西黄丸含药血清对人乳腺癌细胞生长的影响

目的研究西黄丸含药血清对人乳腺癌细胞系(MCF-7)生长及其细胞周期分布的影响。方法应用MTT比色法检测肿瘤细胞活性,流式细胞仪分析细胞周期相对分布。结果西黄丸含药血清对人乳腺癌细胞系(MCF-7)有较强的抑制作用,其抑制率与含药血清浓度呈直线相关。流式细胞仪周期分析结果显示含药血清处理24 h,S期细胞比例增加,G2/M期细胞减少;处理48 h后,G0/1期细胞增多,S期细胞减少。结论西黄丸含药血清可抑制人乳癌细胞系(MCF-7)细胞生长,并可干扰其细胞周期。     

犀黄丸诱导人肝癌细胞凋亡及其机制的研究

观察犀黄丸含药血清诱导人肝癌Bel-7402细胞凋亡的作用,并对其机制进行初步的探讨,目的:研究犀黄丸含药血清诱导人肝癌Bel-7402细胞凋亡的作用,并对其机制进行初步探讨.方法:犀黄丸含药血清对肝癌细胞生长的影响,检测对肿瘤Bel-7402杀伤率.在用不同浓度犀黄丸含药血清作用Bel-7402细胞不同时间后,用TUNEL法检测凋亡,用SASB法检测细胞bcl-2、c-myc、p53蛋白表达.结果:犀黄丸含药血清能明显抑制Bel-7402细胞生长,其肿瘤细胞Bel-7402杀伤率最高达75%,与对照组比较有显著性差异(P＜0.01).TUNEL法显示,细胞凋亡率明显提高,与对照组比较有显著性差异;Bel-7402细胞的bcl-2、c-myc基因蛋白表达降低,而p53基因蛋白表达增强.     

蟾酥胶囊含药血清诱导人肝癌细胞凋亡的实验研究

目的:观察蟾酥胶囊含药血清对人肝癌BEL-7402细胞凋亡的诱导作用。方法:采用中药血清药理学方法,选择不同浓度含药血清作为实验组,分别与人肝癌BEL-7402细胞共同孵育24 h、48 h,显微镜下观察细胞形态学变化;锥虫蓝染色检测细胞蓝染率;流式细胞仪检测细胞凋亡率、细胞周期变化及APO 2.7蛋白的阳性表达率;均与10%无药血清组做对照。结果:实验组部分细胞变小、变圆,贴壁能力明显下降,呈漂浮状态,集落性明显降低,呈单个生长状态;锥虫蓝染色显示,细胞蓝染率无明显变化;流式细胞仪检测,可见明显的凋亡峰,细胞周期中G1、S期下降,G2/M期升高,APO 2.7蛋白表达的阳性峰明显增高,细胞凋亡率与作用时间、含药血清浓度呈一定的时效和量效关系。结论:蟾酥胶囊可以诱导人肝癌细胞BEL-7402凋亡。     

麝黄消瘤汤诱导人肝癌细胞系（Bel-7402）凋亡的研究

目的：研究麝黄消瘤汤对人肝癌细胞系(Bel-7402)的诱导凋亡作用。方法：制备含药血清，孵化人肝癌细胞系(Bel-7402)，用电子显微镜观察法、荧光显微镜观察法研究凋亡细胞超微结构．用流式细胞仪检测凋亡细胞DNA直方图及凋亡率。结果：电子显微镜及荧光显微镜下，麝黄消瘤汤含药血清诱导人肝癌细胞系(Bel-7402)出现凋亡征象，最大凋亡率为50．96％。流式细胞仪检测凋亡细胞DNA直方图上出现亚二倍体峰，细胞周期分布频率与对照组有显著区别(P≤0．05)。结论：麝黄消瘤汤对人肝癌细胞系(Bel-7402)有显著的诱导凋亡作用。     

麝黄消瘤汤诱导人肝癌细胞系(Bel-7402)凋亡的研究

目的:研究麝黄消瘤汤对人肝癌细胞系(Bel-7402)的诱导凋亡作用.方法:制备含药血清,孵化人肝癌细胞系(Bel-7402),用电子显微镜观察法、荧光显微镜观察法研究凋亡细胞超微结构,用流式细胞仪检测凋亡细胞DNA直方图及凋亡率.结果:电子显微镜及荧光显微镜下,麝黄消瘤汤含药血清诱导人肝癌细胞系(Bel-7402)出现凋亡征象,最大凋亡率为50.96%.流式细胞仪检测凋亡细胞DNA直方图上出现亚二倍体峰,细胞周期分布频率与对照组有显著区别(P≤0.05).结论:麝黄消瘤汤对人肝癌细胞系(Bel-7402)有显著的诱导凋亡作用.     

