COX-2、HPV16-E6蛋白在宫颈癌组织中的表达

目的研究环氧合酶-2（cyclooxygenase-2,COX-2）和人乳头瘤病毒16型E6蛋白（human papillomavirus-16 E6 protein,HPV16-E6）在宫颈癌中的表达及其与临床病理特征之间的关系。方法采用免疫组化S—P法检测COX-2和HPV16-E6蛋白在宫颈癌上皮中的阳性表达情况。结果COX-2与淋巴结转移、宫旁或脉管浸润及肌层浸润深度呈显著性相关（P〈0．05）。HPV16-E6与年龄、病理类型、宫旁或脉管浸润呈显著性相关（P〈0．05）。COX-2和HPV16-E6蛋白在宫颈癌中的阳性率呈正相关（rs=0．6014,P〈O．01）。结论COX-2和HPV16-E6在宫颈癌的侵袭转移中可能发挥协同作用。联合应用选择性COX-2抑制剂和HPV疫苗是宫颈癌防治中的一个新的有效策略。     

宫颈癌及其癌前病变组织中HPV16 E6蛋白的表达及意义

目的：探讨宫颈癌及其癌前病变组织中16型人乳头瘤病毒（HPV16）E6蛋白的表达及其意义.方法：用免疫组化SP法对15例正常宫颈组织、14例低级别宫颈上皮内瘤变（LCIN）、11例高级别宫颈上皮内瘤变（HCIN）以及61例浸润性宫颈癌标本进行了HPV16 E6蛋白表达的检测.结果：HPV16 E6蛋白在正常宫颈上皮、CINⅠ～Ⅱ、CINⅢ及浸润性宫颈鳞癌中的阳性表达率分别为0（0/15）、7.14%（1/14）、36.36%（4/11）、59.02%（36/61）.高级别CIN和浸润性宫颈癌中HPV16 E6蛋白阳性率明显高于正常宫颈组织和低级别CIN（P〈0.05）,HPV16 E6蛋白表达与宫颈癌临床分期、组织分化和淋巴结转移无关（P〉0.05）.结论：HPV16 E6蛋白的检测可能可作为宫颈癌前病变转归的指标.     

组织芯片检测MCM2和HPV16在宫颈癌中的表达及意义

目的：探讨MCM2和HPV16在宫颈癌组织中的表达及相关性。方法：采用免疫组化ABC法检测MCM2和HPV16在不同病变宫颈组织芯片中的表达。结果：MCM2在宫颈癌中表达高于正常宫颈,有显著性差异（P〈0.05）,HPV16在宫颈癌和C IN中表达高于正常宫颈（P〈0.05和P〈0.01）。HPV16表达与病理类型有关,宫颈鳞癌中阳性表达显著高于宫颈腺癌,有显著性差异（P〈0.05）。HPV16与MCM2呈明显正相关（r=0.3608,P〈0.01）。结论：MCM2和HPV16在宫颈癌变过程中起协同促进作用。MCM2是一个敏感、可靠地反映宫颈上皮细胞增殖的指标,其结合HPV的检测对判断宫颈病变的性质及程度有参考价值。     

HLA-DR抗原及HPV16/18E6蛋白在宫颈癌组织的表达及意义

目的:通过检测HLA-DR抗原及HPV16/18E6蛋白在宫颈癌组织中的表达情况,探讨由HLA-DR抗原介导的免疫应答在感染高危型人乳头瘤病毒(HPV)至发展为宫颈癌过程中的作用机制。方法:采用免疫组织化学SP法检测正常宫颈、宫颈上皮内瘤病变(CIN)及宫颈癌组织中HLA-DR抗原及HPV16/18E6的表达情况。结果:HLA-DR抗原的阳性表达率在正常宫颈、CIN、宫颈癌组织中分别为37.5%、73.3%、81.8%,而HPV16/18E6蛋白的阳性表达率则分别为37.5%、60.0%、75.8%,两者在3组的表达差异显著,P均<0.05。HLA-DR抗原及HPV16/18E6蛋白在宫颈癌组织中的阳性表达率随临床分期、分化程度及淋巴结是否转移而不同,但无显著性差异,P均>0.05。结论:HLA-DR抗原递呈病毒抗原给T细胞引起的免疫应答可能在宫颈癌的发生发展过程中起重要的作用。     

