复发性自然流产妇女外周血调节性T细胞和辅助性T细胞水平的表达

目的:分析复发性自然流产(RSA)妇女外周血调节性T细胞和辅助性T细胞表达的变化。方法:选择2009年10月～2010年7月住院确诊的RSA育龄期妇女21例(RSA组),入选对象均接受了外周血调节性T细胞(CD4+、CD25+、Treg和CD4+、CD25+、Foxp3+Treg)和辅助性T细胞(CD3+、CD4+、CD8+、CD4+/CD8+)检测,并与20例同期住院正常妊娠产妇(正常妊娠组)及20例未孕育龄妇女(对照组)测试结果比较。结果:调节性T细胞比较中,RSA组血清CD4+、CD25+、Treg和CD4+、CD25+、Foxp3+Treg水平明显低于正常妊娠组及对照组,有统计学差异(P<0.05或P<0.01);辅助性T细胞比较中,RSA组和正常妊娠组血清CD4+/CD8+表达水平明显高于对照组(P<0.05),而CD8+表达水平则显著低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05或P<0.01)。结论:RSA患者存在明确的外周血调节性T细胞和辅助性T细胞异常表达。     

CD4~+ Notch1~+调节性T细胞和CD4~+ FoxP3~+调节性T细胞 在不明原因复发性流产中的表达

目的:探讨CD4+Notch1+调节性T细胞和CD4+FoxP3+调节性T细胞在不明原因复发性流产(URSA)中的表达。方法:流式细胞术分析复发性流产和正常妊娠动物模型中雌性小鼠CBA/J脾细胞CD4+CD25+Treg、CD4+FoxP3+Treg和CD4+Notch1+Treg的表达百分率变化。结果:流式细胞术分析(FACS)结果显示,相比于正常妊娠组,在复发性流产中CD4+CD25+Treg表达百分率减少、CD4+FoxP3+Treg表达百分率减少、CD4+Notch1+Treg表达百分率增加。结论:Notch1增加与FoxP3表达减少相关,CD4+Notch1+Treg的表达百分率增加可能是URSA的机制之一。     

大剂量地塞米松对ITP患者调节性T细胞及叉头状转录因子FoxP3表达的影响

目的:观察特发性血小板减少性紫癜(ITP)患者调节性T细胞(Treg)和叉头状转录因子FoxP3的表达情况及地塞米松治疗前后的变化。方法:用流式细胞术检测ITP患者外周血Treg、FoxP3的表达情况并与正常人群进行比较、并同时记录大剂量地塞米松治疗前后ITP患者Treg、FoxP3的表达情况,比较激素治疗对机体免疫的影响。结果:ITP患者外周血中CD4+T细胞的比例显著低于正常组(P<0.05),CD4+CD25+Treg及CD4+CD25+T在总CD4+T细胞中所占比例也低于正常对照组(P<0.05)。ITP患者未经激素治疗前外周血中FoxP3表达比例明显低于正常对照组(P<0.05),经大剂量地塞米松治疗后Foxp3表达比例升高(P<0.05),与正常人群比较差别仍有统计学意义(P<0.05)。结论:ITP患者的Foxp3表达下降,CD4+CD25+Treg细胞患者数量减少,Treg及Foxp3在ITP的发生发展中起到重要作用,大剂量地塞米松可显著提高CD4+CD25+Treg及FoxP3的表达。     

HBV宫内感染新生儿外周血调节性T细胞表达

目的 探讨CD4+ CD25+调节性T细胞(Treg)在乙肝病毒(HBV)宫内感染新生儿外周血中的表达和意义.方法 选择乙肝表面抗原(HBsAg)阳性孕妇及其分娩新生儿79例,用酶联免疫吸附试验检测孕妇和新生儿外周血HBV标志物,实时荧光定量PCR检测母亲和新生儿外周血HBV DNA含量,用流式细胞仪检测新生儿外周血CD4+ CD25+ Treg和CD4+ CD25+ Foxp3+ Treg水平.结果 宫内感染HBV新生儿外周血CD4+ CD25+Treg和CD4+ CD25+ Foxp3+ Treg占CD4+T细胞比例分别为(10.57±2.25)％和(1.67±0.37)％,均高于未感染新生儿,差异有统计学意义(P＜0.05),随产妇HBV DNA载量增加,新生儿外周血CD4+ CD25+ Treg和CD4+CD25+ Foxp3+ Treg增加,CD4+ CD25+ Treg比例高于阴性组(P ＜0.05);CD4+CD25+ Treg和CD4+ CD25+Foxp3+ Treg均与产妇HBV DNA载量呈正相关(r=0.430、0.409,P＜0.05).结论 Treg可能通过抑制机体细胞免疫反应影响乙肝病毒清除,新生儿HBV宫内感染可能与Treg表达上调有关.     

