负向免疫调节树突细胞对心脏移植大鼠Th1/Th2类细胞因子的影响

目的 探讨受体树突细胞(DC)与体外光化学法(PUVA)处理的供体脾淋巴细胞共培养后,对心脏移植受体Th1/ThZ类细胞因子及移植物存活的影响.方法 以DA大鼠为供体,LEW大鼠为受体,建立大鼠腹部异位心脏移植模型.分离正常的供体脾淋巴细胞(SP),制备经PUVA处理的供体脾淋巴细胞(PWA-SP).在体外将PWA-SP或SP与受体骨髓来源的未成熟DC共同培养,检测上述处理对受体DC分泌白介素-10(IL-10)及干扰素-γ-(IFN-γ)的影响.按受体术前1周静脉输注的细胞成分将受体大鼠随机分为3组:对照组(n=7),单纯输注PBS;SP DC组(n=8).输注负载供体SP的受体大鼠DC;PWA-SP DC组(n=8),输注负载PUVA处理的供体SP的受体大鼠DC.观察移植物的存活时间,移植术后6d检测受体血清中Th1细胞因子(IL-2、IFN-γ)及Th2细胞因子(IL-10),并取移植心脏标本作切片检查,确定排斥反应的病理分级.结果 受体DC与供体PUVA-SP共培养后,其分泌的细胞因子IL-10、IFN-γ的水平分别为75.3±3.7、24.3±1.2ng/ml,明显高于同供体SP共培养后的受体DC(分别为39.0±3.1ng/ml、12.1±0.5ng/ml,P<0.01).心脏移植术后,PUVA-SP Dc组受体大鼠血清中Th1细胞因子IL-2和INF-γ的浓度分别为199.3±8.4、9.0±1.2ng/ml,明显低于对照组(分别为295.0±3.2、61.0±3.2ng/ml,P<0.01)及SP DC组(分别为559.3±35.3、69.0±2.3ng/ml,P<0.01),而其Th2细胞因子IL-10水平(58.2±0.9ng/ml)明显高于对照组(19.0±0.6ng/ml,P<0.01)及SPDC组(20.1±1.6ng/ml,P<0.01).PUVA-SP DC组移植物排斥反应病理分级明显低于对照组,而对照组移植物排斥反应病理分级则低于SP DC组.与对照组(6.7±0.3d)比较,PUVA-SP DC组移植物存活时间(27.3±1.3d)显著延长(P<0.01),而SP DC组移植物存活时间短于对照组(5.5±0.3d,P<0.05).结论 PUVA-SP DC具有负向免疫调节特性,能够在移植物受体体内诱导Th2免疫偏移,下调移植物排斥反应.     

旋毛虫感染对过敏性哮喘小鼠血清总IgE、IL-4、IL-5的影响

目的研究旋毛虫感染对过敏性哮喘小鼠血清TIgE、IL-4、IL-5的影响。方法随机将20只BALA/c雌性小鼠分为4组,每组5只,Ⅰ组为空白对照组,Ⅱ组为单纯过敏性哮喘组,Ⅲ组为感染旋毛虫后哮喘组,Ⅳ组为单纯感染旋毛虫组。首先,将200～300条旋毛虫囊包幼虫经口感染Ⅲ、Ⅳ组小鼠,建立旋毛虫感染模型。28 d后,用卵清白蛋白分别对Ⅱ组和Ⅲ组小鼠进行致敏激发,建立过敏性哮喘模型。56 d后,取小鼠血清,用ELISA法检测TIgE、IL-4、IL-5水平。结果 4组小鼠总IgE水平分别为:(61.79±25.79)ng/ml、(437.08±75.68)ng/ml、(251.64±107.27)ng/ml和(446.12±74.32)ng/ml;IL-4水平分别为:(136.49±31.17)pg/L、(209.80±21.57)pg/L、(162.79±17.69)pg/L和(182.71±12.08)pg/L;IL-5水平分别为:(7.31±1.86)ng/L、(16.00±2.28)ng/L、(9.24±1.73)ng/L和(11.41±2.11)ng/L;与Ⅱ组相比较,Ⅲ组血清中总IgE、IL-4及IL-5水平明显降低(P<0.05)。结论旋毛虫感染可以抑制过敏性哮喘小鼠血清TIgE、IL-4及IL-5的表达。     

