乙醛脱氢酶1作为宫颈癌干细胞标志物的相关研究

目的研究宫颈癌中乙醛脱氢酶1(ALDH1)作为纯化宫颈癌干细胞(CCSCs)标志物的可能性。方法分离宫颈癌原代细胞ALDH1^high和ALDH1^low细胞,检测其自我更新及增殖能力,应用实时定量聚合酶链式反应(Real-Time PCR)技术检测ALDH1^high和ALDH1^low细胞中干性基因表达情况。结果原代细胞中ALDH1^high的成球率(22.92±2.84)%明显高于ALDH1^low的成球数(8.33±4.90)%(P<0.05)。ALDH1^high的克隆形成数(55.00±8.67)/200细胞明显高于ALDH1^low的克隆形成数(23.67±3.93)/200细胞(P<0.05)。ALDH1^high细胞CD24和CD44表达量是ALDH1^low细胞的(2.23±0.33)倍和(1.87±0.12)倍(P<0.05)。结论原代细胞中ALDH1^high细胞自我更新及增殖能力均高于ALDH1^low细胞亚群;ALDH1^high细胞亚群中干性基因表达高于ALDH1^low细胞亚群;ALDH1可富集CCSCs,但不能单独作为CCSCs分选的标志物。     

ALDH1在宫颈癌组织中的表达及临床意义

目的：探讨乙醛脱氢酶1（ ALDH1）在正常宫颈组织、宫颈上皮内瘤样病变组织及宫颈浸润癌组织中的表达及临床意义。方法采用免疫细胞化学的方法检测ALDH1蛋白在宫颈癌细胞系HeLa、SiHa、C33A、CaSki和HT-3中的表达,采用免疫组织化学法检测ALDH1蛋白在100例正常宫颈组织、100例宫颈上皮内瘤样病变组织及100例浸润性宫颈癌组织中的表达,同时分析ALDH1的表达与100例宫颈浸润癌患者临床病理特征的关系。结果免疫细胞化学结果显示,ALDH1蛋白在宫颈癌细胞系C33A中的阳性率为42．24％,在HT-3细胞系中表达的阳性率为12．39％,而在宫颈癌细胞系SiHa、HeLa和CaSki中均未检测到ALDH1蛋白的表达。随着正常宫颈、宫颈上皮内瘤样病变到宫颈浸润癌的进展,ALDH1蛋白在正常宫颈组织、宫颈上皮内瘤样病变组织及宫颈癌组织中表达的阳性率分别为28．00％、38．00％和65．00％,ALDH1蛋白的阳性率和评分均逐渐增加（χ2＝29．785,P＝0．000）;Spearman相关性分析结果显示,ALDH1的表达与宫颈癌患者的病理分级、临床分期、盆腔淋巴结转移、肿瘤大小及患者年龄均无显著性差异（均P＞0．05）。结论 ALDH1蛋白随着宫颈癌的进展表达逐渐增加,提示其可能作为癌基因参与宫颈癌的发生发展。     

RAC1在宫颈癌组织中的表达及其作用

目的研究RAC1在宫颈癌组织中的表达，探讨其与宫颈癌转移的相关性。方法应用免疫组织化学SP法，检测10例正常宫颈组织、20例不典型增生宫颈组织、58例宫颈癌组织中RAC1蛋白的表达情况。分析其表达结果与临床病理特征的关系。结果（1）RAC1蛋白在正常宫颈组织中不表达，在不典型增生宫颈组织中的表达率为25．00％，在宫颈癌组织中的表达率为81．03％，在宫颈癌组织中的表达水平高于不典型增生及正常宫颈组织（P〈0．05），随着从正常宫颈组织-宫颈不典型增生组织-宫颈癌的转化，RAC1阳性表达率呈递增趋势。（2）RAC1的表达与病理分级相关（P〈0.05），与宫颈癌患者的年龄、临床分期、有无淋巴结转移则无明显相关关系（P〉0．05）。结论RAC1蛋白的表达可作为判断宫颈癌预后的指标之一。检测RAC1对了解宫颈癌生物学行为和评估预后具有一定的临床价值。     

