缺血后处理对抗大鼠离体心脏缺血再灌注损伤及其作用机制

目的： 研究缺血后处理（postconditioning）对抗大鼠离体心脏缺血再灌注损伤及其作用机制。方法：采用SD大鼠心肌缺血/再灌注模型，并于再灌注一开始即给予3次全心停灌30 s，再灌30 s处理作为缺血后预处理。记录心肌收缩功能指标，以Even’s blue-TTC法监测心肌梗死范围，并对心律失常严重程度进行定量分析。结果：缺血后处理组左室峰压（LVSP）、最大左室收缩速率（+dp/dt_max）以及心率明显高于缺血对照组。缺血后处理可明显缩小心肌梗死范围（22.97%±3.96% vs 缺血对照组 44.30%±13.61%，P<0.01）。观察复灌10 min时心律失常评分发现，缺血后处理组明显低于缺血对照组。缺血后处理组和缺血预处理组具有类似的心肌保护作用。5-HD组LVSP和+dp/dt_max低于缺血后处理组，心律失常评分增高，心肌梗死范围扩大。结论: 缺血后处理对大鼠缺血再灌注损伤具有心脏保护作用，其作用机制可能是部分通过激活线粒体ATP依赖性钾离子(mitoK_ATP)通道起作用。     

SHR心肌细胞内钙离子浓度改变与左室肥厚和功能的关系

目的:探讨自发性高血压大鼠(SHR)心肌细胞内钙离子浓度的动态演变规律及其与左室肥厚和功能的相互关系。方法:应用Ca²⁺荧光指示剂Fura-2/AM分别测定了10周龄、22周龄、34周龄SHR心肌细胞内Ca²⁺浓度以及导管法测定了大鼠心功能,并以同龄京都-Wistar(WKY)大鼠作对照。结果:各周龄SHR收缩压(SBP)、心肌细胞内Ca²⁺浓度([Ca⁺]_i)、左室重量/体重(LVM/BW)均明显高于同龄正常血压WKY大鼠,22周龄SHR左室压力最大下降速率(-dp/dt_max)低于、左室松弛时间常数(τ)长于同龄WKY大鼠,34周龄SHR±dp／dt_max和左室收缩指数均显著低于同龄WKY大鼠,τ进一步延长;心肌细胞内[Ca⁺]_i与大鼠LVM/BW、SBP-dp／dt_max、τ呈显著正相关(r=0.47-0.83,P＜0.01),与dp／dt_max和收缩指数呈显著负相关(r=-0.46,P<0.05和-0.81,P<0.01)。结论:SHR心肌细胞内钙离子超负荷不仅介导了心肌肥厚的形成,还导致了心肌的收缩和舒张功能障碍。     

曲古抑菌素A对心衰大鼠心脏促炎细胞因子及心功能的影响

目的: 观察组蛋白脱乙酰化酶抑制剂曲古抑菌素A(TSA)对心肌梗死后心衰(HF)大鼠心脏肿瘤坏死因子(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)和诱导型一氧化氮合酶(iNOS)及心功能的影响。方法: 采用冠状动脉左前降支结扎术致心肌梗死制备大鼠HF模型和假手术模型(sham),给予TSA或vehicle处理。给药4周后,测定血流动力学参数,应用免疫组织化学和ELISA检测左室心肌TNF-α、IL-1β和iNOS的水平,并测定右室/体重(RV/BW)、肺重/体重(LW/BW)。结果: 与HF+vehide组相比,给予TSA后可使HF大鼠心肌组织内增高的TNF-α、IL-1β和iNOS含量明显降低(P<0.05),左室舒张末压(LVEDP)和LW/BW降低(P<0.05);降低的左室内压最大上升速率(+dp/dt_max)和左室内压最大下降速率(-dp/dt_max)明显升高(P<0.05)。结论: 组蛋白脱乙酰化酶抑制剂TSA抑制心肌梗死后HF大鼠心肌组织TNF-α、IL-1β及iNOS的产生,并且可能通过该抑制作用改善HF大鼠的心功能,减轻肺淤血。     