清毒栓血清药对宫颈癌SiHa细胞凋亡及周期的影响

目的 通过研究中药含药血清对宫颈癌SiHa细胞凋亡及细胞周期的影响,探讨中药抑制宫颈癌SiHa细胞生长可能的作用机制.方法 以不同浓度含药血清培养液作用于SiHa细胞,并设立空向血清及含中、西药阳性药血清为对照,用流式细胞分析技术进行细胞周期及细胞凋亡检测.结果 口服各组含药血清组S期所占比例较空白血清对照组减少,其差异有显著性(P＜0.05),尤以西药阳性组明显(P＜0.01),清毒栓组次之,中药阳性组再次之.而G0～G1期所占比例较空白血清对照组增加,其差异有显著性(P＜0.01).结论 清毒栓对人宫颈癌SiHa细胞的作用可能是通过阻断细胞从G0～G1期向S期分化及促进其凋亡而抑制细胞生长.     

清毒栓血清药对宫颈癌SiHa细胞凋亡及周期的影响

目的通过研究中药含药血清对宫颈癌SiHa细胞凋亡及细胞周期的影响，探讨中药抑制宫颈癌SiHa细胞生长可能的作用机制。方法以不同浓度含药血清培养液作用于SiHa细胞，并设立空白血清及含中、西药阳性药血清为对照，用流式细胞分析技术进行细胞周期及细胞凋亡检测。结果口服各组含药血清组S期所占比例较空白血清对照组减少，其差异有显著性（P〈0．05），尤以西药阳性组明显（P〈0．01），清毒栓组次之，中药阳性组再次之。而GO-G1期所占比例较空白血清对照组增加，其差异有显著性（P〈0．01）。结论清毒栓对人宫颈癌SiHa细胞的作用可能是通过阻断细胞从G0-G1期向S期分化及促进其凋亡而抑制细胞生长。     

补肾化瘀解毒复方含药血清对肺癌A549/DDP耐药细胞周期的影响

目的 探讨补肾化瘀解毒复方含药血清对肺癌耐药细胞周期的影响.方法 采用血清药理学及流式细胞法,分析补肾化瘀解毒复方含药血清分别与顺铂(DDP)和维拉帕米(VRP)合用后A549/DDP耐药细胞周期的变化.结果 补肾化瘀解毒复方含药血清均能明显增加A549/DDP耐药细胞G0/G1期细胞数,减少S期和G2/M期的细胞比例(P＜O.05).结论 补肾化瘀解毒复方含药血清能使A549/DDP耐药细胞阻滞于G0/G1期,协同增强DDP和VRP阻止A549/DDP耐药细胞DNA的合成,抑制肺癌耐药细胞的分裂增殖.     

莪术不同品种含药血清对人肝癌细胞SMMC7721增殖、凋亡、细胞周期及核质比的影响

目的探讨莪术3个不同品种蓬莪术、广莪术和温莪术含药血清对人肝癌细胞SMMC7721增殖、凋亡、细胞周期及核质比的影响,为临床治疗肝癌及中药抗肿瘤复方中莪术药材的品种选择提供实验依据。方法体外培养人肝癌细胞SMMC7721,加入高、中、低剂量莪术不同品种含药血清,倒置相差显微镜下观察各组细胞形态,应用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法、流式细胞仪分析技术及核质比研究了各药物含药血清对肝癌细胞SMMC7721的作用。结果与阴性血清对照组比较,3个品种莪术含药血清的中、大剂量组对SMMC7721细胞生长都有抑制作用(P0.05),抑制率以温莪术中剂量最高。3个品种莪术含药血清都对SMMC7721细胞周期有影响,肝癌细胞进入S期的数量较阴性对照组减少,并且都能使G0-G1期增多,使细胞增殖减缓。温莪术中剂量含药血清组对SMMC7721细胞核质比的作用较大(P0.05),细胞出现核固缩,核质比较阴性血清对照组明显变小。结论蓬莪术、广莪术和温莪术含药血清对人肝癌细胞SMMC7721增殖、凋亡及细胞周期均有影响,温莪术中剂量含药血清组的抑制率最高,对肝癌细胞SMMC7721核质比的作用较大。莪术品种用于治疗肝癌时建议选用温莪术。     

