖组中性粒细胞计数、MDA含量均明显升高,SOD、CAT、GSH-Px活性均下降（P＜0.05）,肺组织中Nrf2和HO-1的蛋白表达上升（P＜0.05）;与脂多糖组比较,脂多糖+富氢生理盐水组中性粒细胞计数、MDA含量均减少,SOD、CAT、GSH-Px活性以及Nrf2和HO-1的蛋白表达均明显增加（P＜0.05）。 结论高浓度富氢生理盐水可延长脂多糖所致脓毒症大鼠平均生存时间,减少肺部炎症细胞、氧化应激,可能通过Nrf2/HO-1通路控制急性肺损伤。     

硫化氢在内毒素休克大鼠急性肺损伤中的作用及其与一氧化氮、一氧化碳的关系

目的 探讨硫化氢(H2S)在内毒素休克(ES)大鼠急性肺损伤(ALI)中的作用及一氧化氮(NO)、一氧化碳(CO)与其作用机制的关系.方法 将64只雄性SD大鼠随机分为对照组(经尾静脉注射生理盐水0.5 ml/kg)、脂多糖组(经尾静脉注射脂多糖复制ES模型)、脂多糖+硫氢化钠[NaHS(外源性H2S供体)]组、脂多糖+炔丙基甘氨酸(PPG)组,每组16只.给药后连续监测平均动脉压(MAP)的变化,6 h后处死,测定肺系数;光镜观察肺组织形态学改变并观测肺损伤的定量评价指标(IQA);化学法检测血浆H2S含量、肺组织丙二醛、NO和CO含量、髓过氧化物酶(MPO)、胱硫醚-γ-裂解酶(CSE)、一氧化氮合酶(NOS)和血红素氧合酶(HO)活性;用免疫组织化学法和Western印迹检测肺组织诱生型NOS(iNOS)和HO-1蛋白表达.结果 脂多糖组大鼠MAP明显低于对照组,肺组织出现明显的结构损伤,脂多糖组大鼠IQA、肺系数、肺组织丙二醛含量、MPO活性、血浆H2S含量和肺组织CSE活性均明显高于对照组(P<0.05或P<0.01);脂多糖+NaHS组大鼠血浆H2S含量和肺组织CSE活性均高于脂多糖组,而血压低于脂多糖组,且大鼠肺损伤加重;脂多糖+PPG组大鼠血压高于脂多糖组,且大鼠肺损伤减轻(均P<0.05);脂多糖组肺组织中eNOS活性明显低于对照组[(5.26±0.25)U·mg-1·prot-1vs(6.45±0.42)U·mg-1·prot-1],而iNOS活性和NO含量均高于对照组[(12.6±0.6)U·mg-1·prot-1vs(10.5±0.7)U·mg-1·prot-1、(144±25)μmol/L vs(68±5)μmol/L,P<0.05或P<0.01];脂多糖+PPG组肺组织中eNOS活性明显高于脂多糖组,iNOS活性[(10.2±0.4)U·mg-1·prot-1]、蛋白表达和NO含量[(74±5)μmol/L]均明显低于脂多糖组(P<0.05或P<0.01),而脂多糖+NaHS组肺组织中eNOS活性[(4.81±0.23)U·mg-1·prot-1]明显低于脂多糖组,iNOS活性[(14.6±0.4)U·mg-1·prot-1]、蛋白表达和NO含量[(217±18)μmol/L]均明显高于脂多糖组(P<0.05或P<0.01);脂多糖组肺组织中HO活性[(173±31)pkat/g]、蛋白表达和CO含量[(3.63±0.24)%]均明显高于对照组[(125±22)pkat/g、(2.48±0.33)%,均P<0.05]和脂多糖+PPG组[(88±17)pkat/g、(2.98±0.23)%,均P<0.05],而脂多糖+NaHS组肺组织中HO活性[(263±37)pkat/g]、蛋白表达和CO含量[(4.35±0.32)%]均明显高于脂多糖组(均P<0.05).结论 H2S生成增多参与了ES大鼠肺组织炎症损伤的发生,此作用与其引起的eNOS活性下降,iNOS活性升高及随后产生的大量NO有关;H2S可上调ES大鼠肺组织HO-1/CO体系,这可能是机体针对损伤产生的内源性的代偿性保护反应.     

