大鼠视神经压榨伤模型的建立

目的建立大鼠标定性视神经损伤模型.方法健康SD大鼠28只,7只为正常对照组,只进行双上丘注射3%快蓝逆行标记视网膜神经节细胞(retinal ganglion cells,RGCs),另21只为标定性视神经损伤组,依损伤后存活时间的不同再分为A组(4d组)、B组(14d组)及C组(21d组),每组7只.21只大鼠以夹持力为40 g的特制视神经夹,在大鼠眼球后2 mm处夹持视神经4s,制成大鼠标定性视神经压榨伤模型,于处死前3d采用双上丘直接注射3%快蓝(fast blue)法标记双眼RGCs,将全视网膜铺片置于荧光显微镜下,在距视乳头1 mm处的颞上、颞下、鼻下、鼻上4处作荧光摄影(400 ×),并输入计算机经图像分析仪计数RGCs,按RGCs标识率进行统计学比较.RGCs标识率=损伤眼(右眼)RGCs数/未损伤眼(左眼)RGCs数×100%.结果正常大鼠的RGCs标识率右眼RGCs数/左眼RGCs数为99.79%±13.05%,左眼RGCs数/右眼RGCs数为101.86%±13.91%,无论是用左眼的RGCs数比右眼的RGCs数,或用右眼的RGCs数比左眼的RGCs数,其结果无显著性差异(P＞0.5).视神经损伤组的RGCs标识率A组(4d组)RGCs标识率为77.79%±7.11%;B组(14d组)RGCs标识率为63.76%±3.79%;C组(21d组)RGCs标识率为54.66%±4.75%.以上显示,损伤各组的RGCs标识率明显低于正常对照组(P＜0.05),且随着时间的推移,损伤A、B、C组的RGCs标识率渐进性降低.结论用特制的夹持力为40 g的视神经夹,夹持正常大鼠视神经4s,可造成部分性RGCs丧失,随大鼠存活时间的推移,RGCs呈渐进性丧失.眼科学报2001;1799～102.     

人脐血干细胞玻璃体腔移植对大鼠外伤性视神经损伤的保护作用

目的观察人脐血干细胞(human umbilical cord blood stem cells,h UCBSC)移植对视神经部分受损SD大鼠视网膜神经节细胞(retinal ganglion cells,RGC)的保护作用。方法将48只健康成年SD大鼠随机分为2组,2组SD大鼠暴露视神经,应用40 g夹持力的视神经夹在大鼠眼球后2 mm处夹视神经30 s造成部分视神经损伤模型,均损伤左眼。A组:伤后1周玻璃体腔注射脐血干细胞载体PBS,24只。B组:伤后1周玻璃体腔注射h UCBSC,24只;2组均于注射后7 d、14 d、21 d、28 d处死动物。处死前7 d双上丘注射50 g·L-1荧光金逆行标记双眼RGC。然后按时间先后处死大鼠分离视网膜置于荧光显微镜下,计数2组RGC并计算RGC标识率。结果 A、B两组视神经损伤眼RGC计数均低于未损伤眼(均为P<0.05),且随时间延长两组RGC标识率均呈下降趋势(均为P<0.05),但B组注射后7 d、14 d、21 d、28 d RGC标识率(77.52±6.33)%、(74.12±8.23)%、(64.78±5.21)%、(59.93±9.00)%下降幅度明显较A组(75.68±8.74)%、(68.21±10.59)%、(56.24±9.34)%、(48.91±8.81)%平缓。同时间段B组RGC标识率均高于A组,且差异均有统计学意义(均为P<0.05)。结论玻璃体腔注射h UCBSC可减缓外伤性视神经损伤大鼠视网膜中RGC的凋亡,对RGC具有一定的保护作用。     

