环境化学物雌激素样作用的评价方法

许多环境化学物具有雌激素样作用（ｅｓｔｒｏｇｅｎ－ｌｉｋｅｅｆｅｃｔ），它们模拟或干扰天然雌激素的生理、生化作用。这类物质统称为环境雌激素。目前已报道的环境雌激素主要有农药（如ＤＤＴ及其代谢产物）、工业化学物（如非离子表面活性剂和多氯联苯）、人工合成...     

白藜芦醇对去卵巢大鼠生殖系统的影响

目的观察白藜芦醇(RES)对去卵巢大鼠生殖系统的影响,研究其雌激素样作用。方法48只SD大鼠随机分为6组,分别为A组:假手术、B组:去卵巢、C组:去卵巢+0·03mg/(kg·bw)已烯雌酚(DES)、D、E、F组:去卵巢+RES(分别为5,15和45mg/(kg·bw)剂量组,处理90d,观察大鼠血清雌二醇浓度、动情周期、子宫指数及子宫内膜的变化。结果A组血清雌二醇浓度显著高于其余5组(P<0·05),子宫指数A组显著高于B、D、E、F组,C组显著高于A组(P<0·05);阴道涂片显示B组大鼠基本无动情期,C组大鼠动情期明显,D、E、F组大鼠部分出现动情期;D、E、F组子宫内膜部分萎缩变薄,内薄上皮细胞形态正常,C组大鼠子宫内膜无萎缩,内膜上皮细胞水肿,但无明显增生。结论白藜芦醇在去卵巢大巢体内有较弱的雌激素样作用,对大鼠子宫内膜无促进增生的副作用。     

大豆异黄酮雌激素样作用的实验研究

目的 :探讨大豆异黄酮的雌激素样作用。方法 :采用性成熟 SD去卵巢雌性大鼠 ,用去大豆蛋白饲料喂养 ,口服不同剂量大豆异黄酮 ,观察阴道涂片情况 ,测量子宫系数以观察大豆异黄酮的雌激素样作用。结果 :大豆异黄酮能使性成熟的去卵巢大鼠子宫增重 ,阴道上皮细胞发生角化 ,使之出现动情期的改变。结论 :大豆异黄酮具有雌激素样作用 ,且作用强度与剂量有关。     

农药咪鲜安雌激素样作用机制体外研究

目的用体外试验检测农药咪鲜安的雌激素样作用,并对其可能的作用机制进行探讨。方法将人乳腺癌细胞株(MCF-7)细胞在含10%小牛血清的RPM11640培养基中进行半开放式贴壁培养,加受试物前2周,改在含10%去激素小牛血清的无酚红RPMI 1640培养基中培养。设溶剂对照组、阳性对照组及5个不同浓度的咪鲜安样品组,采用MCF-7细胞增殖试验、四甲基偶氮噻唑蓝(MTT)试验和生长曲线观察咪鲜安对MCF-7细胞增殖的影响,并通过雌激素受体(ER)结合试验分析咪鲜安与ER的结合情况,探讨可能的作用机制。结果咪鲜安在10^-7~10^-5mol/L剂量范围内可诱导MCF-7细胞增殖,差异有统计学意义(P<0.05或P<0.01),且存在剂量-效应关系;咪鲜安能竞争性地与ER结合,从而抑制125I-E2与ER结合。结论咪鲜安具有雌激素样作用,其作用机制在于其竞争性地与ER的结合。     

5种多环芳烃化学物的雌激素样作用研究

目的 评价5种多环芳烃化学物的雌激素样作用。方法 采用大鼠子宫增生实验和MCF—7细胞增殖实验。结果 苯并(a)芘、7，12—二甲基苯并蒽和2，3，6，7—二苯并蒽不仅引起大鼠子宫湿重明显增加(P＜0．01，P＜0．05)，而且能明显诱导MCF—7细胞增殖(P＜0．01)。苯并(a)蒽和1，2—苯并菲既不能导致大鼠子宫湿重明显增加(P＞0．05)，也不能诱导MCF—7细胞增殖(P＞0．05)。结论 苯并(a)此、7，12—二甲基苯并蒽和2，3，6，7—二苯并蒽具有明显的雌激素样作用，而苯并(a)蒽和1，2—苯并蒽没有检测到雌激素样作用。     

