电针刺激对糖尿病神经病理性疼痛大鼠脊髓p38MAPK的影响

目的：探讨电针刺激对糖尿病神经病理性疼痛大鼠痛阈的影响。方法128只雄性SD大鼠随机均分为4组（n＝32）：糖尿病神经病理性疼痛组（D组）造模成功后不给予治疗;电针刺激组（EA组）造模成功后给予电针治疗;假电针刺激组（A组）只将针灸针插入穴位,但不给予电刺激;假穴位电针刺激组（E组）将电针插入穴位右侧1 cm处,并给予电刺激,记录电针干涉前（T1）、电针干涉7 d（T2）、14 d（T3）及21 d（T4）大鼠的机械缩足反射阈值及血糖的水平;各时间点测定结束后,每组随机选取8只大鼠取L4－6脊髓,用Western blot的方法测定脊髓p38 MAPK表达水平,分析痛阈变化及p38 MAPK表达水平的相关性。结果与D、A、E组相比,EA组T2、T3、T4时间点痛阈均较高,差异有统计学意义（P＜0.05）;与D、A、E组相比,EA组T2、T3、T4时间点p38 MAPK活化水平均下降,差异有统计学意义（P＜0.05）;DNP大鼠痛阈及p38 MAPK变化呈负相关（r＝－0.942,P＜0.05）。结论电针刺激能提高糖尿病神经病理性疼痛大鼠的痛阈,其机制可能与抑制脊髓p38MAPK的表达有关。     

黄芩苷对哮喘大鼠 p38 MAPK 信号通路影响初探

目的：初步探讨黄芩苷防治支气管哮喘的作用机理。方法用卵蛋白致敏大鼠制备支气管哮喘动物模型,经黄芩苷干预治疗,运用免疫组化法及 Western Blot 法检测各组大鼠肺组织匀浆中 p38 MAPK 磷酸化蛋白表达量。结果两种检测方法均显示,p38 MAPK 磷酸化蛋白水平在模型组中有明显的增加,地塞米松组、黄芩苷高剂量组和低剂量组的 p38 MAPK 磷酸化蛋白水平均低于模型组（P ＜0．05）。结论黄芩苷能有效治疗哮喘的作用与抑制哮喘大鼠 p38 MAPK 信号通路的表达密切相关。     

p38 MAPK通路对电针经A2AR抑制CIA大鼠关节骨侵蚀的影响

目的：观察电针“足三里”、“三阴交”后通过腺苷A2A受体（A2AR）作用于p38丝裂原活化蛋白激酶（p38 MAPK）信号通路对抑制胶原诱导性关节炎（CIA）大鼠关节骨侵蚀的影响,探讨电针治疗类风湿关节炎（RA）的抗炎效应和作用机制。方法：SD大鼠随机分为生理组模型组,药物组和电针组,每组8只。采用胎牛II型胶原弗氏佐剂混合液两次注射免疫复制CIA大鼠模型。电针组取大鼠双侧“足三里”、“三阴交”,每天20min,连续14d。药物组每隔7d腹腔注射甲氨蝶呤2mg/kg,连续14d。采用CT影像学检查足踝关节病理学变化;HE、番红O-固绿及TRAP染色分别观察膝关节滑膜、软骨及破骨细胞病理组织学变化;蛋白质印迹法（WB）测定膝关节滑膜组织中A2AR、p38、磷酸化p38丝裂原活化蛋白激酶（P-p38）、核转录因子κB（NF-κB）、T 细胞核因子 c1（NFATc1）蛋白表达;ELISA法测定外周血清IL-1β含量。结果：与生理组对比,模型组后足骨密度下降空间结构紊乱,膝关节软骨明显受损,滑膜细胞大量增生,软骨蛋白多糖明显丢失;阳性破骨细胞数目显著增加（P＜0.01）;膝关节滑膜组织A2AR,p38,P-p38,NF-κB,NFATc1表达均显著上调（P＜0.01）;外周血清中IL-1β的含量明显升高（P＜0.01）。与模型组比较,电针组和药物组后足整体结构、膝关节滑膜及软骨破坏有明显改善;阳性破骨细胞数目减少（P＜0.01）;A2AR表达上调（P＜0.01）,p38,P-p38,NF-κB,NFATc1表达下调（P＜0.01）;血清中IL-1β的含量大量减少（P＜0.01）。与电针组比较,药物组的阳性破骨细胞平均数目减少（P＜0.05）;A2AR蛋白表达增加（P＜0.01）,NF-κB,NFATc1蛋白表达减少（P＜0.05）,总p38表达差异不明显（P＞0.05）,P-p38表达明显下调（P＜0.05）。结论：电针“足三里”、“三阴交” 可以改善CIA大鼠关节骨侵蚀损害,其作用机制可能与激活A2AR抑制破骨细胞（OC）生成的p38 MAPK通路有关,且在一定程度上与甲氨蝶呤治疗趋于相似。     