利用荧光金逆行示踪技术评价视神经不完全损伤后视网膜神经节细胞的存活率

目的　利用荧光金逆行示踪技术评价正常及视神经不完全损伤后的视网膜神经节细胞 (retinalganglioncells,RGCs)的数目。 方法　正常成年LongEvans大鼠 2 0只 ,体重(2 70± 2 0 ) g ,雌雄不限。按对照组、损伤后 7d、14d、2 1d分组 ,每组 5只大鼠。在球后视神经钳夹伤前 7d行荧光金逆行标记。 7d后损伤组大鼠用反向血管夹于左眼球后 2mm处夹视神经 10s。对照组大鼠只暴露视神经不行钳夹 ,分别于各时间点将大鼠用 4 %多聚甲醛灌注固定后 ,行全视网膜铺片 ,3h内在荧光显微镜下观察。在每张视网膜的上、下、鼻、颞侧距视盘 1/ 6、1/ 2、5 / 6半径处共拍摄 12张荧光照片。对照片上标记的RGCs进行计数 ,求平均值 ,计算损伤后各时间点剩余的RGCs与正常视网膜中RGCs的百分比。结果　视网膜铺片的RGCs边界清晰 ,并可见明显的细胞突起 ,血管走行区未见节细胞分布。正常组每张铺片的平均节细胞数为 (2 0 31± 2 87)个·mm-2 ,损伤后 7d的RGCs存活率为 71% ,14d存活率为 5 1% ,2 1d存活率为 35 %。结论　荧光金逆行标记是评价视神经损伤后RGCs存活率可靠并且有效的方法。     

横向定量牵拉法制作大鼠视神经精确损伤模型

目的:采用横向定量牵拉法制作大鼠视神经损伤模型,并利用荧光金逆行标记评价视神经牵拉伤后视网膜节细胞(retinal ganglion cells,RGCs)的存活率.方法:将25只雄性Wistar大鼠随机均分为5组,即假手术组和视神经牵拉伤后1、3、7、14d组.模型组用横向张力计牵拉左眼视神经,假手术组仅暴露左眼视神经但不予牵拉,各组以右眼为正常对照.用荧光金逆行标记,并观察假手术组及视神经牵拉伤后1、3、7、14d组RGCs的密度.结果:正常对照组RGCs形态多呈圆形或椭圆形,边界清楚,细胞外无明显荧光染料渗漏,部分可见明显细胞突起;而视神经牵拉伤后RGCs随时间延长而不断减少,细胞分布不均匀,并可见大量荧光渗漏及小胶质细胞.与正常对照组相比,假手术组RGCs形态和密度无明显差异(P＞0.05);视神经牵拉伤后第1、3、7、14d的RGCs数量进行性减少,且其密度均明显低于正常对照组(P＜0.01);视神经牵拉伤后第1、3、7、14d的RGCs存活率分另别为78.94％±0.92％、60.07％±0.90％、38.92％±1.42％和17.31％±0.97％.结论:横向定量牵拉法可以建立易于量化的视神经损伤模型,为进一步研究视神经损伤后的治疗方法提供有力工具.     

褪黑素对大鼠视网膜缺血再灌注损伤后神经节细胞的保护作用

目的:探讨褪黑素(melatonin,MT)对大鼠视网膜缺血再灌注损伤(retina ischemia reperfusion injury,RIR)中神经节细胞(retina ganglion cells,RGC)的防护和修复作用.方法:健康SD大鼠24只随机分为A组和B组.两组均利用前房高眼压灌注法制成左眼RIR模型,A组每日给予溶媒(100mL/L无水乙醇生理盐水)1mL/kg ip,B组每日给予5g/L MT1mL/kgip,直至处死动物.两组按左眼RIR后的存活时间又分为3小组:A1和B1组(损伤后7d),A2和B2组(损伤后14d),A3和B3组(损伤后30d),每组各4只.于处死前7d由双上丘和双外侧膝状体注射30g/L fluorogold(FG)标记双眼RGC,处死日行双眼眼球摘除术,将全视网膜组织铺片置于荧光显微镜下,分鼻上、鼻下、颞上、颞下4个区域作荧光摄影,并输入计算机经图像分析系统计数RGC,计算RGC标识率(即损伤眼RGC数/未损伤眼RGC数)×100%,作统计学分析.结果:A1,A2,A3 3组RGC标识率分别为77.2%±6.4%,65.5%±7.0%,53.9%±4.4%;B1,B2,B3 3组RGC标识率分别为81.3%±9.3%,79.8%±8.4%,80.3%±11.1%.结论:大鼠RIR后MT治疗可提高RGC存活率.     