复合营养素对应激大鼠血清IL-6水平的影响

目的 探讨复合营养素对大鼠应激时血清细胞因子白介素6(IL-6)水平的影响.方法 36只SD大鼠随机分为急性应激和慢性应激两组,其中各自又分为正常对照组、应激对照组、应激 复合营养素组.急性应激组束缚冷水浸泡应激30min,应激后0、0.5、1和2h处死动物取血;慢性应激组束缚冷水浸泡每日应激1次,30min,持续2周,最后1次应激结束后30min处死大鼠取血.ELISA检测大鼠血清中的IL-6水平.结果 束缚冷水浸泡应激可引起IL-6水平升高,而应用复合营养素对此有抑制作用.其中急性应激组应激后30min的变化最显著,IL-6水平由17.69±0.96pg/ml升高至29.67±1.64pg/ml,升高了67.8%;应用复合营养素可减轻应激所引起的IL-6水平的升高,30min时间点降至22.30±2.52pg/ml,降低了24.9%.慢性应激组其应激对照组的IL-6水平升高至30.69±1.08pg/ml,应激 复合营养素组则降低至22.70±1.68pg/ml.结论 复合营养素可以显著改善应激大鼠的内分泌免疫调节功能,对减轻应激所造成的损伤可能具有一定作用.     

高迁移率族蛋白B1对调节性树突状细胞的免疫效应及其作用机制

目的 观察高迁移率族蛋白B1(high mobility group box-1 protein,HMGB1)对分泌IL-10树突状细胞(dendritic cell,DC)亚群CD11clowCD45RBhigh DC功能的影响. 方法 采用磁珠分选技术获得Bab/c小鼠脾脏CD11clowCD45RBhighDC和CD4+T淋巴细胞,加不同浓度HMGB1处理(20,100,500 ng/ml,以不加HMGB1的细胞作为对照)CD11clowCD45RBhighDC细胞;流式细胞术检测CD11clow CD45RBhigh DC表面分子CD40、CD80、CD86、Ⅰ-a/e及Toll样受体(TLR)4的表达强度;应用ELISA检测CD11clowCD45RBhighDC培养液中IL-10的含量.将CD4+T淋巴细胞分为正常对照组(未作任何处理)、未刺激组(加入未经HMGB1处理的CD11clowCD45RBhighDC与CD4+T淋巴细胞混合培养)、高浓度HMGB1刺激组(加入经500 ng/ml HMGB1处理后的CD11clowCD45RBhighDC与CD4+T淋巴细胞混合培养)、高浓度HMGB1刺激+抗体1组(加入经500 ng/mlHMGB1处理后的CD11clowCD45RBhighDC、抗IL-10抗体与CD4+T淋巴细胞混合培养)和高浓度HMGB1刺激+抗体2组(加入经500 ng/ml HMGB1处理后的CD11clowCD45RBhighDC、IL-10的同型对照抗体与CD4+T淋巴细胞混合培养).流式细胞术检测CD4+T淋巴细胞培养液中IL-4和干扰素-γ(IFN-γ)的含量. 结果 与未加HMGB1刺激相比,HMGB1能显著增强CD11clowCD45RBhighDC表面分子CD86、TLR4的表达及IL-10的分泌,其中IL-10分泌呈HMGB1浓度依赖性.高浓度HMGB1刺激组IFN-γ水平为(279±17) pg/ml,显著低于未刺激组(963±11)pg/ml(P＜0.05);高浓度HMGB1刺激组IL-4水平为(372±14) pg/ml,明显高于未刺激组(213±10) pg/ml(P ＜0.05). 结论 HMGB1可促进CD11clowCD45RBhighDC IL-10的分泌,诱导CD4+T淋巴细胞向Th2型反应分化,通过激活CD11clowCD45RBhighDC介导机体免疫抑制活性.     