有机磷农药环境雌激素样的作用

目的 初步探索几种常用有机磷农药的环境雌激素样作用,为有机磷农药对食品污染的综合防治提供依据。方法通过MCF-7人乳腺癌细胞增殖试验,对乐果(Dimethoate)、对硫磷(Parathion)、对氧磷(Paraoxon)3种有机磷农药进行雌激素样活性研究。结果 乐果10-5 mol·L-1、10-6mol·L-1剂量组对MCF-7乳腺癌细胞的增殖指数分别为1.31±0.07、1.56±0.08,较对照组的1.00±0.14有显著差异(P<0.05);对硫磷在10-6mol·L-1、10-7mol·L-1剂量组对MCF-7细胞的增殖指数分别为1.35±0.02、1.39±0.09,与对照组相比也有显著差异(P<0.05)。结论 乐果、对硫磷在适宜剂量范围内有拟雌激素样作用。     

顺式和反式氯氰菊酯拟雌激素样作用探讨

目的通过体内和体外实验相结合的方法,探讨顺式氯氰菊酯和反式氯氰菊酯是否具有拟雌激素样作用。方法进行去势大鼠子宫增重实验、小鼠子宫增重实验和乳腺癌细胞株(MCF-7)细胞增殖实验。结果两种子宫增重实验中两种受试物均未观察到子宫质量增加,而阳性对照组可见到明显子宫增重作用。两种受试物在10-8~10-10mol/L均导致MCF-7细胞明显增殖,与溶剂对照组比较均有统计学意义(P<0.05)。结论两种受试物在体内实验中未见明显雌激素样作用;在体外细胞实验中似乎具有拟雌激素样作用。     

染镉未成年雌性大鼠的雌激素样作用研究

目的评价镉的雌激素样活性。方法SD未成年雌性大鼠随机分为6组(阴性对照组、0.5、1.0、2.0、4.0mg/kgCd2 组及β-雌二醇阳性对照组,皮下注射染毒,每天1次,共3d,第4天时剖杀观察子宫湿重,子宫内膜腔上皮厚度,子宫内膜增殖细胞核抗原(PCNA)表达。结果各剂量染镉组大鼠子宫增重、子宫内膜腔上皮厚度及PCNA阳性表达各项指标与阴性对照组比较差异未见统计学意义(P>0.05)。结论在该实验条件下,并未显示镉具有雌激素样活性。     

用子宫增重试验检测壬基酚的雌激素样作用

目的：检测壬基酚的雌激素样作用,探索其作为环境内分泌干扰物的可能性。方法：220g左右的成年雌性SD大鼠,手术去双侧卵巢一周后和18d断奶ICR小鼠各30只,分别随机分为5个组（溶剂对照组、β－雌二醇阳性对照组和10、40、80mg/kg壬基酚剂量组）,腹腔注射给药3d,第4d剖杀动物,取出子宫称重。结果：两种动物在40、80mg/kg组与对照组比较,子宫增重有统计学意义。结论：本实验提示壬基酚可能具有雌激素样作用。     

污水处理传统工艺与新工艺出水中有机提取物的雌激素样作用比较

目的评价污水处理厂传统处理工艺和新技术处理工艺出水中有机提取物的雌激素样活性,比较两种处理工艺对微量有机污染物的去除效果。方法采用树脂吸附固相萃取富集水样中的微量有机污染物,利用重组基因酵母试验和小鼠子宫增重实验检测水样中有机提取物的雌激素样活性大小。结果重组基因酵母检测中,在原水样中微量有机污染物浓缩1000倍条件下,新技术出水有机提取物处理的酵母表现出β-半乳糖苷酶活性,而三级出水、二级出水和进水都为500倍,相同条件下的β-半乳糖苷酶活性,新技术出水组三级出水组二级出水组进水组。小鼠子宫增重实验中,仅进水有机提取物油溶液原液组和阴性对照组之间具有显著性差异(P0.05),其他各水样组之间皆无显著性差异。结论郑州市城市污水经处理后雌激素样活性显著下降,但仍对环境具有潜在危害;新技术对污水中微量有机污染物的去除效果明显好于传统技术。     