血红素加氧酶-1重组乳酸乳球菌灌胃对内毒素诱导大鼠急性肺损伤的作用

目的:利用基因工程原理合成携带血红素加氧酶-1(HO-1)基因的乳酸乳球菌,给正常大鼠灌胃后,观察其对内毒素诱导大鼠急性肺损伤的保护效应。方法:随机将30只健康清洁级SD大鼠分为对照组(LPS组,n=10)、携带HO-1的乳酸乳球菌灌胃组(HO组,n=10,LPS模型建立前24 h灌胃)、拮抗剂组[锌原卟啉(ZnPP)组,n=10,HO灌胃24 h后,LPS模型建立前1 h腹腔注射ZnPP 10μmol/kg];LPS模型建立后4 h取材,比较各组动物支气管灌洗液(BALF)中髓过氧化物酶(MPO)活性、中性粒细胞(PMN)计数、肺组织湿干重比(W/D)、肺组织MPO活性,并在光镜下观察肺组织病理学改变。结果:与LPS组比较,HO组BALF中MPO、PMN计数和肺组织W/D均降低(P<0.05),肺组织病理学损伤减轻;与HO组比较,ZnPP组BALF中MPO、PMN计数和肺组织W/D均升高(P<0.05),肺组织病理学损伤加重;ZnPP组与LPS组比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论:预先给大鼠用携带HO-1基因的乳酸乳球菌灌胃,可对内毒素诱导急性肺损伤大鼠产生一定的保护作用。     

帕瑞昔布对缺血再灌注后肺组织血红素加氧酶-1表达水平及凋亡程度的影响*

目的 探讨不同剂量帕瑞昔布对大鼠肺缺血再灌注（IR）后肺组织内血红素加氧酶-1（HO-1）表达水平及凋亡程度的影响。方法 随机将40只雄性SD大鼠（280～300?g）分为5组：对照组（C组）、缺血再灌注组（IR组）、帕瑞昔布低剂量组（L组，2?mg/kg）、帕瑞昔布中剂量组（M组，10?mg/kg）及帕瑞昔布高剂量组（H组，20?mg/kg）。复制单侧肺IR模型，检测肺内丙二醛（MDA）和髓过氧化物酶（MPO）含量、肺组织湿重/干重，观察肺组织病理改变及凋亡情况，检测肺内HO-1表达。结果 与C组比较，其他4组肺内MDA和MPO含量、肺组织湿重/干重、肺内凋亡细胞均增加（P?<0.05），IR组增加最多，L组次之，M组和H组增加最少，且M组和H组差异无统计学意义（P?>0.05）。肺IR后，IR组肺损伤最严重，不同剂量帕瑞昔布处理后，肺损伤均减轻，M组和H组较L组减轻更明显。C组内HO-1表达低，其余4组均升高（P?< 0.05），其中L组较IR组升高，M组和H组较L组进一步升高，M组和H组差异无统计学意义（P?>0.05）。结论 帕瑞昔布可减轻肺IR损伤，在一定程度呈剂量依赖性，其机制可能与增加肺组织中HO-1表达有关。     

HO-1/CO在大鼠内毒素性急性肺损伤中的保护作用及硝普钠对其的影响

目的 :研究HO 1/CO系统在内毒素 (LPS)致急性肺损伤 (ALI)中的作用 ,并探讨外源性NO供体硝普钠的保护作用机制。方法 :采用LPS气管内滴入建立大鼠ALI模型 ,32只Wistar大鼠随机分为假手术组 (S组 )、内毒素组 (LPS组 )、HO 1诱导剂hemin预处理组 (HM组 )、硝普钠治疗组 (SNP组 )。 8h后取材 ,半定量分析肺组织HO 1表达 ,检测肺湿 /干重比、支气管灌洗液 (BALF)蛋白含量、肺组织MDA含量 ,并观察肺组织病理变化。结果 :与S组比较 ,LPS组HO 1蛋白表达显著增强 (P <0 .0 1) ;hemin预处理和硝普钠治疗后HO 1蛋白表达较LPS组增高 (P <0 .0 1,P <0 .0 5 )。LPS组肺湿 /干重比、BALF中蛋白含量以及组织匀浆MDA含量显著高于S组 (均P <0 .0 1) ,而HM组和SNP组均显著低于LPS组 (P <0 .0 5或P <0 .0 1)。病理形态学 :SNP及HM组病理损伤程度明显轻于LPS组。结论 :HO 1/CO系统参与了LPS致ALI时的肺保护 ;气管内滴注SNP对急性肺损伤的保护作用可能与增强HO 1/CO效应有关。     