p38MAPK信号通路对病毒性心肌炎的影响

目的：观察病毒性心肌炎（viral myocarditis,VMC）急性期心肌细胞p38MAPK信号通路的动态变化并探讨其可能的作用机制。方法：75只清洁级近交系4～6周龄雄性Balb/C小鼠,随机分为2组,心肌炎组60只,观察各时间点（第1、3、7和14天）心肌细胞磷酸化p38MAPK含量、心肌组织病理学改变及血清cTn-I水平的动态变化。对照组15只作总体对照。结果：病毒接种后第1天即出现心肌细胞p38MAPK明显活化,第3天达高峰,后渐降至对照组水平;这一变化早于炎症细胞浸润及血清cTn-I升高。结论：急性VMC早期存在p38MAPK信号通路活化,提示p38MAPK信号通路可能参与VMC的发病。     

七叶皂苷钠调控p38 MAPK通路改善癫痫大鼠认知功能的作用及机制

目的 探讨七叶皂苷钠(SA)调控p38MAPK通路,改善癫痫大鼠认知功能的作用及机制.方法 将3周龄的雄性SD幼鼠56只,随机分为对照组、模型组、模型+SA组、AAV-NC组、AAV-NC+模型组、AAV-NC+模型+SA组、AAV-p38MAPK+模型+SA组,每组各8只.采用单次腹腔注射戊四氮的方式建立癫痫模型,造...     

氯胺酮通过p38 MAPK信号通路对乳腺癌细胞生物学行为的影响

目的:探讨氯胺酮通过p38 MAPK信号通路对乳腺癌细胞增殖、侵袭与迁移的影响.方法:以乳腺癌细胞MDA-MB-231为研究对象,根据细胞培养基添加氯胺酮和p38 MAPK抑制剂(SB203580)分为4组:control组(无氯胺酮和SB203580)、氯胺酮组(10μg/mL)、SB203580组(20μmol/L...     

丹皮酚抑制脂多糖诱导的血管内皮细胞TNF-α释放对共培养体系中血管平滑肌细胞凋亡及p38 MAPK信号通路的影响

目的 观察丹皮酚（Paeonol,Pae）对脂多糖（lipopolysaccharide,LPS）损伤的大鼠血管内皮细胞（vascular endothelial cells,VECs）炎性因子释放及对血管平滑肌细胞（vascular smooth muscle cells,VSMCs）凋亡的影响,阐明Pae抑制VSMCs凋亡是否通过影响VECs释放的炎性因子调控p38 MAPK信号通路。方法 组织块预消化贴壁法原代培养VECs和VSMCs;Transwell小室建立VSMCs和VECs共培养体系;LPS诱导VECs损伤;MTT方法检测细胞存活率;ELISA检测VECs分泌肿瘤坏死因子-α（tumor necrosis factor-alpha, TNF-α）的水平;流式细胞仪检测VSMCs凋亡率;Western blotting检测VSMCs中p38 MAPK信号通路及凋亡相关蛋白表达。结果 与正常对照组比较,LPS可显著提高VECs分泌的TNF-α水平（P＜0.05）,明显升高共培养体系中VSMCs p38 MAPK信号通路蛋白及凋亡相关蛋白（p-MKK3/6、p-p38、p53和Cleaved caspase-3）水平（P<0.05）,显著提高VSMCs凋亡率（P<0.05）;与LPS刺激组比较,Pae可显著抑制VECs分泌的TNF-α（P＜0.05）,明显降低共培养体系中VSMCs p38 MAPK信号通路蛋白及凋亡相关蛋白（p-MKK3/6、p-p38、p53和Cleaved caspase-3）水平（P＜0.05）,显著降低VSMCs凋亡率（P＜0.05）。结论 Pae可抑制VECs释放TNF-α,从而抑制p38 MAPK信号通路,进而减少VSMCs凋亡。     

