细胞粘附肽(RGDS)抑制人胃癌细胞BGC823生长及诱导其凋亡

目的 研究细胞粘附肽(RGDS)对人胃癌细胞系BGC823(Human stomach cancer BGC823)生长增殖的影响,进而探讨RGDS诱导BGC823细胞凋亡的作用.方法 用不同浓度的RGDS处理BGC823细胞48 h后,MTT法检测RGDS对BGC823细胞生长增殖的抑制作用,通过HE染色、透射电子显微镜、免疫组织化学、流式细胞术和凋亡细胞的DNA片断等方法观察凋亡细胞的形态结构变化以及定性、定量检测细胞凋亡.结果 RGDS能抑制BGC823细胞的生长增殖,并呈浓度依赖性;RGDS诱导BGC823细胞凋亡的作用机制可能通过抑制凋亡抑制蛋白Survivin的表达引发这一途径.结论 RGDS能够通过诱导BGC823细胞凋亡,从而抑制肿瘤细胞的增殖.     

含RGD的细胞粘附肽抑制人胃癌细胞BGC823增殖及诱导其凋亡作用

目的四种含RGD的细胞粘附肽（RGD、RGD（NH2）2、RGDS、RGDS-NH2）对人胃癌细胞BGC823（Human stomach cancer BGC823）生长增殖的影响,进而探讨含四种RGD诱导BGC823细胞凋亡的作用。方法通过MTT法检测四种含RGD对BGC823细胞生长增殖的抑制作用;通过HE染色、透射电子显微镜、免疫组织化学、流式细胞术和凋亡细胞的DNA片段分析等方法观察凋亡细胞的形态结构变化及细胞凋亡的机制。结果含RGD能抑制BGC823细胞的生长增殖,并呈浓度依赖性;其含RGD诱导BGC823细胞凋亡可能通过线粒体引发这一途径。结论含RGD诱导BGC823细胞凋亡,从而抑制肿瘤细胞的增殖。并且在介导细胞凋亡中,RGD具有高度保守的特性。     

佛波酯不同浓度和不同时间对人胃癌BGC823细胞的MMP-9表达

目的 观察佛波酯(12-myristate 13-acetate,PMA)不同浓度和不同时间对人体胃癌BGC823细胞MMP-9表达的影响,探讨PMA能诱导MMP-9表达增加的最佳浓度和诱导时间.方法 采用mRNA(Real Time RT-PCR)蛋白(West-blot)明胶酶活性分析(Zymography)观察不同浓度的PMA作用于人胃癌BGC823细胞不同时间后的MMP-9表达.结果 PMA浓度1 5mg/L、3 0mg/L、6 0mg/L、12 0mg/L、24 0mg/L 24h时对人胃癌BGC823细胞作用后MMP-9表达率分别为(19 1±1 27)%、(25 3±5 7)%、(52 6±4 8)%、(67 9±3 6)%、(91 3±2 3)%;48h时分别为(21 1±1 9)%、(29 2±3 6)%、(56 6±4 3)%、(76 1±5 1)%、(93 3±2 9)%;72h时分别为(23 4±3 7)%、(37 8±4 2)%、(60 3±14 5)%、(83 6±18 1)%、(95 6±1 3)%.结论 PMA对MMP-9表达的影响浓度剂量和时间依赖性,最佳浓度24 0mg/L,最佳时间24h.     

佛波酯不同浓度和不同时问对人胃癌BGC823细胞的MMP-9表达

目的观察佛波酯（12-myristate13-acetate,PMA）不同浓度和不同时间对人体胃癌BGC823细胞MMP-9表达的影响,探讨PMA能诱导MMP-9表达增加的最佳浓度和诱导时间。方法采用mRNA（RealTimeRT-PCR）蛋白（West-blot）明胶酶活性分析（Zymography）观察不同浓度的PMA作用于人胃癌BGC823细胞不同时间后的MMP-9表达。结果PMA浓度1．5mg／L、3．0mg／L、6．Omg／L、12．Omg／L、24．Omg／L24h时对人胃癌BGC823细胞作用后MMP-9表达率分别为（19．1±1．27）％、（25．3±5．7）％、（52．6±4．8）％、（67．94-3．6）％、（91．34-2．3）％;48h时分另0为（21．14-1．9）％、（29．2±3．6）％、（56．6±4．3）％、（76．1±5．1）％、（93．34-2．9）％;72h时分另l为（23．44-3．7）％、（37．84-4．2）％、（60．3±14．5）％、（83．6±18．1）％、（95．64-1．3）％。结论PMA对MMP-9表达的影响浓度剂量和时间依赖性,最佳浓度24．0mg／L,最佳时间24h。     