通心络对急性冠脉综合征患者PCI术后炎性反应及血管内皮功能的影响

 目的 探讨通心络对急性冠脉综合征(acute coronary syndrome, ACS)患者PCI术后炎性反应及血管内皮功能的影响。方法 收集辽河油田总医院心内科2017-10至2018-03收治的拟行PCI治疗的ACS住院患者137例,以随机信封法分为通心络组(68例)和对照组(69例)。对照组给予冠心病常规治疗,通心络组在常规治疗的基础上给予通心络胶囊口服治疗,观察周期均为12周。监测两组PCI术后血管生成素样蛋白2(Angptl2)、白细胞介素(IL)-18及血浆纤溶酶原激活物抑制剂-1(PAI-1)水平变化,术后12周肱动脉血管内皮舒张功能(FMD)和小动脉弹性指数(C2)。结果 观察治疗12周后,两组Angptl2[(27.61±8.55)ng/L,(32.30±11.56)ng/L]及IL-18[(75.66±10.22)pg/ml,(91.81±12.99)pg/ml]水平均较治疗前[(61.95±10.31)ng/L,(60.83±10.00)ng/L;(178.28±12.00)pg/ml,(180.12±10.43)pg/ml]显著降低(P＜0.05),同时PAI-1水平[(26.64±8.0)μg/L,(30.92±6.64)μg/L]较治疗前[(88.71±8.11) μg/L,(83.33±8.70) μg/L]显著降低(P＜0.05);且通心络组Angptl2及IL-18水平较对照组显著降低(P＜0.05);通心络组PAI-1水平低于对照组,两组间差异有统计学意义(P＜0.05)。治疗12周后两组FMD和C2均有改善,通心络组[FMD(8.99±1.12),C2(6.32±0.70) ml/mmHg×100]水平明显优于对照组[(6.65±0.95),(5.42±0.91)ml/mmHg×100]) (P＜0.05)。结论 通心络可通过降低Angptl2、IL-18、PAI-1水平及改善FMD和C2,减轻ACS患者PCI术后炎性反应、恢复血管内皮功能和修复小动脉弹性。     

阿托伐他汀对急性冠脉综合征患者血清MMP-9及IL-18的影响

目的：探讨阿托伐他汀对急性冠脉综合征（acute coronary syndrome,ACS）患者血清基质金属蛋白酶-9（matrix metalloproteinase-9,MMP-9）、白介素-18（interleukin-18,IL-18）水平的影响。方法将ACS患者60例随机分为阿托伐他汀组（阿托伐他汀20 mg/d,连续用药14 d）和对照组（除未用阿托伐他汀外,余治疗同阿托伐他汀组）。药物治疗前及治疗14 d后检测血清MMP-9、IL-18水平。结果阿托伐他汀组治疗后MMP-9及IL-18[分别是（295±110） mg/L和（399±115） pg/ml]与治疗前[分别是（368±97） mg/L和（471±105） pg/ml]比较有下降,差异均有统计学意义（ P＜0．05）;阿托伐他汀组治疗后MMP-9及IL-18水平均明显低于同期对照组[分别是（358±95） mg/L和（466±109） pg/ml],差异有统计学意义（P＜0．05）。结论阿托伐他汀可降低ACS 患者血清MMP-9、IL-18水平,抑制斑块内炎性反应,促进斑块的稳定性。     

双侧乳晕入路腔镜下治疗良性甲状腺疾病的手术效果

目的 探讨双侧乳晕入路腔镜下治疗良性甲状腺疾病的手术效果和优势.方法 选取在我院行双侧乳晕入路腔镜甲状腺切除术患者165例为观察组,另选行传统开放手术甲状腺切除术患者162例为对照组.比较两组手术时间、术中出血量、术后血清IL-6和TNF-α水平、术后并发症、患者对美容效果满意度等.结果 观察组术中出血量少于对照组[（50.3±10.4） vs （100.7±20.6） ml],术后IL-6 [（21.45±1.42）pg/ml vs（36.36± l.45）pg/ml]和TNF-α[（26.58±1.62）pg/ml vs （35.51±1.53）pg/ml] 水平明显低于对照组,差异有统计学意义（P＜0.05）.观察组患者术后美容效果满意度（8.9±0.8）高于对照组（4.2±0.4）,差异均有统计学意义（P＜0.05）.结论 双侧乳晕入路腔镜下甲状腺手术术中出血量较少,创伤小,美容效果优于开放手术,值得推广.     

