Toll样受体4在D-氨基半乳糖/内毒素介导的急性肝损伤中的表达

目的研究D-氨基半乳糖(D-Gal)/内毒素介导的急性肝损伤模型中肝组织细胞Toll样受体4(TLR4)的表达变化,探讨TLR4在识别内毒素、启动炎性肝损伤中的作用.方法 BALB/C小鼠腹内注射D-Gal 900 mg/kg与内毒素(即脂多糖,LPS)10 μg/kg后0～7 h分别检测血清丙氨酸转氨酶(ALT)及天门冬氨酸转氨酶(AST)与血浆肿瘤坏死因子(TNF-α)含量以评价肝功能;另随机取10只小鼠给药后观察致死率.用半定量逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)和Tanon Gis 2.0软件分析不同时间点肝组织中TLR4 mRNA表达,并与血浆TNF-α含量进行相关分析;免疫组织化学观察肝组织TLR4蛋白的表达.实验数据用SAS软件分析.结果给药后4 h,血清转氨酶明显升高(与0h比较,P＜0.05);血浆TNF-α含量逐步上升,在2 h、5 h有两个分泌高峰;7 h小鼠开始死亡,10 h致死率达80%.正常小鼠肝组织少量表达TLR4 mRNA,给药后表达明显增强(与0 h比较,P＜0.05);免疫组织化学也显示TLR4蛋白有类似的变化,尤其肝窦内皮细胞、库普弗细胞表达更为显著.血浆TNF-α含量与肝组织TLR4 mRNA表达呈正相关.结论肝内细胞膜上表达的TLR4可能通过启动下游的炎性应答基因表达及细胞因子释放而诱导出肝组织对LPS的炎性应答.因此,调控TLR4表达可能是感染性疾病防治的一种新策略.     

α-GalCer诱导急性肝损伤时肝内Kupffer细胞表型和功能的变化

背景:Kupffer细胞是肝内重要的免疫细胞,在天然免疫和适应性免疫中起重要作用。目的:研究α-GalCer诱导的急性肝损伤中肝内Kupffer细胞表型和功能变化。方法:将30只小鼠分为模型组和对照组,腹腔注射α-GalCer诱导小鼠急性肝损伤。行肝组织病理学检查,免疫组化法检测肝内F4/80阳性的Kupffer细胞的分布。胶原酶原位灌注、不连续密度梯度离心和选择性贴壁法分离正常和急性肝损伤小鼠的Kupffer细胞。real time-PCR法检测肝组织和Kupffer细胞肿瘤坏死因子(TNF)-α、于扰素γ(IFN-γ)、白细胞介素(IL)-10和Toll样受体(TLR)4mRNA表达。采用全自动生化仪测定血清ALT和AST水平。结果:α-GalCer腹腔注射引起小鼠局灶性肝细胞坏死、炎性细胞聚集,血清ALT、AST明显升高(P<0.05)。免疫组化法发现肝内F4/80阳性细胞明显增加、体积增大,并在肝组织炎症坏死处呈灶性聚集。胶原酶原位灌注分离的Kupffer细胞数量明显增加(P<0.01),肝组织和Kupffer细胞TNF-α、IFN-γ和IL-10 mRNA表达明显增加(P<0.05),而Kupffer细胞中TLR4 mRNA表达显著下降(P<0.05)。结论:在急性肝损伤中Kupffer细胞的抗炎因子IL-10表达增加和TLR4途径下调可能是Kupffer细胞维持机体免疫耐受、避免过度炎症的重要机制。     

茵陈紫金汤对小鼠四氯化碳急性肝损伤的保护作用

[目的]观察茵陈紫金汤对四氯化碳(CCl4)诱导的小鼠急性肝损伤保护作用.[方法]以0.12?l4花生油溶液经腹腔注射,制备小鼠急性化学性肝损伤模型,测定给药后模型小鼠血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天冬氨酸转氨酶(AST),肝组织匀浆超氧化物歧化酶(SOD)活性以及丙二醛(MDA)水平,计算肝脏指数,光镜下观察肝组织病理学变化.[结果]茵陈紫金汤高、中剂量组均能显著降低CCl4所致小鼠急性肝损伤血清ALT、AST活性,提高肝组织匀浆SOD活性,降低MDA及肝脏指数,明显改善肝组织损伤的程度,与模型组比较差异有统计学意义(P＜0.05).[结论]茵陈紫金汤对CCl4诱导的小鼠急性肝损伤有保护作用,其作用机制可能与抗脂质过氧化有关.     

