重组人催乳素（rhPRL）在huPBL／SCID嵌合模型中对人直肠癌的治疗效？…

通过体内实验进一步证实ｒｈＰＲＬ对体免疫功能的调节作用，以及用于过继细胞免疫治疗的可能性。     

催乳素对人NK细胞抗癌效应的调节作用

ＮＫ细胞是机体抗癌的前哨，属免疫系统个体发育中较早形成的细胞。ＰＲＬ为机机体十分重要的脑本激素。在生命基本活动中起重要作用。由于ＰＲＬ的受体类似于许多造血免疫相关的细胞因子，因而ＰＲＬ的促造血和调节免疫功能的作用十分引人注目，其中ＰＲＬ与ＮＫ的关系倍受关注。ＮＫ细胞膜可表达高亲和力的ＰＲＬ受体，ＰＲＬ对ＮＫ扔ＰＲＬ受体作用可引起ＮＫ的ＩＬ－２Ｒ和ＩＬ－２基因表达，从而调控ＮＫ的功能。     

基因工程人催乳素(rhPRL)促进骨髓移植小鼠的造血重建

选用BACB/c鼠经致死放疗后行同基因骨髓移植(SBMT),在小鼠SBMT后腹腔注射rhPRL(10μg/次,隔日进行,共10次).结果显示,小鼠骨髓和脾脏中造血前体细胞(CFU-C和BFU-E)比例增加,外周血中WBC、RBC和PLT亦均有明显的时相提前,该剂量rhPRL无任何病理损伤和增长体重的作用,提示rhPRL在促进BMT造血重建有应用前景.     

腹腔镜扩大根治术治疗老年直肠癌的疗效及对细胞免疫功能的影响

目的探讨腹腔镜扩大根治术治疗老年直肠癌的疗效及其对T细胞亚群、自然杀伤T(NKT)细胞的影响。方法选取2009年8月至2012年8月间四川省邛崃市医疗中心医院收治的72例经病理学诊断为直肠癌患者,按照手术方式分为观察组(37例)和对照组(35例)。观察组患者接受腹腔镜扩大根治术,对照组患者接受开腹直肠癌扩大根治术。比较两组患者的临床疗效、围术期血清炎性细胞因子水平、T细胞亚群和NKT细胞水平变化。结果观察组患者有效率(RR)和疾病控制率(DCR)分别为83.8%和91.9%,对照组则分别为62.9%和85.7%,组间差异有统计学意义(P<0.05)。观察组患者手术时间、术中出血量及术后肠道功能恢复时间均显著小于对照组,组间差异有统计学意义(P<0.05)。根据生活质量评价量表(SF-12),观察组患者治疗后生活量表相关维度(总体健康、情感职能、躯体疼痛及精神健康)评分均显著高于对照组,组间差异有统计学意义(P<0.05)。两组患者术后1 d、3 d和5 d血清白介素6(IL-6)、白介素8(IL-8)水平均显著高于术前1 d,差异有统计学意义(P<0.05);观察组患者术后1 d、3 d血清白介素8(IL-8)水平均显著高于术前1 d,差异有统计学意义(P<0.05)。观察组患者术后血清IL-6及IL-8水平均显著低于对照组术后相应时间的水平,组间差异有统计学意义(P<0.05),且观察组患者术后5 d血清IL-8水平又恢复至术前水平,组内差异无统计学意义(P>0.05)。观察组患者手术前后T淋巴细胞亚群各指标(CD3~+T、CD4~+T、CD8~+T及CD4~+/CD8~+T)水平均处于稳定状态,而对照组手术前后上述指标间差异均有统计学意义(P<0.05),且两组患者术后各对应时间点上述指标水平的差异也均有统计学意义(P<0.05)。结论腹腔镜扩大根治术治疗老年直肠癌的疗效显著,且对机体T细胞亚群、NKT细胞的影响较小,值得临床推广。     