大鼠视神经横断伤及夹挫伤后视网膜神经节细胞变化及与损伤时间关系

目的 观察大鼠视神经横断伤及夹挫伤后,视网膜神经节细胞(RGCs)形态学变化、区别及在不同时间的计数变化,探讨其与视神经损伤经过时间的关系,为视神经损伤的病理机制及损伤经过时间的推断提供一定的依据.方法 采用大鼠球后视神经横断伤/夹挫伤动物模型,在伤后不同时间处死动物并取材,HE 染色,光镜下观察RGCs的动态变化.结果 视神经损伤后RGCs数日均严重下降,2周内RGCs快速减少,3～7 d为RGCs快速减少期,2周以后缓慢减少;但横断伤组3 d以后各个时期RGCs计数下降幅度与夹挫伤组相比更明显.结论 视神经损伤导致了视网膜形态结构的变化,RGCs丢失的严重程度与损伤类型及时问呈相关性.     

灯盏细辛对大鼠视神经压榨伤后视网膜神经节细胞的保护作用

目的　探讨中草药灯盏细辛对大鼠标定性视神经压榨伤所致的视网膜神经节细胞(RGC)损伤的防护和修复作用。方法　 4 2只健康SD大鼠随机均分为A组和B组。两组均用特制微型视神经夹直接夹持视神经 ,制作成单眼视神经部分压榨伤模型后 ,A组不予任何治疗 ,B组予以灯盏细辛治疗 ,直至处死动物。以上两组按致伤日至处死日动物的存活时间又分为 :A1组和B1组 (损伤后 4d) ,A2 组和B2 组 (损伤后 14d) ,A3 组和B3 组 (损伤后 2 1d) ,每组各 7只大鼠。于处死前 3d双上丘直接注射 3%快蓝标记双眼RGC。处死日行眼球摘除术后 ,将双眼全视网膜组织铺片置于荧光显微镜下 ,在距视乳头 1mm处的颞上、颞下、鼻下及鼻上 4处作荧光摄影 ,并输入计算机经图像分析仪计数RGC。计算RGC标识率 ,即 (损伤眼RGC数 /未损伤眼RGC数 )× 10 0 % ,并进行统计学分析。结果　A组大鼠中 ,A1、A2 及A3 组的RGC标识率分别为 (77 79± 7 11) %、(6 3 76± 3 79) %、(5 4 6 6±4 75 ) % ;B组大鼠中 ,B1、B2 及B3 组的RGC标识率分别为 (80 13± 12 0 3) %、(78 17± 9 19) %及(83 5 9± 12 6 1) %。A2 和A3 组分别与B2 和B3 组比较 ,差异均有非常显著意义 (t=14 10 8,36 2 0 3;P<0 0 1)。结论　大鼠标定性视神经压榨伤后用灯盏细辛治疗 ,     

血府逐瘀汤对外伤性视神经损伤大鼠轴浆流动的影响

目的 观察血府逐瘀汤对大鼠外伤性视神经损伤的保护作用.方法 27只健康SD大鼠随机分为A、B、C 3组,均用微型视神经夹制作成单眼视神经夹伤模型,A、B、C 3组分别以蒸馏水、灯盏细辛、血府逐瘀汤灌胃.用30g·L-1荧光金(fluro gold,rG)双上丘注射逆行标记双眼视网膜神经节细胞(retinal ganglion cells,RGCs),计算RGCs存活率.结果 给药4周后进行RGCs计数,A、B、C 3组RGCs的存活率分别为(63.72±12.97)%、(75.75±8.86)%、(88.34±10.34)%,两两比较差异均有统计学意义(PaB=0.048<0.05,PAC=0.0010.01,尸BC=0.026<0.05);对各组左、右眼RGCs数量进行配对比较,差异均具有显著统计学意义(PA=0.000,PR=0.000,Pc=0.005).结论 该造模方法可造成钳夹伤大鼠RGCs一定量的丢失;灯盏细辛和血府逐瘀汤均可提高钳夹伤大鼠视神经RGCs的存活毕,促进轴浆运输,且血府逐瘀汤的作用优于灯盏细辛,这可能是其促进视神经修复、再生的机理之一.     