浸润性宫颈癌及宫颈上皮内瘤变组织中HPV16-E7蛋白和端粒酶的表达及意义

目的探讨16型人乳头瘤病毒E7（HPV16-E7）蛋白和端粒酶在浸润性宫颈癌及宫颈上皮内瘤变组织中的表达以及在宫颈癌发生、发展过程中的作用。方法30例浸润性宫颈癌（ICC组）;90例宫颈上皮内瘤变（CIN）,其中CINⅠ（CINⅠ组）30例,CINⅡ（CINⅡ组）30例,CINⅢ（CINⅢ组）30例。采用免疫组化Elivision二步法检测各组组织标本中HPV16-E7蛋白和端粒酶的表达。另设10例正常宫颈组织标本作为对照组。结果对照组、CINⅠ组、CINⅡ组、CINⅢ组和ICC组中的HPV16-E7蛋白阳性表达率分别为30.0%、63.3%、63.3%、76.7%和96.7%,ICC组和CINⅢ组显著高于对照组,差异均有统计学意义（均P〈0.05）;而ICC组与CINⅢ组比较,CINⅢ组与CINⅡ组比较,差异均无统计学意义（均P〉0.05）。对照组、CINⅠ组、CINⅡ组、CINⅢ组和ICC组的端粒酶阳性表达率分别为30.0%、40.0%、43.3%、70.0%和93.3%,ICC组显著高于CINⅢ组,CINⅢ显著高于CINⅡ组,差异均有统计学意义（均P〈0.05）;而CINⅡ组与CINⅠ组比较,CINⅠ组与对照组比较,差异均无统计学意义（均P〉0.05）。浸润性宫颈癌及宫颈上皮内瘤变患者的HPV16-E7蛋白与端粒酶的表达呈正相关（r=0.376,P〈0.01）。结论HPV16-E7蛋白和端粒酶的表达与宫颈癌的发生、发展有关。     

HPV16/18 E6和TRIM25蛋白在不同宫颈组织中的表达及意义

目的 研究不同宫颈组织中HPV16/18 E6和TRIM25蛋白表达水平及意义。方法 选取宫颈癌患者105例、CINIⅠ~Ⅲ患者62例、CINⅠ患者58例和慢性宫颈炎患者50例,免疫组织化学方法检测在各宫颈组织中HPV16/18 E6和TRIM25的表达情况。用Spearman相关分析法分析HPV16/18 E6和TRIM25表达在宫颈癌组织中的相关性。用Kaplan-Meier法分析HPV16/18 E6和TRIM25表达水平与宫颈癌患者预后的关系;COX回归分析法分析宫颈癌患者预后的危险因素。结果HPV16/18 E6、TRIM25在不同宫颈组织中表达比较,差异有统计学意义。HPV16/18 E6和TRIM25在宫颈癌组织中表达水平呈负相关。HPV16/18 E6表达与组织分化程度、淋巴结转移、肿瘤直径有关,TRIM25表达与组织分化程度、淋巴结转移有关。HPV16/18 E6阳性表达患者的总生存期短于阴性表达患者。TRIM25阴性表达患者的总生存期短于阳性表达患者。淋巴结转移、HPV16/18 E6可作为宫颈癌患者预后的独立危险因素,TRIM25可作为宫颈癌患者预后的独立保护因素。结论 HPV16/18 E6、TRIM25表达与不同宫颈病变的发生、发展及预后有关,有望成为HPV感染及宫颈癌辅助基因治疗的靶点。     

HPV16-E7蛋白和Survivin在宫颈鳞癌及其癌前病变组织中的表达及意义

目的 探讨HPV16-E7蛋白和Survivin在宫颈鳞癌和宫颈上皮内瘤变(CIN)组织中的表达以及其在宫颈癌发生、发展中的作用.方法 取宫颈鳞癌组织30例、CIN组织90例(其中CINⅠ、CINⅡ、CINⅢ各30例),采用免疫组化EnVision二步法检测标本中HPV16-E7蛋白和Survivin的表达,另取正常宫颈组织10例为对照组.结果 HPV16-E7蛋白和Survivin在宫颈鳞癌及CIN组织中的表达随宫颈病变进展而呈递增趋势,且二者呈正相关(r=0.340,P=0.000);HPV16-E7蛋白和Survivin在宫颈鳞癌组织中的表达与患者年龄、临床分期、病理分级、淋巴结转移均无明显关系.结论 HPV16-E7蛋白和Survivin与宫颈癌的发生、发展密切相关.     