FOLFOX方案化疗对结直肠癌患者免疫细胞数的影响

背景与目的：化疗在杀伤肿瘤的同时,也损害了机体的正常免疫。很多文献曾报道晚期肠癌的化疗,常使细胞免疫功能抑制加重。本研究探讨FOLFOX方案即奥沙利铂联合亚叶酸钙及氟尿嘧啶联合化疗对结直肠癌患者免疫细胞数的影响及与健康人的差异。方法：80例结直肠癌患者行FOLFOX方案化疗（奥沙利铂85mg/m2,静脉滴注,第1天;亚叶酸钙200mg/m2,静脉滴注,第1天;氟尿嘧啶400mg/m2,第1天,2400mg/m2,持续静脉滴注46h）,2周1次,2次为1个疗程,采用流式细胞仪测定化疗前及化疗后2周、4周外周血T淋巴细胞亚群和NK细胞的活性,比较化疗前后的变化,同时根据临床分期进行亚组分析比较,以健康人作对照分析。结果：本组结直肠癌患者第1天、第2周及第4周外周血CD3＋、CD4＋、CD8＋、CD4＋/CD8＋及NK细胞活性比较均无显著下降（P〉0.05）,但患者外周血CD3＋、CD4＋、NK细胞数量及CD4＋/CD8＋比值与健康人相比下降,而CD8＋细胞比例显著升高,差异有显著性（P〈0.05）,提示免疫功能较健康人下降,而且外周血T淋巴细胞亚群和NK细胞数量的改变与结直肠癌临床病理分期有关,分期越晚,CD3＋、CD4＋及NK细胞数量CD4＋/CD8＋细胞比值越低,CD8＋细胞比例越高;Ⅰ、Ⅱ期结直肠癌患者与Ⅲ、Ⅳ期患者之间差异有显著性（P〈0.05）。结论：FOLFOX方案治疗结直肠癌疗效肯定,可改善患者生存质量,而且对机体免疫力影响小。检测淋巴细胞亚群对判断患者的免疫功能、预测肿瘤患者的预后以及指导临床是否需要应用免疫增强剂均有重要意义。     

CIK细胞过继性免疫治疗对结直肠癌化疗患者免疫指标的影响

目的 探讨 CIK 细胞回输对化疗后结直肠癌患者免疫功能的影响.方法 检测化疗联合 CIK 细胞回输后结直肠癌患者的外周血 CD3+细胞百分率,CD4+细胞百分率,CD4+/CD8+比值,NK 细胞百分率.结果 化疗联合 CIK 细胞回输后肿瘤患者CD3'、CD4+、CD4+/CD8+、NK 均显著高于化疗前组,且 CD8+显著低于对照组(P<0.05).结论 FOLFOX 方案化疗后序贯应用 CIK 细胞过继性免疫治疗,可提高结直肠癌患者的免疫功能,有可能降低术后复发和转移.     

短链脂肪酸在结直肠癌治疗中潜在的负面作用

目前的研究多是强调短链脂肪酸(SCFAs)在结直肠癌防治中的有益作用,如:通过抑制肠道慢性炎症反应,给肠道上皮细胞提供能量和维持肠黏膜上皮稳态,从而降低结直肠癌的发生率。此外,SCFAs还可以通过拮抗组蛋白去乙酰化酶(HDACs),抑制结肠癌细胞增殖;通过活化caspase-3信号通路,促进肿瘤细胞凋亡,以及激活抗肿瘤免疫,对结直肠癌产生治疗作用。然而,最近的流行病学研究显示,结直肠癌患者血液中,部分SCFAs水平升高,是促进结直肠癌发生的危险因素。在肠道中补充产丁酸细菌,可促进小鼠结直肠癌的发生,敲除细菌中产丁酸基因,促癌作用受到抑制。另有临床研究,在肿瘤患者的血液中发现,高水平丁酸可以抑制伊匹木单抗诱导的T细胞以及白介素-2浸润,降低了细胞毒T淋巴细胞相关抗原4抗体治疗肿瘤的效果。这些研究提示SCFAs在结直肠癌的防治中发挥有益作用是在一定条件下的,超出这个范围会产生负面作用。因此,在临床工作中应用SCFAs预防和治疗结直肠癌的同时,需要警惕SCFAs不恰当的应用产生的负面作用。     

