Ⅰ型胶原及Ⅲ型胶原在丝素膜移植修复兔眼睑中的表达

目的研究Ⅰ型胶原、Ⅲ型胶原在丝素膜移植修复兔眼睑中的表达,探讨应用丝素膜行眼睑重建的愈合机制。方法将健康新西兰大白兔36只随机分为丝素膜修复组（n=18）和异体巩膜修复组（n=18）,均制作右眼上睑板缺损模型,分别植入丝素膜和异体巩膜予以修复。左眼为正常对照。各组于术后第1、2、4周取手术区域上眼睑,苏木精伊红（HE）染色观察组织形态学变化,免疫组织化学法检测眼睑中Ⅰ型胶原、Ⅲ型胶原的表达。结果所有兔眼睑缺损均Ⅰ期愈合。HE染色结果显示,术后移植区炎性细胞浸润异体巩膜组多于丝素膜组。免疫组化染色结果显示,丝素膜组和异体巩膜组Ⅰ型胶原、Ⅲ型胶原的表达随着术后观察时间的增加而增加。术后各时间点Ⅰ型胶原的表达为异体巩膜组〉丝素膜组〉正常对照组（1周：F=19．586,P〈0．01;2周：F=30．041,P〈0．01;4周：F=32．587,P〈0．01）。术后各时间点Ⅲ型胶原的表达为异体巩膜组〉丝素膜组〉正常对照组（1周：F=19．220,P〈0．01;2周：F=39．414,P〈0．01;4周：F=49．680,P〈0．01）。结论丝素膜移植修复兔眼睑缺损I型胶原、Ⅲ型胶原表达较异体巩膜少,愈合反应较异体巩膜轻,可用于眼睑重建。     

异体巩膜移植治疗眼睑恶性肿瘤术后睑板缺损的临床观察

目的：探讨异体巩膜移植在眼睑恶性肿瘤切除术后睑板缺损重建手术中的临床效果。

方法：对24例24眼眼睑恶性肿瘤术后睑板缺损长度大于1/2睑板的患者实施眼睑重建, 利用异体巩膜替代睑板,异体巩膜材料取自眼库。

结果：术后3～12mo随访,眼睑重建术后形态良好,未出现明显的异体巩膜溶解或排斥反应; 巩膜脉络膜面均被结膜细胞移行覆盖,异体巩膜与皮肤粘连紧密,缺损区修复完整。4眼出现睑缘轻、中度内翻后行眼睑内翻矫正。2眼出现不同程度睑球粘连,行睑球粘连分离手术。

结论：异体巩膜具有材质稳定性好、组织相容性佳、取材保存方便、手术操作简单易行等优点。术后眼睑功能良好、外观满意,是理想的睑板替代材料。     

脱细胞真皮与异体巩膜在眼睑重建中的实验研究

目的　了解脱细胞真皮植入兔眼睑后的组织相容性 ,比较脱细胞真皮与异体巩膜替代睑板后的组织转归。方法　 16只新西兰白兔 ,随机平均分成两组 ,在去除右下睑 5mm× 10mm的全层睑板后 ,分别植入脱细胞真皮和异体巩膜 ,观察大体情况和血液中免疫学指标的改变 ,分别于术后 1、4、8、12周取出植片 ,光镜检查组织学的改变 ,取第 4周的植片做免疫组化检查。结果　脱细胞真皮植入眼睑后结膜充血水肿消退较快 ,无植入物排斥 ,两组血液中抗体和CD 4、CD 8细胞的改变无明显差异 ,组织学检查显示脱细胞真皮引起的免疫和炎症反应轻微。作为一种生物支架 ,可以引导受体新生血管和胶原纤维的长入。结论　脱细胞真皮在植入兔眼睑后有较好的组织相容性 ,并可引导新生胶原的生长 ,起到替代睑板的作用     

异体巩膜联合生物羊膜移植修复眼睑全层大缺损临床观察

目的 探讨异体巩膜联合生物羊膜移植替代睑板修复眼睑全层大缺损的远期效果.方法 对39例因肿瘤切除术或外伤造成的眼睑全层大缺损(超过睑长四分之一时)患者行异体巩膜联合羊膜移植替代睑板的眼睑重建术,并随访观察半年至5年.结果 39例患者经眼睑重建术后,植片生长良好,功能正常,对眼球无刺激,对视功能无影响,肿瘤未见复发.结论 异体巩膜联合生物羊膜移植替代睑板修复眼睑全层大缺损远期疗效确切,术后眼睑形态、功能恢复良好,不影响视功能,是一种较为理想的手术方式.     