CD4~+ CD25~+调节性T细胞在HIV/AIDS患者中的作用及其与HIV病毒载量的相关性研究

目的研究HIV感染者/AIDS患者外周血CD4~+CD25~+调节性T细胞(CD4~+CD25~+ regulatory T cell,Treg)频率、功能及其临床意义。方法选择31例HIV感染者/AIDS患者和30例健康对照者,采用流式细胞仪检测各组外周血Treg的表型和频率。采取MACS磁珠分选Treg,利用[~3H]胸腺嘧啶掺入法检测Treg在特异性HIV抗原刺激下对CD4~+CD25~+T细胞的增殖影响。结果HIV/AIDS患者组与正常对照组相比较,外周血CD4~+CD25~+调节性T细胞在统计学上无显著性意义。与正常对照组比较,HIV感染者外周血Treg比例升高,差异有统计学意义(P<0.01);与正常对照组比较,AIDS患者外周血Treg比例降低,差异有统计学意义(P<0.0001)。HIV RNA病毒载量与患者外周血Treg细胞数量呈正相关性(P<0.01)。Treg具有抑制HIV特异性的CD4~+CD25~- T细胞的增殖作用。结论HIV感染者/AIDS患者的细胞免疫功能紊乱,Treg能抑制HIV感染者/AIDS患者的HIV特异性细胞免疫反应,促进HIV病毒复制,与形成持续HIV感染有关。     

子痫前期患者蜕膜中CD4~+ CD25~+ Foxp3~+调节性 T细胞及NK细胞的相关研究

目的:对子痫前期(PE)患者蜕膜中CD4+CD25+Foxp3+调节性T细胞(CD4+CD25+Foxp3+Treg)和NK细胞进行相关研究,探讨子痫前期发病机制中相关的免疫学变化。方法:选择子痫前期患者30例(轻度13例、重度17例)、正常晚期妊娠妇女30例。采用免疫组织化学法检测胎盘蜕膜CD4+CD25+Foxp3+调节性T细胞和NK细胞后计数并检测其平均灰度值。结果:①子痫前期患者蜕膜CD4+CD25+Foxp3+Treg细胞阳性表达率均明显低于正常晚期妊娠者(P均<0.05);②子痫前期患者蜕膜NK细胞数高于正常孕妇(P均<0.05)且NK细胞CD56组化染色平均灰度值高于正常孕妇(P均<0.05)。结论:子痫前期患者蜕膜的CD4+CD25+Foxp3+Treg细胞均低于正常孕妇;蜕膜的NK细胞数均高于正常孕妇,这一结果造成母胎免疫耐受失衡且NK细胞呈激活状态,杀伤活性增强,导致子痫前期。     

子痫前期患者CD4~+CD25~+Foxp~(3+)调节性T细胞检测及意义

目的:研究CD4+CD25+Foxp3+调节性T细胞在子痫前期患者(PE)外周血中的比例变化,探讨其在子痫前期发病中意义。方法:采用细胞内染色的流式细胞术检测22例子痫前期患者外周血中CD4+CD25high和CD4+CD25+Foxp3+的表达,并与正常妊娠和正常育龄妇女进行比较。结果:子痫前期患者外周血单个核细胞(PBMCS)CD4+T细胞中CD25high细胞明显低于正常妊娠和正常育龄妇女,CD4+CD25+Foxp3+的表达显著降低,而且其CD4+CD25+Foxp3+的表达与平均动脉压呈负相关。结论:子痫前期患者CD4+CD25+Foxp3+的表达明显减少,表明调节性T细胞的降低可能打破了母胎之间的耐受,参与了子痫前期的病理进程。     

