“神宁藏香”对失眠大鼠的行为学及GABA能系统通路的影响＊

目的 观察“神宁藏香”对失眠大鼠行为学及GABA能系统通路的相关受体及递质的影响。方法 采用SD大鼠腹腔注射对氯苯丙氨酸（PCPA）复制失眠模型，随机分组为模型组、阳性药组、“神宁藏香”组和安神中药组，并建立空白对照组，每组进行相应药物干预7天，模型组和空白组7天提供生理盐水，观察并记录各组大鼠的一般活动状态。通过行为学实验（翻正实验、旷场实验、悬尾实验、强迫游泳实验）对比各组之间的差异；运用Western Blot分子生物学技术探讨失眠的发病机制及“神宁藏香”对失眠大鼠GABA能系统通路中合成代谢：GAD65、GABA-T，转运：GAT-1，传导：NKCCl的蛋白含量的表达影响。结果 “神宁藏香”可以明显增加睡眠持续时间（P < 0.01），显著降低旷场实验中央格停留时间（P < 0.01）及增加站立次数（P < 0.01），有效降低悬尾实验中不动时间（P < 0.01），显著降低强迫游泳实验漂浮时间（P < 0.01）；“神宁藏香”可以提高下丘脑中GAD65、GAT-1蛋白的表达，降低下丘脑中GABA-T、NKCC1蛋白的表达。结论 “神宁藏香”能够有效延长失眠大鼠的睡眠持续时间，改善失眠所产生的抑郁、紧张等负性情绪，增加其空间探索的兴趣；并且其作用靶点主要是通过促进失眠大鼠下丘脑中GABA合成蛋白GAD-65的表达和降低转运蛋白NKCC1的表达而发挥治疗作用，这也为临床中推广使用“神宁藏香”治疗失眠提供参考。     

基于OX1R/PLCβ-1/PKCα/ERK1/2信号通路探讨安寐丹对失眠模型大鼠肝脏神经递质和昼夜节律的影响及机制

目的 基于食欲素受体1（OX1R）/磷脂酰肌醇特异性磷酯酶Cβ-1（PLCβ-1）/蛋白激酶Cα（PKCα）/细胞外信号调节激酶1/2（ERK1/2）信号通路探讨安寐丹对失眠大鼠肝脏神经递质及昼夜节律的影响及机制。方法 SPF级SD大鼠60只,随机分为空白组、模型组、苏沃雷生组、安寐丹低、中、高剂量组,各10只;除空白组外,其余各组通过腹腔注射对氯苯丙氨酸（PCPA）进行造模,空白组给予等容生理盐水、苏沃雷生组给予苏沃雷生溶液30 mg·kg^-1·d^-1灌胃、安寐丹低、中、高剂量组分别给予安寐丹水煎液（4.55、9.09、18.18 g·kg^-1·d^-1）;观察各组一般情况、体质量和24 h自主活动情况;采用苏木素-伊红（HE）和马松（Masson）染色观察肝脏病理学改变,酶联免疫吸附测定法（ELISA）检测肝脏神经递质γ-氨基丁酸（GABA）、5-羟色胺（5-HT）、肾上腺素（EPI）、去甲肾上腺素（NE）和乙酰胆碱（ACh）的表达,生化检测肝脏谷氨酸（Glu）的表达,实时荧光定量聚合酶链式反应（Real-time PCR）检测肝脏生物钟基因Per1、Per2、Cry1、Cry2、Bmal1、Bmal2的mRNA表达,蛋白免疫印迹法（Western blot）、Real-time PCR检测肝脏OX1R/PLCβ-1/PKCα/ERK1/2信号通路蛋白及mRNA表达。结果 与空白组比较,模型组体质量下降（P<0.05,P<0.01）,狂躁、静止节律紊乱（P<0.01）,肝脏肌纤维断裂、水肿伴炎性细胞浸润,GABA、5-HT、EPI、NE和ACh含量降低、Glu含量升高（P<0.01）,Per1、Per2、Cry1和Cry2 mRNA表达降低（P<0.01）,Bmal1和Bmal2 mRNA表达升高（P<0.01）,OX1R、PLCβ-1、PKCα、ERK1/2蛋白及mRNA基因表达均增高（P<0.01）;与模型组比较,苏沃雷生和安寐丹低、中、高剂量组可增加失眠大鼠体质量（P<0.05,P<0.01）,减少狂躁状态、增加其静止时间和频率（P<0.05,P<0.01）,并可上调神经递质GABA、5-HT、EPI、NE、ACh和节律基因Per1、Per2、Cry1、Cry2 mRNA表达（P<0.05,P<0.01）,抑制Glu及Bmal1、Bmal2、OX1R、PLCβ-1、PKCα、ERK1/2 mRNA和OX1R、PLCβ-1、PKCα、ERK1/2蛋白表达（P<0.05,P<0.01）。结论 安寐丹可通过抑制OX1R/PLCβ-1/PKCα/ERK1/2信号通路调节失眠大鼠肝脏神经递质表达,改善昼夜节律紊乱,且安寐丹高剂量组效果最佳。     

