近交系和远交系白化小鼠毛色基因的测试

随着生物医学科学的发展,多种基因型的近交系动物,经常用作实验模型。虽然近交系动物的遗传性是稳定的,可是在长期的饲养过程中仍有可能发生变异和基因污染。新培育的品系也需要遗传鉴定和监测,以了解近交系动物的主要遗传性是否改变。     

豫医无毛小鼠近交系毛色基因遗传学测试

目的：考核豫医无毛小鼠（YYHL）近交系纯化程度及毛色基因型。方法：用复隐性基因小鼠DBA／2、615分别对YYHL近交系进行了毛色基因测试。结果和结论：杂交的性的F1代全部为野生色,表明其毛色基因为纯合,其基因型为AABBccDD。豫医无毛小鼠近交系已达到近交系的国际标准。     

豫医无毛小鼠近交系毛色基因遗传学测试

目的考核豫医无毛小鼠(YYHL)近交系纯化程度及毛色基因型.方法用复隐性基因小鼠DBA/2、615分别对YYHL近交系进行了毛色基因测试.结果和结论杂交所生的F1代全部为野生色,表明其毛色基因为纯合,其基因型为AABBccDD.豫医无毛小鼠近交系已达到近交系的国际标准.     

纯系小鼠毛色基因检测

用已知含隐性复等位基因aabbCCdd、AAbbccDD的DBA/2和SMMC/c两纯系小鼠检测BALB/c、615、ob/ob、C3H和CFW五品系的毛色基因型。结果表明,上述五品系小鼠毛色基因型分别是AAbbccDD、aabbCCDD、aaBBCCDD、AABBCCDD和AABBccDD,均为基因纯合,符合纯系小鼠的要求。     

白化小鼠毛色基因测试法

为了保证近交系动物遗传上的高度纯合性及其品系特征,及时发现造成遗传变异和污染的各种原因是非常重要的。国际上用于近交系小鼠遗传鉴测方法,在形态学方面有毛色等位基因测试法,下颌骨形态分析法,以及染色体C带检查法,在免疫学方面有同系异体皮肤移植法,组织相溶     

关于在津白2系小鼠中发现无毛小鼠的报道

津白2系（Tientsin Albinao 2 strain．TA2）小鼠是我校实验肿瘤研究室从1962年始将昆明种小鼠按兄妹交配进行培育。至1969年培育成功的高乳腺癌品系小鼠。其特性为高乳癌发生率、体质强壮、产子数多，经产雌鼠自发乳癌发生率为81％，见瘤鼠龄平均为381d，未经产雌鼠自发乳癌为41％，见瘤鼠龄平均为435d。其在1985年成为我国被国际权威机构一国际小鼠遗传标准命名委员会承认的3个小鼠品系之一。也是我国自行培育的唯一高乳癌品系小鼠。在全国实验肿瘤研究中应用非常广泛。     

小鼠的毛色遗传

动物不同种、不同品种及不同品系间的差异,总是反映在某些性状上。人们可以根据这些明显构不同性状,把不同品种、不同品系区分开。由于小鼠毛色是质量性状,容易从外表上看出来,并且决定小鼠毛色的基因已基本清楚,因此可以通过毛色基因的差别,来帮助我们进行小鼠品系的鉴别。特别是利用突变导入系建立动物疾病模型、利用品系杂交建立重组近交系及利用人工(物理、化学的)方法诱发动物突变的研     

津白3侏儒小鼠垂体前叶TSH细胞的免疫细胞化学观察

目的 对津白3侏儒小鼠(dW^1)垂体前叶TSH细胞进行观察,以探讨dW^1是否存在垂体发育缺陷。方法 本实验应用免疫细胞化学技术和体视学原理进行定量分析。结果 dw^1 TSH细胞的体积密度(Vv)和数密度(Nv)值均低于正常对照组。结论 dw^1由于垂体前叶TSH细胞数量减少,导致TSH分泌不足。     

TW近交系小鼠的血液生化及毛色基因检测

目的 建立野生来源TW (Tianjin wild,TW)近交系小鼠的体重和血液生化正常范围并检测其毛色基因纯合性.方法 分别选用F23代TW近交系成年小鼠,进行毛色基因测试,并检测动物的体重及血液生化指标.结果 6周龄前,雌雄TW小鼠体重差异无统计学意义(P＜0.05);6周龄后雄性TW小鼠体重明显高于同期雌性小鼠体重,差异具有统计学意义(P＜0.05).血生化检测指标中,雌雄小鼠的总蛋白和甘油三酯均值不同,差异具有统计学意义(P＜0.05),其他各项差异均无统计学意义(P＞0.05),且与文献报道的其他品系结果不一致.毛色基因测试,F1代小鼠的毛色为白腹野生色,其基因型为AWAWBBccDD.结论 TW小鼠毛色基因已达纯合,且在一些指标上与通用实验小鼠品系不同,具有自身特点.     

