皮下注射神经生长因子对大鼠背部皮瓣存活的实验研究

目的探究NGF对皮瓣微循环血流量的影响作用。方法选20只SD大鼠,随机分成两组,在其背部形成2cm×8cm的随意皮瓣。实验组皮下注射神经生长因子（NGF）,对照组注射生理盐水,激光多普勒仪测量大鼠背部皮瓣的微循环血流量,术后7d计算皮瓣存活面积。结果①术后7d处死大鼠,实验组皮瓣存活面积（7．58±1．48）cm2,大于对照组（5．57±O．69）cm2,统计学有显着性差异。②术后第1、3天实验组大鼠背部皮瓣蒂部、中部、尾部微循环血流量均高于对照组,有统计学差异。结论大鼠背部皮瓣局部皮下注射NGF能增加皮瓣微循环血流量,能够提高大鼠背部随意皮瓣的存活面积。     

bFGF-FG对大鼠随意皮瓣早期断蒂的影响

目的探讨碱性成纤维细胞生长因子-生物蛋白胶（bFGF—FG）对大鼠随意皮瓣早期断蒂后成活率的影响。方法制备bFGF—FG,将bFGF—FG喷涂于大鼠背部随意皮瓣下方,4d后断蒂,断蒂后10d观察皮瓣成活率、微血管密度,并与单独使用bFGF组进行对比。结果皮瓣成活率bFGF—FG组为（75．6±8．91％,bFGF组为（68.3±9．3）％,对照组为（51．4±11．2）％。微血管血管密度bFGF—FG组为（24．15±6．42）／mm^2,bFGF组为（20．6±4．56）／mm^2,对照组为（13．95±5．18）／mm^2。经统计学分析,各组问差异存在显著性。结论bFGF—FG能够更好地提高随意皮瓣早期断蒂的成活率。     

表皮生长因子联合地塞米松防治大鼠超长随意型皮瓣缺血坏死的实验研究

目的研究联合应用表皮生长因子（EGF）和地塞米松防治大鼠超长随意皮瓣缺血坏死的效果及探讨超长随意皮瓣远端缺血坏死的机制。方法将40只Wistar大鼠随机分为对照组、EGF组、地塞米松组和EGF联合地塞米松治疗组,比较4组大鼠皮瓣成活的情况。结果 4组皮瓣成活率两两比较,地塞米松组与EGF组差异无统计学意义（P〉0.05）,其他各组间差异有统计学意义（P〈0.01）。结论 EGF与地塞米松都能促进皮瓣成活,联合应用促进皮瓣成活的效果更佳。     

表皮生长因子联合地塞米松防治大鼠超长随意型皮瓣缺血坏死的实验研究

目的:研究联合应用表皮生长因子(EGF)和地塞米松防治大鼠超长随意皮瓣缺血坏死的效果及探讨超长随意皮瓣远端缺血坏死的机制.方法:将40只Wistar大鼠随机分为对照组、EGF组、地塞米松组和EGF联合地塞米松治疗组,比较4组大鼠皮瓣成活的情况.结果:4组皮瓣成活率两两比较,地塞米松组与EGF组差异无统计学意义(P>0.05),其他各组间差异有统计学意义(P<0.01).结论:EGF与地塞米松都能促进皮瓣成活,联合应用促进皮瓣成活的效果更佳.     

辛伐他汀对大鼠随意皮瓣成活的影响及其可能的作用机制

目的 探讨辛伐他汀对大鼠随意皮瓣成活的影响及其可能的作用机制.方法 取体质健康而且清洁的雄性SD大鼠112只,随机分为研究组和对照组.在其背部进行随意皮瓣制作的模型之后,研究组的大鼠从腹腔进行5 mg/kg的辛伐他汀注射,对照组通过腹腔进行等容积的生理盐水注射,1次/d.7 d之后,对两组皮瓣是否成活进行观察并对成活率进行计算,使用光镜对两组皮瓣的形态和病理情况进行观察,使用免疫组化法计算微血管近、中、远三段的密度(MVD).结果 手术7 d之后,研究组比较对照组的皮瓣成活率和皮瓣中段MVD都要高(P＜0.05),研究组和对照组皮瓣比较血管再生能力要强.结论 辛伐他汀可以增加高随意皮瓣的成活率,促进血管的新生能力.     