养阴清肺方对钴60照射后肺成纤维细胞周期和凋亡的影响

目的：探讨养阴清肺方对钴60照射后肺成纤维细胞的生长周期及凋亡的影响。方法：制备实验用含药血清：空白组、中药组、激素组、中药加激素组;采用钴60射线照射肺成纤维细胞后,用不同含药血清培养细胞,分别于24、48、72 h后用流式细胞技术检测各组的细胞周期及细胞凋亡。结果：24 h,各药物组的细胞凋亡与空白组均有差异（P〈0.05）,中药组的作用最突出。各药物组的细胞周期主要阻滞在G2/M期;空白组与各药物组的S期有显著差异（P〈0.05）。48 h,各药物组细胞凋亡与空白组均有差异（P〈0.05）,而各药物组之间没有差异（P〉0.05）。72 h,各药物组细胞凋亡与空白组均有差异（P〈0.05）;各药物组之间亦有差异（P〈0.05）。48、72h各组出现了以G0/G1期比例增高为主的G0/G1期和G2/M期同时阻滞的现象。结论：养阴清肺方能够影响细胞生长周期,减少细胞合成期,诱导G2/M期阻滞,促进肺成纤维细胞的凋亡。     

西黄丸对人肝癌细胞SMMC7721及小鼠宫颈癌细胞U14周期的影响

目的研究西黄丸抑瘤作用对肿瘤细胞周期的影响。方法采用体内体外两方面实验进行。体外实验:将西黄丸浸提液加入人原发性肝癌细胞株SMMC7721培养基中,72h后流式细胞术测定SMMC7721细胞的细胞周期;体内实验:连续10d给予移植性U14荷瘤小鼠模型西黄丸,10d后流式细胞术测定U14细胞的细胞周期。结果在体外实验中,西黄丸(200μl/ml)使SMMC7721中G0-G1期细胞比例显著低于肿瘤细胞对照组,G2-M期增多;在体内实验中,西黄丸高剂量组(0.96g/kg)中也导致U14细胞G0-G1期细胞比例显著低于模型组,G2-M期细胞增多。结论体内、体外研究结果显示西黄丸可特异性地将肿瘤细胞阻滞在G2-M期,提示西黄丸可以通过影响肿瘤细胞周期来发挥抑瘤效应。     

西黄丸含药血清经Wnt信号转导通路细胞周期蛋白D1调控人肺癌干细胞增殖的机制

目的：观察葶苈草颗粒对炎症性肠病（IBD）的治疗作用并探讨其作用机制。方法：选昆明种小鼠,用3%恶唑酮（OXZ）复制小鼠OXZ结肠炎模型。实验分为正常对照、模型对照组（等容蒸馏水）、葶苈草颗粒（1.95,3.9,7.8 g·kg^-1）治疗组、柳氮磺胺吡啶（0.39 g·kg^-1）阳性药对照组,ig每天 1 次,连续治疗4 d。用酶联免疫吸附（ELISA）法测定血清和结肠组织中白细胞介素-10（IL-10）、结肠组织中髓过氧化物酶（MPO）、白细胞介素-1β（IL-1β）、白细胞介素-6（IL-6）、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）的含量,进行疾病活动指数（DAI）评分和病理组织学观察。结果：治疗4 d后,与模型组比较,葶苈草颗粒3.9,7.8 g·kg^-1治疗组,血清和结肠组织IL-10含量明显升高（P<0.05或P<0.01）,结肠组织MPO,IL-1β,TNF-α和IL-6含量明显降低（P<0.05或P<0.01）;葶苈草颗粒治疗组总DAI值明显减少（P<0.05或P<0.01）。结论：葶苈草颗粒对OXZ诱导的小鼠实验性肠炎具有较好的治疗作用,其可能通过调节促炎细胞因子IL-1β,TNF-α,IL-6和抑炎细胞因子IL-10之间的平衡,有效减轻实验性结肠炎炎症,从而起到治疗IBD的作用。     