电针对阿尔茨海默病模型大鼠GSK3β信号通路相关蛋白的影响＊

目的 观察电针“百会”“肾俞”穴对阿尔茨海默病（AD）模型大鼠学习记忆能力及海马CA1区GSK3β信号通路相关蛋白的影响及机制研究。方法 30只SPF级SD雄性大鼠随机分成假手术组、模型组和电针组，每组10只。除假手术组外，其余各组大鼠双侧海马区各注射5 μL β淀粉蛋白25-35（Aβ_25-35）制备AD模型，假手术组给予同等剂量生理盐水注射。假手术组、模型组正常喂养，不做干预处理，电针组选取百会及肾俞穴（两侧肾俞穴交替选择）进行电针治疗，频率2 Hz，电流1 mA，每日1次。每个疗程6天，共2个疗程，两个疗程间隔1天。治疗结束后第2天上午8点开始Morris水迷宫（Morris water maze，MWM）检测大鼠学习记忆能力，行为学实验结束后第2天取材。苏木精-伊红染色（Hematoxylin eosin staining，HE）观察海马CA1区病理形态改变。免疫组化法（Immunohistochemical method，IHC）检测大鼠海马区Tau蛋白磷酸化的表达，及糖原合成酶激酶3β（glycogen synthase kinase3β，GSK3β）信号通路相关蛋白表达。免疫印迹法（Western blot，WB）检测磷脂酰肌醇3激酶（phosphatidylinositol 3 kinase，PI3K）、蛋白激酶B（protein kinase B，AKT）、GSK3β相关蛋白的表达。聚合酶链反应（polymerase chain reaction，PCR）检测AKT、GSK3β mRNA的表达。结果 与假手术组相比：模型组大鼠逃避潜伏期明显延长（P < 0.01），穿越平台次数明显减少（P < 0.01），目标象限停留时间明显缩短（P < 0.01）；模型组海马区Tau蛋白磷酸化水平明显提高（P < 0.01），GSK3β蛋白表达水平明显提高（P < 0.01）；模型组PI3K（P85）、AKT（Ser473）、GSK3β（Ser9）蛋白相对表达量降低（P < 0.05）；模型组AKT mRNA表达水平明显降低（P < 0.01），GSK3β mRNA表达水平明显提高（P < 0.01）。与模型组相比：电针组大鼠逃避潜伏期明显缩短（P < 0.01），穿越平台次数明显增加（P < 0.01），目标象限停留时间明显延长（P < 0.01）；电针组海马区Tau蛋白磷酸化水平明显降低（P < 0.01），GSK3β蛋白表达水平明显降低（P < 0.01）；电针组PI3K（P85）、AKT（Ser473）、GSK3β（Ser9）蛋白相对表达量增加（P < 0.05）；电针组AKT mRNA表达水平明显提高（P < 0.01），GSK3β mRNA表达水平明显降低（P < 0.01）。结论 电针治疗能够有效改善AD大鼠学习记忆能力，其机制可能与影响GSK3β信号通路相关蛋白表达从而抑制Tau蛋白磷酸化有关。     

基于p38 MAPK/NF-κB信号通路探讨柴胡加龙骨牡蛎汤干预广泛性焦虑模型大鼠的作用机制

目的 研究柴胡加龙骨牡蛎汤是否可以通过调控抑制p38丝裂原活化蛋白激酶/核转录因子-κB（p38 MAPK/NF-κB）信号通路抑制广泛性焦虑（GAD）大鼠下丘脑区炎症反应，改善GAD大鼠的焦虑样行为，缓解GAD大鼠的焦虑症状。方法 74只Wistar大鼠随机选择12只作为空白组，剩余大鼠采用慢性束缚应激法制造GAD模型大鼠，造模14 d后进行旷场实验（OFT）和高架十字迷宫实验（PMT）检测各组大鼠焦虑样行为，筛选造模成功的大鼠60只，随机分为模型组、柴胡加龙骨牡蛎汤低、中、高剂量组（6、12、24 g·kg^-1）和地西泮组（1 mg·kg^-1），每组12只，连续14 d灌胃相应剂量柴胡加龙骨牡蛎汤和地西泮，给药14 d后继续通过旷场和十字迷宫实验观察大鼠焦虑样行为的变化；酶联免疫吸附测定法（ELISA）检测大鼠下丘脑和血清中肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、白细胞介素IL-6（IL-6）、白细胞介素-1β（IL-1β）水平；实时荧光定量聚合酶链式反应（Real-time PCR）检测p38 MAPK、NF-κB p65、NF-κB抑制因子α（IκBα）、钙结合蛋白（Iba-1）mRNA的水平；蛋白免疫印迹法（Western blot）检测大鼠下丘脑p38 MAPK、磷酸化（p）-p38 MAPK、NF-κB p65、p-NF-κB p65、IκBα蛋白的表达水平；免疫荧光法检测大鼠下丘脑小胶质细胞激活蛋白Iba-1表达情况。结果 与空白组比较，模型组大鼠体质量较轻且皮毛散乱黯黄、易躁易怒、喜在角落蛰伏，OFT边缘运动距离和边缘运动时间显著增加（P<0.01），PMT开臂运动距离、开臂运动时间及进入开臂次数显著减少（P<0.01），下丘脑室旁核小胶质细胞激活标志蛋白Iba-1荧光强度显著升高（P<0.01），血清和下丘脑中IL-1β、IL-6、TNF-α显著增多（P<0.01），下丘脑p38 MAPK、NF-κB p65、p-p38 MAPK、p-NF-κB p65、Iba-1蛋白及mRNA表达明显升高（P<0.05，P<0.01），IκBα蛋白及mRNA表达显著减低（P<0.01）。与模型组比较，柴胡加龙骨牡蛎汤中、高剂量组和地西泮组大鼠体质量较重且皮毛较为光滑、活动较为正常，OFT边缘运动距离和时间明显减少（P<0.05，P<0.01），PMT开臂运动距离及开臂运动时间明显增加（P<0.05，P<0.01），下丘脑小胶质细胞激活标志蛋白Iba-1荧光强度降低（P<0.05，P<0.01），血清和下丘脑组织中IL-1β、IL-6、TNF-α明显降低（P<0.05，P<0.01），下丘脑p38 MAPK、NF-κB p65、p-p38 MAPK、p-NF-κB p65、Iba-1蛋白及mRNA表达明显降低（P<0.05，P<0.01），IκBα蛋白及mRNA表达明显升高（P<0.05，P<0.01）。结论 柴胡加龙骨牡蛎汤可通过抑制p38 MAPK/NF-κB信号通路，降低GAD大鼠下丘脑内小胶质细胞活化度、下调促炎因子水平，发挥改善大鼠焦虑样行为、缓解大鼠焦虑状态的作用。     