非兴奋性电刺激对正常及心肌梗死兔心功能的影响及其作用的局部性

目的:观察于绝对不应期发放电刺激对正常和心肌梗死(MI)兔在体心脏心功能的影响及其对心肌作用的局部性。方法:64只家兔随机分为正常组和MI组两大组,每组又分为前壁和后壁两组。复制MI模型,4周后每组开胸,窦性心律下,分别于前壁组和后壁组的左心室前壁和后壁,发放绝对不应期方波电刺激(CCM)。观察左心室收缩压(LVSP)左心室舒张末压(LVEDP)及其微分(±dp/dt_max)的变化。结果:正常组前壁和后壁CCM刺激时LVSP及+dp/dt_max均显著大于刺激前(P<0.05),LVEDP低于、-dp/dt_max负值大于刺激前(P<0.05),且不同部位的CCM刺激对心功能的影响不同,左心室前壁的上述作用大于后壁(P<0.05);MI组前壁和后壁CCM刺激时LVSP及+dp/dt_max亦大于刺激前(P<0.05),LVEDP低于、-dp/dt_max负值亦大于刺激前(P<0.05),但前后壁两组之间无显著差别(P＞0.05)。结论:于绝对不应期发放电刺激能明显增强正常和MI后心肌的收缩和舒张功能,CCM刺激对心肌的作用是局部性的。     

心肌缺血预处置对心肌组织11,12-二十碳三烯酸的影响

目的: 观察心肌缺血预处置和再灌注损伤时心肌内源性11,12-环氧二十碳三烯酸(11,12-epoxyeicosatrienoicacid, 11,12-EET)的改变, 探讨内源性11,12-EET在缺血预处置中的作用。方法: 使用雄性Wistar大鼠,通过结扎(60 min)和松开(30 min)冠状动脉左前降支, 复制心肌缺血/再灌注模型; 采用缺血5 min, 再灌注5 min两次造成缺血预处置。实验分5组: ①假手术组(sham); ②缺血再灌注组(I/R); ③短阵缺血预处置组(SI); ④短阵缺血预处置缺血/再灌注组(SI+I/R)。采用气相色谱法测定心肌11,12-EET的含量, 并观察再灌注过程中心功能的变化。结果: I/R组+dp/dt_max、-dp/dt_max以及LVDP均低于、心肌11,12-EET高于sham组及SI+I/R组(P<0.01); 而SI+I/R组心肌11,12-EET也高于sham组(P<0.01)。结论: 整体动物心肌再灌注使大量内源性11,12-EET释放, 是再灌注损伤机制之一;缺血预处置抑制再灌注时心肌11,12-EET的增加, 可能与缺血预处置心肌保护作用有关。     

肾缺血预处理保护缺血再灌注损伤心肌的机制

目的:探讨心脏外脏器缺血预处理对心肌保护作用的机制。方法:将动物分为缺血／再灌注(I/R)、经典缺血预处理(CIPC)、肾缺血预处理(KIPC)及超氧化物歧化酶＋肾缺血预处理(SOD+KIPC)4组。比较各组心肌内源性保护物质一氧化氮(NO)含量、5'-核苷酸酶(5'-NT)活性的变化。结果:肾缺血预处理能明显改善左室功能,降低再灌性心律失常发生率及血浆磷脂酶A₂(PLA₂)活性,同时使心肌5'－NT活性、NO含量明显高于I/R组。而在肾缺血预处理前用超氧化物歧化酶处理则肾缺血预处理的心肌保护作用明显弱于KIPC组,与心肌5'－NT活性、NO含量下降相一致。结论:肾缺血预处理对心肌的保护作用可能也与通过调动心肌内源性保护物质的释放有关,氧自由基在介导该类物质的释放中起了重要的作用。     