外源途径一氧化碳抑制小鼠严重烧伤后早期肺损伤和炎症反应的分子机制

目的 探讨外源途径一氧化碳对严重烧伤后小鼠早期肺损伤和炎症反应的抑止作用及机制.方法 建立小鼠15% Ⅲ度烧伤模型.实验动物共随机分成3组:假伤(Sham)组(12只),烫伤组(12只)及烫伤加一氧化碳释放分子(CORM)-2组(12只).烫伤组小鼠异氟烷吸入麻醉下,背部去毛,以92℃水,9 s,造成15% Ⅲ度烫伤,伤后腹腔内注射生理盐水1.5 ml抗休克;烫伤加CORM-2组小鼠烫伤后尾静脉注射CORM-2(8 mg/kg);Sham组用37℃温水代替92℃水,其余操作相同.检测动物肺组织髓过氧化物酶(MPO)、核因子、κB(NF-κB)活性、细胞间黏附分子-1(ICAM-1)的表达,肺泡灌洗液中TNF-α和IL-1β,肺组织损伤指标(湿干比、血管通透性)以及肺内皮细胞经烧伤血清刺激后对白细胞的黏附作用.结果 烧伤组肺组织中MPO(87±11)U/g组织,肺泡灌洗液中TNF-α(160±9)pg/ml和IL-1β(27.2±2.9)pg/ml,NF-κB的活性及ICAM-1蛋白表达水平均明显高于Sham组.与烫伤组比较,烫伤+CORM-2组上述情况明显得到改善(P＜0.05);而肺湿干比、血管通透性未见明显改善.肺内皮细胞经烧伤血清刺激后对白细胞的黏附作用增强(46.5±8.5)%,经CORM-2处理后的烧伤血清刺激后肺内皮细胞对白细胞的黏附作用明显减弱(25.4±5.6)%.结论 外源性一氧化碳释放分子能明显抑止肺组织NF-κB活性,减轻严重烧伤后肺组织黏附分子的表达,从而减轻组织中白细胞扣留,有效减轻肺脏炎症反应.     

不同浓度七氟醚预处理对内毒素性 急性肺损伤大鼠肺组织的影响

目的：比较3种不同浓度(3.6%,2.4%和1.2%)七氟醚预处理对内毒素性急性肺损伤大鼠肺组织的影响。方法：健康雄性SD大鼠36只,随机分为6组（n=6）：对照组（A组）、单纯七氟醚吸入组（B组）、3.6%七氟醚预处理组（C组）、2.4%七氟醚预处理组（D组）、1.2%七氟醚预处理组（E组）、内毒素组（F组）。分别在给药后（LPS或生理盐水）6 h 处死大鼠, 观察肺组织病理学结果,测定肺组织湿干比(W/ D)、髓过氧化物酶(MPO)活性及肺组织ICAM-1mRNA的表达。结果：与对照组比较,F组和不同浓度七氟醚预处理组肺组织病理损伤加重,肺W/D、MPO活性、ICAM-1mRNA表达升高(P＜0.05)。与F组比较,C组肺组织病理损伤减轻,MPO活性和ICAM-1mRNA表达降低(P＜0.05),但肺W/D无明显降低（P＞0.05）;D组肺组织病理损伤减轻,肺W/D、MPO活性、ICAM-1mRNA表达均降低(P＜0.05),F组肺组织MPO活性降低(P＜0.05),但肺W/D和ICAM-1mRNA表达无明显降低（P＞0.05）。结论：2.4%七氟醚预处理可以减轻内毒素所致急性肺损伤,作用机制可能与其降低肺组织ICAM-1mRNA的表达上调,从而减少肺内中性粒细胞的浸润相关。     