安寐丹调控OXA/CREB/PER1信号通路改善SD模型大鼠昼夜节律紊乱＊

目的 观察中医经典名方安寐丹对睡眠剥夺（Sleep disruption，SD）模型大鼠食欲素（Orexin）及其介导的食欲素A（Orexin A，OXA）/cAMP反应元件结合蛋白（cAMP Response Element Binding Protein，CREB）/Period1（period circadian regulator 1， PER1）基因信号通路的作用。方法 40只雄性6月龄SD大鼠随机等分为空白组、模型组、艾司唑仑组、安寐丹组，空白组常规进食进水，其他三组采用对氯苯丙氨酸（PCPA）腹腔注射叠加多平台水环境剥夺法构建SD模型，自主活动仪监测昼夜活动节律。空白组、模型组给予等容的0.9%氯化钠灌胃，艾司唑仑组给予艾司唑仑0.09 mg·kg^-1、安寐丹组给予安寐丹水煎剂9.09 mg·kg^-1灌胃治疗，连续4周。4周后运用Morris水迷宫检测其学习记忆，免疫荧光检测下丘脑Orexin神经元表达，酶联免疫吸附测定法（ELISA）检测各组大鼠下丘脑组织OXA、食欲素B（Orexin B，OXB）含量，蛋白质免疫印迹（Western Blot，WB）和实时荧光定量（Quantitative Real-time PCR，RT-PCR）检测各组大鼠下丘脑组织OXA/CREB/PER1信号通路蛋白和mRNA表达。结果 与空白组比较，模型组大鼠24 h自主活动时间和活动距离均高于空白组；活动时间、活动距离显著增加（P<0.01），上平台潜伏期与游泳总路程显著延长（P<0.01），穿越站台次数和站台活动时间均减少（P<0.01）；下丘脑组织OXA、OXB含量高于空白组（P<0.01）；且OXA、CREB 蛋白和mRNA表达均显著升高（P<0.01），PER1 蛋白和mRNA表达均显著下调（P<0.01）。与模型组比较，安寐丹组大鼠上平台潜伏期缩短（P<0.01）、游泳总路程减少（P<0.05）、穿越平台数量增加（P<0.05）；下丘脑组织OXA、OXB含量降低（P<0.05），OXA蛋白表达下调（P<0.05）、CREB蛋白表达下调（P<0.01）、PER1蛋白表达上调（P<0.01），OXA和CREB mRNA表达降低（P<0.05），PER1 mRNA表达升高（P<0.05）。结论 安寐丹改善SD模型大鼠昼夜节律紊乱可能与调节Orexin及其介导的OXA/CREB/PER1信号通路相关。     

疏肝健脾养心方对失眠模型小鼠食欲素A及其受体的干预作用

目的 探讨疏肝健脾养心方下调食欲素A（OXA）及食欲素受体1（OX1R）、食欲素受体2（OX2R）的表达对失眠模型小鼠的干预作用。方法 利用腹腔注射对氯苯丙氨酸（PCPA）建立失眠小鼠模型,50只BALB/c小鼠随机分为空白组、模型组、右佐匹克隆组（0.13 mg·kg^-1）、疏肝健脾养心方低、高剂量组（8.4、33.6 g·kg^-1）,并给予相应药物治疗14 d。监测小鼠体质量变化,分别进行Morris水迷宫、戊巴比妥钠协同睡眠实验;免疫组化（IHC）检测下丘脑OXA的表达;酶联免疫吸附测定法（ELISA）检测下丘脑、血清、脾脏组织中OXA、5-羟色胺（5-HT）含量;实时荧光定量聚合酶链式反应（Real-time PCR）检测下丘脑OXA及其受体OX1R、OX2R mRNA表达。结果 与空白组比较,模型组小鼠体质量显著降低（P<0.01）,逃避潜伏期时间显著增加（P<0.01）,睡眠潜伏期显著增加（P<0.01）,睡眠持续时间显著减少（P<0.01）,下丘脑、血清、脾脏组织中OXA含量升高、5-HT含量明显降低（P<0.05）,下丘脑中OXA及其受体的mRNA含量显著升高（P<0.01）。与模型组比较,疏肝健脾养心方低、高剂量组小鼠体质量明显升高（P<0.05,P<0.01）,逃避潜伏期时间明显减少（P<0.05）,睡眠潜伏期减少,睡眠持续时间显著增加（P<0.01）,下丘脑、血清、脾脏组织中OXA含量降低、5-HT含量明显升高（P<0.05,P<0.01）,下丘脑中OXA及其受体的mRNA含量显著降低（P<0.01）。结论 疏肝健脾养心方具有镇静、催眠作用,对失眠症有一定的治疗作用,其机制与增加脑中5-HT的含量,抑制下丘脑中OXA及其受体的表达有关。     