HPV16-E6、P53、BTG1在子宫颈疾病中的表达及意义

目的：探讨HPV16-E6、P53、BTG1在宫颈鳞癌、高度鳞状上皮内病变（HSIL）、慢性宫颈炎等子宫颈疾病中的表达及其临床意义。方法：收集宫颈鳞癌35例、HSIL 53例、慢性宫颈炎44例的病理组织,采用RQ-PCR检测HPV16-E6、P53、BTG1转录水平的表达,Western Blot检测HPV16-E6、P53、BTG1蛋白水平的表达,分析其表达与子宫颈病变的关系。结果：在宫颈鳞癌、HSIL、慢性宫颈炎组织中,BTG1、P53两者mRNA及蛋白的表达均随病理级别的降低而逐渐升高,差异有统计学意义（P<0.05）;宫颈鳞癌、HSIL组织中HPV16-E6 mRNA及蛋白的表达均明显高于慢性宫颈炎,差异有统计学意义（P<0.01）,而宫颈鳞癌与HSIL组织中HPV16-E6 mRNA及蛋白的表达差异无统计学意义（P>0.05）。结论：HPV16-E6、P53、BTG1的表达可能与宫颈癌的发生、发展相关,并在宫颈癌发生的早期已经发生了变化,可能是宫颈癌诊断和治疗的新靶点。     

宫颈癌预后影响因素的临床分析及研究

摘要：目的研究环氧合酶-2（cyclooxygenase-2,COX-2）、人乳头瘤病毒16-E6（humanpapillomavirusl6-E6,HPVl6-E6）及I临床病理特征对宫颈癌患者预后的影响。方法采用免疫组化S—P法,检测92例接受综合治疗的宫颈癌患者石蜡切片中COX-2、HPVl6-E6的表达情况,探讨COX-2及HPVl6-E6对宫颈癌预后的影响。结果COX-2、HPVl6-E6及病理分级、临床分期、淋巴结转移、病灶直径、宫旁浸润或脉管瘤栓对宫颈癌预后的影响有统计学意义（P〈0．05）,年龄、病理类型、治疗方式、肌层浸润深度对患者的预后无统计学意义（P〈0．05）。结论COX-2、HPVl6-E6、临床分期、淋巴结转移、宫旁浸润或脉管瘤栓为宫颈癌的独立预后因素。     

靶向人乳头瘤病毒16型-E6的siRNA对宫颈癌肿瘤生长的影响

目的 研究靶向HPV16-E6的小分子干扰RNA抑制宫颈癌裸鼠移植瘤的生长.方法 建立裸鼠宫颈癌模型,HPV16-E6 siRNA瘤体内多点注射观察肿瘤的生长情况,使用HE染色方法观察肿瘤组织细胞在pSiRNA或pCON治疗后的病理学改变;免疫组化采用SP法.结果 靶向HPV16-E6的小分子干扰RNA能显著抑制宫颈癌裸鼠移植瘤的生长.结论 利用宫颈癌裸鼠移植瘤模型,证明靶向HPV16-E6的siRNA能够显著抑制宫颈癌裸鼠移植瘤的生长.     

端粒酶和人乳头病毒16/18在宫颈癌中的表达及其临床意义

目的:探讨端粒酶(hTERC)和人乳头病毒(HPV)16/18在宫颈癌中的表达及其临床诊断意义。方法:随机选择2009年3月～2012年3月,我院妇产科收治的宫颈癌确诊病例40例作为观察组。同时,随机选择在本院门诊就诊的宫颈诊断正常40例病理标本作为对照组。分别采用聚合酶链反应(PCR)技术和重复片段扩增方法银染定性法(TRAP-PCR),对所有样本宫颈组织中hTERC和HPVl6/18的感染和表达情况进行检测。利用SPSS17.0软件运用Logistic分析各组HPVl6/18和hTERC的感染和表达与宫颈病变的关联性。结果:宫颈癌组hTERC阳性率为60.0%,显著高于正常宫颈组的2.5%(P<0.01);HPV-16/18阳性率达到92.50%,显著高于正常宫颈组阳性率7.50%(P<0.01);宫颈癌易感性与hTERC、HPV16和HPV18阳性率关联关联系数分别为3.94、4.022和4.73,均达到显著水平(P<0.05)。结论:hTERC基因表达和HPV16/18感染与宫颈癌宫颈组织病变有密切的关联性,在宫颈癌发生发展中起重要作用,两者可以作为宫颈癌早期诊断的临床指标之一。     