乌司他丁对大鼠肠缺血-再灌注损伤的保护作用

目的 探讨大鼠肠缺血-再灌注损伤致肠黏膜损害的机理及乌司他丁的保护作用.方法 Wistar雄性大鼠30只,随机分成假手术组(SO组)、肠缺血45 min再灌注6 h组(I/R组)组,乌司他丁预处理组(UTI组).每组均为10只.用无创伤动脉夹夹闭大鼠肠系膜上动脉制成肠缺血-再灌注模型,假手术组仅无菌开腹,但不钳夹该血管.乌司他丁预处理组在术前30 min经阴茎背静脉注入乌司他丁(2×104 U/kg),而肠缺血45 min再灌注6 h组和假手术组则分别注入等量生理盐水.在缺血45 min再灌注6 h后,各组分别采集静脉血、肠系膜淋巴组织及小肠组织标本.分别观察各组血清肠脂肪酸结合蛋白(IFABP),一氧化氮(NO),肿瘤坏死因子(TNF)α水平;小肠组织丙二醛(MDA),超氧化物歧化酶(SOD),髓过氧化物酶(MPO)水平;血液及肠系膜淋巴组织细菌移位率;并对小肠组织进行光镜及电镜观察.结果 和I/R组比较,UTI组IFABP,NO,TNF-α,MDA,MPO水平均明显降低,SOD活性显著升高[IFABP(520.87±75.41)pg/ml比(1493.57±136.35)pg/ml,NO (58.97±7.06)μmol/L比(95.15±9.13)μmol/L,TNF-α(15.38±1.70)pg/ml比(23.55±4.34)pg/ml,MDA(4.5±1.1)nmol/mg比(9.2±2.6)nmol/mg,MPO(1.98±0.22)U/g比(3.02±0.55)U/g,SOD(77.08±7.14)U/mg比(60.61±6.83)U/mg,P均＜0.01].差异具有统计学意义.肠系膜淋巴组织细菌移位率显著降低(P＜0.05),病理损害明显减轻.结论 乌司他丁可能通过减少氧自由基的生成、诚轻中性粒细胞聚集及活化、降低TNF-α、NO释放抑制过度炎症反应,对肠黏膜有一定的保护作用.     

Reactive oxygen species contribute to the induction of superoxide dismutase during heat shock in cultured rat neonatal cardiomyocytes

Objective To explore the influence of reactive oxygen species (ROS) during heat shock on the activity of superoxide dismutase (SOD) and the endurance of cardiomyocytes against hypoxia-reoxygenation damage. Methods Cultured rat neonatal cardiomyocytes were divided into 5 groups (n=6/group): normal control, anoxic control, heat shock, heat shock + SOD (150 U/ml) and exogenous ROS pretreated. Myocytes were first incubated in a CO(2)incubator (37℃) with Hank’s solution for 30 min, followed by specific pretreatment. Heat shock was performed by incubating the cells in a 43℃ incubator for 30 min; exogenous ROS were generated by the reaction of xanthine oxidase with xanthine. After the dishes were returned to normal incubation conditions for 24 h, myocytes underwent hypoxia (3 h) and reoxygenation (1 h). Results Compared with control groups, ROS production increased after the cells experienced heat shock (1.28±0.34 nmol/mg·protein vs 0.80±0.23 nmol/mg·protein and 0.74±0.20 nmol/mg·protein, P&lt;0.05) or ROS pretreatment (3.30±0.58 nmol/mg·protein, P&lt;0.05). 24 hours later, accompanied by attenuated cellular injury, significantly increased SOD activity was found in heat shock (2.55±0.43 U/mg·protein vs 0.77±0.12 U/mg·protein and 0.63±0.09 U/mg·protein, P&lt;0.05) and exogenous ROS pretreated (2.34±0.31 U/mg·protein, P&lt;0.05) groups following reoxygenation. Moreover, opposite results were found when myocytes were treated with SOD during heat shock. Conclusions The release of ROS during heat shock triggers delayed myocardial protection by altering the activity of SOD. ROS may play an important pathophysiological role in heat shock induced myocardial protection.     