柴胡疏肝散对四氯化碳所致大鼠急性肝损伤的防治作用

观察柴胡疏肝散对四氯化碳(CCl4)所致大鼠急性肝损伤的防治作用.方法:用CCl4造成大鼠急性实验性肝损伤模型,检测大鼠血清中丙氨酸转氨酶(ALT)、天门冬氨酸转氨酶(AST)、超氧化物歧化酶(SOD)、脂质过氧化物丙二醛(MDA)和谷胱甘肽(GSH)含量,同时检测肝组织中MDA和GSH的含量.结果:该方能显著降低CCl4所致急性肝损伤大鼠血清中ALT、AST含量,升高其SOD水平,并可显著降低该模型大鼠血清及肝组织中MDA的含量,而升高GSH水平.结论:柴胡疏肝散对此模型大鼠的肝损伤具有显著的防治作用,其机制可能与降低、抑制脂质过氧化反应以及抗自由基损伤有关.     

Vanin-1作为对乙酰氨基酚致急性肝损伤早期评价标志物的相关性分析

目的 探讨泛酰巯基乙胺酶(Vanin-1)在对乙酰氨基酚(APAP)所致急性肝损伤早期的表达变化及评价中的应用价值。方法 建立APAP诱导的急性肝损伤模型,将小鼠随机分为对照组、不同浓度APAP(100、200、300 mg/kg)处理组,对小鼠血清中Vanin-1及肝损伤标志物谷丙转氨酶(ALT)水平,及肝组织Vanin-1蛋白水平进行测定,对Vanin-1与ALT进行平行比对并分析其相关性,评价Vanin-1在APAP诱导的小鼠急性肝损伤早期评价中的作用。结果 (1)造模12 h后,与对照组相比,APAP处理组小鼠血清ALT水平显著上调(P0.05),且其水平变化呈剂量依赖性;(2)造模12 h后,APAP处理组血清及肝脏组织中的Vanin-1表达水平显著高于对照组(P0.05),且呈剂量依赖性;(3)在对急性肝损伤早期评价中,血清Vanin-1 mRNA与ALT具有相关性(R0.9);(4)与ALT相比,Vanin-1在急性肝损伤中表达更具灵敏性。结论 Vanin-1有望成为APAP致急性肝损伤的早期评价标志物,但仍需进一步研究。     

石榴多酚对小鼠急性肝损伤的保护作用

目的观察石榴多酚对小鼠肝损伤的防护作用。方法用四氯化碳(CCl4)致小鼠急性肝损伤模型,观察石榴多酚(200、400、600mg/kg)对小鼠血清丙氨酸转氨酶(ALT)、天门冬氨酸转氨酶(AST)活性和肝脏组织超氧化物歧化酶(SOD)活性及丙二醛(MDA)含量的影响。结果石榴多酚能明显降低急性肝损伤小鼠血清ALT、AST水平;并可使肝脏中MDA含量降低,SOD活性升高。各实验组小鼠的肝体比值均低于肝损伤模型组。结论石榴多酚对肝损伤具有保护作用,其作用可能与抗氧化有关。     

清热利湿法对小鼠CCl4急性肝损伤的保护作用

目的:观察清热利湿法对四氯化碳(CCl4)诱导的小鼠急性肝损伤的保护作用.方法:给小鼠以0.12?l4花生油溶液腹腔注射,制备急性化学性肝损伤模型,测定各组血清谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)活性,计算肝脏指数,光镜下观察肝组织病理学变化.结果:小鼠灌胃给予清香散后,清香散大、小剂量组均能显著降低CCl4所致小鼠急性肝损伤血清ALT、AST活性及肝脏指数(P<0.05),大剂量组能明显改善肝组织损伤的程度,与模型组比较差异有统计学意义(P<0.05).小剂量组虽有改善肝组织损伤的趋势,但与模型组比较差异无统计学意义(P>0.05).结论:清热利湿法对CCl4诱导的小鼠急性肝损伤有保护作用.     