探讨蛇床子催眠活性组分对PCPA失眠大鼠褪黑素合成限速酶AANAT的调控作用

目的 观察蛇床子催眠活性组分（CHC）对对氯苯丙氨酸（PCPA）失眠大鼠行为学、褪黑素（MT）合成限速酶芳基烷基胺N-乙酰基转移酶（AANAT）的影响，探讨其对松果体的保护机制。方法 60只SPF级雄性SD大鼠随机分为正常、模型，MT阳性药，CHC高、中、低剂量6组，每组10只。除正常组其余各组腹腔注射4.5%PCPA混悬液，10 mL·kg^-1，连续2 d，建立大鼠PCPA失眠模型。造模后正常及模型组灌胃等体积2%聚山梨酯-80，MT组（10 mg·kg^-1），CHC高、中、低（60，30，15 mg·kg^-1）给予10 mL·kg^-1给药体积的药物，每日1次，连续7 d。给药4 d后分别进行旷场活动、高架十字迷宫、戊巴比妥钠协同睡眠试验，采用酶联免疫吸附法检测血清MT；实时荧光定量聚合酶链式反应（Real-time PCR）测定松果体MT合成关键酶AANAT mRNA表达水平；蛋白免疫印迹法（Western blot）检测松果体AANAT蛋白表达变化。结果 与正常组比较，模型组大鼠旷场活动总距离、站立次数、中心区持续时间明显增加（P<0.05，P<0.01），高架开臂次数及时间比例下降（P<0.05），入睡潜伏期显著延长（P<0.01）；与模型组比较，低剂量组无明显差异，其余各组大鼠活动总距离均减少（P<0.05，P<0.01），高架开臂次数百分比升高（P<0.05），入睡潜伏期缩短、睡眠时间明显延长（P<0.05，P<0.01）。与正常组比较，模型组MT含量显著下降（P<0.01）；与模型组比较，低剂量组差异无明显统计学意义，其余各组血清MT不同程度的升高（P<0.05）。与正常组比较，模型组AANAT mRNA表达量，AANAT蛋白表达量下降（P<0.01）；与模型组比较，MT组，CHC高剂量组表达量明显增加（P<0.05）。结论 CHC改善PCPA失眠行为学指标、增加松果体细胞合成分泌MT，提高血清MT水平，与上调松果体AANAT mRNA及其蛋白的表达有关。     

温经汤加味对EM肾虚血瘀证大鼠局部微环境MMP-9、TNF-α、Collagen Ⅰ、Collagen Ⅲ的影响及其意义＊

目的 探讨子宫内膜异位症（Endometosis，EM）肾虚血瘀证大鼠异位病灶局部MMP-9，TNF-α，CollagenⅠ、Collagen Ⅲ表达水平，以及温经汤加味对其干预作用及机制。方法 SPF级雌性未孕健康SD大鼠设为空白组；构建肾虚血瘀证大鼠模型，造模成功后，设为假手术组（仅开腹）；其余大鼠以自体内膜移植法构建EM肾虚血瘀证模型，造模成功后的大鼠分为模型组（不用药物干预）、阳性药（达那唑）组、温经汤加味组（低、中、高3种剂量）。阳性药对照组给予达那唑63 mg·kg^-1连续4周灌胃，中药低、中、高剂量组分别以5 g·kg^-1、10 g·kg^-1、20 g·kg^-1连续4周灌胃。取各组大鼠子宫内膜组织观察组织病理变化；免疫组化法（IHC）检测各组大鼠子宫内膜组织MMP-9，TNF-α的蛋白表达；蛋白免疫印迹法（WB）、实时荧光聚合酶链式反应法（RT-PCR）检测各组大鼠子宫内膜组织MMP-9、TNF-α、CollagenⅠ、Collagen Ⅲ基因表达。结果 与空白组、假手术组比较，EM肾虚血瘀证模型组大鼠在位、异位内膜组织中MMP-9、TNF-α、CollagenⅠ、Collagen Ⅲ蛋白及其基因表达在模型组子宫内膜组织升高（P < 0.01）；与模型组比较，阳性药对照组、温经汤加味治疗组大鼠MMP-9、TNF-α、CollagenⅠ、Collagen Ⅲ蛋白及其基因表达水平均降低（P < 0.01或P < 0.05）。结论 局部微环境免疫抑制微血管新生导致异位内膜侵袭是EM发生、发展过程中的重要病理表现，MMP-9、TNF-α、CollagenⅠ、Collagen Ⅲ过度表达可能促进了这一过程的发生、发展；温经汤加味通过“逆转”MMP-9、TNF-α、CollagenⅠ、Collagen Ⅲ等细胞因子异常升高，起到了解除局部微环境免疫抑制、阻断微血管新生的作用，在治疗EM肾虚血瘀证过程中表现出确切的疗效。     