长期TCV116干预对心肌梗死后心室重塑及心功能的影响

目的:研究长期新型血管紧张素Ⅱ1型受体阻断剂TCV116干预对心肌梗死(MI)后心肌重塑及心功能的影响。方法:通过结扎冠状动脉左前降支复制大鼠MI模型,1周后将大鼠随机分为:(1)MI对照组;(2)MITCV116治疗组(2mg.kg^-1·d^-1):另设假手术组及假手术TCV116组。22周后检测:(1)血流动力学参数如平均动脉压(MAP)、左室收缩压(LVSP)、室内压最大上升和下降速率(dp／dt_max)和左室舒张末压(LVEDP)及心脏形态学指标如左室相对重量(LVW／BW)和左室腔相对面积(LVCA／BW);(2)室间隔存活心肌中β肌球蛋白重链(βMHC)、B型钠尿肽(BNP)、转化生长因子β₁(TGF-β₁)、I型和III型胶原(collagenI、III)基因的mRNA表达;(3)存活率。结果:MI对照组与MITCV116治疗组间总体MI范围无显著差异(34%±14％vs33%±13%,P>0.05)。MI对照组LVW／BW和LVCA／BW显著高于假手术组(P<0.01),βMHC、BNP、TGF-β₁、collagenI和III基因的mRAN表达显著大于假手术组(P<0.01);同时MAP、LVSP、dp／dt_max显著低于和LVEDP显著高于假手术组(P<0.01),也伴随着生存时间显著缩短(P<0.05)。TCV116治疗组,LVW／BW和LVCA／BW与MI对照组比无显著差异,βMHC、BNP、TGF-β₁、collagenI和III基因的mRNA表达低于MI对照组(P<0.05或P<0.01);与此同时,MAP、LVSP、dp／dt_max显著高于及LVEDP显著低于MI对照组(P<0.05或P<0.01),并伴随着生存时间的延长(P<0.05)。结论:长期血管紧张素II1型受体阻断剂干预能显著改善心肌梗死后大鼠心室重塑及心功能。     

内源性碱性成纤维细胞生长因子是大鼠对抗心脏缺血/再灌注损伤的保护因子

目的:观察内、外源性碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)在大鼠心脏缺血/再灌注(I/R)损伤中的作用。方法:在大鼠离体心脏I/R模型上分别给以bFGF和bFGF抗血清,以生理多导仪测定心率、±LVdp/dt_max及左心室终末舒张压(LVEDP)变化,并测定冠脉流量、冠脉流出液中蛋白、肌红蛋白含量、乳酸盐脱氢酶(LDH)活性以及心肌组织钙、丙二醛(MDA)、三磷酸腺苷(ATP)含量和蛋白激酶(PKC)、丝裂素活化蛋白激酶(MAPK)活性。结果:I/R组心功能显著低于对照组,冠脉流出液中蛋白、肌红蛋白含量、LDH活性及心肌MDA、钙含量显著升高,ATP含量显著降低(均P＜0.01)。bFGF组±LVdp/dt_max较I/R组分别高42.8％和25.6％,LVEDP低40.0％,再灌末心率/预灌末心率(HRr/HRi)及冠脉流量的(B/A)分别高42.3％和20.3％,冠脉流出液中蛋白、肌红蛋白含量及LDH活性分别少28.8％、30.2％(均P＜0.01)和32.3％(P＜0.05),心肌MDA和钙含量分别少44.4％和35.6％,ATP含量高33.8％。心肌PKC、MAPK活性分别高41.3％和10.1％(均P＜0.01);bFGF抗血清组±LVdp/dt_max较I/R组分别低35.1％和38.1％,LVEDP高92.5％,HRr/HRi及冠脉流量的B/A分别少36.0％和45.4%,冠脉流出液中蛋白、肌红蛋白和LDH漏出分别多54.3%、96.2%和34.4%,心肌MDA和钙含量分别高23.6%和49.7%,ATP含量低27.8%,心肌PKC及MAPK活性分别低20.9%和7.7%(均P<0.01)。结论:内源性bFGF是大鼠对抗心脏缺血/再灌注损伤的保护因子。     