人宫颈癌干细胞的分离鉴定

目的:通过分选人宫颈癌细胞中的侧群细胞验证其肿瘤干细胞特性。方法:取16例行宫颈鳞癌切除的手术标本进行宫颈癌细胞原代培养,流式细胞仪分选侧群细胞(Side Population,SP),对比SP细胞和非SP细胞(Non Side Population,Non-SP)的体外自我更新能力和肿瘤形成能力。结果:在原代培养的16株宫颈癌细胞中均分选出SP细胞,比例约占(1.67±0.94)%。SP细胞的克隆形成能力显著高于NSP细胞,SP细胞在裸鼠肿瘤形成能力显著高于NSP细胞。结论:人宫颈癌侧群细胞具有肿瘤干细胞特性,为宫颈癌干细胞的研究提供了简单、有效的分离方法。     

Ref-1在宫颈癌中的表达及生物学意义

目的:探讨Ref-1在正常宫颈组织和宫颈癌中的表达及其生物学意义。方法:采用免疫组织化学SP法和RT-PCR方法检测Ref-1在正常宫颈组织及子宫颈癌组织中的表达。结果:①Ref-1在正常宫颈与高分化宫颈鳞癌组织中的表达差异无统计学意义(P>0.05);随着病理学分级的升高,宫颈鳞癌组织中Ref-1的表达明显降低(P﹤0.01)。②Ref-1 mRNA在正常宫颈及高分化宫颈鳞癌组织中的表达差异无统计学意义(P>0.05),但Ref-1 mRNA在正常宫颈及中、低分化宫颈鳞癌组织中的表达差异有统计学意义(P<0.01)。Ref-1 mRNA的表达随着病理学分级的升高而下降,甚至缺失。结论:Ref-1基因及其编码蛋白在宫颈鳞癌组织中表达随着病理学分级的升高,表达明显下降或缺失,说明Ref-1基因失活与宫颈癌的浸润和转移有关,且Ref-1表达水平与分化程度密切相关。     

AEG-1蛋白在宫颈癌组织中的表达及临床意义

目的探讨AEG-1在宫颈癌组织中的表达及临床意义。方法采用实时荧光定量逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测48例宫颈癌组织和15例正常宫颈组织中AEG-1mRNA的表达,采用免疫组化法检测48例宫颈癌组织和15例正常宫颈组织中AEG-1蛋白的表达,分析其表达差异和临床病理特征关系。结果AEG-1mRNA在宫颈癌组织中的表达量比正常组织高,差异有统计学意义(P<0.001);免疫组化显示AEG-1蛋白在宫颈癌组织中阳性表达率高于正常组织,差异有统计学意义(P<0.001)。AEG-1蛋白的表达与肿瘤分期、淋巴结转移有关,与年龄、肿瘤大小、病理分级无明显相关性(P>0.05)。结论AEG-1的表达与宫颈癌分期及淋巴结转移有关,AEG-1的过表达可作为预测宫颈癌恶性程度的重要指标。     

缺氧诱导因子-1在宫颈癌发生中的作用研究

缺氧诱导因子-1是一种重要的缺氧应答调控因子,能与缺氧反应基因上特定位点结合,启动靶基因的转录,使机体对缺氧产生一系列适应性反应。其在维持氧稳定、细胞能量代谢、肿瘤血管生成及转移、细胞增殖与凋亡等诸多方面起着重要作用。该文就缺氧诱导因子-1的生物学特性和在宫颈癌中的研究现状作以概述。     

P53与hMLH 1在宫颈癌中的表达及意义

目的:通过检测宫颈炎及宫颈癌中P53和hMLH1的表达,探讨其与宫颈癌发生和发展的关系。方法:采用免疫组织化学技术SP法检测临床资料较完整的72例子宫颈鳞癌和31例慢性宫颈炎组织突变型P 53与hMLH 1蛋白表达。结果:P 53在宫颈炎及宫颈癌组的表达率分别为32.26%和65.28%,差异显著(P<0.05);P 53在宫颈癌各级中的表达率分别为Ⅰ级36.36%,Ⅱ级72.73%,Ⅲ级67.86%,Ⅰ级与Ⅱ、Ⅲ级的表达率差异显著(P<0.05);P 53表达率与宫颈癌分期无关(P>0.05)。hMLH 1在宫颈炎及宫颈癌组的表达率分别为61.29%和58.33%,无显著性差异(P>0.05);hMLH1在宫颈癌各期中表达率分别为Ⅰ期60.00%,Ⅱ期52.63%,Ⅲ期33.33%,无显著性差异(P>0.05);hMLH 1表达率与宫颈癌分级无关(P>0.05)。结论:P 53基因突变与宫颈癌的发生和组织分化程度有关;hMLH 1表达缺失与宫颈癌发生的关系尚不确切。     