AIHA/Evans综合征患者外周血CD80、CD86及CD4^+CD25^+T细胞的表达及临床意义

目的探究自身免疫性溶血性贫血(autoimmune hemolytic anemia,AIHA)/Evans综合征患者外周血CD80、CD86及CD4^+CD25^+调节性T细胞的表达水平及其临床意义。方法选取2014年1月-2017年12月经南阳医学高等专科学校第一附属医院诊治的AIHA/Evans综合征患者60例,以是否处于发作期为准分为发作组与缓解组,其中发作组39例,缓解组21例,另同期随机选取28名健康志愿者作为对照组,比较三组外周血的淋巴细胞共刺激因子CD80、CD86及CD4^+CD25^+调节性T细胞的表达水平。结果AIHA/Evans综合征发作组CD80、CD86、CD4^+CD25^+调节性T细胞表达水平分别为(7.21±1.84)%、(6.23±4.42)%、(2.83±1.75)%,发作组CD80、CD86表达水平高于缓解组及对照组,CD4^+CD25^+调节性T细胞表达水平低于缓解组及对照组,差异均具有统计学意义(P<0.05),但缓解组与对照组CD80、CD86及CD4^+CD25^+调节性T细胞表达水平的比较差异无统计学意义。结论AIHA/Evans综合征发作患者外周血CD80、CD86及CD4^+CD25^+调节性T细胞的表达水平明显升高,CD80、CD86及CD4^+CD25^+调节性T细胞可能在AIHA/Evans综合征发病机制中起着重要作用。     

乙肝病毒感染者外周血调节性T细胞检测的临床意义

目的探讨乙型肝炎患者外周血中CD4^＋CD25^＋调节性T细胞水平的表达及其临床意义。方法应用流式细胞仪检测外周血CD4^＋CD25^＋调节性T细胞表达水平。结果急性乙型肝炎、慢性活动性乙型肝炎、肝硬化患者外周血中CD4^＋CD25^＋调节性T细胞水平明显高于正常对照（P〈0.01）,肝癌患者外周血CD4^＋CD25^＋调节性T细胞水平与正常对照比较（P〈0.05）;HBeAg阳性患者者CD4^＋CD25^＋调节性T细胞水平明显高于HBeAg阴性患者（P〈0.01）。结论乙型肝炎病毒感染后患者外周血CD4^＋CD25^＋调节性T细胞表达异常。     

探讨孕妇怀孕前后细胞免疫功能变化和CD4+CD25+调节性T细胞及雌二醇对妊娠的影响

目的:探讨孕妇免疫功能变化和CD4+CD25+调节性T细胞功能变化及雌激素水平与妊娠的关系。方法:采用流式细胞仪检测30例孕妇外周血淋巴细胞亚群比例和CD4+CD25+调节性T细胞值及雌二醇的变化,并且测定20例未孕妇女外周血T细胞亚群比例和CD4+CD25+调节性T细胞值及雌二醇做对照。结果:淋巴细胞亚群比例存在明显差异,CD4+CD25+调节性T细胞值及雌二醇值明显升高。结论:孕妇免疫功能受到抑制,CD4+CD25+调节性T细胞及雌二醇在孕妇中调节免疫耐受起着重要作用。     

上皮性卵巢癌患者外周血CD4~+CD25~(high)调节性T细胞分析

目的探讨CD4+CD25highT细胞(Treg)在60例上皮性卵巢癌患者外周血中的分布及其表型特征,分析手术对卵巢癌患者外周血Treg的影响。方法采用流式细胞术检测卵巢癌患者及健康人外周血中Treg的比例,探讨其表型特征并分析手术对患者外周血Treg比例的影响。结果与正常对照(2.95±1.09)%相比,60例上皮性卵巢癌患者外周血中Treg比例明显增加(9.81±5.19)%,二者差异有统计学意义(P0.01);手术后,患者外周血中Treg的比例相比术前显著下降(P0.01);Treg表型分析发现:Treg高表达CD45RO、HLA-Ⅰ、Foxp3分子,较高水平表达OX40、GITR、CD152、CD95、CD95L、B7-H1,几乎不表达CD80、CD86、B7-H4、CD45RA、CD69分子,而HLA-DR、CD154的表达水平在个体间差异较大,同时大部分Treg细胞CD127表达阴性。结论上皮性卵巢癌患者外周血CD4+CD25highT细胞水平明显升高,可能参与卵巢癌患者肿瘤免疫抑制。     