集群免疫治疗对支气管哮喘患者血清IL-4和INF-Υ的影响

目的 检测集群免疫治疗(cluster immunotherapy)前后轻中度支气管哮喘患者血清白细胞介素4(IL-4)和Υ干扰素(INFF-Υ)的变化,探讨集群免疫治疗的机制.方法 68例轻中度过敏性哮喘患者,随机分为治疗组和对照组各34例,对照组给予抗组胺药物、布地奈德气雾剂和沙丁胺醇气雾剂治疗;治疗组在应用上述药物的同时给予剂量累加阶段为期7周的集群免疫治疗,而后每4周给予1次维持治疗.两组疗程均为1年,在治疗前后分别采用酶联免疫吸附试验(ELISA)方法 检测患者血清IL-4和INF-Υ值.检测数据应用SPSS15.0统计学软件进行分析.结果 两组中所有患者均完成了为期1年的治疗.治疗后两组患者血清IL-4值降低,而血清INF-Υ值升高.治疗组血清IL-4值(均数±标准差)由治疗前的(17.01±3.26) ng/L降至(11.43±2.48)ng/L,而对照组由治疗前的(16.84±2.94)ng/L降至(13.89±3.05)nb/L,治疗组血清IL-4值明显低于对照组,两组比较差异有显著统计学意义(P＜0.01);治疗组血清INF-Υ值(均数±标准差)由治疗前的(12.24 ±2.39) ng/L增至(16.98 ±3.16) ng/L,而对照组由治疗前的(11.96±2.15) ng/L增至(13.92±2.34)ng/L,治疗组血清ⅢF-Υ值明显高于对照组,两组比较差异有显著统计学意义(P＜0.01).结论 集群免疫治疗能有效降低患者血清IL-4值,同时能升高INF-Υ值.本研究表明调节患者血清IL-4和INF-Υ的平衡可能是集群免疫治疗的分子免疫机制之一.     

调节性树突细胞对皮肤移植小鼠IL-10+调节性B细胞的影响

目的 探讨吞噬了供者凋亡淋巴细胞的未成熟树突细胞(imDC)对皮肤移植受体小鼠外周血IL-10+CD19+调节性B细胞(Breg)比例及移植物存活时间的影响.方法 以C57BL/6小鼠作为受者,BALB/c小鼠为供者,建立小鼠皮肤移植模型.分离C57BL/6小鼠骨髓细胞,经小鼠重组白细胞介素4(IL-4)和粒-巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)共同诱导,制备并培养imDC.分离BALB/c小鼠脾淋巴细胞(SP),经光化学照射方法(PUVA)处理,得到供者小鼠脾淋巴细胞(PUVA-SP).在体外将PUVA-SP与C57BL/6小鼠骨髓来源的imDC共同培养,得到PUVA-SP DCs.根据受体小鼠术前接受的静脉输注成分将其随机分为4组(n=14):PUVA-SP DC组、imDC组、成熟树突细胞(maDC)组和PBS对照组.于手术前7d分别从尾静脉注入1×106个(0.2ml)PUVA-SP DC、imDC、maDC或0.2ml PBS.于移植术后观察受体小鼠的移植物存活时间、外周血IL-10+CD19+ Breg比例及IL-10的表达情况.结果 移植术后,受体小鼠外周血IL-10+CD 19+Breg细胞占CD19+B细胞的比例在PUVA-SP DC组为7.48％,明显高于imDC组(4.12％)、maDC组(3.01％)和PBS对照组(2.37％).PUVA-SP DC组小鼠血清中IL-10表达水平为58.2±0.9ng/ml,与maDC组(20.1±1.6ng/ml)、imDC组(26.2±1.3ng/ml)及PBS对照组(19.0±0.6ng/ml)比较显著升高(P＜0.01).PUVA-SP DC组移植物存活时间为62.3±2.6d,显著长于maDC组(20.7±1.9d)、imDC组(12.1±1.0d)和PBS对照组(11.0±1.3d,P＜0.01).结论 移植术前输注PUVA-SP DCs可显著延长移植物存活时间,增加受者体内IL-10的表达水平,诱导产生较多分泌IL-10的调节性B细胞.     

集群免疫治疗对支气管哮喘患者血清IL-4和INF-γ的影响

目的检测集群免疫治疗(cluster immunotherapy)前后轻中度支气管哮喘患者血清白细胞介素4(IL-4)和γ干扰素(INF-γ)的变化,探讨集群免疫治疗的机制。方法 68例轻中度过敏性哮喘患者,随机分为治疗组和对照组各34例,对照组给予抗组胺药物、布地奈德气雾剂和沙丁胺醇气雾剂治疗;治疗组在应用上述药物的同时给予剂量累加阶段为期7周的集群免疫治疗,而后每4周给予1次维持治疗。两组疗程均为1年,在治疗前后分别采用酶联免疫吸附试验(ELISA)方法检测患者血清IL-4和INF-γ值。检测数据应用SPSS15.0统计学软件进行分析。结果两组中所有患者均完成了为期1年的治疗。治疗后两组患者血清IL-4值降低,而血清INF-γ值升高。治疗组血清IL-4值(均数±标准差)由治疗前的(17.01±3.26)ng/L降至(11.43±2.48)ng/L,而对照组由治疗前的(16.84±2.94)ng/L降至(13.89±3.05)ng/L,治疗组血清IL-4值明显低于对照组,两组比较差异有显著统计学意义(P<0.01);治疗组血清INF-γ值(均数±标准差)由治疗前的(12.24±2.39)ng/L增至(16.98±3.16)ng/L,而对照组由治疗前的(11.96±2.15)ng/L增至(13.92±2.34)ng/L,治疗组血清INF-γ值明显高于对照组,两组比较差异有显著统计学意义(P<0.01)。结论集群免疫治疗能有效降低患者血清IL-4值,同时能升高INF-γ值。本研究表明调节患者血清IL-4和INF-γ的平衡可能是集群免疫治疗的分子免疫机制之一。     