钳夹法造成大鼠视网膜神经节细胞过量丢失

目的评估钳夹视神经对视网膜神经节细胞(retinal ganglion cells,RGCs)的损伤程度。方法取38只雄性Wistar大鼠,夹持组(n=30)按夹持时间12s、9s、6s、3s、1s分为A-E组,F为反身夹持组,每组各5只大鼠。沿大鼠眼球颞侧暴露视神经,于球后2mm处用90g微型视神经夹夹持视神经,另有40g反向镊在球后2mm处夹持视神经,每只大鼠均左眼手术,右眼正常对照,假手术组(n=8)大鼠左眼仅手术暴露视神经球后段,不予夹持。采用荧光金逆行标记RGCs,视网膜铺片计数,计算RGCs数量及存活率。结果假手术组左右眼RGCs密度相比无显著性差异,细胞密度分别为(2679±67)mm-2、(2689±53)mm-2(P=0.896);夹持组RGCs细胞密度明显下降,分别为(220±167)mm-2、(265±232)mm-2、(298±239)mm-2、(478±682)mm-2、(769±615)mm-2、(974±476)mm-2,夹持冲量(夹持力与时间的乘积)和RGCs存活率呈负相关。结论钳夹法可造成明确、定量的视神经损伤,但损伤量过大、稳定性较差,与临床外伤性视神经病变的发病实际尚有一定差距。     

腺病毒介导BDNF基因转染的雪旺细胞对大鼠视神经损伤修复的保护作用

目的研究经腺病毒介导,转染有人脑源性神经营养因子(brain-derivedneu-rotrophicfactor,BDNF)基因的SD大鼠雪旺细胞(Schwanncells,SCs)对成年SD大鼠视神经夹伤后修复的保护作用。方法将人BDNF基因转染到体外培养的SCs内,采用酶联免疫反应(enzyma-linkedimmumosorbentassay,ELISA)检测培养液上清中BDNF的表达量。80只成年SD大鼠随机分为转染有BDNF基因的SCs治疗组(A组)、正常SCs治疗组(B组)、DMEM治疗组(C组)和手术对照组(D组),每组20只,每只右眼建立视神经夹伤模型,D组大鼠左眼作为空白对照组(E组)。夹伤前7d进行荧光金(fluorogold,FG)逆行标记视网膜神经节细胞(retinalganglialcells,RGCs)。夹伤后即刻向A、B、C组伤眼玻璃体腔内注入相应液体各10μL。分别在伤后第7d、14d、21d、28d时进行闪光视觉诱发电位(flashvisualevokedpotentials,FVEP)检测和全视网膜铺片、记数RGCs。结果转染有BDNF基因的SCs的BDNF表达量明显高于正常SCs。A组的P1波幅比随观察时间延长呈下降趋势,但在夹伤后第14d、21d、28d时仍明显高于其他各组(P<0.05)。夹伤后第21d和第28d时,A组RGCs数分别为(1591±82)·mm-2、(1516±91)·mm-2,明显高于除E组外的其他各组(P<0·01)。结论视神经夹伤后,玻璃体腔内注射转染有BDNF基因的SCs能够促进RGCs轴突的修复,提高RGCs存活率,保护视神经功能,对视神经损伤修复具有明显的保护作用。     

在晶状体损伤诱导的视神经长时程再生过程中MMP-12的表达规律

目的:探讨晶状体损伤诱导SD大鼠视神经钳压损伤后轴突长时程再生过程中MMP-12的表达变化。方法:建立SD大鼠视神经损伤模型和晶状体损伤模型,将实验动物24只分为对照组(仅开放眼眶暴露视神经)、晶状体损伤组、视神经损伤组、晶状体损伤联合视神经损伤组,每组各6只大鼠。采用有参转录组测序分析损伤视神经区域差异基因表达变化,筛选相关高表达差异基因,通过实时荧光定量PCR(qRT-PCR)和酶联免疫吸附实验(ELISA)定量分析损伤区MMP-12的表达量变化。结果:转录组测序主成因分析表明,晶状体损伤联合视神经损伤是基因表达变化中的主要成因。基因表达差异分析显示,晶状体损伤联合视神经损伤组中,存在MMP-12基因表达上调。在建模成功后14、21d时,晶状体损伤联合视神经损伤组的MMP-12 mRNA表达量与对照组、视神经损伤组和晶状体损伤组比较上调(P<0.05);在7、28d时,各组间表达无差异。在建模成功后7、14、21d时,晶状体损伤联合视神经损伤组的MMP-12蛋白表达量与对照组和视神经损伤组比较上调(P<0.05);21d时,晶状体损伤联合视神经损伤组与视神经损伤组比较上...     