原发性胆汁性肝硬化患者外周血CD4+CD28-T细胞和CD4+CD25+T细胞亚群变化及意义

[目的]探讨原发性胆汁性肝硬化(PBC)患者外周血CD4+CD28-T细胞和CD4+CD25+调节性T细胞亚群的变化及意义。[方法]入选病例为我院从2006年6月到2008年12月共59例原发性胆汁性肝硬化患者(活动期36例、稳定期23例),同时以30例健康体检者为对照,借助双色荧光标记技术对外周血CD4+CD28-T细胞和CD4+CD25+占CD4+T细胞比例进行流式细胞术测定。[结果]活动期PBC患者外周血CD4+CD25+细胞比例(1.66±0.83)%低于稳定期(2.53±1.06)%和正常组(4.06±2.36)%(P﹤0.05);而CD4+CD28-细胞比例(4.15±1.89)%则高于稳定组(3.66±0.7)%和正常组(1.54±0.99)%(P﹤0.05)。[结论]活动期PBC患者外周血CD4+CD25+T细胞比例减少而CD4+CD28-T细胞比例升高,CD4+CD25+比例降低可能使外周免疫耐受失去平衡,参与了PBC疾病的发生发展。     

外周血调节性CD_4~+ CD_(25)+ T细胞比例在体外受精与胚胎移植中的意义

目的:研究外周血调节性CD4+CD25+T(CD4+CD25+Tr)细胞的比例变化,探讨CD4+CD25+Tr细胞在妊娠免疫母胎耐受中的作用。方法:应用流式细胞术检测试管婴儿成功孕妇外周血中CD4+CD25+Tr细胞的比例变化。结果:试管婴儿成功孕妇外周血中CD4+CD25+Tr细胞比例较高,高于同孕期的正常妊娠组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:CD4+CD25+Tr细胞在体外受精与胚胎移植的发生发展中发挥一定作用。该研究将有助于阐明妊娠的本质,为探讨妊娠相关免疫异常疾病的发生机制及提高试管婴儿的成功率提供理论依据。     

妊娠期调节性T细胞与雌激素水平变化对母胎免疫耐受的影响

目的:探讨不同妊娠期外周血调节性T细胞与雌激素水平变化对母胎免疫耐受的影响。方法:选择非妊娠妇女30例为对照组,早、中、晚孕及产后3天妇女各30例为研究组;应用流式细胞术检测外周血CD4+ CD25+ Treg及Foxp3+细胞占CD4+ T细胞的比例,用电化学免疫发光法测定其外周血E2含量。结果:外周血E2含量、CD4+ CD25+ Treg、CD25+ Foxp3+ Treg占CD4+细胞的比例分别为:非妊娠对照组(211.30±107.30)pmol/L、(10.99±2.64)%、(2.12±0.83)%;早孕组(16644.00±12131.20)pmol/L、(12.63±3.05)%、(2.99±1.22)%;中孕组(90846.60±36335.20)pmol/L、(19.48±5.11)%、(3.92±1.46)%;晚孕组(109354.1±40671.6)pmol/L、(17.44±5.36)%、(3.47±1.15)%;产后组(420.70±214.80)pmol/L、(13.86±2.61)%、(2.56±0.74)%。各妊娠组CD4+ CD25+ Treg和CD25+ Foxp3+ Treg均明显高于非妊娠对照组(t值分别为2.22,8.90,5.91和3.22,5.83,5.21;P均<0.05);中孕期达高峰;晚孕略有下降,但仍维持高水平,与中孕组比较无统计学差异(t=1.51和1.30,P>0.05);产后3天下降明显,但仍高于非妊娠对照组(t=4.24和2.13,P<0.05)。外周血E2含量从早孕到晚孕逐渐升高,产后迅速下降,但仍明显高于非妊娠对照组(t=4.78,P<0.01)。各妊娠组均明显高于非妊娠对照组(t值分别为7.42,13.66,14.69;P均<0.01);中、晚孕组明显高于早孕组(t=10.61和11.59,P<0.01),中、晚孕组比较无统计学差异(t=1.86,P>0.05)。结论:妊娠期CD4+ CD25+ Treg增殖和Foxp3+表达在诱导母胎免疫耐受和维持正常妊娠过程中发挥重要作用,而高水平E2对CD4+ CD25+ Treg增殖和Foxp3+表达起促进作用。     