调节性T细胞在结直肠癌发生发展中的作用及相关治疗

调节性T细胞（regulatory T cell,Treg）是肿瘤微环境中重要的免疫抑制性细胞,在维持免疫稳态方面发挥重要的作用。Treg不仅可以通过分泌抑制性细胞因子阻碍有效的抗肿瘤免疫,还可以通过调节细胞因子进而调控结直肠癌（colorectal cancer,CRC）细胞生长,同时直接或间接地促进CRC血管新生,并与患者不良预后有关;但Treg也可能在炎症相关性肿瘤发生的早期,通过抑制炎症反应降低肠道肿瘤发生的风险。近年来,靶向Treg的免疫治疗也成为了研究热点,一些治疗策略已经在临床应用,还有一些正在进行临床前及临床试验。本文就Treg在CRC发生发展中的作用及靶向Treg的免疫治疗策略进行综述,探讨Treg作为治疗靶点的作用机制及临床应用前景。      

同期调强放疗联合内分泌治疗对局部晚期前列腺癌患者免疫指标的影响

目的:探讨同期调强放疗联合内分泌治疗对局部晚期前列腺癌患者机体免疫指标的影响.方法:92例局部晚期前列腺癌患者纳入研究,随机分为内分泌治疗(androgen deprivation therapy,ADT)组和放疗联合内分泌治疗(radiotherapy plus androgen deprivation therapy,RT+ ADT)组,ADT组方案:口服比卡鲁胺片50mg/次,1次/d,皮下注射醋酸戈舍瑞林3.6mg/次,1次/28d;RT+ ADT组方案:肿瘤体积靶区2.2Gy/f,1次/d,每周5次,共31次,前列腺病灶肿瘤剂量68.2Gy.采用酶联免疫吸附法,分别比较健康人群与内分泌治疗组、放疗联合内分泌治疗组治疗前和治疗后T淋巴细胞亚群(CD3+、CD4+、CD8+、CD4 +/CD8+)和NK细胞二者的差异.结果:健康对照组CD3+、CD4+、CD8+均高于ADT组和RT+ ADT组基线评价和治疗后,且有统计学差异(P＜0.05);ADT组和RT+ ADT组治疗后CD3+、CD4+、CD8+较基线评价均有不同程度升高,且二者比较有统计学差异(P＜0.05);RT+ ADT组在治疗结束后CD3+、CD4+、CD4+/CD8+均高于ADT组,有统计学差异(P＜0.05);CD8+低于ADT组,差异有统计学意义(P＜0.05).结论:局部晚期前列腺癌患者存在不同程度的免疫功能紊乱,同期调强放射联合内分泌治疗可在近期内改善局部晚期前列腺癌患者的免疫功能.     

rIL-6抗癌机理初探(Ⅱ)-rIL-6对小鼠脾脏NK细胞和CTL细胞体内外调节效应

为了探讨rIL-6对NK和CTL细胞的调节效应．我们进行了rIL-6对小鼠脾脏NK细胞和CTL细胞功能影响的体内外实验研究，实验采用C57BL/6荷瘤或正常小鼠，给予rIL-6或生理盐水，连续10天，第15天取小鼠脾脏进行NK细胞或CTL细胞的活性测定。结果表明：(1)rIL-6在体外对NK细胞在小剂量时有促进作用，在大剂量时有抑制作用；对CTL细胞则表现出随IL-6剂量的增加，促进作用明显增强；(2)rIL-6对正常鼠体内NK细胞杀伤活性有促进怍用；(3)对荷瘤鼠体内NK细胞和CTL细胞杀伤活性均有明显的促进作用；(4)rIL-6对荷瘤所致NK功能下降具有预防作用。提示rIL-6对小鼠NK细胞和CTL细胞杀伤活性的促进效应可能是rIL-6发挥抗癌作用的一个途径。     

Growth of Human Lymphoma Cells in SCID Mice

Two EBV-negative human lymphoma cell lines raised in this laboratory and peripheral blood cells of a patient with large cell lymphoma in leukemic phase were injected intravenously or intraperitoneally into C.B.17 SCID mice. One line (OCI-LY18) was derived from the pleural fluid of a patient with a large cell, immunoblastic malignant lymphoma. Cells of this line are of B cell origin and characterized by multiple rearrangements of the JH locus. The second line (OCI-LY17) was grown from the peripheral blood of a patient with a large cell lymphoma of T-cell phenotype which has characteristic rearrangement of the T-cell receptor beta chain. The cells directly obtained from a patient with large cell non-cleaved malignant lymphoma were of B-cell origin.