Toll样受体4在CCl_4诱导的大鼠慢性肝损伤过程中的表达

背景:Toll样受体4(TLR4)在内毒素的信号转导过程中具有重要作用。目的:动态观察在CCl4诱导的大鼠慢性肝损伤过程中,肝组织和Kupffer细胞TLR4基因表达的变化,探讨TLR4在肝损伤中的作用。方法:以CCl4诱导慢性肝损伤纤维化大鼠模型,分离肝Kupffer细胞,以逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测肝组织和Kupffer细胞TLR4 mRNA的表达;将Kupffer细胞分别与不同浓度的脂多糖(LPS)孵育,以酶联免疫吸附测定(ELISA)检测细胞培养上清的肿瘤坏死因子(TNF)-α水平。以基质显色法测定大鼠血浆内毒素水平。结果:正常大鼠肝组织TLR4 mRNA表达水平较低,Kupffer细胞未检测到TLR4 mRNA表达;CCl4处理2-6周大鼠的肝组织和Kupffer细胞TLR4 mRNA表达水平显著增高(P<0．05)。CCl4处理4周和6周大鼠Kupffer细胞的TNF-α基础分泌水平显著高于正常大鼠(P<0．05); 在LPS的刺激下,TNF-α的分泌水平较基础值进一步增高(P<0．05),呈浓度依赖性。大鼠血浆内毒素水平在肝损伤过程中逐渐增高．相关分析显示在慢性肝损伤的早、中期,肝组织和Kupffer细胞TLR4 mRNA的表达与血浆内毒素水平呈正相关。结论:在CCl4诱导的慢性肝损伤过程中,大鼠肝脏TLR4基因表达上调,与Kupffer细胞活化和肝脏的炎症损伤有关。     

Toll样受体-4小干扰RNA预处理防治小鼠急性肝损伤

目的 观察Toll样受体(TLR)-4小干扰RNA(siRNA)对D-氨基半乳糖盐酸盐/月旨多糖(D-GalN/LPS)诱导的肝损伤小鼠的保护作用.方法 150只雄性C57BL/6小鼠均分为PBS预处理组、阴性对照质粒预处理组、TS4预处理组、TS6预处理组和TS7预处理组.腹腔内联合注射LPS(10 ng/g)及D-GalN(1 mg/g)诱导小鼠急性肝损伤.在D-GalN/LPS联合注射前24及48 h通过尾静脉高压水注射法导人siRNA质粒50 mg/L.末端脱氧核苷酸转移酶介导的dUTP缺口标记术(TUNEL)检测细胞凋亡水平,免疫组织化学法检测肝组织中TLR-4表达,RT-PCR检测TLR-4、TNF-α及巨噬细胞炎性蛋白(MIP)-2 mRNA水平,ELISA检测小鼠血清中MIP-2及TNF-α水平,标准自动分析仪检测血清中ALT及AST水平,苏木精-伊红染色观察肝脏组织学变化,Fisher确切概率法比较各组间小鼠存活率.结果 TLR-4 siRNA可减轻肝细胞坏死、减轻炎性反应,并可显著降低血清转氨酶水平.TS4预处理组(0.065±0.015)比PBS预处理组(0.346±0.062)的TUNEL标记指数(LI)明显降低(t=9.796,P<0.05).TLR-4 siRNA预处理下调TLR-4 mRNA及蛋白表达水平,显著降低TNF-α及MIP-2 mRNA表达及细胞因子水平,显著降低D-GalN/LPS联合诱导的急性肝损伤C57BL/6小鼠的死亡率和肝损伤.结论 TLR-4 siRNA抑制TLR-4表达在防治肝损伤方面可能具有潜在应用价值.     