蛋白激酶C对缺血预处理家兔心肌热休克蛋白70 mRNA的影响

目的:探讨心肌缺血预处理(IPC)过程中蛋白激酶(PKC)对热休克蛋白(HSP)70mRNA表达的影响。方法:在原位及离体家兔心脏缺血再灌注(I/R)、缺血预处理模型上分别应用PKC抑制剂和激动剂,观察对心肌的作用和对心肌HSP70mRNA的表达的影响。结果:缺血预处理和使用佛波酯(PMA)使心肌HSP70mRNA的表达、左心功能明显高于I/R组,磷脂酶A₂(PLA₂)活性及心律失常发生率明显低于该组;而使用多粘菌素B(PMB)则阻断了缺血预处理对心脏的保护作用,同时HSP70mRNA表达也明显低于IPC及PMA组。结论:PKC参与了缺血预处理过程中HSP70表达的调控。     

氟伐他汀对缺血再灌注损伤兔心肌细胞间粘附分子的影响

目的:探讨氟伐他汀短期预处理对缺血再灌注损伤兔心肌的保护作用及其机制。方法:日本大耳白兔21只随机分为3组:①假手术对照组(Sham组),②缺血再灌注组(IR组),③氟伐他汀干预组(F组)。实验中持续监测左室收缩压(LVSP)、左室舒张末压(LWEDP)、左室内收缩压最大上升速率和下降速率(±dp/dtmax)的变化,再灌注结束后用伊文氏蓝和TTC染色法确定缺血和梗死心肌范围,用RT-PCR进行心肌局部ICAM-1 mRNA表达测定。结果:缺血再灌注后,F组上述心功能各项指标较IR组明显改善,心肌组织ICAM-1 mRNA水平较IR组显著降低;心肌梗死面积较IR组明显减小。结论:氟伐他汀短期预处理可降低心肌缺血再灌注后心肌ICAM-1 mRNA表达,降低心肌梗死程度,改善心功能,对心肌缺血再灌注损伤有明显的保护作用。     

氟烷和七氟醚对缺血再灌注心肌功能和氧自由基的影响

目的：研究１５肺泡最小浓度（ＭＡＣ）的氟烷和七氟醚对缺血再灌注心肌功能和氧自由基的影响。方法：应用离体大鼠心脏Ｌａｎｇｅｎｄｏｒｆ逆行灌注模型研究１５ＭＡＣ的氟烷、七氟醚对心肌缺血前后心功能的影响,测定缺血前、缺血１０ｍｉｎ、复灌３０ｍｉｎ３个不同时间的心肌超氧化物歧化酶（ＳＯＤ）活性和丙二醛（ＭＤＡ）含量。结果：七氟醚不同程度地抑制心肌收缩功能。缺血１０ｍｉｎ时,七氟醚组ＳＯＤ酶活性明显下降,ＭＤＡ含量显著升高。缺血２５ｍｉｎ复灌３０ｍｉｎ后,二药均能促进心肌功能和ＳＯＤ酶活性恢复,抑制ＭＤＡ生成,其中七氟醚的作用较为明显。结论：二药对缺血再灌注心肌具有一定的保护作用,七氟醚优于氟烷。     

不同给药途径的腺苷预处理对大鼠缺血再灌注心肌的保护

目的 研究静脉与左心室两种不同给药途径的腺苷预处理对在体缺血再灌注心肌的保护作用.方法 48只成年SD大鼠随机分6组(n=8),分别为缺血再灌注组、缺血预处理组、腺苷静脉组、腺苷左心室组、生理盐水静脉组、生理盐水左心室组.建立大鼠在体缺血再灌注损伤模型,观察各组缺血再灌注前后心功能变化,并检测再灌注末血清肌钙蛋白T(cTnT)、丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)的变化以及心肌组织核转录因子kB(NF-kB)的表达.结果 缺血预处理组、腺苷静脉组及腺苷左心室组SOD值[(208.63±23.88)、(178.27±11.56)、(191.31±28.14)U/ml]均高于缺血再灌注组[(145.05±23.18) U/ml,P<0.05],cTnT、MDA值、NF-kB的表达均低于缺血再灌注组(P<0.05),心功能均好于缺血再灌注组;腺苷左心室组SOD值高于腺苷静脉组(P<0.05),cTnT、MDA值、NF-kB的表达低于腺苷静脉组(P<0.05).结论 腺苷预处理可以模拟缺血预处理的心肌保护作用;左心室给药的腺苷预处理的心肌保护作用优于静脉给药的腺苷预处理的心肌保护作用.     