缺氧诱导因子-1在宫颈癌发生中的作用研究

缺氧诱导因子-1是一种重要的缺氧应答调控因子，能与缺氧反应基因上特定位点结合，启动靶基因的转录，使机体对缺氧产生一系列适应性反应。其在维持氧稳定、细胞能量代谢、肿瘤血管生成及转移、细胞增殖与凋亡等诸多方面起着重要作用。该文就缺氧诱导因子-1的生物学特性和在宫颈癌中的研究现状作以概述。     

nm23-H1在宫颈癌中的表达及其临床意义

目的 通过了解nm23-H1在宫颈癌中的表达,试图阐明nm23-H1的表达与宫颈癌的一些临床病理特征及预后的关系.方法 运用免疫组化链霉菌抗生物素蛋白-过氧化物酶法检测99例宫颈癌组织中nm23-H1的表达情况.结果 nm23-H1在宫颈浸润癌中的表达率低于宫颈上皮内瘤样变Ⅲ及正常宫颈组织(P=0.002);在宫颈浸润癌中,nm23-H1的表达与肿瘤原发灶大小(P=0.001)、大体类型(P=0.007)、浸润深度(P=0.044)、淋巴结转移(P＜0.001)和治疗后复发(P＜0.001)相关;而与肿瘤的病理类型(P=0.064)、细胞分化程度(P=0.487)、国际妇产科联盟分期(P=0.214)及发病年龄(P=0.200)无相关性.结论 nm23-H1在宫颈癌中表达下降,nm23-H1表达下降是宫颈癌的一个高危因素,可望作为宫颈癌淋巴结转移和治疗后复发的预测指标.     

正常宫颈及宫颈癌组织中干细胞标记物表达情况的研究

目的:研究表皮干细胞标记物P63与CK17在正常宫颈鳞状上皮及浸润性宫颈鳞状细胞癌组织中的表达情况,进而为宫颈及宫颈癌干细胞的研究工作奠定基础。方法:采用免疫组化的方法,检测宫颈正常鳞状上皮20例、浸润性宫颈鳞状上皮癌30例中P63与CK17的表达情况,结果采用χ2检验。结果:宫颈正常鳞状上皮中P63与CK17阳性细胞表达于宫颈基底层,宫颈癌组P63与CK17阳性细胞位置上移,差异有显著性(P<0.05)。结论:P63与CK17表达于正常宫颈基底层的宫颈储备细胞,因此宫颈储备细胞可能为宫颈干细胞,同时P63与CK17在宫颈癌组织中表达呈数量上的上升趋势及位置上的上移趋势,因此推断P63与CK17可能为宫颈及宫颈癌干细胞的标记物。     

肿瘤干细胞学说对肺癌研究的价值

肿瘤干细胞(CSC)学说是肿瘤基础与临床研究上的突破,必将对包括肺癌在内的肿瘤的发生、发展以及肿瘤的临床诊断、治疗都带来极大的影响。作者综述国内外肿瘤干细胞与肺癌的研究文献,旨在探讨肿瘤干细胞在癌症尤其是肺癌方面的研究进展。     

Derlin-1在早期宫颈癌中的表达及其与宫颈癌临床病理特征的关系

目的分析Derlin-1在早期宫颈癌中的表达及其与宫颈癌临床病例特征关系,为早期发现宫颈癌提供依据。方法收集2014年3月-2017年3月在丽水市中心医院接受治疗的225例宫颈癌患者、190例切除子宫的子宫肌瘤患者以及205例CINⅡ~Ⅲ(宫颈癌高级别病变)患者,对Derlin-1与宫颈癌临床分期、HPV感染、淋巴结转移和病理分级等临床病理特征进行分析。结果浆细胞的定位主要是Derlin-1在CIN组织、宫颈癌组织中的表达,宫颈癌组织中Derlin-1的阳性表达率为56.0%、正常宫颈组织中Derlin-1的阳性表达率为6.8%、CIN组织中Derlin-1的阳性表达率为33.2%。其中表达水平最高的是宫颈癌组织中的Derlin-1,明显高于正常宫颈组及CIN组,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论在宫颈癌患者中表达较高的是内质网相关降解蛋白Derlin-1,并且经研究发现高危型HPV的感染与Derlin-1的高表达有关。但是宫颈癌患者年龄、组织分化程度、临床分期、临床病理类型及淋巴结转移等与Derlin-1之间都不存在相关性。     