92例宫颈癌患者预后影响因素的分析研究

目的分析宫颈癌患者的预后影响因素。方法选择2004年3月～2009年12月在邯郸市中心医院妇科治疗的宫颈癌患者92例,组间生存率的比较采用Log-rank检验,采用Cox比例风险模型进行多因素分析,探讨宫颈癌的预后影响因素。结果 Log-rank检验显示,临床分期、淋巴结转移、宫旁浸润或脉管瘤栓、环氧合酶-2（COX-2）阳性、人乳头瘤病毒16-E6蛋白（HPV16-E6）阳性与预后有关（P〈0.05）,而年龄、病理类型、宫颈肌层浸润深度与预后无关（P〉0.05）。Cox比例风险模型结果显示,临床分期、淋巴结转移、宫旁浸润或脉管瘤栓、COX-2阳性、HPV16-E6阳性与宫颈癌预后显著相关（P〈0.05）;而肿瘤分化程度、病灶直径与宫颈癌预后无关（P〉0.05）。结论淋巴结转移、宫旁浸润或脉管瘤栓、COX-2、HPV16-E6为宫颈癌的独立预后因素。     

Survivin、HPV 16-E7蛋白、VEGF在宫颈鳞癌及癌前病变中的表达及临床意义

目的探讨Survivin、HPV16-E7蛋白、血管内皮生长因子(VEGF)在宫颈鳞癌及宫颈上皮内瘤样病变组织中的表达及在宫颈癌发生、发展中的作用。方法采用免疫组化SP法检测50例宫颈鳞癌、90例宫颈上皮内瘤变(其中CINⅠ、CINⅡ、CINⅢ各为30例)中Survivin、HPV16-E7蛋白及VEGF的表达,另取正常宫颈者20例为对照组。结果 Survivin、HPV16-E7蛋白及VEGF在宫颈鳞癌及宫颈上皮内瘤变(CINⅡ、CINⅢ)中的表达均随宫颈病变而呈递增趋势(P<0.05);Survivin的高表达与分化程度、临床分期及淋巴结转移有关(P<0.05);VEGF的高表达与分化程度、临床分期及淋巴结转移有关(P<0.05);HPV16-E7蛋白的高表达与分化程度、临床分期及淋巴结转移无关(P>0.05)。Survivin与HPV16-E7蛋白和VEGF的表达间存在正相关(r=0.417,P<0.01;r=0.378,P<0.01)。结论 Survivin、HPV16-E7蛋白及VEGF与宫颈癌的发生、发展密切相关。     

HPV16 E6蛋白表达作为宫颈上皮内病变的癌变等级指标研究

目的：为了研究HPV16 E6蛋白表达程度对宫颈上皮内病变程度的影响。探讨蛋白表达与不同等级宫颈内上皮病变关系。为预测宫颈癌前病变结局转归的方向探索分子的指标。方法：选取35例样本,其中10例低度鳞状上皮内病变（CIN1）,15例高度鳞状上皮内病变（CIN2和CIN3）,和10例正常上皮细胞样本。使用免疫组化方法进行检测。结果：HPV16 E6I基因在12例病人中高度表达（34．3％）。 HPV16 E6Ⅱ基因在10例病人中高度表达（28．6％）。在CIN病人其表达均高于正常组。差异均有统计学意义（P＜0．05）。在CIN1、CIN2／CIN3与正常组织之间无统计学意义上的差别。在CIN2／CIN3之间表达HPV16 E6I 基因、HPV16 E6Ⅱ基因的表达有统计学意义上的差别。结论：HPV16 E6蛋白可试作为确立宫颈癌等级的分子指标。     