晶状体损伤对视神经损伤后再生影响的研究

目的观察单纯视神经损伤及视神经损伤联合晶状体损伤后视神经中Nogo-A mRNA及Nogo-A的表达,探讨晶状体损伤促进视神经损伤后再生的机制。方法 66只雄性Wistar大鼠随机分为正常对照组(A组,6只)、单纯视神经损伤组(B组,30只)和视神经损伤联合晶状体损伤组(C组,30只)。分别于造模后7d、14d、21d处死大鼠2只(A组)、10只(B组)、10只(C组),光镜下观察视神经的病理变化,免疫组织化学染色检测Nogo-A表达情况,采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)、半定量分析不同组视神经Nogo-A mRNA的表达。结果大鼠正常视神经中表达Nogo-A mRNA及Nogo-A,但表达量较低;损伤视神经后7d Nogo-A mRNA的表达量显著升高,至伤后21d B组及C组均维持较高的水平。B组损伤后7d Nogo-A表达阳性的细胞数开始增多(136.80±3.94),与A组比较差异有统计学意义(P<0.05),并保持高表达;C组损伤后21d Nogo-A的表达较B组低,差异有统计学意义(P<0.05)。结论视神经损伤后髓鞘相关抑制因子Nogo-A表达增高,晶状体损伤促进视神经再生的机制可能与Nogo-A有关。     

牛磺酸对大鼠视神经损伤后MMP-2和MMP-9表达的促进作用

目的观察视神经损伤后基质金属蛋白酶(matrix metalloproteinases,MMP)-2和MMP-9的表达及牛磺酸对其表达的影响,探讨牛磺酸在视神经再生修复方面的作用。方法 84只大鼠随机分为4组,正常组(12只)不作处理,对照组、预治疗组、治疗组(每组24只)建立大鼠视神经不完全损伤模型,预治疗组于造模前3d、治疗组于造模后1h开始每天1次给予体积分数5%牛磺酸腹腔注射,对照组造模后1h每天1次给予等量蒸馏水腹腔注射。各组分别于伤后3d、7d、14d、28d取视神经采用免疫组织化学法检测MMP-9平均光密度值,用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测MMP-2mRNA。结果对照组、预治疗组、治疗组视神经损伤后MMP-9和MMP-2mRNA的表达较正常组均增高,预治疗组及治疗组与对照组相比,各时间点MMP-9和MMP-2mRNA的阳性表达均明显升高(均为P<0.05)。在视神经损伤后3d时预治疗组MMP-9光密度值为39.53±4.05、MMP-2mRNA灰度值为1.746±0.268,其阳性表达与治疗组的MMP-9光密度值32.96±3.62、MMP-2mRNA灰度值1.303±0.289相比均明显增高(均为P<0.05),其后两组相近,差异均无统计学意义(均为P>0.05)。结论视神经损伤后MMP-2和MMP-9的表达增强,牛磺酸治疗可以提高视神经组织中MMP-2、MMP-9的表达,对视神经损伤后的再生修复有一定的促进作用。     