同型半胱氨酸和白介素-18与急性脑梗死发病的相关性研究

目的：分析血浆同型半胱氨酸（Hcy）及白介素（IL）-18与急性脑梗死发病的相互关系。方法：选择我院老年病科2006-04－2008-05的住院脑梗死患者103例,健康对照46例,测定血清中IL-18及Hcy水平。结果：脑梗死组的血清IL-18浓度（212.57±86.72 pg/ml）明显高于对照组（121.45±75.65 pg/ml）（P〈0.05）;脑梗死组Hcy浓度（8.84±3.15μmol/L）明显高于对照组（6.92±1.23μmol/L）（P〈0.05）;在脑梗死患者,IL-18升高组血浆Hcy的浓度（10.1±3.5μmol/L）明显高于IL-18正常组（8.3±2.6μmol/L）,直线相关性显示IL-18水平和Hcy明显相关（r=0.42,P〈0.05）。结论：急性脑梗死患者血清中IL-18、Hcy浓度明显高于正常对照,另外IL-18可能是脑梗死患者Hcy的独立决定因素。     

C反应蛋白对急性冠脉综合征患者树突状细胞激活的影响

目的：研究C反应蛋白（CRP）对急性冠脉综合征（ACS）患者外周血树突状细胞（DC）分化成熟的影响。方法：研究人群分为ACS组与正常对照组。分离人外周血单核细胞,用含rhGM-CSF和rhIL-4的完全培养液培养7 d,使其分化为DC后加入CRP孵育。应用流式细胞仪检测DC表型CD80、CD86的表达;混合淋巴反应检测DC对T淋巴细胞的刺激作用;酶联免疫吸附法（ELISA）测定混合淋巴反应上清液中IL-4、IFN-γ水平。结果：与正常对照组比较,ACS组DC表面CD80、CD86的表达明显增高,对T淋巴细胞刺激的能力增强;致炎细胞因子IL-4、IFN-γ分泌增多;且IL-4/IFN-γ比值降低。结论：ACS时CRP可明显促进DC的分化成熟,刺激的免疫类型以细胞免疫为主,即产生免疫偏移。     

健康综合干预对糖耐量减低患者IL-10及hs-CRP的影响

目的：探讨糖耐量减低（IGT）患者血清炎症因子白介素-10（IL-10）、高敏c-反应蛋白（hs-CRP）的水平变化及健康综合干预对糖耐量减低患者血清炎症因子的影响。方法：检测正常对照组、IGT非干预组、IGT干预组共90例的空腹血清hs-CRP、IL-10浓度,并对它们进行方差分析,同时检测血糖、血脂、肝功能及胰岛素水平,并采用稳态模型法计算IR I。结果：空腹血清hs-CRP浓度：在IGT非干预组（17 564±16 576μg/L）、IGT干预组（9 378±6 296μg/L）和正常对照组（4 263±1 861μg/L）,3组之间差异有统计学意义（P〈0.01）,IGT非干预组显著高于IGT干预组和正常对照组（P〈0.05）。IL-10浓度：3组分别为IGT非干预组（14.2±6.7 ng/L）、IGT干预组（21.9±10.1 ng/L）和正常对照组（28.7±11.8 ng/L）,3组之间差异有统计学意义（P〈0.01）,IGT非干预组显著低于IGT干预组（P〈0.05）。结论：IGT患者血清前炎症因子、hs-CRP水平明显升高,IL-10水平明显降低,IGT患者处于慢性低度炎症状态;健康综合干预后、hs-CRP浓度显著下降,IL-10浓度明显升高,健康综合干预可显著改善IGT患者的慢性低度炎症状态。     