石决牡蛎汤通过p38MAPK通路改善自发性高血压大鼠血管重构的机制研究

【目的】探讨石决牡蛎汤通过p38丝裂原活化蛋白激酶(p38MAPK)信号通路改善自发性高血压大鼠(SHR)血管重构的作用。【方法】将40只16周龄自发性高血压大鼠随机分为模型对照组,石决牡蛎汤高、中、低剂量组,卡托普利组,每组8只;将8只Wistar-Kyoto大鼠设为正常对照组。治疗8周后,采用苏木精—伊红(HE)染色法观察胸主动脉形态,光镜下采用计算机图像分析系统测量血管内膜中层厚度(IMT)、管腔直径(LD),酶联免疫吸附法(ELISA)测定血清中内皮素-1(ET-1)水平,硝酸还原酶法测定血清中一氧化氮(NO)水平,免疫组织化学法检测磷酸化p38MAPK(p-p38MAPK)在胸主动脉组织中的表达水平。【结果】与模型对照组比较,石决牡蛎汤中、高剂量组及卡托普利组收缩压和舒张压、ET-1水平均显著降低,NO水平增高,中药高剂量组及卡托普利组IMT、IMT/LD值显著降低,差异均有统计学意义(P0.05)。免疫组织化学结果显示,石决牡蛎汤中、高剂量组及卡托普利组能较显著抑制p-p38MAPK在胸主动脉的表达。【结论】石决牡蛎汤可能通过抑制p38MAPK信号通路、调节ET/NO系统改善自发性高血压大鼠血管重构。     

VD患者P38MAPK通路的变化及参茸养心益肾胶囊干预影响

目的 分析血管性痴呆及参茸养心益肾胶囊干预患者脑脊液和外周血p38MAPK通路主要因子P-p38MAPK/ p38MAPK蛋白表达的变化,为完善其发病机制及益肾活血中药的干预机理提供依据。方法 选取本院收治的血管性痴呆患者31例,给予参茸养心益肾胶囊,对比治疗前后的简易智能量表(MMSE)评分和长谷川痴呆量表(HDS)评分;同时,分别于治疗前后抽取患者脑脊液和空腹静脉血,以Western blot检测P-p38MAPK/ p38MAPK的蛋白表达量,并以同期入院体检的26例健康志愿者为对照组,进行对比分析。结果 治疗后,观察组患者的MMSE和HDS评分均有升高,与治疗前相比有统计学差异(P<0.01)。治疗前,观察组患者的P-p38MAPK蛋白表达量偏高,P-p38MAPK/p38MAPK表达水平明显高于对照组(P<0.01);治疗后,观察组患者的P-p38MAPK蛋白表达量明显降低,P-p38MAPK/p38MAPK表达水平显著低于治疗前(P<0.05)。结论 中成药参茸养心益肾胶囊能够抑制血管性痴呆患者p38MAPK磷酸化激活,从而干预p38MAPK信号通路级联反应。     