鹿茸多肽对人胶质瘤细胞生长抑制率及细胞周期的影响

目的观察鹿茸多肽对人胶质瘤细胞生长抑制率及细胞周期的影响,探讨鹿茸多肽抑制肿瘤细胞的增殖及调节细胞周期作用的机制。方法在体外传代的培养人胶质瘤细胞(U251)细胞株中加入不同浓度(50、100、200、400、800μg/mL)的鹿茸多肽,诱导培养48 h,镜下观察细胞的形态学变化,MTT法检测鹿茸多肽对肿瘤细胞增殖情况,计算抑制率;流式细胞术(FCM)分析鹿茸多肽,诱导培养肿瘤细胞48 h后,细胞周期变化情况。结果形态学观察表明,与对照组相比,随着药物剂量的增加,实验组细胞密度逐渐降低,细胞间隙逐渐增宽,细胞体积逐渐缩小,细胞内颗粒逐渐增多。MTT法检测结果表明,鹿茸多肽对肿瘤细胞的增殖抑制作用明显,细胞生长抑制率随着剂量增加抑制率逐渐增加,呈现出良好的剂量依赖性。FCM检测表明,肿瘤细胞G0/G1期与S期所占百分比逐渐减少,G2/M期阻滞。48 h均出现凋亡峰,及凋亡细胞群。结论鹿茸多肽对体外培养的人胶质瘤细胞的增殖有抑制作用,并具有量效关系。可使肿瘤细胞阻滞在细胞周期的G2/M期,继而引起的细胞周期阻滞和诱导其凋亡。     

西黄丸调节肿瘤微环境中Treg细胞PI3K/AKT通路的抗肿瘤作用机制研究

目的：研究西黄丸调节肿瘤微环境中Treg细胞PI3K/AKT的表达对Treg细胞增殖的影响,探讨西黄丸抗肿瘤作用机制。方法：采用4T1乳腺癌细胞建立乳腺癌荷瘤小鼠模型,连续灌胃给药14天,剥离肿瘤组织、称重、匀浆,制备单细胞悬液;流式细胞仪（FACS）检测肿瘤微环境中Treg细胞数量;TUNEL染色检测肿瘤微环境中Treg细胞凋亡情况;蛋白质免疫印（Western Blot）检测肿瘤微环境中Treg细胞PI3K、AKT蛋白的表达。结果：与阴性对照组比较,西黄丸治疗组瘤重明显下降,差异具有统计学意义（P＜0.05）;FACS结果显示肿瘤微环境中Treg细胞含量随西黄丸剂量增高而降低;TUNEL染色结果显示肿瘤微环境中Treg细胞凋亡数量随西黄丸剂量的升高而升高;Western Blot结果显示Treg细胞PI3K、AKT蛋白表达随西黄丸剂量的增高而降低。结论：西黄丸通过下调Treg细PI3K/AKT蛋白的表达,能抑制肿瘤微环境中Treg细胞增殖,促进其凋亡,改善肿瘤微环境免疫抑制状态,逆转免疫逃逸,从而抑制肿瘤生长。     

软坚消瘤片药物血清对乳腺癌MCF-7细胞生长的机制研究

目的：通过观察软坚消瘤片药物血清对乳腺癌MCF-7细胞的芳香化酶和雌激素受体基因的表达、细胞增殖周期及细胞凋亡的影响,探讨软坚消瘤片治疗乳腺肿块性疾病的可能机制。方法：制备软坚消瘤片含药动物血清,以体外培养的MCF-7细胞为研究对象,以qRT-PCR法检测乳腺癌细胞芳香化酶（CYP19）及雌激素受体（ER）mRNA表达水平;流式细胞术（FCM）测定细胞增殖周期和凋亡水平;MTS实验测定细胞生长曲线。结果：与空白对照组比较,含药血清组作用细胞24h后能明显抑制乳腺癌细胞株MCF-7的CYP19mRNA、ERmRNA表达水平,表达水平分别降低0.32和0.09倍;药物血清作用48h后S期和G2/M期细胞所占比例降低,尤以G2/M期最为显著,相应的G0/G1期细胞增加,药物血清抑制了细胞增殖的正常进行;凋亡实验示细胞早期凋亡率增加,药物血清组总体凋亡率高于对照组;药物血清作用细胞48h以后细胞生长曲线幅度开始明显低于对照组,在96h时抑制效果最明显。结论：软坚消瘤片药物血清影响乳腺癌MCF-7细胞的雌激素合成及其作用发挥,同时抑制一定时段的细胞生长。     