血红素氧合酶-1的诱导对肺缺血再灌注损伤的保护作用

目的探讨血红素氧合酶-1的诱导对肺缺血再灌注损伤的保护作用。方法将40只健康Sprague-Dawley大鼠随机分为4组：假手术对照（sham）组、肺缺血再灌注（I／R）组（阻断左肺门30min再灌注2h）、氯化血红素（Hemin）组（给予血红素氧合酶-1的诱导剂）与锌原卟啉（ZnPP）组（给予血红素氧合酶-1的抑制剂）。检测各组肺组织超氧化物歧化酶（SOD）活性,血浆肿瘤坏死因子（TNF-α）含量,观察肺组织湿干重比（W／D）以及电镜下肺组织超微结构变化。结果Hemin组肺湿／干重比（5．92±0．66）低于I／R组（7．55±0．66）（P〈0．01）,SOD活性（9．2±0．5）高于I／R组（2．8±0．4）（P〈0．01）,TNF-α含量（60．37±8．25）低于I／R组（452．26±22．59）（P〈0．01）,电镜下肺组织超微结构损伤改变明显减轻;而给予ZnPP（ZnPP组）后使上述改变发生逆转。结论血红素氧合酶-1的诱导可有效保护肺缺血再灌注损伤。     

低剂量低分子肝素对内毒素诱发的急性肺损伤的影响

目的 探讨低剂量低分子肝素(LMWH)对内毒素(LPS)诱发的急性肺损伤(ALI)的影响.方法 选取36只雄性SD大鼠分为3组:正常对照组(A组),LPS组(B组)和LPS+ LMWH组(C组),每组12只.B、C组腹腔注射6 mg/kg LPS诱发ALI.C组腹腔注射低分子肝素100 U/kg,B组腹腔注入同等容积的生理盐水.6h后处死动物,光镜下观察各组大鼠肺组织病理改变,行动脉血气分析、检测肺湿质量/干质量(W/D)比值和支气管肺泡灌洗液(BALF)中总蛋白浓度;测定肺组织髓过氧化物酶(MPO)活性、丙二醛(MDA)水平;ELISA法测定血浆中肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素1β(IL-1β)及白细胞介素6(IL-6)水平.结果 B、C组PaO2、pH值低于A组,C组与B组相比明显升高(P＜0.05).B、C组大鼠肺W/D、BALF总蛋白及肺组织MDA、MPO水平明显高于A组(P＜0.01);C组与B组相比,肺W/D、BALF中蛋白及肺组织MDA、MPO水平明显下降(P＜0.05).B、C组大鼠血浆中TNF-α、IL-1β及IL-6水平较A组明显升高(P＜0.01),而C组较B组明显降低(P＜0.01).结论 LMWH处理能够减轻LPS诱发的急性肺损伤.     

依达拉奉对脂多糖引起的小鼠急性肺损伤的保护效应研究

[目的]探讨依达拉奉在急性肺损伤当中的保护效应及其可能的机制。[方法]成年C57小鼠54只被随机等分为3组:正常组(假手术组),对照组(LPS+生理盐水)和实验组(LPS+依达拉奉)。将对照组和实验组小鼠,采用气道内注入LPS溶液(2 mg/mL)1 mL/kg造急性肺损伤模型,正常组小鼠不注。实验组小鼠尾静脉注射依达拉奉溶液(2 mg/mL)2.5 mL/kg,对照组小鼠注射等体积生理盐水。24 h后,每组取6只小鼠腹腔注射过量麻醉戊巴比妥(100 mg/kg),后断头处死,取肺组织用于组织学及丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)、TNF-α,IL-1β和IL-6的检测。每组余下的12只小鼠用做生存率实验,每12 h观测1次并记录小鼠存活的情况,观察周期为4d。[结果]实验组小鼠生存率明显高于对照组(P<0.05);LPS刺激后,小鼠肺组织内的MDA含量由(1.41±0.119)nmol/mg上升到(4.48±0.159)nmol/mg,而依达拉奉治疗后则降到(2.56±0.157)nmol/mg(P<0.01);LPS刺激后,小鼠肺组织内的SOD活力由(12.86±1.49)U/mg下降到(8.95±1.02)U/mg,而依达拉奉治疗后则上升至(10.69±1.77)U/mg(P<0.01);同时,LPS刺激后,小鼠肺组织内的TNF-α,IL-1β和IL-6含量分别由(47.89±4.71)pg/mg、(79.39±3.45)pg/mg和(81.9±6.39)pg/mg上升到(300.48±12.18)pg/mg、(717.99±35.01)pg/mg和(428.99±21.89)pg/mg,而依达拉奉治疗后小鼠肺组织的含量则降到(191.84±6.43)pg/mg、(236.87±13.46)pg/mg和(136.92±12.47)pg/mg。病理结果显示:依达拉奉减轻了LPS引起的肺水肿,弥漫性出血和炎性细胞的浸润等症状。[结论]依达拉奉可以减轻LPS引起的急性肺损伤。     