Animals carrying OCI-LY18 developed large tumor masses within 6-8 weeks of inoculation. The tumors were detected in the intestine, mesentery, retroperitoneum, lymph nodes, spleen, lung and kidney. The masses resembled the primary tumor with respect to histological appearance and immunological phenotype. It was possible to generate secondary cell lines from the tumors found in the inoculated SCID mice. Injection of one of these secondary cell lines into SCID mice resulted in the rapid development of lymphoma and as few as 10 cells were sufficient to establish the disease in the inoculated animals. In contrast cells of OCI-LY17 produced small tumor aggregates that did not appear to progress over time and did not cause death of the animals. The tumors were identified by the same phenotypic profile as that seen in the primary cell line and sections of the patient derived lymph node biopsy.

The sample of peripheral blood cells directly derived from the patient gave rise to tumor nodules in multiple locations. Their morphology and immunological phenotype was consistent with the original disease seen in the patient.     

LPAK细胞对裸鼠人胃癌的抗瘤作用

LPAK细胞(Lymphokine and PHA Activated Killer cells,LPAK)在体外实验中对Raji细胞和SGC-7901胃癌细胞均有较强的杀伤活性. LPAK细胞对裸鼠SGC-7901胃癌亦有显著的抗瘤作用,抑瘤率达84.6±8.6%.     

腺病毒介导的CD/5FC自杀基因疗法对小鼠结肠腺癌的治疗作用及相关免疫机理的研究

大肠杆菌胞嘧啶脱氨酶CD可以将前体药物5FC代谢为毒性产物5FU,具有抗肿瘤作用.本课题我们观察了腺病毒介导的CD/5FC自杀基因疗法对小鼠结肠癌生长的治疗作用并探讨其作用机理.结果表明,首先,CD/5FC自杀基因疗法小鼠结肠癌CT26体内外生长均具有显著的抑制作用,4O%的荷瘤小鼠经过治疗后长期存活;其次,我们还研究了自杀基因疗法治疗肿瘤时可能涉及的免疫机理.结果发现在以CD/5FC系统治疗结肠腺癌小鼠过程中能在一定程度上诱导出机体的抗肿瘤免疫反应,包括脾脏CT6L活性的增高、肿瘤局部浸润免疫细胞表达,DEC-205、B7-2、I-A~(b,d)分子增加等.本实验结果提示虽然CD/5FC系统可以诱导机体产生一定的抗肿瘤免疫反应,但其程度不够显著.     

TNP-470联合重组人内皮抑素抑制小鼠肺腺癌生长的研究

目的:观察TNP470和重组人内皮抑素（recombinant human endostatin,rhES）联合治疗对小鼠肺腺癌LA795肿瘤生长的抑制作用。方法: 用甲醇诱导能高效分泌表达重组人内皮抑素（rhES）的毕赤酵母菌株分泌表达rhES，将皮下接种LA795肺腺癌细胞的T739雄性近交系小鼠随机分成3组，每组各10只，分别给予PBS，rhES及TNP470+rhES皮下注射，每日1次，连续14 d；观察各组小鼠肿瘤生长情况，游标卡尺测量肿瘤体积大小。断颈处死小鼠，原位肿瘤免疫组化观察肿瘤内部微血管密度（microvessel density, MVD）。结果: 经甲醇诱导，毕赤酵母重组菌分泌表达rhES，并应用肝素亲和层析将其纯化；动物试验显示与PBS对照组比较，rhES治疗组及rhES＋TNP470治疗组均明显抑制小鼠肿瘤的生长（P<0.01），TNP470+rhES组与rhES组比较亦有显著性差异（P<0.01）。原位肿瘤免疫组化显示联合治疗组抑制血管生成更显著（P<0.01）。结论: TNP470联合rhES治疗对小鼠肺腺癌LA795生长的抑制效果比单独使用rhES的治疗效果更佳，具有良好的协同治疗作用     