雌激素提高皮瓣存活面积的实验性研究

目的研究不同剂量雌激素对皮瓣存活面积的影响,并探讨其作用机制。方法新西兰白兔30只,随机分为A、B、O三组。在兔背作超长型皮瓣,其蒂部注射雌激素,三组间剂量不同。术后检测皮瓣血管内皮生长因子（VEGF）、一氧化氮（NO）、皮瓣存活面积（S）等指标。结果A组、B组皮瓣的NO、VEGF、S较O组增加;皮瓣存活面积S与VEGF表达、NO含量之间呈正相关。结论雌激素处理可使皮瓣VEGF表达上调、NO含量增加。     

胃宁胶囊对胃溃疡大鼠胃黏膜EGF及EGFR mRNA表达的影响

目的:探讨胃宁胶囊抗溃疡的作用机理.方法:采用大鼠幽门结扎法致胃溃疡模型;RT-PCR法观察胃宁胶囊对大鼠胃黏膜表皮生长因子(EGF)及表皮生长因子受体(EGFR) mRNA表达水平的影响.结果:胃宁胶囊能提高胃黏膜组织中EGF及EGFR mRNA的表达水平.结论:胃宁胶囊对胃黏膜的保护作用与提高胃黏膜组织中EGF及EGFR mRNA表达水平有关.     

随意皮瓣在颜面部皮肤缺损修复中的应用体会

我科自2004年3月～2007年7月，应用不同类型随意皮瓣修复颜面部皮肤缺损80例（112个创面），术后效果较为理想，报道如下。     

三七总皂苷对大鼠腹部游离皮瓣存活的影响

目的观察三七总皂苷对大鼠腹部游离皮瓣氧化应激、血液流变学以及皮瓣存活率的影响,初步探讨三七总皂苷影响皮瓣存活的可能机制。方法健康清洁雄性SD大鼠144只,随机平均分为假手术组(SO组),缺血再灌注组(IR组)和三七总皂苷干预组(PNS组)。建立大鼠右下腹部游离皮瓣模型。在术前30 min分别给予生理盐水(SO组、IR组)、三七总皂苷注射液(PNS组)腹腔注射,一次性给药。术后检测各组大鼠血液中丙二醛(MDA)含量、超氧化物歧化酶(SOD)活性及血液流变学指标,并观察皮瓣成活率。结果 IR组、PNS组于皮瓣组织再灌注后(即血管吻合成功后)4、8、24 h 3个时点,MDA含量均高于SO组,SOD活性及血液流变学指标则低于SO组(P<0.05);同时,PNS组在这3个时点的各项指标又优于IR组(P<0.05)。皮瓣成活率为:缺血再灌注组<三七总皂苷组<假手术组(P<0.01)。结论三七总皂苷能通过改善微循环和提高机体抗氧化的能力,促进皮瓣成活。     

Protective effect of citicoline on random flap survival in a rat mode

BackgroundMedical therapy for flap survival has been extensively investigated. In this study, we explored the effect of citicoline (CDP-choline, CDPC), used for clinical treatment of cerebral trauma, on random skin flap survival in rats.Materials and methodsSixty rats were divided into three groups: low-dose (CDPC-L), high-dose (CDPC-H), and control. The CDPC-L and CDPC-H groups were intraperitoneally injected with 100 mg/kg and 300 mg/kg CDPC every day, respectively; the control group was injected with an equivalent volume of normal saline. The survival region was assessed on the 7th day after the flap operation. The microvascular density and neutrophil density were measured by hematoxylin and eosin staining. Lead angiography was used to detect angiogenesis, and laser Doppler was used to detect blood perfusion. Expression levels of vascular endothelial growth factor (VEGF), interleukin (IL)-1β, IL-6, tumor necrosis factor (TNF)-α, Toll-like receptor (TLR) 4, and nuclear factor kappa B (NF-κB) were detected by immunohistochemistry. Malondialdehyde and superoxide dismutase were used to determine the lipid peroxidation level.ResultsThe average survival region of the flap was significantly larger in the CDPC-H group than in CDPC-L and control groups, with less ischemic necrosis. VEGF expression, microvascular density, angiogenesis, blood perfusion, and superoxide dismutase in the flap were higher in the CDPC-H group than in the CDPC-L and control groups. In addition, levels of neutrophil density, IL-1β, IL-6, TNF-α, TLR4, NF-κB, and malondialdehyde decreased significantly in the CDPC-H group.ConclusionHigh-dose CDPC injection after a random flap operation is beneficial for flap survival.     