竞争性受体结合试验检测农药拟雌激素样作用

【目的】应用竞争性受体结合试验检测常用六种农药的雌激素样活性。[方法]选用乐果、乙酰甲胺磷、久效磷、马拉硫磷、对硫磷和对氧磷6种有机磷农药进行大鼠子宫雌激素受体竞争性结合试验。【结果】应用多点饱和分析建立Scatchard图，采用10nmol／L^3 H-E。作单点饱和分析，结果显示这6种有机磷农药的结合率均未下降到50％。【结论】这6种有机磷农药不能与大鼠子宫雌激素受体的位点结合。     

镉雌激素样作用的筛检--子宫增重试验

[目的]用子宫增重试验筛检镉的雌激素样作用,比较子宫增重试验中子宫湿重和剥离重之间的关系,评价子宫增重试验的测量指标.[方法]分别对去卵巢SD大鼠皮下注射雌二醇(0,30,100,300,1 000,3 000,10 000 ng/kg·bw)和氯化镉(0,25,50,75,100,200 μg/kg·bw),连续染毒3 d后,第4天处死动物,分离子宫,称量子宫的湿重和挤去子宫腔内液后的剥离重.[结果]与对照组相比,雌激素组和氯化镉组子宫重量都有增加的剂量效应趋势.雌激素组子宫湿重在30 ng/kg·bw时与对照组相比差异有显著性(P＜0.05),剥离重在100 ng/kg·bw时差异才出现显著性(P＜0.05).氯化镉组情况类似,湿重和剥离重差异呈现显著性的剂量分别为75 μg/kg·bw和100 μg/kg·bw.子宫腔内液在雌激素组随着剂量的增加,持续上升;在氯化镉组,当达到一定浓度后不再增加,对子宫增重的影响逐渐减少.[结论]镉可以引起大鼠子宫增重.     

黑升麻的雌激素活性及其对人类乳腺癌MCF-7细胞雌激素受体水平的影响

为了检测黑升麻 (CR)的雌激素活性及其对人类乳腺癌 MCF- 7细胞雌激素受体 (ERs)水平的影响 ,未成年雌性小鼠按体重以 75、15 0和 30 0 m g/ kg的 CR灌胃 14d,观察处于动情期的时间 ,第 15天处死后取子宫和卵巢称重。以 MTT实验筛选 CR的最佳细胞作用剂量 ,观察对照组、CR组 (4.75μg/ L )和 17β-雌二醇组 (0 .3nmol/ L)的细胞生长曲线 ,并在流式细胞仪上用间接免疫荧光法测定各组 ERs水平。结果发现子宫重量随 CR剂量增加而增加 ,30 0 mg/ kg的 CR可显著增加动情天数 (P<0 .0 5 )。 4.75 μg/ L CR对 MCF- 7细胞的促增殖作用最强 ,达 6 4.7% ;CR组和 17β-雌二醇组的细胞群体倍增时间 (TD)分别为 32 .1h和31.7h,明显低于对照组 (TD=35 .3h) ;4.75 μg/ L 的 CR可显著增加细胞的 ERs水平 (P<0 .0 1)。结果表明CR具有雌激素活性 ,其升高 ERs水平的作用可能是该物质可治疗更年期综合征的机制之一。     