兔异体睑板睑结膜移植修复眼睑缺损实验研究

目的比较甘油、酒精及深低温3种方法保存兔异体睑板修复眼睑缺损的有效性和术后组织病理学反应及细胞凋亡情况。方法分3组进行甘油、酒精及深低温保存兔异体睑板睑结膜移植修复眼睑缺损各16眼,术后1周、1月及3月分别取材用光镜观察植片的组织病理学改变,并以原位末端标记（TUNEL）技术观察移植后细胞凋亡情况。结果3组术后均有不同程度的炎性反应出现,深低温保存兔异体睑板移植术后临床及组织病理学观察炎性反应轻于甘油及酒精保存材料移植后反应;3组均出现细胞凋亡现象,深低温组移植术后凋亡细胞数量较甘油、酒精组少。结论深低温保存的兔异体睑板移植修复眼睑缺损活性高,简便易行,保存方便,术后并发症少,排斥反应小,是理想的眼睑缺损修复的材料。     

先天性眼睑缺损修复术

目的：探讨利用皮肤旋转滑行皮瓣及异体巩膜分层修复先天性巨大眼睑缺损的效果。方法：设计分层修复巨大眼睑缺损的方法，采用局部转移结膜瓣修复睑结膜面，利用异体巩膜代替睑板，皮肤层面采用缺损区延长切口及鼻侧旋转滑行皮瓣修复，达到一期修复全层眼睑缺损的目的。结果：6例先天眼睑缺损再造术，术后随访6月以上，外观满意，睑裂闭合良好，眼睑瞬目功能正常，角膜透明。结论：皮肤及结膜旋转滑行瓣及异体巩膜代替睑板是一期修复先天性巨大眼睑缺损的简便有效方法。     

美容性异体巩膜眼睑成形术治疗眼睑肿瘤

美容性异体巩膜眼睑成形术治疗眼睑肿瘤河南省眼科研究所陈静琪，张晓伟，吴众，庞广仁新蔡县卫校赵如君１９８７年以来对部分眼睑肿瘤作全展眼睑切除后用异体巩膜代茶睑板作眼睑成术８例巴眼．其中３例３眼术后加放疗，不但免作眶内容剜出术，免受终生缺眼有损面容的残疾...     

异体巩膜治疗眼睑缺损二例

我院采用异体巩膜代替睑板,对2例因肿瘤切除和严重睑外伤而致的眼睑缺损,进行了眼睑再造术,经过临床观察3年。效果较好,现报告如下: 材料保存二例异体巩膜,均系1987年7月北京同仁医院行角膜移植术后提供给我院的眼球,在无菌操作下,剪除眼球表面的筋膜组织和     

眼睑恶性肿瘤切除术后异体巩膜移植的眼睑再造

目的：探讨眼睑恶性肿瘤切除术后异体巩膜移植的眼睑再造手术效果。方法：采用保存的异体巩膜代替睑板，对28例眼睑恶性肿瘤切除术后进行眼睑再造术，6例皮肤除较大，行皮瓣转位及游离植皮，4例外眦韧带切除者，将巩膜移植片外侧延长固定于眶骨缘以代替外眦韧带，术后随访3－72月，平均37．5月。结果：28例术后均未见排异反应，眼睑外观满意；运动自如，闭合良好，结论：较大的眼睑恶性肿瘤切除的患者采用异体巩膜移植眼睑再造术，能达到保持眼睑功能和美容的效果。     

交联型异体脱细胞巩膜行眼部修复的试验研究

目的 将交联型异体脱细胞巩膜植入眼睑,研究其组织相容性及抗原性变化.方法 将20只新西兰大白兔随机平均分为两组,去除睑板后,分别植入兔交联型脱细胞巩膜和异体巩膜,于植入后1、4、8、12周观察全身及局部光镜和免疫学变化.结果 脱细胞巩膜和异体巩膜植入眼睑后第1周、4周、8周,两组间外周血IgG、IgA、IgM、C3、C4和CD4+T细胞、CD8+T细胞定量均无明显差异.术后1周、4周、8周、12周,植入局部的光镜显示:脱细胞巩膜组的炎症反应和淋巴细胞浸润要小于异体巩膜组,8周后植入的异体巩膜组织中央部发生少量坏死溶解现象,术后12周两组成纤维细胞及血管完全长入植片.术后1、4、8周,局部CD4+T及CD8+T细胞计数显示脱细胞巩膜组明显少于异体巩膜组.结论 兔脱细胞巩膜植入眼睑后引起的免疫反应较同种异体巩膜小.     