三氧化二砷对人胃癌细胞BGC-823凋亡及耐药基因表达影响的研究

目的:研究三氧化二砷(As2O3)对人胃癌细胞系BGC-823的凋亡诱导作用及对LRP、C-myc基因表达的影响.方法:进行体外细胞培养,MTT法,流式细胞术检测As2O3对人胃癌细胞系BGC-823的凋亡诱导作用;逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)方法检测LRP、C-myc mRNA的表达.结果:As2O3对人胃癌BGC-823细胞具有抑制作用,其抑制率呈时间-剂量依赖关系.不同浓度的As2O3均可诱导凋亡.1.0 μmol/L、2.0 μmol/L的As2O3可下调LRP、C-myc的表达.结论:As2O3具有抗胃癌作用,主要通过诱导细胞凋亡实现,其机制可能与下调LRP、C-myc表达有密切关系.     

P21活化激酶1小分子干扰RNA对胃癌BGC823细胞生长的影响

目的观察Pak1siRNA对胃癌BGC823细胞生长和细胞周期的影响。方法 Westernblot检测Pak1在胃癌细胞中的表达。BGC823细胞转染Pak1siRNA后,MTT分析和细胞计数观察BGC823细胞的生长情况,同时进行细胞周期测定。结果 Pak1在胃癌BGC823细胞中高表达,且能被Pak1siRNA干扰达72.24%。BGC823细胞在转染Pak1siRNA后,生长明显受到抑制(P<0.05),细胞周期在G2/M期发生阻滞,转染Pak1siRNA组G2/M比率[(20.12±1.64)%]较对照组[(8.70±1.69)%,P=0.008]明显升高。结论 Pak1siRNA能够影响细胞周期,从而抑制胃癌BGC823细胞的生长。     

新城疫病毒HN基因重组体对人胃癌细胞BGC-823凋亡作用机制研究

目的本实验研究旨在探讨含新城疫病毒HN基因的重组质粒对人胃癌细胞BGC-823凋亡的联合作用机制。方法将含有HN基因的重组质粒pIRVP3IL-18HN经脂质体介导转染人胃癌细胞BGC-823，通过MTT方法检测细胞活力；电镜下观察细胞形态；罗丹明123和DCFA染色测定线粒体跨膜电位（△ψ）和活性氧（ROS）水平变化；底物染色反应检测Caspase-3活性。结果重组质粒pIRVP3IL-18HN转染人胃癌细胞BGC-823后，MTT法结果显示致肿瘤细胞死亡率升高，细胞活力下降；电镜观察肿瘤细胞呈现明显凋亡状态；与阴性空白质粒对照显示，线粒体△ψ下降，ROS水平升高；Caspase-3活性被激活。结论含新城疫病毒HN基因的重组质粒可以诱导人胃癌细胞BGC-823进入特定的凋亡程序，从而导致人胃癌细胞BGC-823的凋亡。     

胃癌及癌前病变中c—myc基因蛋白表达的定量研究

了解ｃ－ｍｙｃ基因蛋白在胃癌及癌前病变中的表达，并探讨ｃ－ｍｙｃ基因表达与细胞增殖活性之间的关系。应用流式细胞术和细胞免疫荧光染色技术，对胃癌及癌病变中ｃ－ｍｙｃ基因蛋白进行定量测定，用免疫组化法研究增殖细胞核抗原（ＰＣＮＡ）在组织中的表达，结果表明，ｃ－ｍｙｃ基因蛋白表达和ＰＣＮＡ标记指数在正常胃粘膜，肠化生，异型增生，胃癌中依次递增，且两者呈显著正相关，Ⅲ型肠化ｃ－ｍｙｃ基因表达显著高于Ｉ型和     

miR-139-5p靶基因参与调控人骨肉瘤细胞表型的机制分析

目的 通过生物信息学方法预测miR-139-5 p的靶基因,并对靶基因进行信号通路富集分析,结合蛋白质互作(PPI)网络分析筛选核心基因.方法 使用dbDEMC数据库检索miR-139-5 p在骨肉瘤细胞中的表达,使用miRSystem网站的生物信息学数据库进行miR-139-5 p的靶基因预测,利用DAVID6.8软...     