表皮生长因子受体在胸腺瘤中的表达

目的探讨表皮生长因子受体(EGFR)在胸腺瘤中的表达及其意义。方法免疫组化SP法检测63例患者胸腺瘤(胸腺瘤组)和20例胸腺增生(胸腺增生组)组织中EGFR的表达,分析胸腺瘤EGFR表达与其病理分级及临床分期的相关性。结果胸腺瘤组EGFR表达阳性率高于胸腺增生组(52.4%vs.20.0%)(P<0.05)。直径>6cm的胸腺瘤EGFR表达阳性率高于直径≤6cm的胸腺瘤(P<0.05)。胸腺瘤EGFR表达水平与病理分级及临床分期呈正相关。胸腺瘤的预后和临床分期相关。结论 EGFR可能在胸腺瘤的进展和预后中发挥重要作用。EGFR可能成为胸腺瘤新的治疗靶点和预后的标志物。     

腺病毒载体介导VEGF cDNA和bFGF cDNA联合治疗缺血皮瓣的实验研究

目的 探讨以腺病毒载体局部应用血管内皮生长因子(Ad-VEGF)和碱性成纤维细胞生长因子(Ad-bFGF)基因治疗对大鼠缺血皮瓣生存的影响.方法 50只SD大鼠随机分成5组,每组10只.在其背部形成8 cm ×2 cm的缺血皮瓣.于皮瓣远端皮下分别注射Ad-VEGF和Ad-bFGF(目的基因组), Ad-VEGF(基因对照组),Ad-bFGF(基因对照组) Ad-GFP(绿色荧光蛋白基因对照组),PBS(磷酸盐缓冲液空白对照组).48 h后按原设计掀起皮瓣并原位缝合,术后7 d,测量皮瓣的成活面积及免疫组化,组织学检查等.结果 目的基因组皮瓣成活面积比及单位面积微血管密度与其它4个对照组有显著性差异.免疫组化目的基因组毛细血管周围VEGF、bFGF沉积.结论 以腺病毒为载体局部应用VEGF和bFGF基因能增加缺血皮瓣的成活面积.     

黄芪提取物联合表皮生长因子治疗大鼠皮肤烫伤的实验研究

目的：探讨黄芪提取物联合表皮生长因子对皮肤烫伤愈合的疗效。方法：Wistar大鼠80只,每只背部造成2处直径2.8cm深Ⅱ度烫伤创面。将大鼠随机分为黄芪提取物联合表皮生长因子治疗组（联合组）、表皮生长因子治疗组（EGF组）、黄芪提取物治疗组（黄芪组）和生理盐水对照组（对照组）,每组20只,观察伤后愈合情况。烫伤后第2、5、7、10、14、18、21天计算创面愈合率;第7、14、18天取大鼠创面皮肤采用羟脯氨酸测试盒测定烫伤创面羟脯氨酸含量;第7、14、21天取大鼠创面皮肤采用Ⅷ因子免疫组织化学染色计算微血管密度;第14、21天取大鼠创面皮肤做病理学分析。结果：联合组愈合时间显著小于其它组（P〈0.05,P〈0.01）,EGF组和黄芪组愈合时间显著小于对照组（P〈0.05）;联合组于烫伤后10、14、18、21d和7、14d创面愈合率、创面微血管密度明显大于其它组（P〈0.05,P〈0.01）,EGF组和黄芪组创面愈合率以及创面微血管密度显著大于对照组（P〈0.05）;联合组创面组织羟脯氨酸水平在伤后第7、14天均显著高于其他组（P〈0.05,P〈0.01）,EGF组和黄芪组创面组织羟脯氨酸水平显著高于对照组（P〈0.05）。结论：黄芪提取物联合表皮生长因子能显著促进皮肤烫伤的愈合,缩短愈合时间。     

腺病毒介导VEGF121基因治疗大鼠缺血皮瓣的实验研究

目的探讨腺病毒为载体的血管内皮细胞生长因子（Ad-VEGF121）基因治疗对大鼠缺血皮瓣成活的影响。方法30只SD大鼠，随机分成3组，在其背部形成8cm×2cm随意型皮瓣。于皮瓣远端皮下分别注射Ad-VEGF121（10只目的基因组），Ad-GFP（10只绿色荧光蛋白对照基因组），PBS（10只磷酸盐缓冲液空白对照组）。48h后按原设计掀起皮瓣并原位缝合，术后7d，测量皮瓣的成活面积，并采集组织行免疫组化、组织学检查等。结果3组中Ad-VEGF121组皮瓣成活面积比及单位面积微血管密度与其他2个对照组有显著性差异。免疫组化目的基因组毛细血管周围VEGF。沉积。结论腺病毒为载体Ad-VEGF121基因能增加缺血皮瓣的成活面积。     