SMMC/C系小鼠的培育及其生物学特性的研究——Ⅰ.毛色基团的测试

在生物医学研究中,为了减少和避免实验动物个体间差异所造成的影响,常常需要用近交系动物做实验。由于繁殖快、饲养方便等原因,近交系小鼠的培育特别受到关注。目前全世界各实验室维持和使用的小鼠近交系及其亚系至少250种以上,曾被广泛或选择地用于遗传、免疫、肿瘤、代谢、内分泌等各方面的研究。但尽管近交系动物的遗传性状相对稳定,在长期饲养中,仍有可能发生突变;也可能因管理不慎而造成基因污染。所以,必须定期进行遗传质量的监测。 1973年Kryshkina等报道用毛色等位基因测试法对近交系动物进行遗传监测。此法比较简便,无需特殊设备,易于掌握。现将我校育成的SMMC/C和维持的几种白化小鼠毛色基因测试结果报告如下:     

TA3系和TB1系小鼠自发肿瘤的发生率

我室继TA 1和TA 2系小鼠之后,又培育出两系近交系小鼠,命名为TA 3和TB 1系小鼠。该两系小鼠的遗传学检测结果表明,纯合度很高。本文报告两系小鼠的自发瘤,供使用单位参考。材料及方法一、动物来源:TA 3系小鼠来源于天津市,1956年始按兄妹(B×S)交配繁殖。采用第83～84代。共580只((?)273,(?)307)。 TB 1系小鼠,以615×TA 3杂交系严格按兄妹交配育成。采用第26～27代。共394只((?)122,(?)272)。二、实验方法:每系小鼠设两组,即未生殖组和生殖组,每组(?)(?)兼有,分开饲养于塑料盒内,喂给     

髓系特异性SOCS3基因敲除小鼠的构建及应用

目的：通过Cre-loxP基因敲除系统特异性敲除髓系SOCS3基因,构建早期髓系来源抑制细胞（eMDSCs）高浸润荷瘤鼠模型。方法：通过将SOCS3fl/-小鼠与Lyz2-Cre小鼠杂交繁育,获得髓系特异性SOCS3基因敲除小鼠,PCR法鉴定小鼠基因型,Western印迹验证基因敲除效果,流式细胞术检测髓系特异性SOCS3基因敲除小鼠骨髓中eMDSCs比例及其对T细胞的抑制作用,并在该小鼠基础上分别构建乳腺癌、肺癌和黑色素瘤3种eMDSCs高浸润荷瘤鼠模型,流式细胞术检测肿瘤组织中eMDSCs浸润情况。结果：PCR鉴定和Western印迹检测证实髓系特异性SOCS3基因敲除小鼠构建成功,流式细胞术结果表明髓系SOCS3基因敲除小鼠骨髓中eMDSCs比例显著升高（t=17.94,P<0.001）,且该群eMDSCs抑制T细胞增殖（t=14.21,P<0.001）、促进T细胞凋亡（t=13.53,P<0.001）。在黑色素瘤、乳腺癌、肺癌3种髓系特异性SOCS3基因敲除荷瘤鼠的肿瘤组织中eMDSCs数量显著增加（t=24.14、24.56、14.93,均P<0.00...     

髓系特异性Spi1基因敲除小鼠的构建和基因鉴定

目的 构建髓系特异性Spi1基因敲除小鼠并分析其基因型,为疾病病理机制及药物靶点研究提供动物模型基础。方法 根据CRISPR/Cas9技术原理和Cre/LoxP系统,设计并构建sgRNA和Donor载体,以第2号外显子(Exon 2)所在的转录本为敲除区域,在Exon 2两侧各放置同向Loxp元件;将Cas9蛋白、sgRNA和Donor载体混合显微注射到C57BL/6J小鼠的受精卵中,移植受精卵到假孕的C57BL/6J母鼠的子宫中,19～20 d后获得F0代。将阳性F0代小鼠与C57BL/6J小鼠交配,得到稳定的F1代Spi1^flox/+小鼠。F1代Spi1^flox/+小鼠雌雄自交得到Spi1^flox/flox小鼠。Spi1^flox/flox与Lyz2-Cre⁺小鼠交配得到Spi1^flox/+/Lyz2-Cre⁺小鼠,再将其与Spi1^flox/flox交配,得到的Spi1^flox/flox/...     

