脂质胞壁酸延迟预适应对大鼠供心停搏/复灌性损伤的影响

目的：探讨脂质胞壁酸（LTA）诱导的延迟预适应对大鼠供体心脏停搏/复灌性损伤的影响。 方法： 采用心脏Langendorff灌流模型，腹腔注射LTA后24 h，观察心脏停搏保存4 h后再灌注30 min及60 min时心脏功能及再灌注末灌流液中心肌型肌酸激酶同功酶（CK-MB）、乳酸脱氢酶（LDH）及一氧化氮（NO）含量，并用dUTP缺口末端标记（TUNEL）法检测左室心肌细胞凋亡。 结果： LTA预适应组再灌注30 min和60 min时心脏的冠脉流量，左室发展压及压力最大上升和下降速率等参数值显著大于对照组（均P<0.01）。LTA预适应组灌流液中NO含量明显大于对照组（P<0.01），而CK-MB和LDH的水平和心肌凋亡指数小于对照组（均P<0.01）。一氧化氮合酶抑制剂L-NG-硝基精氨酸甲酯（L-NAME）能取消LTA预适应的保护效应。 结论： LTA预适应能显著改善供体心脏停搏/再灌注后的心功能，减少心肌坏死和细胞凋亡，内源性NO在介导LTA预适应中发挥关键作用。     

双歧杆菌的脂磷壁酸对小鼠腹腔MΦ的激活作用

目的 探讨青春型双歧杆菌的脂磷壁酸（LTA）对MΦ功能的影响。方法 将LTA注射于小鼠腹腔，分别采用中性红吞噬试验，MTT法，小鼠胸腺细胞增殖法和ELISA法，检测MΦ的吞噬能力，能量代谢水平，IL－1的活性及IL－6含量。结果 LTA注射组小鼠腹腔MΦ的吞噬能力，能量代谢水平，IL－1活性及IL－6含量均显著高于对照组（P＜0．01）。结论 双歧杆菌的LTA能激活MΦ，提高其吞噬能力和能量代谢水平，同时可分泌多种的具有杀瘤作用的活性因子。     

双歧杆菌脂磷壁酸激活巨噬细胞活性机制的研究

目的：从信号分子PKC和细胞内游离Ca^2 ([Ca^2 ]i)这一途径探索青春型双歧杆菌的脂磷壁酸（lipoteichoic acid,LTA)激活小鼠腹腔巨噬细胞的机制，同时观察巨噬细胞之间缝隙连接通讯（GJIC）的变化。方法：γ-^32P ATP磷酸转移法测定巨噬细胞总PKC活性；激光共聚焦显微镜检测[Ca^2 ]i浓度的变化；激光漂白后荧光恢复技术（FRAP）观察GJIC的状态。结果：（1）LTA能明显提高巨噬细胞总PKC活性，呈剂量依赖性；（2）LTA可显著升高巨噬细胞[Ca^2 ]i的水平，并且EDTA和维拉帕米处理组、肝素和普鲁卡因处理组以及EDTA、维拉帕米、肝素和普鲁卡因处理组巨噬细胞内[Ca^2 ]i亦升高，但明显低于对照组（P＜0．01）。（3）巨噬细胞被LTA刺激后，其平均荧光恢复率明显高于对照组（P＜0．01）。结论：LTA可通过提高PKC活性，升高[Ca^2 ]i的水平以及增强GJIC的功能来激活巨噬细胞。     

双歧杆菌脂磷壁酸对结肠癌细胞Toll样受体表达的影响

目的通过研究双歧什菌脂磷壁酸（lipoteichoic acid，LTA）对结肠癌细胞中Toll样受体（TLR）表达的影响，探讨TLR在启动双歧杆菌LTA抗肿瘤信号转导通路中的作用。方法用RT-PCR检测结肠癌细胞HCT-116经双歧杆菌LTA处理前后11R的表达变化。结果结肠癌HCT-116细胞有TLR的基础表达，且经LTA处理后受体的表达增强，呈剂量依赖件。结论双歧杆菌LTA可上调TLR的表达，提示双歧杆菌LTA诱导肿瘤细胞凋亡的信号转导途径可能由TLR启动。     