加味人参乌梅汤调控腹泻大鼠GABA能信号通路的系统效应

目的 研究加味人参乌梅汤对腹泻模型大鼠结肠组织中γ-氨基丁酸（GABA）能信号通路相关调控因子的影响,进一步揭示加味人参乌梅汤益气生津止泻的作用机制。方法 从48只SD幼龄大鼠中随机抽取12只作为正常组,其余大鼠以番泻叶泻下、劳倦力竭及饮食失宜等复合因素造模14 d。造模成功后,随机分为模型组、西药组及中药组,每组12只。正常组与模型组给予生理盐水灌胃（20 mL·kg^-1）,西药组给予妈咪爱灌胃（0.7 g·kg^-1）,中药组给予加味人参乌梅汤灌胃（35 g·kg^-1）,均1次/d,连续干预7 d。每日观测记录大鼠一般情况、稀便率及腹泻指数。获取大鼠结肠标本,采用免疫组化法（IHC）检测大鼠结肠GABA蛋白积分吸光度表达;酶联免疫吸附测定法（ELISA）检测磷脂酰肌醇3-激酶（PI3K）、蛋白激酶B2（Akt2）、磷酸化（p-）Akt及白细胞介素-1β（IL-1β）的含量,实时荧光定量聚合酶链式反应（Real-time PCR）及蛋白免疫印迹法（Western blot）检测大鼠结肠PI3K、Akt2及γ-氨基丁酸A型受体β₂亚基（GABRB2） mRNA和蛋白的表达水平。结果 与正常组比较,模型组大鼠一般情况明显变差,稀便率及腹泻指数差异无统计学意义,GABA蛋白表达明显升高（P<0.05）,PI3K、Akt2、p-Akt及IL-1β表达含量明显升高（P<0.05,P<0.01）,PI3K、Akt2、GABRB2 mRNA及蛋白表达均极显著升高（P<0.01）。与模型组比较,中药组、西药组大鼠一般情况明显好转,稀便率及腹泻指数显著下调（P<0.01）,中药组、西药组PI3K、Akt2、p-Akt及IL-1β含量均明显下调（P<0.05）,中药组PI3K、Akt2、GABRB2 mRNA均明显下调（P<0.05,P<0.01）,GABA、PI3K及GABRB2蛋白表达明显下调（P<0.05,P<0.01）;西药组PI3K及Akt2 mRNA和PI3K蛋白表达均明显下降（P<0.05）。结论 加味人参乌梅汤能通过调节腹泻大鼠结肠GABA能信号通路,减少肠上皮细胞中Cl^-向肠腔流动,改善腹泻模型大鼠结肠水液代谢失衡状态,进而发挥其益气生津止泻效应。     

基于Wnt/β-catenin信号通路探讨黑逍遥散对AD模型大鼠神经炎症的影响

目的 研究黑逍遥散是否可以通过调控激活Wnt β-连环蛋白（β-catenin）信号通路抑制阿尔茨海默病（AD）大鼠海马区炎症反应，改善AD大鼠认知和记忆功能障碍。方法 90只雄性Wistar大鼠先随机分别选择12只作为空白组和假手术组，剩余大鼠在左右两侧海马区注射β淀粉样蛋白₄₂（Aβ₄₂）制造AD模型大鼠，随机分为模型组、黑逍遥散低、中、高剂量组和多奈哌齐组，每组12只，并连续42 d给予相应剂量黑逍遥散和多奈哌齐灌胃。尼氏染色观察海马CA1区病理形态学变化；Morris水迷宫实验检测1~5 d大鼠逃避潜伏期的变化，第6天的空间探索能力。酶联免疫吸附测定法（ELISA）检测大鼠海马组织和血清中白细胞介素-6（IL-6）、白细胞介素-10（IL-10）、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）的表达，蛋白免疫印迹法（Western blot）检测检测海马中海马区糖原合成激酶-3β（GSK-3β）、β-catenin、过氧化物酶体增殖物激活受体γ（PPARγ）的蛋白表达水平；实时荧光定量聚合酶链式反应（Real-time PCR）检测大鼠GSK-3β、β-catenin、PPARγ mRNA的水平。结果 与空白组比较，模型组大鼠海马CA1区神经元数量明显减少，排布不均，细胞体损坏比较明显，尼式小体不清；模型组大鼠第3~5天的逃避潜伏期均相比治疗组显著延长（P<0.01），跨台次数显著减少（P<0.01）；模型组大鼠血清和海马组织中IL-10水平显著降低，IL-6、TNF-α水平显著升高（P<0.01）；模型组GSK-3β蛋白和mRNA显著升高，β-catenin、PPARγ蛋白表达显著降低（P<0.01），差异较为明显；与模型组比较，黑逍遥散中、高剂量组和盐酸多奈哌齐组大鼠神经元细胞数量分布较多，排列整齐，结构完整，尼式小体清晰明确；黑逍遥散中、高剂量组和多奈哌齐组的第3~5天逃避潜伏期显著缩短（P<0.01），跨越平台次数显著增多（P<0.01）；大鼠海马组织和血清中IL-10的表达水平明显升高，IL-6和TNF-α显著降低（P<0.01）；大鼠海马中GSK-3β蛋白和GSK-3β mRNA表达明显降低，β-catenin、PPARγ蛋白和β-catenin、PPARγ mRNA表达水平显著升高（P<0.01）。盐酸多奈哌齐组与黑逍遥散高剂量组之间各指标比较，差异无统计学意义。结论 黑逍遥散可以通过调控Wnt/β-catenin信号通路抑制AD大鼠海马区炎症反应，改善AD模型大鼠认知和记忆障碍。     