组织工程角膜支架材料再生丝素膜的生物相容性

目的:研究再生丝素膜作为组织工程角膜支架材料的可行性。方法:制备再生丝素膜,测定其接触角与透光率;在材料上接种兔角膜上皮细胞,观察细胞生长情况,MTT法测定6h贴壁率;将膜材料植入兔角膜基质层间,观察材料的透明性、可降解性及生物反应性。结果:再生丝素膜材料接触角为58.2度;492nm波长透光率为93.0%,570nm波长透光率为94.4%;细胞在材料表面贴附良好,6h贴壁率为31.6%,经统计学比较优于普通培养板;4wk时材料开始变得不透明,从角膜缘长入新生血管,8wk时新生血管达到高峰,12wk时材料部分降解,至16wk材料大部分降解,新生血管显著减少。结论:再生丝素膜具有较好的生物相容性。     

异体巩膜矫正甲状腺相关眼病上睑退缩并内翻

目的 评估异体巩膜移植延长上睑提肌矫正甲状腺相关眼病上睑退缩并内翻的疗效.方法 对17例（21眼）上睑退缩并内翻的静止期甲状腺相关眼病患者行异体巩膜移植延长上睑提肌矫正上睑退缩并内翻,观察其临床效果.结果 术后所有患者睑裂宽度均较术前缩小,差异有统计学意义（t=2.94,P=0.028）,患者自觉症状不同程度减轻或消失,随访6个月和1年无上睑退缩或内翻复发.结论 异体巩膜移植延长上睑提肌能有效矫正甲状腺相关眼病上睑退缩并内翻.     

物理交联再生丝素膜组织工程角膜的生物相容性研究

背景角膜组织工程生物材料在体内应当具备透明性、一定的机械强度、生物相容性和缓慢降解的特点,丝素膜生物材料具备这些特征。目的研究采用物理交联再生丝素膜构建组织工程角膜的可行性。方法用常规培养法培养人角膜上皮细胞（CECs）,将对数生长期的CECs在用家蚕丝制备的物理交联再生丝素膜上进行培养,分别于培养后24、48、72h在倒置显微镜、扫描电子显微镜下观察CECs的生长状态和形态学,并与细胞培养板培养的人CECs形态进行对照。MTT法每日检测和记录再生丝素膜培养后人CECs的增生情况,流式细胞仪检测再生丝素膜培养人CECs的细胞周期和凋亡率。将再生丝素膜4mm×3mm植入新西兰白兔右眼角膜基质层间,于术后1个月、2个月时裂隙灯下检查眼表,术后2个月摘除兔眼并制备移植眼角膜组织切片行组织病理学检查,观察再生丝素膜材料的降解情况及角膜新生血管（CNV）的生长情况。采用免疫组织化学法检测术后1个月、2个月CD34在移植眼角膜组织中的表达,并与正常眼进行对照。结果在24、48、72h3个时间点,倒置显微镜、扫描电子显微镜下见再生丝素膜培养的人CECs与细胞培养板培养法培养的人CECs形态结构无明显差别。再生丝素膜或细胞培养板培养CECs在1、2、3、4、5、6、7d各个时间点A490值比较,差异无统计学意义（F=0．641,P〉0．05）。再生丝素膜和细胞培养板培养的CECs凋亡率分别为1．8％、2．0％,细胞G2／G1期分别为1．956、1．945。再生丝素膜角膜植入后2个月时,再生丝素膜为排列整齐的胶原组织替代,角膜内新生血管和炎性细胞均少于移植后1个月。角膜免疫组织化学染色检测显示再生丝素膜植入角膜后1个月、2个月CD34表达量均明显低于Ad—VEGF165诱导的阳性对照,而与正常的角膜相比差异无统计学意义（P〉0．05）。术后1个月与术后2个月比较,角膜中CD34阳性率的差异无统计学意义（P〉0．05）。结论物理交联再生丝素膜构建组织工程角膜可行,再生丝素膜与角膜组织生物相容性良好,再生丝素膜植入兔角膜基质后无明显的炎症反应和新生血管。     

保存异种巩膜移植的实验研究

目的：比较经过保存的异种(猪)巩膜与同种异体(兔)巩膜及人工合成材料作为埋藏材料的术后效果，为眼科手术探寻新的应用材料。方法：在白兔背部及眼睑皮下分别植入甘油保存的猪巩膜、甘油保存的兔巩膜、酒精保存的猪巩膜、医用硅橡胶片。术后1、4、12周取出，进行大体观察和组织学检查，部分植片还进行电镜检查。结果：同种异体巩膜和异种巩膜植片在受体内的转归相似。结论：保存猪巩膜有希望成为人同种异体巩膜的代用品。     