COX-2、VEGF及MVD在宫颈癌中的表达及意义

目的：研究环氧合酶一2（COx一2）、血管内皮生长因子（VEGF）在宫颈癌中的表达及其与肿瘤血管新生和临床病理特征之间的关系。方法：采用免疫组化和RT—PCR方法检测50例正常宫颈组织和62例宫颈癌组织中cOX一2、VEGF的表达并检测微血管密度（MVD）值,分析其相关性及其与患者临床病理特征的关系。结果：RT—PCR和免疫组织化学结果显示,宫颈癌组织中的COX一2、VEGF的表达及MVD计数均明显高于正常组织,差异具有统计学意义（P〈0．05）;且COX一2、VEGF的表达及MVD计数在不同年龄、临床分期的宫颈癌组织中比较,差异无统计学意义（P〉0．05）;而与病理分级、是否淋巴结转移有关,差异具有统计学意义（P〈0．05）。此外,Spearman等级相关分析显示：宫颈癌组织中COX一2蛋白表达与VEGF蛋白的表达呈正相关（r一0．8214,P〈0．05）;COX一2蛋白表达与MVD计数呈正相关（r一0．7928,P〈0．05）;VEGF蛋白的表达与MVD计数呈正相关（r一0．8035,P〈0．05）。结论：在宫颈癌组织中cox2、VEGF的阳性表达率和MVD值均高于正常宫颈组织,可能参与了宫颈癌的发生发展和血管生成过程,检测cOx一2、VEGF的表达及MVD值能够作为宫颈癌诊断和转移的依据。     

p16~(INK4a)与HPV16/18-E6在宫颈组织中的表达及其临床意义

目的 研究p16INK4a与HPV在不同宫颈组织中的表达及其临床意义,以寻求预测宫颈癌前病变及宫颈癌进展及预后的生物学标记.方法 选取不同的宫颈组织.采用免疫组织化学方法检测宫颈组织上HPV16/18-E6和p16INK4a的表达,并结合临床资料进行分析.结果 HPV16/18-E6和p16INK4a在正常宫颈组织、慢性宫颈炎组织和宫颈上皮内瘤变组织CIN Ⅰ级上呈阴性表达或弱表达,在CIN Ⅲ级和宫颈癌组织上表达明显增强(P＜0.01).p16INK4a在宫颈癌上的表达和宫颈癌的病理分化和肌层浸润程度有明显的相关性(P＜0.01).结论 HPV16/18-E6和p16INK4a在宫颈CIN Ⅲ和宫颈癌上的表达有明显的相关性.p16INK4a和HR-HPV联合检测可提高对宫颈癌前变及宫颈癌的早期诊断率.     

应用荧光定量聚合酶链方法检测宫颈组织中人乳头瘤病毒16E6基因

目的　建立荧光定量聚合酶链 (FQ PCR)方法检测宫颈细胞中人乳头瘤病毒 16型(HPV16 )E6基因的方法。方法　以 2 2 0例新疆妇女宫颈不同病变组织DNA作为样本 ,人乳头瘤病毒 16型 (新疆株 )E6基因 (HPV16E6 ,AF32 785 1)作为扩增的靶基因 ,同时以人 β 肌动蛋白基因片段作为内参照 ,借助于设计的目的基因引物 ,两个特异的荧光探针 ,在筛选的FQ PCR优化反应体系中 ,同时对两个基因片段进行扩增 ,得到HPV16E6的相对含量。结果　对 β 肌动蛋白阳性的宫颈不同病变组织中HPV16E6阳性率及其相对含量进行统计分析 ,新疆妇女宫颈脱落细胞标本 96例中 ,HPV16E6阳性 3例 (3 3% ) ;宫颈癌蜡块组织 5 9例中HPV16E6阳性 4 9例 (83 0 % ) ;宫颈上皮内瘤变 (CIN)蜡块组织 6 5例中 ,HPV16E6阳性 2 8例 (75 7% ) ;宫颈炎蜡块组织 33例 ,HPV16E6阳性 2 8例 (93 3% )。HPV16E6的相对含量随病情加重呈上升趋势 ,二者呈显著正相关 ,相关系数为 0 83。结论　建立的FQ PCR检测宫颈不同病变组织内HPV16E6基因的方法 ,能反映单位细胞人乳头瘤病毒的复制情况 ,筛查宫颈癌患者 ,并可能应用于宫颈癌的风险评估和疗效观察。