沉香线香燃香吸入助睡眠作用及机制探究＊

目的 探究沉香线香熏香助睡眠作用及其作用机制。方法 实验动物随机分为空白对照组、氯苯丙氨酸模型组、地西泮对照组（2.5 mg·kg^-1）及熏香吸入低剂量组（0.25 g·kg^-1）、中剂量组（0.5 g·kg^-1）、高剂量组（1.0 g·kg^-1）；采用自制熏香仪熏点吸入的给药方法，1次/天，1 h/次，连续7天。观察沉香线香熏点吸入后对睡眠的影响；观察小鼠行为学变化并进行评价；采用酶联免疫吸附测定法（ELISA）测定小鼠脑内伽马氨基丁酸（GABA_A）、谷氨酸（Glu）、五羟色胺（5-HT）、腺苷（AD）等递质及对GABA_A/Glu值的影响；采用免疫印迹法（Western Blot）检测对谷氨酸能系统代谢和转运相关蛋白——谷氨酸受体（GluR1）及囊泡谷氨酸转运蛋白（VGluT1）表达的影响。结果 在一定剂量下，沉香线香熏香吸入可显著提高入睡效率和时长（P < 0.05），同时减少其自主活动时间（P < 0.05）；熏香组可显著升高5-HT、Glu、GABA_A及腺苷分泌水平（P < 0.01或P < 0.05），同时上调GABA_A/Glu的比值（P < 0.01或P < 0.05）；沉香线香熏香还可显著升高海马组织中GluR1及VGluT1相关蛋白的表达。结论 沉香线香熏香吸入可显著抑制失眠小鼠的自主活动，较好改善睡眠状况，作用机制可能与调节脑内5-HT递质含量、调控GABA-Glu分泌平衡及Glu合成代谢和转运有关。     

复方柴归方超临界CO_2提取物调控cAMP信号通路的抗抑郁作用机制研究

目的从环磷酸腺苷(c AMP)信号通路角度探讨复方柴归方超临界CO_2提取物的抗抑郁作用机制。方法采用慢性温和不可预知应激(CUMS)程序对大鼠进行造模,以高、中、低剂量复方柴归方超临界CO_2提取物及文拉法辛为干预药物,检测各组大鼠海马组织中c AMP、蛋白激酶A(PKA)、环磷酸腺苷反应原件结合蛋白(CREB)、脑源性神经生长因子(BDNF)水平及其相应m RNA水平。结果与对照组比较,模型组大鼠海马组织中c AMP、PKA、p-CREB、BDNF水平显著下降(P0.05、0.01),复方柴归方干预后,与模型组比较,各剂量组c AMP、PKA、p-CREB、BDNF水平均出现回调(P0.05、0.01);同时,模型组大鼠海马组织中酪氨酸激酶B(TrkB)、PKA、p-CREB、BDNF的m RNA水平显著下降(P0.05、0.01),复方柴归方干预后,与模型组相比,各剂量组Trk B、PKA、p-CREB、BDNF的m RNA水平均出现回调(P0.05、0.01)。结论复方柴归方超临界CO_2提取物可通过调控c AMP-PKA-CREB-BDNF信号通路发挥抗抑郁作用。     

双合枣仁颗粒对原发性失眠患者睡眠脑电图的影响

目的:观察双合枣仁颗粒对原发性失眠患者的睡眠脑电图主要参数的影响及临床疗效,并探讨其机制。方法:将120例原发性失眠患者按随机方法分为观察组和对照组,各60例。观察组口服双合枣仁颗粒,每次1袋,tid。对照组予以艾司唑仑1 mg,临睡前口服,每晚1次;两组均以2周为1个疗程。观察两组治疗前后睡眠潜伏期(SL),睡眠总时间(TSA),觉醒次数(AT),觉醒时间(ASA),觉醒睡眠比(A/TSA),S1期,S2期,S3期,S4期,异相睡眠期(REM期),睡眠效率(SE)等主要睡眠脑电图参数变化,匹兹堡睡眠质量量表(PSQI)评分,中医证候积分及临床疗效。结果:观察组总有效率(90%)高于对照组总有效率(73%)(P0.05)。两组治疗后睡眠脑电图参数均改善,入睡时间缩短,觉醒次数和觉醒时间减少,深睡期显著延长,浅睡期和异相睡眠(REM期)减少,睡眠效率增加(P0.01),观察组各项参数改善优于对照组(P0.05,P0.01)。观察组和对照组治疗前PSQI评分分别为16,17分,治疗后两组PSQI评分显著下降,各为5,8分(P0.01);观察组PSQI评分减少较对照组更显著(P0.01)。两组治疗后中医证候积分较治疗前显著下降(P0.01),观察组中医证候积分下降幅度是对照组的3倍(P0.01)。结论:双合枣仁颗粒能缩短入睡时间,减少觉醒次数和觉醒时间,延长深睡眠期,改善睡眠结构和睡眠质量,尤其对阴虚火旺型、心脾两虚型患者疗效更佳,是治疗原发性失眠安全、有效的药物。     