高压氧对脊髓损伤患者术后早期血清肿瘤坏死因子-α及白细胞介素-6水平的影响

目的 探讨高压氧对急性脊髓损伤患者术后早期血清肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)水平的影响.方法 60例急性脊髓损伤患者,均在外伤后24h内人院,为不完全性脊髓损伤.按知情同意原则分为常规治疗组(对照组,30例)、高压氧综合治疗组(高压氧组,30例).2组患者均在入院后1 ～3d内行外科手术治疗.对照组在术后给予常规药物治疗,高压氧组在术后给予常规药物治疗的同时并用高压氧治疗.分别在术前、术后1d(高压氧治疗1次后)、术后3d(高压氧治疗3次后)采用ELISA法检测患者血清TNF-α和IL-6水平,并在术前、术后1个月时评定脊髓损伤患者ASIA损伤分级,确定疗效.结果 对照组术后1d血清IL-6水平[(13.35±3.60) ng/L]低于术前[(16.54±3.78)ng/L](P＜0.05),术后3d时血清TNF-α[( 18.85±4.39)ng/L]、IL-6[(12.84±3.75) ng/L]水平低于术前[(23.89±4.83)ng/L,(16.54 ±3.78) ng/L] (P ＜0.05);高压氧组术后1d、3d时血清TNF-α( 19.65±4.21)ng/L,(17.44±5.43)ng/L;IL-6[(11.37±3.54)ng/L,(8.70±3.37) ng/L]水平均低于术前[(23.34±4.34)ng/L,(17.89±4.46)ng/L] (P＜0.05).术后1d时高压氧组脊髓损伤患者血清TNF-α[(19.65±4.21) ng/L、IL-6 (11.37±3.54) ng/L]水平低于对照组[(22.58±5.04) ng/L,(13.35±3.60)ng/L] (P ＜0.05).结论 高压氧对脊髓损伤后炎症细胞因子TNF-α、IL-6生成或分泌有一定的抑制作用,有助于减轻继发性炎症损伤.     

静脉注射T-bet重组腺病毒对小鼠过敏性气道炎症的抑制作用研究

目的 探讨静脉应用T-bet重组腺病毒(AdT-bet)对哮喘小鼠过敏性气道炎症的作用.方法 48只C57BL/6小鼠随机均分为AdT-bet处理组(A组)、AdLacZ处理组(B组)、PBS处理组(C组)和正常对照组(D组),每组12只.A、B、C组采用卵蛋白(OVA)和氢氧化铝建立哮喘模型,于第19天激发前分别静脉注射50μl AdT-bet(108pfu)、AdLacZ、PBS.第26天测定肺泡灌洗液(BALF)中的细胞组分和IL-4、IL-5、IFNγ浓度,测定血浆IgE水平,观察肺组织病理学变化及GATA-3表达.结果 A组BALF中的嗜酸性细胞(EOS)、IL-4、IL-5分别为0.6%±0.2%、6.8±3.7pg/ml、12.5±4.8pg/ml,明显低于B组(分别为20.9%±6.8%、92.4±23.0pg/ml、56.5±11.8pg/ml)和C组(分别为20.8%±6.7%、90.4±22.8pg/ml、57.3±12.2pg/ml)(P＜0.01),而A组的IFNγ水平(720.0±50.0pg/ml)则明显高于B组(13.3±3.6pg/ml)和C组(12.3±5.0pg/ml).A组血浆中总IgE(38.8±9.5μg/ml)及OVA特异性IgE(19.2±4.8U/ml)水平显著低于B组(分别为66.9±10.2μg/ml、35.2±7.8U/ml)和C组(分别为68.6±9.6μg/ml、36.1±8.5U/ml)(P＜0.01).肺组织病理学观察提示B组和C组GATA-3表达明显增加,支气管平滑肌肥厚,黏膜充血、水肿,炎性细胞浸润,管腔内可见黏液栓,而A组GATA-3的表达明显减少,炎症性反应明显减轻.结论 静脉应用AdT-bet可抑制哮喘鼠IL-4、IL-5的合成,增强IFNγ的表达,抑制EOS在气道内的炎性浸润及血浆中IgE水平,其机制可能与AdT-bet增强Th1型反应,抑制GATA-3表达,从而抑制Th2型免疫反应有关.     