肝脾调补方对小鼠免疫性肝损伤的防护作用

目的:观察中药肝脾调补方对小鼠免疫性肝损伤的防护作用并探讨其药理学机制。方法:采用卡介苗(BCG)+脂多糖(LPS)建立小鼠免疫性肝损伤模型,通过肝脾调补方高、中、低剂量灌胃,观察肝脾调补方对各组小鼠血清丙氨酸转氨酶(ALT)、天门冬氨酸转氨酶(AST)及肝组织匀浆超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)水平的影响;ELISA法检测肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的变化。结果:肝脾调补方可明显降低免疫性肝损伤小鼠血清中ALT、AST、TNF-α水平;减少肝组织匀浆的MDA含量,升高肝匀浆SOD、GSH-Px含量。结论:肝脾调补方对BCG+LPS尾静脉注射造成的小鼠免疫性肝损伤有明显的防护作用,其作用与抗脂质过氧化有关。     

青少年高血压的研究进展

随着人们生活和行为方式的改变,高血压发病明显呈年轻化趋势。在青少年时期识别高血压病高危人群有助于早期进行有效干预和治疗,降低未来高血压的发生率及其严重性。现试从青少年高血压的诊断、发病因素、特点、治疗策略等方面的研究进展作一综述。     

Morbidity in cardiovascular diseases in immigrants in Sweden

INTRODUCTION: Although immigration to Sweden has increased in the last few decades, the incidence rates of cardiovascular disease and coronary heart disease in immigrants are unknown. The aim of the present study is to estimate whether place of birth affects the incidence rates of cardiovascular disease and coronary heart disease. MATERIAL AND METHODS: The study was designed as a follow-up study on morbidity in cardiovascular disease and coronary heart disease between 1 January 1997 and 31 December 1998, including three and a half million persons with age range 35-64 years, of whom 550 000 were born abroad, from the database MigMed consisting of the whole Swedish population. Incidence rates and relative risks were estimated by indirect standardization and a proportional hazard model. RESULTS: The age-adjusted risk of coronary heart disease was higher in most foreign-born groups than in Swedes. For example, in nine of 12 male groups, the relative risks varied between 1.1 and 2.2, and in seven of 12 female groups, the relative risks varied between 1.4 and 2.5. When also adjusting for level of education and employment status, the risks were still high, but on a lower level. CONCLUSIONS: Foreign-born people possess an over-risk of cardiovascular or coronary heart disease(CVD/CHD) compared with Swedish-born persons, also when level of education and employment status are taken into account.     

C·肉毒杀鼠素(冻干剂)应用研究

目的为研究C·肉毒杀鼠索对杀灭达乌尔黄鼠(简称黄鼠)的大面积应用情况和对家畜、家禽的毒害作用,进行了C·肉毒杀鼠素的应用研究.方法大面积投毒采用ES-2药饵撒播机[1],间隔约80m进行条投.羊、鸡采用直接灌胃.结果大面积应用的灭鼠率为83.72%.对羊、鸡最高剂量分别为500万MLD、150万MLD,均未出现中毒现象.结论 C·肉毒杀鼠素是较为理想的草原大面积杀灭黄鼠的理想、首选药物.     

高龄老年高血压的临床研究进展

随着社会老龄化进程的加快,80岁以上高龄老人的绝对数量以及占总人口的比例均在增加,如何提高高龄老年高血压的防治水平备受关注。现试从高龄老年高血压的临床特点、治疗策略等方面的临床研究进展作一综述。     

中国老年性耳聋的研究与干预进展

老年性耳聋已成为影响我国老年人生活质量的最主要的慢性病之一。助听器是目前帮助听力损失的老年人克服交流障碍的主要手段。在我国,数字助听器已逐渐取代模拟助听器并且体现出了更好的效果。但是老年听力损失患者中使用助听器的比例仍然很小。人工耳蜗植入也已被应用在老年患者中。我国针对老年人的听力康复服务还有较长的路要走。     