人重组睫状神经营养因子对大鼠视神经不全损伤后功能恢复的影响

目的　探讨人重组睫状神经营养因子 (recombinanthumanciliaryneurotrophicfactor,rhCNTF)对大鼠视神经不全损伤后功能恢复的作用。方法　采用无创血管夹在成年鼠造成视神经不全损伤 ,治疗组玻璃体腔内注射rhCNTF ,对照组注射等量双蒸水。在损伤前、损伤后即刻及伤后 1、2、4、8和 12周检测伤眼闪光视觉诱发电位。结果　视神经损伤后即刻 ,闪光视觉诱发电位波形几近熄灭。伤后 1周 ,潜伏期 (LP1) 2组基本恢复至损伤前水平 ,与损伤前比较无显著性差异 (P >0 .0 5 ) ,组间比较无显著性差异 (P >0 .0 5 )。振幅 (AP1 N2 )恢复缓慢 ,伤后 1～ 2周治疗组与对照组比较无显著差异 (P >0 .0 5 ) ;4周以后 2组间差异非常显著 (P <0 .0 1)。 8周时对照组恢复至损伤前的30 .84 % ,而治疗组恢复至 5 0 .35 % .结论　rhCNTF对大鼠视神经不全损伤后神经传导功能的恢复有明显的促进作用     

A new and reliable animal model for optic nerve injury

Objective: To create an animal (rat) model of force percussion injury (FPI) to the optic nerve for clinical and experimental research. Methods: Seventy-one healthy female Wister rats, with no ocular disorders, were used in this study. Sixty-six rats were subjected to bilateral blunt trauma to the eyes via FPI; five rats were not subjected to trauma. According to the degree of optic nerve injury, injured eyes were divided into two groups: severe optic nerve injury group, with beat pressures of 699.14 ± 60.79 kPa and mild optic nerve injury group, with beat pressures of 243.18 ± 20.26 kPa. Eight rats were examined using flash visual-evoked potential (F-VEP) monitoring and magnetic resonance imaging (MRI) before, 1 and 3 days, and 1, 2, 4, 6, and 8 weeks after optic nerve injury. Fifty-six rats were examined by histopathology and terminal deoxynucleotidyl transferase-mediated dUTP nick-end labeling (TUNEL) assay for apoptosis at 1 and 3 days, and 1, 2, 4, 6, and 8 weeks after optic nerve injury. Two rats were examined by transmission electron microscopy (TEM) 4 and 8 weeks after optic nerve injury. The presence or absence of optic nerve injury was evaluated in all trauma eyes. Results: Latency was prolonged in the severe injury group compared with controls 1 day after optic nerve injury (p < .05). Amplitude decreased during the first 2 weeks after optic nerve injury (p < .05) and then stabilized (p > .05). Latency was prolonged in the mild optic nerve injury group compared with controls 1 day after optic nerve injury (p < .05) Amplitude decreased during the first 4 weeks (p < .05) following injury and then stabilized (p > .05). As measured by MRI, an abnormally high signal was seen 1 day after injury and remained significantly high 8 weeks after injury. A ruptured capillary was detected in the ganglion cell layer (GCL) 1 day after injury. Acellular regions in the ganglion cell layer were observed 4 weeks after optic nerve injury. TUNEL-positive cells were present in each layer of the retina 3 days after injury. The number of TUNEL-positive cells began to increase 1-2 weeks after injury, and then gradually decreased 4 weeks after injury (p < .05). Conclusion: We successfully created a reproducible experimental animal (rat) model of optic nerve injury using FPI. Optic nerve injury was demonstrated by F-VEP and MRI, and confirmed histologically. Our model is a simple, reliable, reproducible, and stable tool for use in investigations on the mechanism(s) of and treatment for optic nerve injury.     

颅脑撞击伤早期视神经超微结构的改变

目的研究颅脑撞击伤早期视神经超微结构的改变。方法将18只鼠龄为15周的Wistar大鼠随机分为颅脑撞击伤重伤组（８只）、轻伤组（８只）及正常对照组（２只）。1%戊巴比妥钠按 45 mg/kg的剂量腹腔麻醉大鼠后，在其右顶骨开窗。采用BM-Ⅲ型生物撞击机致伤，其中气源压力7 kg，致伤距离轻伤组为11 cm，重伤组为8 cm，对照组仅作顶骨开窗。于创伤后1、6、24、72 h取大鼠右眼视神经，用硝酸镧灌注固定法制作电子显微镜样品，超薄切片，透射电子显微镜观察视神经超微结构的改变。结果轻伤组大鼠视神经超微结构与对照组相比改变不明显，硝酸镧示踪显示镧颗粒未突破血管进入神经间质；重伤组大鼠损伤后1 h即可见硝酸镧颗粒进入神经间质，且随时间的增加呈递增趋势，同时神经胶质细胞中出现内质网扩张、线粒体空化肿胀、神经间质空泡变性、部分轴索呈空泡样改变。结论颅脑撞击伤可导致视神经超微结构的改变及血管通透性增加。(中华眼底病杂志,2005,21:41-43)     