应用同种异体脱细胞真皮的眼睑原位重建术

目的探讨脱细胞真皮在眼睑缺损治疗中的临床效果。方法2001年11月至2002年11月收治10例眼睑缺损患者(11只眼睑),其中上睑8例,下睑1例,同侧眼上下睑1例;外伤所致者9例,先天性缺损者1例;眼睑完全缺损2只睑,2／3缺损8只睑,1／3缺损1只睑。以厚度为1mm的商业化同种异体脱细胞真皮代替睑板,运用眼睑原位重建术治疗眼睑缺损。随访观察平均8个月。结果脱细胞真皮植入眼睑后炎性反应轻微,未见有植入物脱落和感染现象,受体结膜可在脱细胞真皮表面爬行生长。组织学检查发现术后半年脱细胞真皮植片内有新生毛细血管和纤维母细胞存在。术后按治疗标准评为优者8只睑,良好2只睑,改善1只睑,治愈率为91％。结论脱细胞真皮不仅能代替睑板起支撑作用,而且术后引起的免疫和炎性反应轻微,可作为一种生物支架引导受体新生血管和胶原纤维的长入。     

Developmentally regulated appearance of spliced variants of type XII collagen in the cornea

PURPOSE: To determine whether temporal and spatial changes in the distribution of the long and short alternatively spliced variants of type XII collagen are associated with any specific morphogenetic events in pre- and postnatal development of the cornea and surrounding tissues. METHODS: The distribution of alternatively spliced variants of type XII collagen in fetal and newborn rabbit tissues was analyzed immunohistochemically using monoclonal antibodies that recognize either only the long form or both the short and the long forms of type XII collagen. RESULTS: During early fetal development of the cornea in rabbit (days 14 -17), the short form of type XII collagen was detected in the corneal stroma, the sclera, and the stroma in the rudimentary eyelid folds, whereas the long form was present only in the sclera. The long form was first evident in the cornea at day 24 but only in the posterior stroma. At later stages of prenatal development, the distribution of the long variant gradually extended toward the anterior stroma and in the newborn rabbit, the long variant was distributed throughout the entire stroma. However, in the eyelid, although the short form was present along the entire subepidermal regions both during fetal and neonatal development, the long form was transiently expressed between days 21 and 24 and was restricted to the subepidermal regions at the junction of the opposing eyelids. The long form of type XII collagen was first detectable in the basal epithelial cells and in its basement membrane (BM) at day 12 after birth, just before the opening of the eyelids. It continued to be present in the corneal BM zone in the adult rabbit but was not present in the limbal or conjunctival BM zone. CONCLUSIONS: The expression and distribution of the alternatively spliced forms of type XII collagen are developmentally and differentially regulated in the cornea, the sclera, and the eyelid. Although the short form is expressed in the stromal matrices of the cornea and surrounding tissues from early stages of corneal development, the appearance and distribution of the long variant form of type XII collagen coincide with the pattern of stromal condensation. Its first appearance in the corneal epithelial BM precedes the eyelid opening by 1 to 2 days, possibly suggesting that it may be involved in the tighter anchoring of the corneal epithelium to the underlying tissue or in promoting stromal condensation to assist in the separation of the corneal epithelium from the juxtaposed palpebral conjunctival epithelium of the eyelid.     

用自体足底皮代替睑板行眼睑再造的初步报告

目的：探讨用自体足底皮代替睑板行眼睑再造术的效果。方法：对１１例（１１眼眼睑）由于切除肿瘤和外伤造成眼睑缺损病例施行手术。其中上睑９例,下睑２例。眼睑完全缺损６例,２／３缺损３例,１／２缺损２例。年龄２４～８０岁,平均５８．６岁。用自体足底皮代替睑板行眼睑再造。结果：追踪观察６～４２个月,治愈９例,好转２例,无明显并发症。结论：自体足底皮取材简便,易于成形,经济实用,是一种比较理想的睑板替代材料。     

眼部烧伤眼睑全层缺损修复术成功的影响因素

目的探讨影响游离皮瓣联合异体巩膜、羊膜移植修复眼睑缺损成功的因素。方法选择2000年2月-2007年10月西安市眼科医院收治的41例（41眼）的眼烧伤眼睑全层缺损者。其中热烧伤15例,碱烧伤20例,酸烧伤6例。烧伤后3～24个月,行大腿内侧游离皮瓣联合同种异体巩膜及羊膜移植术。其中5例联合行睑球粘连分离及板层角膜移植术。术后随访6—36个月。结果眼睑再造术41例中有35例眼睑重建成功,移植片成活,其中5例在6～12个月出现瘢痕收缩,使眼睑部分闭合不全。6例术后2周出现皮瓣愈合不良、脱落、溶解。结论自体游离皮瓣联合同种异体巩膜、羊膜移植修复眼烧伤所致的眼睑全层缺损,是临床治疗烧伤眼睑缺损的有效方法。手术时机的选择、烧伤程度的评估、手术方法的改善是决定手术成功的重要因素。