苗族药了哥王不同提取物对正常大鼠肝毒性的影响

目的:考察了哥王不同提取物对正常大鼠肝毒性的影响,并探讨其作用机制。方法:选用SD大鼠72只,随机分成空白组、乙醇提取物组、石油醚提取物组、乙酸乙酯提取物组、正丁醇提取物组和水部位提取物组,每组12只。不同给药组连续灌胃给药2周,每隔2日称量大鼠体重,于第15天,每组随机取6只,麻醉后腹主动脉取血,离心血液,取血清测定丙氨酸氨基转移酶(ALT),天门冬氨酸氨基转移酶(AST),碱性磷酸酶(ALP),总胆红素(T-BIL),总蛋白(TP),白蛋白(ALB),血糖(GLU),总胆固醇(CHOL),肌酐(Cr)。取肝组织,称其质量,计算脏器系数,并留取肝组织作病理学检查。每组余下的6只大鼠于第15天停止给药,正常供给饲料与水,恢复2周,观察大鼠恢复情况,于第28天进行上述相同指标的检测。结果:给药2周后,与空白组比较,乙醇提取物组和乙酸乙酯提取物组大鼠的肝脏系数明显增大(P0.05)。乙醇提取物组血清中ALT,AST,GLB明显升高,白蛋白/球蛋白(A/G),TP和ALB明显降低(P0.05);乙酸乙酯提取物组血清中ALP,T-BIL,GLU明显升高,A/G,TP和ALB明显降低(P0.05);石油醚提取物组血清中AST,AST/ALT,ALP,GLU明显升高,T-BIL,A/G,TP和ALB明显降低(P0.05,P0.01);正丁醇提取物组血清中AST/ALT,T-BIL明显升高,A/G明显降低(P0.05,P0.01);水部位提取物组血清中A/G明显降低(P0.05);乙醇提取物组、乙酸乙酯提取物组和石油醚提取物组大鼠肝组织能观察到不同程度的炎细胞浸润,出现一定的肝细胞脂肪变性和局灶性肝细胞坏死,其他组少见。停药恢复2周后,各组肝脏系数均接近于空白组;各组血清中肝功能生化指标基本恢复到空白组水平;各组大鼠肝组织细胞结构清晰,少见炎细胞浸润,未见脂肪变性和肝细胞坏死。结论:苗族药了哥王乙醇提取物组、乙酸乙酯提取物组对肝损伤较大,具有明显的肝毒性;石油醚提取物组对肝也有一定的损伤,但比乙醇提取物组和乙酸乙酯提取物组损伤程度小;正丁醇提取物组毒性较小,水部位提取物组无毒性;停药2周恢复后,各组大鼠反映肝功能的生化指标基本恢复到空白组水平,大鼠的肝损伤明显的减轻,表明了哥王的肝毒性具有一定的可逆性。     

摩腹手法对睡眠剥夺大鼠脑内神经递质及Orexin-A的影响

[目的]观察和探讨摩腹手法对睡眠剥夺大鼠脑内神经递质及Orexin-A水平的影响。[方法]将Wistar大鼠30只随机分为正常对照组、模型对照组和摩腹手法组各10只,采用改良多平台水环境法对后两组大鼠进行睡眠剥夺造模,造模后正常对照组和模型对照组大鼠不作干预,摩腹手法组大鼠给予每日1次的摩腹治疗,持续14 d后,检测比较各组大鼠脑内5-羟色胺(5-HT)、多巴胺(DA)、去甲肾上腺素(NE)、γ-氨基丁酸(GABA)和食欲素A(Orexin-A)的水平。[结果]与正常对照组相比,模型对照组大鼠脑内5-HT、DA、NE、GABA和Orexin-A的水平均发生显著变化(P0.05)。与模型对照组相比,摩腹手法组大鼠脑内5-HT水平显著回升,DA、NE和Orexin-A水平均明显回落(P0.05),而GABA水平无统计学差异(P0.05)。[结论]摩腹手法可通过调节大鼠脑内5-HT、DA、NE和Orexin-A的水平,起到调节动物睡眠和觉醒状态的作用。     

养心汤治疗亚健康失眠69例临床分析

目的:观察养心汤加减治疗亚健康失眠的疗效及对生活质量的影响。方法:将140例亚健康失眠患者随机按1∶1原则分为对照组71例和观察组69例。对照组采用睡眠卫生宣教结合耳穴贴压的非药物疗法。观察组采用养心汤加减内服和沐足疗法。两组疗程均为4周。进行治疗前后匹兹堡睡眠质量指数(PSQI),WHO生活质量量表(WHOQOL-BREF)和临床医生总体印象(CGI)评分。结果:两组临床疗效经Ridit分析,观察组优于对照组(P0.05);两组治疗后PSQI各因子(睡眠质量、入睡时间、睡眠时间、睡眠效率、睡眠障碍、催眠药物和日间功能)及总分较治疗前下降(P0.01);治疗后观察组PSQI各因子及总分低于对照组(P0.01);两组治疗后生理、心理、环境和社会关系领域评分均较治疗前升高(P0.01),治疗后观察组心理和社会关系2个维度评分高于对照组(P0.05);治疗后第2,3,4周两组CGI评分均比第1周下降(P0.05,P0.01),但组间比较差异无统计学意义。结论:加减养心汤内服和沐足干预亚健康失眠能改善睡眠质量,提高患者的生活,临床疗效确切。     