超声微泡造影剂介导脑源性神经营养因子联合转染视网膜和视皮质对视神经损伤后视网膜神经节细胞的保护作用

　　目的　观察超声微泡造影剂介导脑源性神经营养因子（BDNF）联合转染大鼠视网膜和视皮质区细胞对视神经损伤后视网膜神经节细胞（RGC）的保护作用。方法　雄性Sprague-Dawley（SD）大鼠88只随机分为正常组（A组）、假手术组（B组）、空白对照组（C组）、单纯眼转染组（D组）、单纯脑转染组（E组）、联合转染组（F组）;A组8只大鼠,B～F组每组16只大鼠。建立钳夹视神经损伤模型,将B～F组大鼠随机分为视神经损伤1、2周亚组,各亚组8只大鼠。B、C组玻璃体腔和视皮质区分别注射磷酸盐缓冲液（PBS）,D、E组玻璃体腔和视皮质区分别注射BDNF质粒（pBDNF）微泡造影剂悬液,F组玻璃体腔和视皮质区同时注射pBDNF微泡造影剂悬液。D～F组注射pBDNF微泡微泡造影剂悬液后,立即用超声辐照相应转染部位。视神经损伤后1、2周,各组行逆行荧光金标记RGC计数;半胱氨酸蛋白酶-3(caspase-3）蛋白免疫组织化学染色,观察其阳性表达情况;图形视网膜电流图（PERG）检测,记录N95振幅。结果　荧光金标记RGC结果显示,各组均可见金黄色荧光散布于视网膜定向铺片上。A~F组间RGC计数差异有统计学意义（F=256.30,P＜0.01）;B~F组视神经损伤1、2周亚组间RGC计数差异也有统计学意义（F=6518,P＜0.01）。光学显微镜观察发现,A、B组大鼠视网膜均未见caspase-3蛋白阳性表达;C~F组均可见主要位于神经节细胞层的caspase-3蛋白阳性表达。PERG检测发现,A~F组间N₉₅振幅差异有统计学意义（F=121.56,P＜0.01）;B~F组视神经损伤1、2周亚组间N95振幅差异也有统计学意义（F=8238,P＜0.01）。结论　超声微泡造影剂介导BDNF联合转染视网膜和视皮质区细胞能抑制视神经损伤后RGC凋亡,提高RGC存活数,保护其视功能。      

原发性开角型青光眼视神经损伤不同阶段血清细胞因子水平分析及临床意义

目的：探讨原发性开角型青光眼（ POAG）视神经损伤不同阶段患者血清中各细胞因子的水平，并分析其临床意义。方法选择2012年8月至2014年8月在我院接受治疗的POAG患者97例（172只眼），作为观察组。再选择同期在我院眼科接受治疗的白内障患者50例，作为对照组。对比两组眼压及视力情况，对相关细胞因子水平进行对比分析。然后根据MD值分组得到A、B、C组，并对比三组间的眼压、视力、细胞因子水平等。结果观察组眼压、近视患者所占比例以及白细胞介素-4（ IL-4）水平显著高于对照组，而IL-6及IL-12水平低于对照组。观察组中根据不同视神经损伤程度分为A、B、C组发现A、B、C组眼压呈上升趋势，并且三组间眼压显著差异。并且A组近视比例低于C组，A组、B组IL-12水平显著高于C组，差异均有统计学意义（均P ＜0．05）。其他水平不存在显著差异（ P ＞0．05）。结论 POAG出现眼压升高、视力下降的可能性增大，其中IL-4会对视神经造成一定程度的损伤，相反IL-6以及L-12具有保护作用。此外，在POAG视神经不同损伤阶段仅有IL-12水平波动显著，说明相关的免疫应答反应在视神经损伤过程中的作用显著。