缺血后处理对鼠肺缺血-再灌注损伤中氧化状态的影响

目的 研究缺血后处理对于肺缺血-再灌注损伤早期内源性氧化/抗氧化系统及一氧化氮水平的影响.方法 24只雄性SD大鼠,分为假手术组(S),缺血-再灌注组(I/R)以及缺血后处理组(IPO)(每组8只),分别检测肺组织中谷胱甘肽(GSH)、丙二醛(MDA)及一氧化氮(NO)的水平;黄嘌呤氧化酶(XO)及髓过氧化物酶(MPO)的活性;抗氧化酶包括:超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)、谷胱甘肽过氧化酶(GPX)的活性.结果 IPO组与I/R组相比较,其抗氧化系统:SOD(41.4±4.4)U/mg vs(19.6±2.8)U/mg、CAT(19.5±1.6)U/mg vs(8.4±0.8)U/mg、GPX(168±13)U/mg vs(72±8)U/mg)和GSH(1.72±0.26)mg/g vs(0.89±0.07)mg/g蛋白的水平明显升高(均P＜0.05);氧化状态指标:XO(50±6)U/g vs(83±8)U/g,MPO(5.0±0.5)U/g vs(7.6±0.7)U/g和MDA(0.91±0.08)nmol/mg vs(1.58±0.17)nmol/mg的水平显著降低(均P＜0.05);并且内源性NO[(93±7)μmoL/g vs(22±4)μmol/g]的水平也明显升高(P＜0.01).结论 在再灌注初期的后处理可以减轻肺缺血-再灌注损伤,其保护作用一定程度上是通过抑制氧化剂的产生以及氧化作用,并且内源性NO也许和后处理的保护作用有关.     

血红素加氧酶-1/一氧化碳系统对急性肝损伤大鼠的防治作用

目的:研究血红素加氧酶-1/一氧化碳(HO-1/CO)系统对四氯化碳(CCl4)诱导大鼠急性肝损伤的保护作用及其机制.方法: 随机将30只SD大鼠分成6组,即正常对照组、四氯化碳染毒组(CCl4)、hemin组、hemin+CCl4组、CO组和CO+CCl4组,每组5只大鼠.采用Western blot法测定HO-1蛋白的表达情况;测定各组大鼠血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)和天门冬氨酸氨基转移酶(AST)水平,肝组织丙二醛(MDA)浓度和超氧化物歧化酶(SOD)活性以及caspase-3活性和肿瘤坏死因子(TNF)-α水平变化;以HE染色观察肝组织病理形态学改变以及采用TUNEL法观察肝细胞凋亡情况.结果:CCl4成功诱导了大鼠急性肝损伤,表现为染毒24 h后血清ALT,AST水平(2 136.3±163.4 U,1 422.7±221.7 U)以及肝组织MDA浓度(5.28±0.93 μmol/g)、肝组织caspase-3活性(光密度值4.69±1.02)和TNF-α水平(256.3±27.3 ng/L)均显著升高,肝组织SOD活性(45.9±14.8 U/mg)下降,和正常对照组相比差异有统计学意义(P＜0.01);病理学和TUNEL法检测结果均显示肝有严重损伤,大量肝细胞发生凋亡.给予hemin预处理能显著诱导大鼠肝HO-1的表达,并对肝产生明显的保护作用,表现为大鼠血清ALT,AST水平(287.1±24.3 U,246.2±21.7 U)和肝组织MDA浓度(3.27±1.34 μmol/g)明显降低,肝组织SOD活性(71.4±22.6 U/mg)升高,肝组织TNF-α水平(132.6±19.5 ng/L)和caspase-3活性(光密度值2.49±1.47)明显低于CCl4组;此外,hemin预处理亦使染毒大鼠的病理学指标得到明显改善,细胞凋亡的数目显著减少.腹腔注射低浓度CO亦能降低染毒大鼠ALT,AST水平和MDA浓度,抑制caspase-3活性和TNF-α水平,并使组织SOD活性升高,同时改善肝损伤程度,对肝产生明显保护作用.结论: HO-1诱导表达和给予外源性CO均对急性肝损伤大鼠产生明显的保护作用,提示HO-1/CO系统在防护急性肝损伤的病理生理过程中占有重要地位;HO-1/CO系统的保护机制可能与其减轻脂质过氧化反应,抑制caspase-3活性和降低TNF-α水平有关.     