建立高表达小鼠Retn基因的3T3-L1细胞系的研究

目的:建立一个组成性地高表达小鼠Retn基因的3T3-L1细胞系.方法:(1)采用重组DNA技术将小鼠Retn基因的全长cDNA克隆到质粒pcDNA3的CMV启动子下面而获得一个能在真核细胞内组成性表达小鼠Resistin蛋白的表达载体pcDNA3-mRetn.(2)用电穿孔转染和G418筛选等方法建立能组成性地高表达小鼠Retn基因的3T3-L1细胞系.(3)诱导细胞分化为脂肪细胞,并用实时荧光RT-PCR法分析这些脂肪细胞内Retn基因mRNA的水平.结果:构建了一个能在真核细胞内表达小鼠Retn基因的表达载体;建立了一个携带有pcDNA3-mRetn载体并组成性地高表达小鼠Retn基因的细胞系.结论:成功地建立了一个组成性地高表达小鼠Retn基因细胞系,为进一步研究Retn基因的功能和小鼠Resistin蛋白的获得奠定了基础.     

两品系小鼠食物过敏模型的比较

目的 比较两种不同品系小鼠食物过敏模型的敏感性和肠道菌群变化的差异,旨在为食物过敏模型的建立提供依据.方法 分别对30只4～5周龄BALB/c和KM雌鼠用卵清蛋白（ovalbumin,OVA）致敏建立食物过敏模型,ELISA法检测小鼠血清OVA特异性IgE水平;HE染色观察空肠组织形态;采用DGGE技术检测粪便菌群的变化.结果 （1）30只致敏的BALB/c小鼠中有27只血清OVA特异性IgE水平明显升高（P<0.001）,而30只致敏的KM小鼠中有21只,且BALB/c小鼠空肠绒毛炎症细胞浸润、上皮脱落及坏死比KM小鼠明显;（2）食物过敏造模后,BALB/c小鼠肠道菌群的改变明显（P<0.001）,而KM小鼠中仅有均匀度改变显著（P<0.05）;（3）BALB/c小鼠和KM小鼠对照组肠道菌群的丰富度、Shannon指数及均匀度都有差异.结论 BALB/c小鼠对OVA的敏感性高于KM小鼠,不同品系小鼠肠道菌群结构不同,OVA处理后,BALB/c小鼠菌群的改变比KM小鼠更明显.     

两系裸小鼠繁育的初步结果

前文已报导本实验室建立的SPF动物室的设备条件以及对裸小鼠繁育管理方法。本文报导二种不同基因背景裸小鼠BALB/CA/JCL-nu/nu及Swiss-DF nu/nu,在SPF条件下繁育研究的初步结果,供国内有关单位参考。材料与方法 BALB/CA/JCL-nu/nu繁殖鼠分别于81年4月及9月二次自日本引进,前者为三对纯合子(nu/nu)裸小鼠(日本肿瘤研究所池川哲郎博士赠送),后者为7只雌性杂合子(nu/ )。Swiss-DF-nu/nu于81年11月自美国引进(Roswell Park Memorial InstituteMurphy,D.教授赠送)即3雄nu/nu,1雌     

Smad3基因剔除对小鼠肾脏功能的影响

目的 了解Smad3基因剔除对小鼠肾脏解剖特征及功能的影响。方法 常规解剖学方法及通过荷兰半自动生化仪检测有关一些肾脏功能的血清学指标。结果 不同日龄不同基因型Smad3基因剔除小鼠之间的比较，35日龄Cre、体重、肾脏、肾上腺差异显，UA、BUN纯合型小鼠高于野生型，体重及脏器重量与脏器指数低于野生型；70日龄和6月龄BUN、体重、肾脏重量差异显，6月龄纯合型小鼠的Cre和BUN高于野生型，70日龄纯合型小鼠的uA高于野生型，而6月龄的uA却低于野生型。纯合型小鼠在不同年龄时各项指标差异不显，但Tbili、cre、BUN在6月龄时比较高，UA在70日龄相对高。结论 Smad3基因剔除小鼠从性成熟经过体成熟到老龄阶段，其代谢产物存在差异；通过解剖学观察Smad3基因剔除小鼠，含有纯合基因的小鼠在生产繁殖过程，出现12．5％的单肾小鼠，而肾上腺尚在。说明Smad3基因剔除对小鼠肾脏的形成具有一定影响。