大肠杆菌重组LTKA63突变体和LTB黏膜免疫佐剂活性的研究

目的构建大肠杆菌不耐热肠毒素A亚单位（heat-labile enterotoxin subunit A,LTA）突变体LTKA63及B亚单位（heat-labile enterotoxin subunit B,LTB）基因原核表达系统,确定rLTKA63和rLTB黏膜免疫佐剂活性.方法采用高保真PCR从大肠杆菌44815株基因组DNA中扩增LTA和LTB基因,采用定位突变技术构建LTKA63突变体,T-A克隆后测序.构建LTKA63和LTB原核表达载体,采用SDS-PAGE鉴定表达产物.采用三色流式细胞术确定rLTKA63激活T细胞途径,以GM1-ELISA检测rLTB结合牛GM1的能力.建立幽门螺杆菌SS1株小鼠感染模型,分别以幽门螺杆菌（Hp）重组尿素酶B亚单位（rUreB）和黏附素（rHpaA）为抗原,分别检测rLTKA63和rLTB对rUreB和rHpaA的免疫保护增强作用.结果从大肠杆菌44815株DNA模板中扩增获得预期大小的LTA和LTB基因条带.LTA基因定位突变后获得序列正确的LTKA63突变体.rLTKA63和rLTB表达量分别占细菌总蛋白的30%和20%左右.LTKA63作用后TH1和TH2细胞较阴性对照组分别增加19.9%和42.3%,GM1-ELISA结果证实rLTB能与牛GM1结合.33.3%（4/12）rUreB和41.7%（5/12）rHpaA免疫小鼠胃黏膜标本中分离出幽门螺杆菌,且rUreB和rHpaA特异性S-IgA检测结果均为阴性.rUreB或rHpaA加用rLTKA63或rLTB免疫后,小鼠胃黏膜标本中幽门螺杆菌分离阳性率下降为16.7%～25.0%（P＞0.05）,rUreB和rHpaA特异性S-IgA阳性率可达41.6%～58.3%（P＜0.01）.结论成功地构建了LTKA63和LTB原核表达系统,所表达的rLTKA63和rLTB均具有较强的黏膜免疫佐剂活性.     

鼻咽癌患者树突状细胞对EBV特异性细胞毒T细胞的免疫反应

目的：用负载EB病毒抗原LMP-2表位肽段的鼻咽癌患者树突状细胞（DC）诱导自身CD8^＋T细胞，观察其细胞毒性T细胞的免疫应答能力。方法：在体外分离并诱导成熟HLA—A2基因型鼻咽癌患者自身的DC，分别负载EB病毒抗原LMP-2的HIA—A2限制型两个表位肽段CLGGLLTMV（CLG）和LTAGFIFL（LTA）后，诱导自身CD8^＋T细胞，培养2周后，运用酶联免疫斑点法（Elispot）和HLA-肽四聚体法（Tetramer）检测诱导后T细胞的免疫应答情况。结果：经DC抗原呈递后分泌IFN-γ的CLG和LTA特异性CD8^＋T细胞数，分别为（42．67±33．79）个／孔和（25．67±18．25）个／孔，而呈递前分别为（2．67±1．97）个／孔和（5．33±1．86）个／孔。两者IFN-γ^＋CD8^＋T细胞数均有明显增加（P〈0．05）。CLG和LTA肽段特异性细胞毒性T细胞（CTL）的中位数在呈递前分别为0．135％和1．14％；呈递后则为1．045％和1．945％。两者较呈递前均明显增加（P〈0．05）。结论：负载EB病毒抗原LMP-2表位肽段的DC诱导鼻咽癌患者自身CD8^＋T细胞，可产生特异性CTL，对鼻咽癌患者的免疫治疗具有潜在的应用价值。     

金黄色葡萄球菌脂磷壁酸纯化及其抗肿瘤的初步研究

目的从金黄色葡萄球菌细胞壁中提取脂磷壁酸(LTA),研究其抗肿瘤活性。方法冷酚法提取LTA,经SepharoseCL4B纯化,检测LTA毒性;观察荷瘤小鼠注射LTA后的生命延长率及抑瘤率,NK细胞活性,TNFα、IFNγ分泌。结果LTA未见明显毒性,能提高荷瘤小鼠生命延长率;明显抑制实体瘤生长;提高NK细胞活性;诱导分泌多量TNFα及IFNγ。结论LTA可通过提高NK细胞活性,诱导分泌多量TNFα及IFNγ等细胞因子发挥抗肿瘤活性。     