电针夹脊穴通过磷酸化p38 MAPK信号通路对大鼠炎性痛阈的影响

目的观察电针夹脊穴对炎性疼痛大鼠痛阂的影响,从信号转导的角度探讨针灸镇痛的机制。方法采用经典的完全弗氏佐剂性关节炎疼痛模型,观测电针刺激对大鼠痛阈的影响,采用免疫组织化学法测定各组大鼠背根神经节（doral root ganglion,DRG）内磷酸化p38丝裂原活化蛋白激酶（phosphorylation—p38 mitogen activated protein kinase,p-p38MAPK）的含量,采用蛋白印迹法测定DRG内辣椒素受体1（vanilloid receptor1,VR1）含量。结果电针刺激影响大鼠DRG内P—p38MAPK和VR1含量,并可提高炎性疼痛大鼠的痛阂,降低p38MAPK受体阻断剂提高后大鼠的痛闽。结论电针影响炎性疼痛的机制与p38MAPK—VR1信号通路密切相关。     

p38信号通路在呼吸机相关性肺损伤中的作用

呼吸机相关性肺损伤（ventilator-induced lung injury,VILI）是由机械通气产生的严重并发症,VILI的类型主要包括：气压伤（baratrauma）、容积伤（volutrauma）、肺萎陷伤（atelectrauma）、生物伤（biotrauma）,目前临床上仍无有效的治疗策略。丝裂原活化蛋白激酶家族可以在一系列细胞外刺激下参与细胞应答,在哺乳动物中,已经发现了ERKs（extracellular signal-regulated kinase）、JNK/SAPK（c-jun N-terminal/stress-activated protein kinase）、ERK5/BMK1（ERK/big MAP kinase 1）以及p38四个亚家族。随着对VILI的不断深入研究,p38通路被认为参与了VILI的发生机制,深入研究p38信号通路在VILI中的作用,可为临床提供新的治疗靶点。     

p38MAPK与疾病关系的研究进展

p38MAPK信号转导通路影响多种细胞内应答,调控包括炎症反应、细胞周期、细胞生长、分化、衰老和凋亡以及肿瘤发生.本文以p38MAPK信号转导通路及其上、下游作用物为主要研究对象,着重介绍该信号转导途径在炎症、肿瘤、神经退行性疾病、糖尿病、心血管疾病以及眼部疾病等中的作用及相关生物学效应,以及对该通路的干涉在临床治疗的应用,并探讨了可能存在的一些问题以及未来发展趋势.     

p38MAPK通路在健骨颗粒促成骨细胞早期分化中的作用

目的观察p38MAPK信号转导通路在健骨颗粒促进体外培养成骨细胞早期分化过程中的作用。方法采用酶消化法分离、培养SD大鼠成骨细胞,分4组进行干预:对照组(加入生理盐水血清)、阻断剂组(加入p38MAPK的阻断剂SB202190)、中药组(加入健骨颗粒含药血清)和中药加阻断剂组(加入健骨颗粒含药血清和SB202190),运用化学比色法检测上清液中碱性磷酸酶(AKP)活性及羟脯氨酸(HYP)含量,实时荧光定量PCR-SYBR GREEN法检测成骨细胞Ⅰ型胶原(ColⅠ)的表达。结果在AKP活性、HYP含量及ColⅠmRNA表达3项指标上,中药组>中药加阻断剂组>对照组>阻断剂组,各组间差异有统计学意义(P<0.05)。结论体外培养大鼠成骨细胞的早期分化与p38MAPK信号转导通路有关;健骨颗粒含药血清能促进成骨细胞的早期分化,但这一作用仅部分通过p38MAPK信号通路实现。     