辛伐他汀诱导胃癌BGC-823细胞凋亡的效应研究

目的探讨辛伐他汀诱导胃癌BGC-823细胞凋亡的效应。方法将辛伐他汀终浓度为5.00μmol/L、2.50μmol/L、1.25μmol/L、0.63μmol/L的4个反应体系分别定义为A组、B组、C组、D组,采用CCK-8细胞增殖法检测A~D组的胃癌BGC-823细胞生长抑制率,分析其药物半数抑制浓度(IC50)。此外,再根据IC50设计3个辛伐他汀反应体系,辛伐他汀终浓度分别为2.00μmol/L、1.00μmol/L、0.00μmol/L,分别定义为E组、F组、G组,采用流式细胞法分析这E~F组的胃癌BGC-823细胞凋亡率。结果⑴A组、B组、C组、D组胃癌BGC-823细胞生长抑制率比较差异有统计学意义(P0.01),A组生长抑制率显著高于B组、C组、D组(P0.01),B组生长抑制率显著高于C组、D组(P0.01),C组生长抑制率显著D组(P0.01)。辛伐他汀对胃癌BGC-823细胞的IC50为1.15μmol/L。⑵E组、F组、G组胃癌BGC-823细胞凋亡率比较差异有统计学意义(P0.01),E组凋亡率显著高于F组、G组(P0.01),F组凋亡率显著高于G组(P0.01)。结论辛伐他汀可显著抑制胃癌BGC-823细胞生长并诱导其凋亡。     

RGDS抑制胃癌细胞BGC-823生长的实验研究

RGD(精氨酸-甘氨酸-天冬氨酸)三肽序列是多种细胞外基质蛋白和血浆蛋白结构中共有的基本成分,是存在于细胞间识别系统的基本单位,因此含RGD的多肽或化合物有望成为治疗重要疾病的新制剂[1]。该类肽的黏附性也成为药物设计的一个新靶点。合成的RGD在人体内不稳定,我们应用新的方法即酶-化学法合成RGDS(Arg-Gly-Asp-Ser,一个含4个氨基酸序列的小肽),并研究其对人胃癌细胞系BGC-823的作用。现报告如下。     

应用Cell-IQ筛选榄香烯诱导人胃癌BGC-823细胞凋亡的初步研究

目的应用全自动活细胞观测分析系统(Cell-IQ)及流式细胞仪观察榄香烯诱导人胃癌细胞BGC-823凋亡的影响。方法应用不同浓度的榄香烯作用于人胃癌BGC-823细胞,使用Cell-IQ筛选抑制增殖的最佳浓度,并根据最佳作用浓度,应用流式细胞仪观察分析榄香烯对人胃癌BGC-823细胞凋亡的影响。结果榄香烯对人胃癌BGC-823细胞的抑制作用随其浓度增加而逐渐增强,以150μg/mL为最佳,之后榄香烯浓度再增高,其抑制肿瘤细胞增殖作用不再增强;150μg/mL的榄香烯作用于胃癌BGC-823细胞24 h后,主要表现为诱导早期凋亡为主,细胞凋亡率为(36.9±3.23)%,较对照组有明显差异(P<0.01)。结论 Cell-IQ能够进行细胞毒性、活性和增殖的检测和筛选;榄香烯对于人胃癌BGC-823细胞有明确抑制作用,最佳浓度为150μg/mL;榄香烯抑制人胃癌BGC-823细胞增殖作用的主要机制可能为诱导细胞凋亡,而非细胞毒作用。     

肺腺癌miR-195的表达及靶基因筛选

目的 研究miR-195在肺腺癌中的表达差异,筛选miR-195靶基因,分析靶基因作用网络及其对患者生存预后的影响.方法 利用TCGA数据库,比较miR-195在肺腺癌癌组织与癌旁正常组织间的表达差异;采用实时荧光定量PCR检测miR-195在临床标本中的相对表达水平.设计miR-195的Hybrid PCR引物,扩增...     