男性不育患者细胞因子水平与抗精子抗体、精液参数的关系

目的：探讨患有慢性前列腺炎（CP）的男性不育患者前列腺液（EPS）、血清、精浆中细胞因子水平及血清和精浆中抗精子抗体（AsAb）对男性生育能力的影响。方法：对60例男性不育患者和30例正常生育者进行前列腺液（EPS）常规、精液主要参数检测,采用酶联免疫吸附试验（ELISA）检测EPS、血清、精浆中IL-2、IL-6、TNF-α及血清AsAb,采用免疫珠试验（IBT）法检测精浆AsAb,分析三种细胞因子与AsAb的产生、男性不育相关因素的关系。结果：伴有CP不育患者的EPS、精浆中细胞因子（IL-2、TNF-α、IL-6）的水平明显高于对照组（P〈0.001）,同时AsAb的阳性率也高于正常对照（P〈0.05）;不育组中精浆AsAb阳性组的精子活率、a＋b级精子百分率均明显低于精浆AsAb阴性组（P〈0.05）,精浆AsAb阳性组精浆中的TNF-α水平明显高于精浆AsAb阴性组（P〈0.05）,精浆TNF-α与血清AsAb阳性率存在正相关关系（r=0.312,P〈0.05）。结论：慢性前列腺炎患者来自EPS中的细胞因子对精液主要参数有影响,并与血清及精浆中AsAb的产生有关,是导致男性不育的原因之一。     

慢性前列腺炎患者EPS中细胞因子测定的临床意义

目的：探讨前列腺液（EPS）中自细胞介素-1β（IL-1β）、白细胞介素-2（IL-2）、白细胞介素-10（IL—10）及肿瘤坏死因子-α（TNF-α）水平与不同类型慢性前列腺炎患者之间的关系。方法：应用放射免疫分析（RIA）对86例慢性前列腺炎患者EPS中IL-1β、IL-2、IL-10、TNF-α含量进行了检测。结果：慢性前列腺炎组IL-1β、IL-2、TNF-α浓度均明显高于对照组（P均〈0．05或0．01），IL-10浓度明显低于对照组（P〈0．01）。慢性细菌性前列腺炎（CBP）组和慢性非细菌性前列腺炎／慢性骨盆疼痛综合征（CPPSⅢA）组EPS中IL-1β、TNF-α浓度明显高于慢性非细菌性前列腺炎／慢性骨盆疼痛综合征（CPPSⅢB）组（P〈0．05或0．01），IL-10浓度明显低于CPPSⅢB（P〈0．01）。结论：EPS中IL-1β、IL-2、IL-10、TNF-α在慢性前列腺炎的发病过程中起重要作用，检测EPS中的IL-1β、IL-2、IL-10、TNF-α水平是诊断慢性前列腺炎有价值的指标。亦是CPPSⅢ诊断与分型的重要指标。     

LTA分子识别机制与生物学效应的研究进展

膜磷壁酸 (Lipoteichoicacid ,LTA)是革兰阳性菌胞壁的共有成分 ,通过D 丙氨酸这一关键位点发挥黏附机体细胞和免疫刺激作用。机体对LTA的应答和清除涉及到LBP ,CD14等蛋白和单核细胞 ,中性粒细胞等免疫细胞 ,是一个多步骤的复杂过程。血浆脂蛋白 (HDL、LDL、VLDL)有结合LTA的巨大容量。除了引发炎症外 ,LTA还具有抗肿瘤 ,防止组织缺血再灌注损伤等生物学效应。人们正从化学药物和人工合成抗菌多肽等途径寻找抗LTA毒力作用的分子     

人参皂甙Rg3促进自体外周血干细胞移植后免疫重建的临床观察

大剂量放化疗联合自体造血干细胞移植（AHCT）系治疗恶性血液肿瘤及部分实体瘤的新疗法之一。然而，移植后仍有部分病人出现复发和转移。移植后免疫功能的状态及免疫治疗对清除体内残留肿瘤细胞和移植后的抗感染作用都至关重要池。。因此移植后的免疫重建及免疫治疗已成为当今造血干细胞移植领域研究的热点之一。人参皂甙Rg3是从中药人参中提取的一种四环三萜皂甙，能显著促进淋巴细胞的增殖，提高体液免疫的功能、NK细胞和T淋巴细胞亚群的活性水平。本研究利用“扶正祛邪”理论，通过对人参皂甙Rg3（参一胶囊）用于干细胞移植后免疫功能重建的研究，以期找到一种促进免疫重建的新方法，从而提高AHSCT的生存率，降低移植后的复发和感染。     