扶正抑瘤颗粒对乳腺癌核转录因子-kB及细胞周期的影响

目的：研究扶正抑瘤颗粒(FYK)对乳腺癌肿瘤组织核转录因子-κB(NF-κB)和细胞周期的影响及其临床意义。方法：55例乳腺癌患者，随机分为治疗组和对照组，两组均用常规化疗，治疗组同时口服FYK，1个月后取肿瘤组织用流式细胞仪检测NF-κB的表达情况及肿瘤细胞周期各时相的比例。结果：治疗组与对照组比较，NF-κB的表达明显提高(P＜0．01)；G0／1期细胞比例明显升高(P＜0．01)，S期细胞比例及细胞增殖指数(P1)明显下降(P＜0．01)。结论：FYK可提高乳腺癌组织NF-κB表达水平；能升高G0／1期细胞比例，降低S期细胞比例及PI值，对乳腺癌患者的预后起积极作用。     

扶正抑瘤颗粒对乳腺癌核转录因子-kB及细胞周期的影响

目的:研究扶正抑瘤颗粒(FYK)对乳腺癌肿瘤组织核转录因子-κB(NF-κB)和细胞周期的影响及其临床意义。方法:55例乳腺癌患者,随机分为治疗组和对照组,两组均用常规化疗,治疗组同时口服FYK,1个月后取肿瘤组织用流式细胞仪检测NF-κB的表达情况及肿瘤细胞周期各时相的比例。结果:治疗组与对照组比较,NF-κB的表达明显提高(P<0.01);G_(0/1)期细胞比例明显升高(P<0.01),S期细胞比例及细胞增殖指数(PI)明显下降(P<0.01)。结论:FYK可提高乳腺癌组织NF-κB表达水平;能升高G_(0/1)期细胞比例,降低S期细胞比例及PI值,对乳腺癌患者的预后起积极作用。     

羟基喜树碱对猪视网膜色素上皮细胞增殖抑制作用的实验研究

目的探讨10-羟基喜树碱（hydroxycamptothecin,HCPT）对培养的猪视网膜色素上皮（retinalpigment epithelium,RPE）细胞的抑制作用,并研究其发挥作用的适宜浓度。方法建立体外猪RPE细胞培养体系,应用四甲基偶氮唑盐（MTT）比色法测定对照组及不同浓度（0.75、1.5、3.0、6.0 mg/L）HCPT分别作用第24 h、72 h、120 h时的光密度,计算其对RPE细胞的增殖抑制率;采用流式细胞术检测不同浓度不同时间作用后,各分裂周期RPE细胞的数量;通过倒置相差显微镜和电子显微镜技术观察RPE细胞形态及超微结构的变化,并用台盼蓝排除检测法计算活细胞百分比。结果 0.75 mg/L实验组在HCPT作用后第1天与对照组比较差异无统计学意义;其余各时间段各组与相应对照组比较差异均有统计学意义（P〈0.01）;抑制作用与药物浓度、作用时间均呈正相关（药物浓度及作用时间与RPE细胞增殖抑制率呈明显的线性关系）。终浓度为1.5 mg/L的HCPT作用72 h后,RPE细胞的增殖抑制率达47.95%,而细胞活性〉85%,细胞形态及超微结构改变轻微,RPE细胞的S期细胞增加了7.52%,G2/M期细胞减少。结论 HCPT对RPE细胞的抑制作用呈剂量-时间依赖性;终浓度为1.5 mg/L的HCPT对RPE细胞的增殖具有明显的抑制作用,且细胞毒性小。     

西黄丸含药血清对三阴性乳腺癌细胞株MDA-MB-231细胞增殖、凋亡、迁移的影响

目的:研究西黄丸含药血清对三阴性乳腺癌细胞株MDA-MB-231细胞增殖、凋亡、迁移以及对环氧化酶2(COX-2)转录的影响,以期探讨西黄丸对三阴性乳腺癌细胞的作用。方法:大鼠灌胃给药制备西黄丸含药血清,实验设置大鼠空白血清组和西黄丸含药血清组,以含药血清干预三阴性乳腺癌细胞株MDA-MB-231,MTT法检测细胞增殖,流式细胞术检测细胞凋亡,细胞划痕实验检测细胞迁移,RT-PCR法检测COX-2、TNF-αmRNA表达。结果:西黄丸含药血清可以抑制MDA-MB-231细胞增殖,可以促进MDA-MB-231细胞凋亡,并且西黄丸含药血清可以降低MDA-MB-231细胞划痕愈合率,可以降低在炎性环境下MDA-MB-231细胞中COX-2 mRNA表达(P<0.05)。结论:西黄丸含药血清可以有效地抑制MDA-MB-231细胞增殖,促进其细胞凋亡,可能抑制细胞迁移,并且可以减少炎性因子的转录。