维吾尔族妇女子宫颈癌CCNA1基因甲基化检测

目的:探讨CCNA1基因启动子区域甲基化与维吾尔族妇女子宫颈癌的相关性。方法:采用甲基化特异性PCR(MSP)方法,对40例子宫颈癌患者手术切除肿瘤组织及其40例正常子宫颈组织CCNA1基因启动子区域甲基化进行检测。结果:CCNA1基因在40例子宫颈癌中甲基化率为87.5%,正常子宫颈组织中甲基化率为2.5%,两者比较差异有统计学意义(P<0.01)。结论:CCNA1基因启动子甲基化与维吾尔族妇女子宫颈癌发生相关。     

宫颈糜烂与宫颈CIN及宫颈癌相关性的临床分析

目的:探讨宫颈糜烂与宫颈CIN及宫颈癌的关系。方法:对2008～2009年在山西省人民医院门诊就医的宫颈糜烂患者临床资料进行分析。结果:宫颈CIN及宫颈癌趋于年轻化,宫颈糜烂与宫颈CIN及宫颈癌之间无明显相关性。结论:宫颈糜烂是宫颈CIN及宫颈癌的前期表现,但宫颈靡烂面积、深度与宫颈CIN及宫颈癌不成正比。     

生殖细胞核因子GCNF在宫颈癌中的表达

目的:探讨生殖细胞核因子(GCNF)在宫颈癌中的表达及其在宫颈癌发生发展的作用。方法:运用免疫组织化学Envision法和RT-PCR技术检测GCNF蛋白和mRNA在正常宫颈组织、上皮内瘤变组织及宫颈鳞癌组织中的表达。结果:GCNF蛋白在正常宫颈组织、上皮内瘤变组织(CINⅠ、CINⅡ、CINⅢ)和宫颈鳞癌组织中的表达率分别为90.0%(18/20)、78.3%(18/23)、45.0%(9/20)、33.3%(9/27)和3.4%(4/29),差异有统计学意义(P<0.05)。RT-PCR结果显示GC-NF mRNA的表达与GCNF蛋白相一致,即宫颈鳞癌组织与正常宫颈组织相比GCNF mRNA的表达显著降低(P<0.05)。结论:初步认为GCNF蛋白和mRNA表达的下调或缺失可能是宫颈癌发生的一个早期信号,以期为宫颈癌的靶向治疗提供研究方向。     

在单核细胞中干扰SHP-2后对宫颈癌细胞的影响

目的:研究宫颈感染HPV后是否能通过干扰SHP-2从而负调控IFN-β信号通路,最终导致宫颈癌的发生。方法:通过SiHa细胞与THP-1细胞共培养,利用SHP-2 siRNA干扰片段瞬时转染THP-1细胞,干扰SHP-2基因的表达。将SHP-2封闭肽以0、0.5、2.5μg/ml浓度和2、24 h培养THP-1细胞,收集培养后的细胞进行Western Blotting实验,进而检测SHP-2的表达,确定封闭的最佳时间和浓度。收集正常和不同处理因素的THP-1细胞,Western Blotting法检测THP-1细胞中SHP-2蛋白表达。将THP-1细胞及不同处理因素处理好的THP-1细胞分别与SiHa细胞共培养后,在选定的时间和浓度点测其OD值。收集正常THP-1细胞的培养液上清、THP-1细胞给予SHP-2封闭肽处理的培养液上清和THP-1细胞给予SHP-2 siRNA干扰的培养液上清进行ELISA实验。结果:给予SHP-2的SiRNA后SHP-2蛋白表达明显降低,在干扰后48 h、200 pmol时干扰效果最好。给予SHP-2的封闭抗体后SHP-2蛋白表达明显降低,在封闭后24 h、2.5μg/ml时抑制效果最好。THP-1细胞与SiHa细胞相互作用,从两个细胞作用时间来看,THP-1细胞对SiHa细胞杀伤作用随着时间的增长而增强,从24 h始就起明显作用。给予siRNA干扰的THP-1细胞对SiHa细胞的杀伤作用最强(OD值最低),给予封闭肽的次之,无处理因素的最弱(OD值最高)。SiRNA干扰组的浓度值最高,其次是封闭肽组的浓度值,无处理因素组(仅培养THP-1的细胞组)的浓度值最低,SiRNA干扰组与无处理因素组之间差异有统计学意义(P<0.05),封闭肽组与无处理因素组之间差异有统计学意义(P<0.05),SiRNA干扰组与封闭肽组之间差异无统计学意义(P>0.05)。结论:抑制THP-1细胞中SHP-2的表达后,THP-1细胞分泌的IFN-β明显增多,导致它对SiHa细胞的杀伤作用明显增强。SHP-2在宫颈癌的发生中起着重要作用,它发挥作用的机制是通过抑制IFN-β的信号转导,减少I型干扰素IFN-β的生成,使宫颈癌发生成为可能。     