消化道肿瘤患者外周血中CD4~+CD25~+调节性T细胞检测的临床意义

[目的]探讨消化道肿瘤患者外周血中CD4+CD25+调节性T细胞(Treg)的表达情况及其与消化道肿瘤发生、发展的关系。[方法]采用流式细胞术检测56例健康成人及56例消化道肿瘤患者外周血CD4+CD25+Treg的水平,分析和比较两组之间的差异及各指标之间的相关性,并进行统计学分析。[结果]健康成人对照外周血CD4+CD25+Treg比例为(9.35±2.88)%,消化道肿瘤患者比例显著增高为(17.85±3.85)%,两者比较有统计学意义(P﹤0.01)。消化道肿瘤患者外周血CD4+CD25+Treg比例与淋巴结转移和TNM分期有相关性,淋巴结转移阳性和TNM分期越晚,Treg比例越高。[结论]消化道肿瘤患者外周血CD4+CD25+Treg比率升高,导致免疫抑制功能增强,可能是消化道肿瘤发生的重要机制;且增高程度与肿瘤临床分期正相关,未来可作为消化道患者病情进展的重要预测指标。     

特发性血小板减少性紫癜患者单个核细胞PD-1/PD-Ls的变化及临床意义

目的探讨特发性血小板减少性紫癜(idiopathic thrombocytopenic purpura,ITP)患者外周血程序性死亡因子PD-1及其配体(PD-Ls)的变化及临床意义。 方法收集26例初诊为急性ITP成人患者治疗前、治疗后3个月、6个月以及1年的外周血标本,用流式细胞术检测其外周血T淋巴细胞和单核细胞上分子(CD273、CD274和CD279)的表达水平;对各项指标进行相关性分析和随机区组的方差检验。 结果与ITP患者治疗前相比,治疗后3个月、6个月以及1年的患者单核细胞PD-Ls表达水平均显著性下降(P<0.05);与治疗后3个月相比,治疗后6个月以及1年的患者CD8^＋T淋巴细胞PD-1表达显著性升高(P<0.05);相关性分析显示ITP患者中单核细胞PD-Ls表达与CD8^＋T淋巴细胞的PD-1呈正相关(P<0.01)。 结论ITP患者治疗过程中血小板数量的变化与单个核细胞PD-1/PD-Ls的表达水平存在关联性,证实PD-1/PD-Ls可作为观察ITP疗效的动态指标。     

调节性T细胞在胃癌患者外周血的表达及临床意义

目的研究胃癌患者外周血CD4^＋CD25^＋调节性T细胞（Tregs）的表达,并探讨该群细胞频数的变化与肿瘤临床分期的相关性,从而探讨在胃癌肿瘤免疫过程中Treg细胞对免疫效应细胞的调节作用,探讨其在胃癌发病机制中的作用。方法采用流式细胞术检测39例胃癌患者外周血淋巴细胞CD3^＋、CD4^＋、CD8^＋及CD4^＋CD25^＋调节性T细胞的表达,并以30例健康人作为对照。结果胃癌患者外周血中CD3^＋、CD4^＋、CD4^＋／CD8^＋水平明显低于正常对照组,CIM^＋CD25^＋和CD8^＋水平显著增高,胃癌临床分期越晚CD3^＋、CD4^＋、CD4^＋／CD8^＋水平越低,CD4^＋CD25^＋和CD8^＋水平越离．在临床I、Ⅱ期患者与临床Ⅲ、Ⅳ期患者之间存在显著差异,差异有显著统计学意义。结论胃癌患者机体免疫功能低下,胃癌患者外周血中CD3^＋、CD4^＋T细胞数量下降,而Treg细胞的数量较正常人明显增高,使T细胞不能有效地清除肿瘤,与胃癌的发病有关。