白血病细胞、多种肿瘤细胞及胃癌组织中pokemon基因的定量检测

目的 建立检测pokemon基因表达的实时荧光定量PCR的方法,用以研究pokemon在白血病细胞、多种肿瘤细胞株及胃癌组织中的表达水平.方法 通过RT-PCR、T-A克隆、real-time PCR等方法精确测定并比较pokemon基因在白血病细胞、人结肠癌细胞株(SW480)、人胃癌细胞株(SGC)、人肺癌细胞株(LTEP)、人髓系白血病细胞株(U937)、人前列腺癌细胞株(PC3)、人宫颈癌细胞株(HELA)、人内皮细胞株(UEVC-304)、健康人外周血单个核细胞(PBMC)、胃癌组织中的表达水平.绘制pokemon基因real-time PCR的标准曲线.结果 急性淋巴细胞白血病(ALL)中pokemon的表达显著高于急性粒细胞白血病(AML)和慢性粒细胞白血病(CML)及健康人PBMC(P＜0.05);SW480中的表达量明显高于SGC、LTEP、U937、PC3、HELA和UEVC-304(P＜0.05);胃癌组织表达量高于胃癌旁组织,阳性率为5/7.结论 建立的测定pokemon基因表达的real-time PCR方法稳定、准确,pokemon基因可以作为某些肿瘤的一个新的靶点,其表达水平的检测可作为判断某些肿瘤发生的参考指标.     

人胃癌组织LIN28基因的定量检测及意义

目的检测LIN28基因在胃癌组织及对应癌旁组织中的表达差异,分析其与临床参数间的关系及在胃癌发生、发展中的作用。方法用Trizol提取总RNA,RT-PCR检测30例手术切除的胃癌组织及相应癌旁胃黏膜组织中LIN28 mRNA的表达,用SYBR实时荧光定量PCR进行比较。结果胃癌组织和癌旁组织中LIN28 mRNA均为阳性;胃癌组织LIN28 mRNA的平均表达强度为1.80×10-4,癌旁组织的平均表达强度为7.41×10-4,经配对t检验,P<0.01,有统计学差异。LIN28的表达与其他临床参数无明显相关性(P>0.05)。结论胃癌组织LIN28 mRNA的表达较癌旁组织明显下降;LIN28的表达与患者年龄、性别、肿瘤的分化程度、有无淋巴结转移等无明显的相关性。     

miR-145调控靶基因SENP1对前列腺癌细胞生物学行为的影响及机制

目的 分析微小RNA-145调控靶基因小泛素相关修饰物特异性蛋白酶1对前列腺癌细胞生物学行为的作用机制。方法 选取对数生长期的前列腺癌细胞株PC-3细胞,分为对照组(仅细胞培养)、miR-145组(转染微小RNA-145)、SENP1组(转染小泛素相关修饰物特异性蛋白酶1)、miR-145+SENP1组(转染微小RNA-145及小泛素相关修饰物特异性蛋白酶1),转染48 h后,双荧光素酶报告基因检测微小RNA-145与小泛素相关修饰物特异性蛋白酶1的相互作用,采用水溶性四氮唑8法测定4组细胞增殖抑制率,经细胞黏附实验测定其黏附能力,Transwell检测细胞侵袭与迁移能力,逆转录-聚合酶链式反应与Western-blot法检测小泛素相关修饰物特异性蛋白酶1表达。结果 双荧光素酶报告基因检测显示,微小RNA-145可明显抑制小泛素相关修饰物特异性蛋白酶1-野生型的荧光素酶活性(P<0.05),而对小泛素相关修饰物特异性蛋白酶1-突变型的荧光素酶活性无明显抑制作用(P>0.05)。miR-145组细胞增殖抑制率显著高于SENP1组、miR-145+SENP1组(P<0.0...