Sex Differences in Ethanol-induced Dopamine Release in Nucleus Accumbens and in Ethanol Consumption in Rats

In vivo microdialysis was used to examine changes in nucleus accumbens and striatal dopamine, dihydrophenylacetic acid (DO-PAC), and homovanillic acid (HVA) following acute administration of ethanol (0.0, 0.25, 0.5, 1.0, or 2.0 g/kg) in male and female Long-Evans rats. Following dialysis, rats were trained to bar-press for oral ethanol reinforcement. In nucleus accumbens, females showed significant increases in extracellular dopamine following 0.25 or 0.5 g/ kg ethanol, but did not show significant increases over baseline at the higher doses. Males showed slight increases in dopamine at the lower doses and decreased dopamine at 2.0 g/kg. In striatum, both sexes showed increased dopamine at the lower doses and decreased dopamine at 2.0 g/kg. There were slight increases in nucleus accumbens DOPAC and HVA at some doses in both sexes, but no changes in striatal metabolite levels. In addition to showing increased responsiveness to ethanol-induced mesolimbic dopamine stimulation, females consumed more ethanol than males during behavioral testing. The pattern of both greater ethanol-induced nucleus accumbens dopamine release and greater ethanol consumption in females supports the hypothesis that ethanol reward is mediated, at least in part, by the mesolimbic dopamine system.     

Epstein-Barr virus in malignancies in renal transplant recipients in Japan

A role for Epstein-Barr virus (EBV) in the development of malignancies including lymphomas, and carcinoma of the stomach, nasopharynx, thymus and salivary gland is suggested. It is indicated that EBV evokes polyclonal-B-cell-proliferative diseases in immunocompromised hosts, such as transplant patients, which results in monoclonal malignant lymphomas. The suppression of immune functions in these patients is thought to lead to incomplete elimination of the cells expressing EBV latent infection genes. To examine the etiological role of EBV in the development of malignancies following renal transplant in Japan, 42 malignancies in 1744 cases of renal transplant were studied for the presence and type of EBV. The polymerase chain reaction revealed that 5 malignancies were positive for EBV, all type A: 2 of 2 cases of non-Hodgkin's lymphoma (NHL), 2 of 8 cases of gastric adenocarcinoma of the common type, and 1 of 2 cases of gastric plasmacytoma. In situ hybridization revealed positive signals in the nucleus of tumor cells in 2 cases of NHL and 1 of plasmacytoma. Positive signals were found in the small lymphoid cells but not in the tumor cells in 2 cases of gastric carcinoma. On the basis of these findings, a role for EBV in the development of malignancies in renal transplant patients is unlikely except for lymphoid neoplasias.Abbreviations PCB polymerase chain reaction - EBV Epstein-Barr virus - NHL non-Hodgkin's lymphoma     

糖尿病大鼠心室肌细胞钾通道的改变

目的研究糖尿病大鼠心室肌细胞钾通道的改变及增加葡萄糖代谢对其的作用。方法取体重150～200g的雄性SpragueDawley大鼠,腹腔注射链脲菌素(STZ)建立糖尿病模型,采用酶解法获得单个心室肌细胞,应用膜片钳全细胞记录技术记录钾电流。结果糖尿病大鼠心室肌细胞瞬间外向性钾流(Ito)密度较对照组显著降低[ 60mV时,分别为(15.90±1.19)pA/pF(n=25)和(28.55±0.97)pA/pF(n=12),P<0.001];分别用100nmol/L胰岛素及1.5mmol/L二氯乙酸在体外预处理心室肌细胞4～5h和3～4h使Ito密度恢复至对照组水平[ 60mV时,分别为(29.40±0.38)pA/pF(n=20)和(27.35±0.97)pA/pF(n=12)]。结论糖尿病大鼠心室肌细胞钾通道功能发生改变,增加葡萄糖代谢可逆转这一改变,提示葡萄糖代谢与Ito功能间存在一定关系。