慢性高原病患者骨髓Cyt C和Caspase-3表达及意义研究

目的 探讨细胞凋亡在慢性高原病（CMS）发生发展过程中的作用,从而寻求新的诊断和治疗途径。方法 选取CMS患者20例为研究对象,健康人群14例为对照组,采用固相双抗体夹心ELISA方法测定CMS组及对照组骨髓上清液Cyt C和Caspase-3水平。结果 CMS患者骨髓上清液中Cyt C水平[（21.43±8.92）ng/ml]水平与对照组[（10.36±3.55）ng/ml]比较差异有统计学意义（P〈0.05）;CMS患者骨髓上清液中Caspase-3水平[（15.45±4.73）ng/ml]水平与对照组[（7.14±1.93）ng/ml]比较差异有统计学意义（P〈0.05）;CMS患者骨髓上清液中Cyt C与Caspase-3水平呈正相关（r=0.706,P〈0.01）;CMS患者骨髓上清液中Cyt C和Caspase-3表达水平均与血红蛋白（Hb）浓度呈正相关（r=0.524,P〈0.01;r=0.577,P〈0.01）,与血氧饱和度（SaO2）呈负相关（r=-0.505,P〈0.05;r=-0.554,P〈0.01）。结论 推测细胞凋亡可能在CMS病理生理过程中发挥着重要作用。     

吞噬凋亡淋巴细胞的未成熟树突细胞对脂多糖介导激活的抑制作用研究

目的 探讨吞噬经体外光化学法(PUVA)处理的同种异基因淋巴细胞的未成熟树突细胞(imDC)对脂多糖(LPS)介导的树突细胞(DC)激活的抑制作用.方法 分离C57BL/6小鼠骨髓细胞,经小鼠重组白细胞介素4(rmIL-4)和重组粒-巨噬细胞集落刺激因子(rmGM-CSF)共同诱导培养制备骨髓来源的C57BL/6小鼠imDC.分离BALB/c小鼠脾淋巴细胞(SP),经PUVA处理制备成PUVA-SP.在体外将BALB/c小鼠的PUVA-SP与C57BL/6小鼠骨髓来源的imDC共同培养,获得PUVA-SP DCs.在上述imDC和PUVA-SP DCs中分别加入10ng/ml LPS刺激24h,获得LPS DCs.采用ELISA法检测上清中IL-10和IL-12的浓度,流式细胞仪检测细胞表面MHC-Ⅱ、CD40、CD86和CD80的表达水平.结果 LPS刺激后,PUVA-SP DCs表面分子CD80、CD86、CD40的表达分别为21.26％、38.50％和39.78％,远远低于imDC经LPS刺激后的表达(50.58％、66.29％、71.20％,P＜0.01).LPS刺激后PUVA-SP DCs和imDCs MHC-Ⅱ的表达分别为67.29％和68.64％,差异无统计学意义(P＞0.05).LPS刺激后,PUVA-SP DCs和imDCs分泌IL-10的水平分别为435.6±13.9pg/ml和132.6±2.8pg/ml,与刺激前相比均增高,但前者增高的水平要显著高于后者(P＜0.01).LPS刺激后,imDCs分泌高水平的IL-12,其p70和p40的表达量分别为192.1±5.9和999.8±26.9pg/ml,而PUVA-SP DCs分泌IL-12的水平分别为p7018.56±1.3pg/ml,p40 15.22±1.2pg/ml,显著低于imDCs,差异有统计学意义(P＜0.01).结论 PUVA-SP DCs虽然表达不成熟表型,但其功能不同于imDC,对LPS刺激具有抑制作用,适用于诱导体内免疫耐受.     