蛇床子素对脓毒症急性肺损伤大鼠的保护效应

目的 探讨蛇床子素（Osthole）对脓毒症相关的急性肺损伤大鼠模型的保护效应.方法 采用盲肠结扎穿刺术方法建立急性肺损伤大鼠模型.蛇床子素（100、200 mg/kg）剂量分别处理大鼠模型,24 h后,二辛可宁酸（BCA）测定支气管肺泡灌洗液（BAL）蛋白含量;按不同试剂盒说明测定髓过氧化物酶（myeloperoxidase,MPO）、超氧化物歧化酶（superoxide dismutase,SOD）和丙二醛（malondialdehyde,MDA）的水平;酶联ELISA方法分析细胞因子白介素-6（IL-6）和肿瘤坏死因子-α（TNF-α）的水平;Western blot方法检测肺组织活性caspase-3水平.结果 急性肺损伤显著引起BAL蛋白含量的升高[（0.48±0.04）g/L],差异有高度统计学意义（P＜0.01）,在蛇床子素（100、200 mg/kg）处理模型中,BAL蛋白含量则显著下降[（0.33±0.03）、（0.26±0.02 g/L）],差异有统计学意义（P＜0.05）.急性肺损伤模型中肺组织中MPO[（15.651±1.137）U/g wet tissues）]和MDA[（15.568±2.987）nmol/mg protein]水平显著升高（P＜0.05）,而SOD[（9.657±1.237）U/mgprotein]水平下降（P＜0.05）,在蛇床子素（100、200 mg/kg）处理模型中,MPO[（10.884±1.811）、（9.012±0.896） U/g wet tissues]和MDA[（9.345±1.979）、（11.336±1.236） nmol/mg protein]水平显著下降（P＜0.05）,SOD[（14.679±1.035）、（17.639±1.893）U/mgprotein]水平显著升高（P＜0.05）.炎症因子IL-6和TNF-α水平在急性肺损伤模型中显著升高（P＜0.05）,在蛇床子素（100和200 mg/kg）处理模型中水平受到显著抑制（P＜0.05）.Western blot结果显示急性肺损伤模型中,活性caspase-3水平升高,而在蛇床子素处理模型其水平显著下降.结论 蛇床子素能够抑制炎性反应,缓解肺组织的氧化应激反应,降低肺部细胞的凋亡,从而减轻肺组织的损伤和通透性的变化,对急性肺损伤大鼠有显著的保护效应,其作用效果和机制值得深入研究和探讨.     

HO-1在缺血后处理抗肺缺血再灌注损伤中的作用及其对STAT-3表达的影响

目的 研究血红素加氧酶-1（hemeoxygenase-1,HO-1）在缺血后处理（ischemic postconditioning,IPO）抗肺缺血再灌注损伤中的作用机制及其对STAT-3蛋白表达的影响。方法 40只SD雄性大鼠（250-280 g）随机分为假手术组（S）、缺血再灌注组（IR）、缺血后处理组（IPO）及缺血后处理 HO-1抑制剂组（IPO ZnPP）。称重法计算缺血肺组织干/湿比（W/D）,试剂盒检测缺血肺组织MDA水平及MPO与HO-1活性,Western Blot检测HO-1,p-STAT-3蛋白表达水平。结果 与S组比较,IR组大鼠W/D、MDA、MPO、HO-1活性及蛋白表达水平均显著增加,而p-STAT-3蛋白表达水平显著降低,IPO可以逆转上述变化,而HO-1特异性抑制剂可以取消IPO对上述指标的影响。结论 IPO可以通 过促进HO-1活性及蛋白表达的增加从而激活STAT-3信号通路而发挥抗肺缺血再灌注损伤作用。     