脂质胞壁酸延迟预适应对大鼠供心停搏/复灌性损伤的影响

目的：探讨脂质胞壁酸（LTA）诱导的延迟预适应对大鼠供体心脏停搏/复灌性损伤的影响。 方法： 采用心脏Langendorff灌流模型，腹腔注射LTA后24 h，观察心脏停搏保存4 h后再灌注30 min及60 min时心脏功能及再灌注末灌流液中心肌型肌酸激酶同功酶（CK-MB）、乳酸脱氢酶（LDH）及一氧化氮（NO）含量，并用dUTP缺口末端标记（TUNEL）法检测左室心肌细胞凋亡。 结果： LTA预适应组再灌注30 min和60 min时心脏的冠脉流量，左室发展压及压力最大上升和下降速率等参数值显著大于对照组（均P<0.01）。LTA预适应组灌流液中NO含量明显大于对照组（P<0.01），而CK-MB和LDH的水平和心肌凋亡指数小于对照组（均P<0.01）。一氧化氮合酶抑制剂L-NG-硝基精氨酸甲酯（L-NAME）能取消LTA预适应的保护效应。 结论： LTA预适应能显著改善供体心脏停搏/再灌注后的心功能，减少心肌坏死和细胞凋亡，内源性NO在介导LTA预适应中发挥关键作用。     

Changes in catecholamine, angiotensin converting enzyme and adenosine triphosphatase in ischemic preconditioning rat hearts

Changes in catecholamine ,angiotensin converting enzy me and adenosine triphosphatase in ischemic preconditioning rat hearts     

Thioredoxin regulation of ischemic preconditioning

Thioredoxins are a class of small redox-regulating proteins that appear to play a crucial role in many oxidative stress-inducible degenerative diseases. A recent study demonstrated a reduction of thioredoxin-1 (Trx1) protein in the ischemic reperfused myocardium. When the same heart was adapted to ischemic stress by preconditioning with repeated cyclic episodes of small duration of ischemia and reperfusion, there was an increased induction of Trx1 expression. Inhibition of Trx1 expression resulted in reduced postischemic ventricular recovery and increased myocardial infarct size in the preconditioned heart. Corroborating these findings, transgenic mouse hearts overexpressing Trx1 were resistant to ischemic reperfusion injury as compared with the hearts from wild-type mice. Thus, it appears that thioredoxin plays a crucial role in cardioprotection induced by preconditioning.     

三氧化二砷预处理在离体心肌缺血-再灌注损伤中保护作用的初探

目的研究三氧化二砷（As2O3）预处理在心肌缺血-再灌注损伤中的保护作用,并初步探讨其机制。方法分别采用低中高三个剂量As2O3预处理大鼠,利用离体大鼠心脏Langendorff灌流模型,观察心功能、心肌梗死面积,SOD,MDA等指标的变化。结果As2O3预处理各组的左室舒张末压（LVDEP）、左室发展压（LVDP）、最大左室收缩速率（＋dP／dtmax）和最大左室舒张速率（-dP／dtmax）等各项心功能指标均得到明显改善,SOD活性显著升高,MDA含量大幅度下降。结论As2O3,预处理可对抗心肌缺血一再灌注性损伤,其作用可能与抗氧化应激有关。     

米力农预调对兔心肌的保护作用

目的 探讨米立农预调对成年兔心肌缺血后损伤的保护作用.方法 采用Langendorff离体心脏灌注模型,对32只成年兔随机分为4组进行不同方法预调心肌保护:缺血预调(IPC)、氨力农预调(APC)、米力农预调(MPC),并与单纯全心缺血-再灌注(GI)对照.所有动物均全心缺血30min,开放后再灌注90 min.结果 4组心肌梗死量分别为MPC(10.2±0.7)%、APC(12.8±0.9)%、IPC(23.5±1.5)%和GI(31.2±2.7)%,前两组和后两组比较.差异有统计学意义(P<0.05);前两组左心功能(LVPDP、+dp/dt、LVEDP)恢复亦明显优于后两组(P<0.05).结论 米力农能发挥预调作用,效果与氨力农相当,有可能成为一种新的有效的心肌保护方法.     