人集落刺激因子对荷瘤小鼠外周血T,TH淋巴细胞和TH／TS比值的影响

应用酸性磷酸酯酶(ACP)和双肽氨基肽酶IV(DAPIV)细胞化学方法观察了人集落刺激因子(CSF)对LA795肺腺癌荷瘤小鼠外周血T,T_H淋巴细胞数和T_H/T_S比值的影响.结果表明,CSF能明显抑制荷瘤小鼠外周血T,T_H细胞绝对数的降低;注射CSF5天后,植瘤 CSF组(治疗组)T,T_H细胞数降低的幅度明显低于植瘤对照组,至16天治疗组T,T_H细胞数分别比对照组升高约39％和40％;进一步实验表明,CSF能在一定程度上调整机体免疫T细胞比例,改善免疫功能;给CSF第10天,治疗组T_H/T_S比值明显高于对照组,基本接近植瘤前水平.     

In vivo Antitumor Mechanism of Natural Human Tumor Necrosis Factor Involving a T Cell-mediated Immunological Route

We have investigated the in vivo antitumor mechanism of natural human tumor necrosis factor (n-TNF) isolated from a culture of human leukemic B cell line (BALL-1), especially its action as an immunomodulator, and found that the in vivo antitumor effect of n-TNF on Meth A sarcoma implanted in BALB/c mice pretreated with monoclonal antibody against T cell-specific surface antigen (Thy-1) was significantly diminished. Furthermore, when BALB/c mice were treated with T cell subset-specific monoclonal antibodies, anti-L3T4 or anti-Lyt-2.2, the antitumor effect of n-TNF on Meth A sarcoma was significantly reduced. Therefore, it was suggested that the in vivo antitumor mechanism of n-TNF might involve a T cell-mediated immunological route.     

牛膝多糖对小鼠免疫功能影响的研究

目的 :探讨牛膝多糖 (ABP)对正常及免疫低下小鼠免疫功能的影响。方法 :ABP经腹腔注射给药后 ,测定各组小鼠外周血中NK细胞以及肿瘤坏死因子 (TNF)活性的变化。结果 :ABP 60mg (kg·d)10d能显著提高免疫低下小鼠NK细胞和小鼠外周血中TNF的活性 ,还能促进正常小鼠外周血中YNK细胞及TNF活性的增强。结论 :ABP是一种免疫调节剂 ,能提高正常及免疫低下小鼠的免疫功能     

可调控自杀基因的SCID小鼠乳腺癌基因治疗的研究

目的：探讨经强力霉素（Dox)诱导后，丙氧鸟苷（GCV）对SCID小鼠乳腺癌的调控性治疗作用。方法：重组逆转录病毒载体pRevTRE/HSVtk与pRevTet-On共转染乳腺癌细胞MCF－7，接种SCID小鼠成瘤后，腹腔内分别注射生理盐水（NS），GCV及Dox GCV治疗15d。观测肿瘤体积和组织病理改变及用RT－PCR分析肿瘤组织有无HSVtk的表达。结果：乳腺癌SCID小鼠Dox GCV治疗15d后，肿瘤体积明显减小，生长受抑，组间比较有显著性差异（P＜0．05）；HE染色发现治疗组肿瘤有局部坏死，炎性细胞浸润。RT－PCR结果显示Dox诱导后肿瘤组织HSVtk表达较明显。结论：在Dox的诱导作用下，GCV对可调控性自杀基因乳腺癌SCID小鼠有显著治疗作用。     

rhGM-CSF/LIF融合蛋白的体外抗肿瘤效应研究

本文利用基因重组技术获得的一种人GM-CSF与LIF融合蛋白rhGM-LIF,比较研究了不同浓度rhGM-LIF融合蛋白、rhGM-CSF与rhLIF单独使用及合用的体外抑瘤作用.结果表明,融合蛋白不但能够诱导髓系白血病细胞分化,而且能够抑制其生长,其抑制作用与用药剂量相关,在一定剂量范围内,这种作用显著地高于单个因子和两者合用的效果.值得重视的是,融合蛋白对人肝癌细胞的生长也有明显的抑制作用.实验结果提示,重组的融合蛋白具有潜在的抗肿瘤作用.