雷公藤内酯醇通过p38MAPK信号通路诱导Hut102细胞凋亡

目的 探讨雷公藤内酯醇(triptolide,TP)诱导皮肤T细胞淋巴瘤蕈样肉芽肿细胞株Hut102的凋亡及其机制.方法 体外培养的Hut102细胞与12.5、25、50、100 nmol/L雷公藤内酯醇共同孵育,分别在24、48、72 h用MTT法检测Hut102细胞的增殖抑制率,Annexin V-FITC/PI 双染流式细胞术分析细胞凋亡,Western blot检测Hut102细胞中磷酸化p38丝裂原活化蛋白激酶(p-p38)、caspase-3蛋白的表达水平.结果 不同浓度雷公藤内酯醇(12.5、25、50、100 nmol/L)作用Hut102细胞24 h后的增殖抑制率分别为8.67%、30.02%、52.54%、59.62%.Annexin V-FITC/PI 双染流式细胞术检测经25、50、100 nmol/L雷公藤内酯醇处理24 h后Hut102细胞凋亡率分别为9.19%、21.49%、26.34%,当50 nmol/L雷公藤内酯醇组预先用p38MAPK特异性抑制剂SB203580干预后,Hut102细胞凋亡率下降为14.35%.不同浓度雷公藤内酯醇(50、100 nmol/L)处理Hut102细胞后p38、caspase-3蛋白的表达被激活,同样50 nmol/L雷公藤内酯醇组也预先用p38MAPK特异性抑制剂SB203580干预,结果p-p38的表达降低,caspase-3激活被抑制.结论 雷公藤内酯醇可以抑制Hut102细胞的增殖,其作用机制可能是通过激活p38MAPK信号通路使部分Hut102细胞产生凋亡.     

脑溢安对脑出血大鼠脑内p38MAPK信号转导通路的影响

目的研究脑溢安对脑出血大鼠脑内p38丝裂原活化蛋白激酶(Mitogen-activated protein kinase,p38MAPK)信号转导通路的影响,探讨中药脑溢安颗粒(简称脑溢安)对脑出血的保护作用机制.方法采用胶原酶注射建立大鼠脑出血模型,应用免疫共沉淀、激酶反应及Western blot技术检测脑出血大鼠脑内p38MApK活性变化及脑溢安对p38MAPK活性的影响.结果脑出血损伤后1 h p38MAPK活性增强,出血损伤后6 h达高峰,12 h后下降,至24 h p38MAPK活性消失,脑溢安治疗组(简称治疗组)在脑出血损伤后1,6和12h各时间点p38MAPK活性均较模型组减低.结论脑出血大鼠脑内p38MAPK活性增强,脑溢安能抑制脑出血损伤激活的p38MAPK信号转导通路.     

阻断p38 MAPK信号通路对高糖培养大鼠肾小球系膜细胞增殖和氧化应激的影响

目的 探讨p38丝裂原活化蛋白激酶（p38MAPK）信号通路的阻断对高糖培养的肾小球系膜细胞增殖和氧化应激的影响。方法 大鼠肾小球系膜细胞（mesangial cells MCs）分别培养在低糖浓度（5．5mmol／L，LG组），高糖浓度（25mmol／L，HG组）及25mmol／L葡萄糖＋10μmol／L SB203580（p38抑制剂）。CCK-8测定MCs增殖，比色法检测细胞培养液中的超氧化物歧化酶（SOD）活性和谷胱甘肽（GSH）、丙二醛（MDA）含量的变化。结果 高糖组MCs出现增殖增加，SOD、GSH下降，MDA增加，SB203580干预能抑制MCs的过度增殖，使SOD、GSH增加、MDA减少。结论 抑制p38MAPK途径能抑制高糖环境下的系膜细胞增殖．并显著减少高糖诱导的氧化应激水平。     

乳腺癌耐药性与MAPK信号转导关系的研究

目的探讨乳腺癌细胞阿霉素耐药性与p38MAPK通路的关系。方法用流式细胞术检测SB203580(15μmol/L)干预后细胞的凋亡、细胞内阿霉素浓度的改变、细胞对阿霉素敏感性。结果经SB203580(15μmol/L)干预24h和48h后,流式细胞仪检测见MCF-7/Adr细胞发生显著凋亡,凋亡率分别为25.36±1.17%和38.21±1.25%,并呈一定时间依赖性(P<0.05);显著高于空白对照组及DMSO组MCF-7/Adr细胞的0.65±0.21%和0.81±0.16%(P<0.01);细胞内阿霉素浓度亦显著增加,平均荧光强度分别为32.45±2.36及41.66±3.12,均显著高于空白对照组及DMSO组的14.17±1.45及16.28±0.63(P<0.01);另外,SB203580干预48h使MCF-7/Adr细胞内阿霉素浓度增加的作用强于24h组,两者间差异有统计学意义(P<0.05)。结论提示p38MAPK通路与乳腺癌细胞阿霉素耐药密切相关。