体外循环法对犬骨骼肌缺血再灌注损伤的保护作用

 目的 探讨体外循环法(extracorporeal circulation, ECC)对犬骨骼肌缺血再灌注损伤的保护作用。方法 首先建立犬骨骼肌缺血再灌注损伤模型,通过HE染色法观察组织炎性细胞浸润,利用TUNEL法观察组织凋亡的变化,特异性试剂盒检测LD、SOD等酶的变化,ELISA法检测IL-10和TNF-α等细胞因子的变化,评价ECC法再灌注模式对犬骨骼肌缺血再灌注损伤的保护作用。结果 模型组动物的组织炎性细胞浸润明显,诱导细胞凋亡发生,血清中LD[(2.6±0.3)mmol/ml vs.(5.2±0.1)mmol/ml ]、SOD[(15.2±1.2)U/ml vs.(31.1±2.1)U/ml]等酶的水平显著增加,同时血清中IL-10[(60.4±2.3)pg/ml vs.(89.2±1.5)pg/ml ]和TNF-α[(172.3±8.7)ng/l vs. (273.4±12.5 )ng/l]等细胞因子的含量显著增加 (P<0.01)。ECC法再灌注处理的动物,其组织炎性反应和细胞凋亡程度显著低于模型组动物,血清中上述酶和细胞因子的水平也显著降低,分别为:LD[(3.5±0.1)mmol/ml vs. (5.2±0.1) mmol/ml],SOD[(21.3±1.3)U/ml vs. (31.1±2.1) U/ml], IL-10[(69.4±2.6) pg/ml vs. (89.2±1.5)pg/ml]和TNF-α[(190.8±12.1)ng/l vs.(273.4±12.5)ng/l ](P<0.05)。结论 ECC法再灌注模式,对犬骨骼肌缺血再灌注损伤具有一定的保护作用。     

慢性鼻窦炎术后患者行舒毕灌洗液冲洗的疗效观察

目的：观察慢性鼻窦炎术后患者行舒毕灌洗液冲洗的临床疗效。方法67例慢性鼻窦炎患者随机分为两组,对照组（n=32例）术后采用生理盐水进行冲洗,观察组（n=35例）术后采用舒毕灌洗液进行冲洗。比较两组临床疗效及辅助T（Thl/Th2）细胞因子表达变化。结果观察组治疗总有效率（88.6%）明显高于对照组（75.0%）（P<0.05）;两组患者行冲洗治疗后IFN-γ、IL-2、IL-4、IL-5细胞因子表达水平较治疗前均明显下降（P<0.05）,且观察组IFN-γ、IL-4表达水平较对照组下降更为显著（P<0.05）。结论慢性鼻窦炎术后患者行舒毕灌洗液冲洗疗效显著,可调节机体免疫反应Thl/Th2的平衡。     

LBP对LPS刺激巨噬细胞分泌细胞因子的调节作用

目的 采用脂多糖结合蛋白(LBP)和脂多糖(LPS)以不同比例、不同方式刺激THP-1细胞分泌细胞因子,探讨LBP在LPS转运和活化过程中的调节作用,以及单核巨噬细胞受LPS活化后其炎性和负炎性因子分泌的平衡情况.方法 将THP-1细胞进行增殖和传代后,经PMA刺激,转化为巨噬细胞.实验分为4个组:LPS组(用不同浓度LPS单独刺激)、LBP组(用不同浓度LBP单独刺激)、LBP/LPS预孵育组(LBP和LPS以不同浓度比例混合,37℃孵育15min)、LBP/LPS不孵育组(先加一定浓度LPS,再以不同浓度比例加入LBP).分别培养4、12、24h后,吸出上清液,发光法检测TNF-α,IL-10和IL-6水平,并进行统计学分析.结果 THP-1细胞为悬浮生长,用PMA诱导转化后变为巨噬细胞,变为贴壁生长.分别用1、10、100、1000ng/ml LPS单独刺激巨噬细胞分泌TNF-α,1ng/ml和其他组间均有统计学差异(P<0.05),其余3组间无统计学差异(P>0.05).用LBP刺激巨噬细胞,LBP浓度为1000ng/ml时,TNF-α和IL-6分泌达到最高.LBP/LPS不孵育组中,TNF-α和IL-6分泌曲线在LBP/LPS为10出现最高峰.LBP/LPS预孵育组的TNF-α和IL-6分泌曲线较平缓,无明显分泌高峰.LPS浓度为1000ng/ml时IL-10为8±0pg/ml,其余组IL-10均小于5pg/ml.经析因分析,LPS和LBP之间有交互关系(F=3.425,P<0.01),两者是否预孵育和培养时间有交互作用(F=4.240,P=0.026),LBP浓度和是否预孵育之间有交互作用(F=4.896,P<0.01).LPS浓度和是否预孵育,LPS浓度和培养时间,LBP浓度和培养时间均无明显交互作用(P>0.05).结论 LPS是活化单核巨噬细胞的重要物质,LPS在高浓度时刺激巨噬细胞分泌细胞因子具有饱和现象.LBP本身在高浓度时具有刺激巨噬细胞的活性,低浓度的LBP能增强LPS对巨噬细胞的活化,高浓度LBP则起到负性调节作用.体外单核细胞经PMA分化成巨噬细胞后,再用LPS刺激,IL-10无明显分泌,引起炎性和负炎性因子的严重失衡.