参松养心胶囊对不稳定型心绞痛伴慢性失眠患者临床疗效的影响

目的 观察参松养心胶囊对不稳定型心绞痛（unstable angina pectoris，UAP）伴慢性失眠患者临床疗效的影响。方法 选取UAP伴慢性失眠患者120例，随机分为对照组和观察组各60例。对照组给予UAP一般药物治疗，观察组在一般药物治疗基础上加用参松养心胶囊，两组疗程均为4周。比较两组患者治疗前后UAP治疗效果，并评估患者的睡眠情况。结果 治疗后观察组心绞痛发作次数、每次心绞痛发作持续时间、硝酸甘油消耗量均明显小于对照组（P < 0.01），心型脂肪酸结合蛋白（heart-fatty acid binding protein，H-FABP）和脑钠肽（brain natriuretic peptide，BNP）的水平明显低于对照组（P < 0.01）。经治疗，两组患者的PSQI总评分均有所下降，但对照组无显著差异（P > 0.05），而观察组下降明显（P < 0.01），且与对照组相比有明显差异（P < 0.01）。观察组UAP临床治疗总有效率为88.33%，对照组为66.67%，观察组优于对照组（P < 0.05），且无影响治疗的不良反应。结论 参松养心胶囊治疗可提高UAP伴慢性失眠患者疗效，能明显改善其心绞痛治疗效果和睡眠质量，且安全性较高。     

坤泰胶囊治疗女性更年期失眠伴有焦虑及抑郁的临床观察

目的 观察坤泰胶囊治疗女性更年期失眠且伴有焦虑及抑郁的临床疗效。方法 将120例患有更年期失眠并伴有焦虑及抑郁的女性患者分为两组,治疗组60例采用中成药坤泰胶囊治疗,对照组60例口服舒乐安定片,10 d为1个疗程,2个疗程后,观察两组患者的临床疗效及睡眠质量、焦虑和抑郁改善情况。结果 治疗组睡眠、焦虑改善情况与对照组比较差异不显著（P＞0.05）;睡眠质量改善与对照组比较差异显著（P＜0.05）;抑郁改善情况明显优于对照组（P＜0.01）。结论 坤泰胶囊治疗女性更年期失眠伴有焦虑、抑郁有较好的临床疗效。     

天王补心丹加减改善PCPA失眠大鼠Trx系统氧化损伤的机制探讨

目的:探讨天王补心丹加减对对氯苯丙氨酸(PCPA)所致失眠大鼠硫氧还蛋白(Trx)系统抗氧化损伤的作用机制。方法:60只雄性SD大鼠随机分为空白组、造模组。造模组以腹腔注射PCPA造模,注射剂量为150 mg·kg~(-1),间断注射7 d。造模成功后,依次分为模型组(等容生理盐水),天王补心丹加减低、中、高剂量组(8. 8,17. 6,35. 2 g·kg~(-1)·d~(-1))和艾司唑仑组(0. 1 mg·kg~(-1)·d~(-1)),每组10只。自发活动视频分析系统监测大鼠昼夜活动节律,透射电镜观察大鼠下丘脑视交叉上核(SCN)形态及细胞器完整性,酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测大鼠血清超氧化物歧化酶(SOD),丙二醛(MDA)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)的水平,免疫荧光(IF)和蛋白免疫印迹法(Western blot)分别检测SCN细胞硫氧环蛋白2(Trx2),硫氧环蛋白还原酶2(TrxR2)的表达。结果:与空白组比较,模型组大鼠活动时间显著增加(P 0. 01),昼夜节律紊乱,线粒体嵴断裂,数量减少,排列紊乱,伴空泡化和髓鞘样变,SOD,GSH-Px活性下降且MDA含量显著升高(P 0. 01),Trx2的蛋白表达量显著降低(P 0. 01),TrxR2蛋白表达量显著增加(P 0. 01);与模型组比较,天王补心丹中、高剂量组能够明显改善大鼠昼夜节律紊乱,减少活动时间(P 0. 01),同时线粒体水肿程度减轻,部分嵴尚完整,SOD,GSH-Px活性升高,MDA水平明显降低(P 0. 05,P 0. 01),Trx2蛋白表达明显升高,TrxR2蛋白表达明显下降(P 0. 05)。结论:天王补心丹加减对失眠模型大鼠的改善作用与调控Trx抗氧化系统中Trx2与TrxR2的蛋白表达有关。     

止血镇痛胶囊对外源性雌激素干预下未成年雌性大鼠卵巢和子宫的影响

目的 探讨止血镇痛胶囊对外源性雌激素干预下未成年雌性大鼠卵巢和子宫的影响。方法 将84只雌性大鼠随机分成空白组和模型组，空白组给予0.5% CMC-Na，模型组给予戊酸雌二醇，灌胃3周后，模型组大鼠随机分成模型对照组、卡巴克络对照组、独一味软胶囊对照组、止血镇痛胶囊低、中、高剂量组。各给药组均灌胃相应药物，空白对照组和模型对照组灌胃生理盐水。7 d后检测大鼠体重、子宫和卵巢脏器指数、血清指标、子宫和卵巢组织病理性以及子宫内膜组织中VEGF表达。结果 与模型对照组比较，止血镇痛胶囊中剂量组大鼠的体重十分明显地增加（P < 0.01）；3组动物的子宫系数均十分明显地减小（P < 0.01）；中、高剂量组大鼠血清中PROG浓度十分明显地升高（P < 0.01）；中、高剂量组大鼠子宫肌层平滑肌细胞透明变性、排列紊乱均减轻（P < 0.05或P < 0.01）；高剂量组大鼠卵巢组织的间质增生明显减轻（P < 0.05）；三组大鼠子宫组织VEGF蛋白表达量均升高（P < 0.05或P < 0.01）。结论 止血镇痛胶囊减轻大鼠子宫肌层平滑肌细胞透明变性、排列紊乱和卵巢组织的间质增生的作用,可能与血清中PROG浓度和子宫组织VEGF蛋白表达量有关，为探讨止血镇痛胶囊的化瘀调经作用提供了依据。