白藜芦醇对小鼠脂代谢及相关蛋白表达影响

目的探讨白藜芦醇（RSV）对高脂饲料喂养的C57BL/6J小鼠脂代谢及肝脏沉默信息调节因子1（SIRT1）及肝X受体α（LXRα）表达影响。方法雄性C57BL/6J小鼠30只,分为对照组、高脂组和RSV干预组（n=10）,对照组和高脂组分别喂饲基础饲料和高脂饲料,RSV干预组在喂饲高脂饲料同时给予RSV灌胃,第16周测定血清甘油三酯（TG）、总胆固醇（TC）、低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）和高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）含量,分离小鼠肝脏,测定TG、TC含量以及SIRT1、LXRα蛋白表达水平。结果与对照组比较,高脂组小鼠血清TG、TC、LDL-C含量[分别为（1.25±0.25）、（4.29±0.59）、（1.59±0.20）mmol/L]和肝脏TG、TC含量[分别为（5.78±1.69）、（2.69±1.20）mmol/L]升高,肝脏SIRT1、LXRα蛋白表达水平[分别为（0.36±0.03）、（0.78±0.07）]下降（P<0.05）;与高脂组比较,RSV干预组小鼠血清TG、TC、LDL-C含量[分别为（0.91±0.15）、（3.65±0.36）、（1.39±0.11）mmol/L]和肝脏TG、TC含量[分别为（4.63±1.70）、（1.65±0.89）mmol/L]明显下降,肝脏SIRT1、LXRα蛋白表达水平[分别为（0.41±0.05）、（0.88±0.09）]明显升高（P<0.05）。结论白藜芦醇可有效改善高脂饲料喂养C57BL/6J小鼠脂代谢异常,其机制可能与促进肝脏SIRT1及LXRα表达有关。     

3种拟除虫菊酯类农药拟雌激素样活性的子宫增重实验研究

[目的]研究国内广泛使用的3种拟除虫菊酯类农药氰戊菊酯、氯氰菊酯和甲氰菊酯在体内的拟雌激素样作用。[方法]在不产生严重中毒的剂量以下,给刚断乳的雌性昆明种小鼠皮下注射不同浓度的3种拟除虫菊酯类农药连续3 d,氰戊菊酯25,50,100mg/(kg·d),氯氰菊酯20,40,80mg/(kg·d),甲氰菊酯4,8,16mg/(kg·d),观察它们对小鼠子宫和阴道的影响。[结果]高浓度氰戊菊酯组,小鼠阴道开口率(20%),阴道黏膜上皮细胞高度(2.84±0.35) μm,子宫重量(9.58±1.01)mg,脏器系数(0.79±0.09)%,子宫内膜上皮细胞高度(1.25±0.16)μm,基质层厚度(5.28 ±0.72)μm及腺体数量(2.98±0.32);高浓度氯氰菊酯组,小鼠阴道开口率(20%),阴道黏膜上皮细胞高度(2.78±0.30) μm,子宫重量(9.94±1.10)mg,脏器系数(0.83±0.10)%,子宫内膜上皮细胞高度(1.25±0.14)μm,基质层厚度(5.06 ±0.62)μm及腺体数量(3.16±0.43);高浓度甲氰菊酯组,小鼠阴道开口率(40%),阴道黏膜上皮细胞高度(3.01±0.33) μm,子宫重量(10.07±1.52)mg,脏器系数(0.85±0.18)%,子宫内膜上皮细胞高度(1.29±0.15)μm,基质层厚度(5.34 ±0.58)μm及腺体数量(3.21±0.34)。3种拟除虫菊酯类农药各浓度组与阴性对照组比较,上述各项指标差异均无显著性。[结论]3种拟除虫菊酯类农药对子宫和阴道无明显影响,未显示出拟雌激素样活性。而小鼠阴道黏膜上皮细胞高度可以作为检测化学物拟雌激素样活性的一个指标。     

白藜芦醇对高脂模型小鼠脂代谢影响

目的探讨白藜芦醇对高脂模型小鼠脂代谢影响。方法 50只雄性小鼠随机分为基础对照组,高脂组,白藜芦醇低、中、高剂量组;除基础对照组外,其他组均喂饲高脂饲料,4周后白藜芦醇低、中、高剂量组分别给予白藜芦醇5,22,45 mg/kg灌胃,共干预6周,检测血清总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白-胆固醇(LDL-C)和高密度脂蛋白-胆固醇(HDL-C)。结果不同剂量白藜芦醇干预6周即显现出降低高脂模型小鼠血脂水平的趋势或作用,以中剂量组作用最明显,TC、TG和LDL-C分别为(3.174±0.687)、(0.884±0.408)和(1.762±0.877)mmol/L,与高脂组比较,血清TG和LDL-C明显下降(P<0.05);白藜芦醇还具有减轻高脂模型小鼠肝脏脂肪变性的作用。结论白藜芦醇干预对高脂模型小鼠可产生降脂作用。     