IL-2对荷瘤小鼠红细胞免疫粘附功能及抑瘤生长的研究

ＩＬ-２对荷瘤小鼠红细胞免疫粘附功能及抑瘤生长的研究曹卉，明建扩，吕厚东（济宁医学院微生物学教研究室济宁２７２１１３）柳青，曹蕊（济宁肿瘤医院放疗科济宁２７２１０３）近几年的研究表明，白细胞介素２（ＩＬ-２）对红细胞免疫功能也有提高作用［１￣３］。本文...     

解放军总医院完成一项红细胞免疫研究

解放军总医院完成一项红细胞免疫研究据中华医学会信息，北京解放军总医院戚晓昆等，为研究多发性硬化（ＭＳ）及格林——巴利综合征（ＧＢＳ）患者是否存在红细胞免疫异常及其与临床的关系，采用红细胞免疫粘附实验方法，对两类患者治疗前后的红细胞免疫功能及循环免疫复...     

结核分枝杆菌含信号肽的Mtb8.4/hIL-12嵌合基因疫苗免疫保护效果研究

目前人类预防结核病的惟一疫苗——卡介苗（BCG）存在着不足，研制新型、有效、安全的预防结核病的疫苗成为国内外学者共同关注的一个重要课题。目前由于大多数结核病DNA疫苗的免疫保护效果尚不如BCG，因此，提高DNA疫苗免疫效力是目前结核病核酸疫苗研究的热点。本研究选择新近从结核杆菌培养滤液（CF）中纯化分离出的一种低分子量蛋白抗原——含信号肽的Mtb8．4（Ms）作为目的抗原，与人白细胞介素12（hIL-12）构建成结核病嵌合基因疫苗，旨在提高MS的免疫效力。     

莫西沙星对脂磷壁酸诱导的人肺泡巨噬细胞凋亡及炎症因子释放的影响

目的 探讨脂磷壁酸(LTA)对人肺泡巨噬细胞(AM)凋亡及炎症因子释放的影响和莫西沙星(MXF)对其反应的抑制作用.方法 收集、提纯及体外培养人AM,LTA刺激4h后,加或不加MXF与其共孵育,于各实验终点用MTT法计算细胞相对活力,光学显微镜观察细胞形态,流式细胞术检测细胞凋亡率,RT-PCR法检测TLR2、IL-1β、IL-8及TNF-α的mRNA水平,ELISA检测IL-8蛋白水平,验证RT-PCR.结果 LTA对AM有细胞毒性,并呈浓度递增关系(P＜0.05),MXF对AM活力无影响(P＞0.05),且可抑制LTA的毒性作用(P＜0.05).LTA促进AM凋亡(P＜0.05),此作用可被MXF抑制(P＜0.05).LTA上调AM中TLR2、IL-1β、IL-8及TNF-α的mRNA表达(P＜0.05),各峰值时间及峰值分别为:12 h(3.56±0.03)、6 h(46.63±7.06)、12 h(28.07±1.24)、3 h(2.34±0.50),上调24 h IL-8蛋白水平,上述效应可被MXF抑制.结论 LTA对人AM有细胞毒性,促进AM凋亡,上调AM中TLR2及炎症因子IL-1β、IL-8及TNF-α的表达,MXF抑制LTA诱导的AM炎症及凋亡,可能在革兰氏阳性菌肺炎中发挥杀菌、抗炎、保护宿主AM免疫活性的作用.     