LETM1蛋白过表达在子宫颈癌中的临床病理学意义

目的:探讨LETM1蛋白过表达在子宫颈癌预后评估中的临床病理学意义.方法:实验共选取164例子宫颈活检及手术组织蜡块标本,其中包括94例宫颈鳞癌组织、12例宫颈腺癌组织、15例宫颈上皮内瘤变Ⅰ级(CINⅠ)、22例宫颈上皮内瘤变Ⅱ～Ⅲ级(CINⅡ～Ⅲ)以及21例正常宫颈上皮组织.应用免疫荧光染色在宫颈癌HeLa细胞系中检测LEM1蛋白的定位情况,免疫组化法检测LETM1蛋白在上述宫颈病变组织中的表达,并分析其蛋白检测在宫颈癌预后评估中的意义.结果:免疫荧光结果表明,LETM1蛋白定位在宫颈癌HeLa细胞质及细胞膜上.免疫组化结果显示,LETM1蛋白在宫颈鳞癌和宫颈腺癌组织中表达率分别高达60.6％和75.0％,明显高于正常宫颈上皮组织及CIN Ⅰ～Ⅲ(P＜0.05).此外,LETM1蛋白在低分化宫颈癌组织中的阳性表达率明显高于中分化和高分化宫颈癌组织,且其阳性表达率在晚期宫颈癌组织中亦明显高于早期宫颈癌组织(P＜0.05),但LETM1蛋白的表达与宫颈癌患者年龄、肿瘤大小及有无淋巴结转移均无关联.结论:LETM1蛋白参与了宫颈癌的演进,其过表达可能预示宫颈癌的不良预后.     

高危型人乳头瘤病毒及NDRG1在宫颈鳞癌中的表达

目的探讨高危型人乳头瘤病毒(HPV)及N-myc下游调节基因(NDRG1)在宫颈鳞癌发生、发展中的意义。方法收集2008年9月～2011年9月期间宫颈鳞癌及癌旁正常对照标本各82例,分别采用原位杂交法和免疫组织化学法检测标本中HPV16/18和NDRG1的表达情况。结果在宫颈鳞癌中HPV16/18和NDRG1的表达阳性率均明显高于癌旁正常组织(P均﹤0.05)。宫颈鳞癌组织中HPV16/18的表达与患者年龄、FIGO分期、肿瘤大小及淋巴结转移无关(P均﹥0.05);NDRG1的表达与FIGO分期、淋巴结转移密切相关(P均﹤0.05),而与患者年龄、肿瘤大小无关(P均﹥0.05)。结论 HPV16/18和NDRG1在宫颈鳞癌中的表达阳性率明显增高,证实高危HPV和NDRG1参与了宫颈鳞癌的发生、发展。     

血清SCCAG在宫颈癌及癌前病变中的临床意义

目的:研究鳞状细胞癌抗原(SCCAg)在宫颈癌及癌前病变中的表达和意义。方法:分析宫颈上皮内瘤变(CIN)组368例、宫颈癌组84例的SCCAg值与患者不同临床分期、分化程度等病理参数之间的关系。结果:SCCAg在宫颈癌前病变及宫颈癌早期已有变化,与临床FIGO分期、分化程度、肿瘤体积的增大及淋巴结转移呈正相关。结论:SCCAg是宫颈癌的重要临床肿瘤标志物,较高的血清SCCAg值可能意味着肿瘤恶性程度越高,为患者的辅助诊断、病情估计提供全面的指导信息。