白藜芦醇对C57BL/6J小鼠脂代谢的影响

目的观察22.5mg/kg BW白藜芦醇对C57BL/6J小鼠血清和肝脏脂质的影响。方法 30只C57BL/6J雄性小鼠随机分为正常对照组、高脂组和高脂+白藜芦醇组,每组10只,正常对照组喂饲基础饲料,高脂组和高脂+白藜芦醇组喂饲高脂高胆固醇饲料。高脂+白藜芦醇组每日经灌胃给予22.5mg/kg BW白藜芦醇羧甲基纤维素钠溶液进行干预,正常对照组和高脂组均给予0.5%的羧甲基纤维素钠溶液灌胃。干预8周后测定小鼠血清TC、TG、HDL-C和LDL-C水平,肝脏TC和TG水平,并观察小鼠肝组织病理改变。结果高脂组和高脂+白藜芦醇组小鼠血清TC、LDL-C和HDL-C水平均高于正常对照组(P<0.05),高脂组血清TC和LDL-C水平还高于高脂+白藜芦醇组(P<0.05),但高脂组和高脂+白藜芦醇组小鼠血清TG水平均低于正常对照组(P<0.05)。高脂组小鼠肝脏TC水平高于高脂+白藜芦醇组和正常对照组(P<0.05)。结论 22.5mg/kg BW白藜芦醇可以降低喂饲高脂饲料的C57BL/6J小鼠体内胆固醇水平。     

白藜芦醇对铅诱导小鼠脂质过氧化的拮抗作用

目的探讨白藜芦醇对铅暴露引起的氧化损伤的拮抗作用。方法铅染毒动物模型用含铅(醋酸铅0.5%)饮用水构建。60只健康雄性昆明种小鼠随机分为6组,每组10只:正常对照组,铅染毒组,铅染毒+白藜芦醇低、中、高剂量干预组,白藜芦醇组。检测小鼠血铅和组织铅含量及肝、肾组织中超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、过氧化氢酶(CAT)活性和丙二醛(MDA)的含量和抗氧化能力指数。结果与铅染毒组相比,白藜芦醇处理组肝、肾组织中SOD、CAT和GSH-Px活性均上升(P<0.01),MDA含量降低(P<0.01)。白藜芦醇使用剂量在800～1 200mg/kg时能够显著地提高机体抗氧化酶的活力,增强机体的抗氧化能力。铅染毒小鼠血浆、肝组织及肾组织中ORAC值均有一定程度的减小,给予白藜芦醇可以拮抗铅毒性引起的ORAC值的下降。结论白藜芦醇通过提高抗氧化酶活性,以减轻铅毒引起的脂质过氧化损伤,提高小鼠机体的抗氧化能力,而实现保护肝、肾组织的作用。     

小米多肽对小鼠免疫调节作用

目的研究小米多肽对小鼠的免疫调节作用。方法小米多肽分为高、中、低剂量组,分别为250、500、1 000 mg/(kg·d)喂饲小鼠30 d,通过淋巴细胞转化试验、半数溶血值(HC₅₀)、腹腔巨噬细胞吞噬功能、免疫器官指数的测定,研究小米多肽对小鼠免疫调节作用。结果不同剂量的小米多肽有明显的刺激淋巴细胞转化作用;500、1 000 mg/(kg·d)小米多肽剂量组HC₅₀分别为(171.33±8.77)、(175.91±9.22),吞噬率分别为(59.45±5.16)%、(65.7±4.31)%;吞噬指数分别为(0.83±0.11)、(0.88±0.09),与对照组比较差异有统计学意义(P<0.01),脾脏指数和胸腺指数均明显增加(P<0.01)。结论小米多肽具有明显的免疫调节作用。