Protective effects of hemin pretreatment combined with ulinastatin on septic shock in rats

Background Urinary trypsin inhibitor inhibits the enhanced production of pro-inflammatory molecules. Hemeoxygenase-1 induction protects against ischemia/repeffusion injury, oxidative stress, inflammation, transplant rejection, apoptosis, and other conditions. However, it is unknown if a combined hemin and ulinastatin pretreatment could result in protective effects for septic shock. In this study, we investigated the role of hemin pretreatment combined with ulinastatin on septic shock in rats. Methods Eighty healthy, male Sprague-Dawley rats were randomly divided into four groups： group S, group H, group U and group HU. Groups S and U received 1 ml normal saline intraperitoneally, while groups H and HU both received 1 ml （100 mg/kg） hemin. Twenty-four hours later, 0.5 ml （10 mg/kg） E. coil lipopolysaccharide was injected intravenously to replicate the experimental model of septic shock. After an initial 25% decrease in the mean arterial pressure, corresponding to time point 0, groups HU and U received 0.5 ml 10 000 U/kg ulinastatin intravenously, and the others received 0.5 ml normal saline. Results The number of deaths in groups H and U was lower than that in the group S （P〈0.05）, and was higher than that in group HU （all P〈0.05） respectively. The mean arterial pressure （MAP） in the group S was significantly greater than that in group H （P〈0.05）, and was lower than that in group HU and group U （P〈0.05）. The plasma levels of alanine aminotransferase （ALT）, aspartate aminotransferase （AST）, creatinine （Cr） and blood urea nitrogen （BUN）, the malondial- dehyde （MDA） of liver, kidney and lung, and the lung Evans blue （EB） contents in groups H and U, were greater than that in group HU （all P〈0.05）, and were lower than that in group S （all P〈0.05）. In contrast, the plasma levels of CO in groups H and HU were higher than that in groups S and U （all P〈0.05）, and SOD of liver, kidney and lung in groups H and U were higher than that in group S,     

高浓度二氧化碳致大鼠全身性水肿的机理研究

目的　探讨高碳酸血症时大鼠全身性水肿发生的机理。方法　给大鼠呼吸高浓度二氧化碳气体（８ ％ Ｃ Ｏ２ 、２１ ％ Ｏ２ ,７１ ％ Ｎ２） ,每天７ 小时,连续４ 周。观察高碳酸血症大鼠各项指标的变化,并设对照组。结果　对照组平均肺动脉压（ｍ Ｐ Ａ Ｐ） 为（１９４ ±０２８） ｋ Ｐａ, Ｐａ Ｃ Ｏ２ 为（４６ ±０９） ｋ Ｐａ 。大鼠循环血中１２５ Ｉ牛血清白蛋白半排出时间（ Ｔ１／２） 为（２３８ ±３０） ｍｉｎ ;血浆过氧化脂质（ Ｌ Ｐ Ｏ） 为（３０ ±０６）ｎｍｏｌ／ｍｌ,红细胞超氧化物歧化酶（ Ｓ Ｏ Ｄ） 活性为（１ ０４２ ±１３５） Ｕ／ｇ Ｈｂ 。肺组织中水含量为（７６２ ±１０） ％ ,肌组织为（７４１ ±２８） ％ 。高碳酸血症组ｍ Ｐ Ａ Ｐ 为（２０ ±０４） ｋ Ｐａ 、 Ｐａ Ｃ Ｏ２ 为（７４ ±０４） ｋ Ｐａ 、 Ｔ１／２ 为（１５０ ±２３） ｍｉｎ 、 Ｌ Ｐ Ｏ 为（８８ ±２０） ｎｍｏｌ／ｍｌ、 Ｓ Ｏ Ｄ 为（６８２ ±３４１） Ｕ／ｇ Ｈｂ 、肺组织中水含量为（７８８±１８） ％ 、肌组织为（７６０ ±１０） ％ 。两组比较ｍ Ｐ Ａ Ｐ 差异无显著意义（ Ｐ＞ ００５） ; Ｐａ Ｃ Ｏ２ 、