二甲双胍对人肝癌Hep-G2细胞表皮生长因子及其受体表达的影响

目的 观察二甲双胍对人肝癌Hep-G2细胞表皮生长因子（EGF）及其受体（EGFR）的影响.方法 体外培养人肝癌Hep-G2细胞,用不同浓度二甲双胍进行干预,3-（4,5-二甲基噻唑-2）-2,5-二苯基四氨唑溴盐法检测二甲双胍对Hep-G2细胞生长的影响;Hoechst 33342染色荧光显微镜观察细胞的形态学变化,流式细胞术观察细胞凋亡;蛋白质印迹法（Western blot）检测EGF、EGFR的表达.结果 二甲双胍对肝癌细胞的活性具有明显的抑制作用,且呈剂量依赖性;以10 mmol/L作用终浓度抑制效果最明显,其48 h的细胞吸光度为（0.477 ±0.025）,与对照组（0.602±0.026）比较差异有统计学意义（P＜0.01）;逐渐增加二甲双胍的作用浓度,细胞凋亡率随之逐渐增加,药物组细胞凋亡率分别为（10.76±0.96）％、（20.77±1.16）％,与对照组（5.21±0.13）％相比差异均有统计学意义（P＜0.05）;Hoechst33342染色可见明显的细胞皱缩,核染色质浓缩,核碎裂等凋亡形态学变化;Western blot结果显示,EGF及其受体蛋白的表达随着二甲双胍作用浓度的增加而逐渐下调.结论 在体外,二甲双胍能够抑制人肝癌Hep-G2细胞增殖及诱导细胞凋亡,其抗肿瘤机制可能与细胞内EGF及EGFR表达下调有关.     

Time-dependent alteration of epidermal growth factor receptor in rat stomach by ethanol feeding

This study investigated the time-dependent effects of ethanol (EtOH) feeding on epidermal growth factor binding and epidermal growth factor-mediated functions in the stomach. Adult male rats were fed either an isocaloric control or EtOH-containing liquid diet (36% total calories as EtOH) for 2, 4 and 6 weeks. At the end of each feeding period, animals were sacrificed and the stomach was dissected for the sample preparation. EtOH caused a time-dependent alteration (r = 0.89) of the ¹²⁵I-epidermal growth factor binding to the gastric mucosal membrane (% control: week 2, 114%; week 4, 64%^* and week 6, 45%^*, n = 5, ^*P < 0.05). Protein kinase analysis also showed that EtOH caused a time-dependent decrease of epidermal growth factor-stimulated autophosphorylation of epidermal growth factor receptor protein (180 kDa) during three feeding periods. Western blot analysis, using anti-tyrosine phosphorylated epidermal growth factor receptor (active form) antibody, revealed a major immunoreactive protein band (180 kDa) in all samples pre-incubated with 1 μM epidermal growth factor. Consistent with data from kinase analysis, treatment of EtOH decreased the immunoreactivity of the active form of epidermal growth factor receptor (180 kDa) in the stomach. In conclusion, EtOH feeding caused a time-dependent alteration of epidermal growth factor receptor in the stomach, which may be one of the mechanisms underlying the gastric pathology associated with alcohol abuse.     

表皮生长因子含漱液中mEGF活性及热稳定性的实验研究

目的检测表皮生长因子(mEGF)在口腔局部用药制剂中活性和热稳定性.方法采用四甲基偶氮唑盐微量酶反应比色法.结果mEGF在对不同温度活性比较中作t检验,各组间无统计学差异.结论表皮生长因子是一种高度生物活性多肽物质,因结构紧密,对热比较稳定,是所有细胞生长因子中唯一能耐受热的一种生物活性蛋白质,在加入朵贝氏溶液中无抑制活性作用.     

表皮生长因子受体表达、肿瘤残留与鼻咽癌疗效的关系

目的 探讨同期放化疗治疗鼻咽癌表皮生长因子受体(EGFR)的表达和肿瘤残留情况对疗效和预后判断的价值.方法 200例鼻咽癌(NPC)患者应用免疫组织化学技术检测EGFR在癌组织中的表达,并分析鼻咽部及颈部肿瘤残留情况.结果 EGFR在200例NPC中阳性表达160例(80.0%),阴性表达40例(20.0%);EGFR阳性组和阴性组3年总生存率(OS)、无瘤生存率(DFS)、无区域复发生存率(LRFS)、无远处转移生存率(DMFS)分别为72.3%、63.6%、72.2%、63.8%和90.0%、90.0%、90.0%、90.0%(X2=3.95,X2=4.12,X2=3.98,X2=4.15,P＜0.05);有残留者局部复发率、远处转移率26.6%、32.5%明显高于无残留者8.1%、18.1%(X2=4.75,X2=4.94,P＜0.05);在多因素分析中,EGFR高表达与无病生存率(DFS)和总生存率(OS)显著相关(r=6.457,P＜0.05).结论 EGFR在HNC中表达率较高,过度表达者呈现不良预后的趋势;放射治疗后肿瘤残留可作为判断预后的一个指标.