亚甲蓝减轻大鼠离体心脏缺血/再灌注引起的线粒体损伤

目的:探讨亚甲蓝(methylene blue,MB)对大鼠离体心脏缺血/再灌注(ischemia/reperfusion,I/R)线粒体损伤的作用。方法:将Spragure-Dawley大鼠随机分为对照组(control组)、I/R模型组和MB治疗组(I/R+MB组),建立Langendorff离体心脏灌注模型(n=6)。手术前2 h,MB组大鼠按2 mg/kg腹腔注射MB。对照组持续灌注K-H液110 min,I/R组与I/R+MB组平衡灌注20 min后停灌30 min,再灌注60 min。实时记录心率(HR)、左室发展压(LVDP)、左室最大压力变化速率(±dp/dt_(max))和左室舒张末压(LVEDP)。测定冠脉流出液中肌酸激酶MB同工酶(CK-MB)和乳酸脱氢酶(LDH)活性。测定心肌组织中活性氧簇(ROS)、丙二醛(MDA)和三磷酸腺苷(ATP)含量以及超氧化物歧化酶(SOD)活性。苏木精-伊红染色观察组织病理学变化。分离心肌组织线粒体,测定线粒体肿胀程度和线粒体膜电位(MMP)。结果:与对照组相比,I/R组的心功能恶化,冠脉流出液中的CK-MB和LDH活性升高,心肌组织中的ROS和MDA增加,SOD活性降低,ATP减少,线粒体肿胀程度升高,MMP下降(P0.05);与I/R组相比,I/R+MB组的心功能改善,CK-MB和LDH的释放减少,组织中的ROS和MDA减少,SOD活性和ATP含量升高,线粒体肿胀程度降低,MMP升高(P0.05)。结论:MB通过减轻线粒体损伤对大鼠离体I/R心脏发挥保护作用。     

Effects of volatile anesthetic preconditioning on expression of NFκB-regulated genes in aged rat myocardium

Volatile anesthetic preconditioning has been shown to be a potent way to provide myocardium protection against ischemia/reperfusion (I/R) injury; however, this cardioprotection is lost in senescent animal models and elderly patients. NFκB-regulated genes have been linked to myocardial I/R injury and anesthetic preconditioning. Here, we investigated NFκB activation related to anesthetic preconditioning in aging rat myocardium. Isolated, Langendorff perfused rat hearts from Fischer 344 male rats, 24 months old, were randomly assigned to one of the three groups. The hearts of the control group were perfused with physiologic solution without any intervention. The hearts in the I/R group were subjected to 25 minutes ischemia and followed by 60 minutes reperfusion. The hearts in the treatment group were subjected to 10 minutes 2.5% sevoflurane, followed by 20 minutes washout and by 25 minutes ischemia and 60 minutes of reperfusion, respectively. Left ventricular developed pressure (LVDP) and left ventricular enddiastolic pressure (LVEDP) were measured. Western blot analysis was used to measure inhibitor of κB (IκB) and antiapoptotic genes: A1, ILP, c-IAP-2, Bcl-2, caspase 8 and caspase 9. Ischemia and reperfusion significantly decreased LVDP and increased LVEDP in aged rat hearts. Anesthetic preconditioning with sevoflurane did not change the effects I/R on LVDP and LVEDP, despite the fact that after treatment with anesthetic preconditioning, the levels of IκB, A1, ILP, caspase 8 and caspase 9 were significantly different compared to those of the control hearts. In conclusion, anesthetic preconditioning with sevoflurane does not improve myocardial systolic and diastolic functions. Our results suggest that the activation of NFκB regulated genes is different in the senescent myocardium and could account for loss of cardioprotection with aging.