双歧杆菌表面分子诱导大肠癌细胞分化的研究

目的 研究双歧杆菌表面分子完整肽聚糖（whole peptidoglycan,WPG)、脂磷壁酸（lipo-teichoic acid,LTA)和多糖（polysaccharides,PS)的直接抗肿瘤作用。方法 采用MTT、形态学、流式细胞能的机理。结果 LTA抑制LoVo细胞的生长,将细胞阻滞于G0／G1期。50μg/mlLTA使细胞核与细胞浆向成熟细胞分化,并且降低细胞膜的流动性。LoVo细胞特征性分化酶－肠型碱性磷酸酶的合成亦显著增加。LTA还诱导细胞内钙离子浓度增加,增加的钙离子来自于外钙内流而非内贮钙释放。结论 LTA作用于LoVo细胞后,直接抑制了该细胞的生长,并诱导LoVo细胞向成熟细胞分化,钙离子内流引起的信号传导在此过程中可能发挥了重要的作用。     

肠上皮细胞系诱导骨髓前体细胞的T细胞分化

MaricD…CellImmunol．-1996，172-172～179胸腺细胞的发育依赖于T细胞前体与胸腺基质成分的相互作用。无胸腺裸鼠外周T细胞发育大大减弱。尽管胸腺对T细胞发育有强烈影响，但是T细胞仍能在胸腺外发育，例如小鼠肠上皮细胞内的T淋巴细胞群可能就是一个胸腺外细胞系。该文研究了肠上皮细胞系MODE－K对去除T细胞的骨髓细胞（BM）向T细胞发育和分化的促进作用，同时用成纤维细胞系LTA作对照。自C3H小鼠股鼠分离骨髓细胞，用抗-Thy12和抗-CD4单抗加免补体处理去除T细胞，然后将其与MODE－K细胞或LTA细胭松合培养．回层培养时，将…     

乙肝特异性免疫核糖核酸免疫学活性的观察

免疫核糖核酸（ｉＲＮＡ）的特异性免疫活性，国内外学者已进行了大量研究。鉴于ｉＲＮＡ具有超种属传递免疫功能等特点，已被作为一种免疫调节剂而广泛使用。文献报道，从ＨＢｓＡｇ免疫动物的脾及淋巴结提取的ｉＲＮＡ，可将其免疫活性转移给乙肝患者，临床应用已取得了疗效。但从脾及淋巴结提取ｉＲＮＡ产量低，难以满足临床需要。为此，我们由乙肝疫苗免疫动物的肝脏提取ｉＲＮＡ，采用白细胞粘附抑制试验（ＬＡＩ）、巨噬细胞（ＭΦ）吞噬试验及间接血凝试验，对其免疫活性做了初步观察。１材料和方法１．１ 材料 Ｂａｌｂ／ｃ小鼠体重…     

趋化因子受体3及其配体参与结核病免疫机制和诊断的研究进展

趋化因子（CXCL）9、CXCL10、CXCL11是目前研究较多且与结核免疫密切相关的3种趋化因子，同属于趋化因子受体3(CXCR3)配体。CXCL9、CXCL10、CXCL11主要作用于活化的CD4细胞（CD4+T细胞）、细胞毒性T淋巴细胞（CD8+T细胞）和自然杀伤（NK）细胞，参与结核病发病及免疫过程，在细胞免疫中发挥重要作用。本文总结了近5年CXCL9、CXCL10及CXCL11在结核病免疫机制和检测中作用的相关研究，以期为结核病诊断和疗效评估提供新的方法。     

HSD3B1是一种新的滋养层细胞相关性标记物

滋养层细胞肿瘤和肿瘤样病变与非滋养层细胞肿瘤仅从形态学上鉴别有时很困难。尽管已有一些滋养层细胞肿瘤标志物如hPL、hCG、Mel-CAN、p63、HLA—G、CK18和inhibin-α等，但这些标记物大多数并不特异且有不同程度的缺陷。作者评价了HSD381作为滋养层细胞标记物的价值。该研究共检测了19例胎盘部位结节（PSN）、18例上皮样滋养细胞肿瘤（ETT）、9例巨大胎盘结节（EPS）、14例胎盘部位滋养细胞肿瘤（PSTT）、35例绒癌、86例宫颈鳞状细胞癌、16例宫颈腺癌、63例子宫内膜癌、84例肺癌（鳞癌41例、腺癌43例）和70例乳腺浸润性导管癌中HSD381的表达。结果发现HSD381高度表达于合体滋养层细胞及正常胎盘和种植部位的中间滋养层细胞，而细胞滋养层细胞不表达。在所有正常胎盘、绒癌、PSTT、ETT、PSN和EPS中均有HSD381表达，